Arterioskleroz pons verilerini sunan östrojen eksikliği fareler içeren laboratuvar modelleri eksiktir. Bu işlem özellikle menopoz sonrası kardiyovasküler disfonksiyon eksojen östrojen tedavileri tarama için yararlıdır. Bu tekniğin en büyük avantajı, çift dorsolateral insizyon olmadan ovariektomi nin şiddetli abdominal kavite yapışmasını ve iltihabı önleyen daha kolay ve daha az zaman alan bir yöntem olmasıdır.
Prosedürü gösteren Yue-Zhang Yin, benim laboratuvarımdan bir yüksek lisans öğrencisi olacak. APOE nakavt farelerde ikili bir ovariektomi gerçekleştirmek için, ilk pedal refleks yanıt eksikliği onaylamak ve bir ısıtma yastığı üzerinde eğilimli pozisyonda hayvan yerleştirin. Merhemi hayvanın gözlerine uygulayın ve hayvanın üzerini cerrahi bir örtüile kapatın.
Orta hatta bir santimetre lik bir kesi yapın, ve kostal kaburgalara bir santimetre lateral, ve deri altı dokuyu künt bir şekilde incelemek için forceps kullanın. Diseksiyon gözlük kullanarak, karın boşluğunda beyaz yağ dokusu belirlemek. Mikro makas ve mikro forceps kullanarak, fasya ile 0.5-bir santimetre lik bir kesi yapmak, karın boşluğu na kadar, ve yavaşça beyaz yağ dokusu geri çekmek için mikro forceps kullanın.
Pembe, dut şeklinde bir yumurtalık, yağ dokusuna sarılmış, karın boşluğu içinde gözlenmelidir. 0,5 ila bir santimetre proksimal damar ve rahim boynuzu ligate için bir monofilament sütür kullanın ve yumurtalık hasat için mikro makas kullanın. Karın boşluğuna kalan doku dönün ve ayrı kas ve cilt katmanları kapatmak için bireysel monofilament dikişkullanın.
Sonra hayvanın kontralateral tarafında yumurtalık hasat, sadece gösterildiği gibi, ve fare izleme ile bir ısıtma yastığı üzerinde kurtarmak için izin, tam recumbency kadar. Haftada bir kez, ameliyattan önceki haftadan 12 haftaya kadar, her sahte ve deneysel hayvanın vücut ağırlığını bir denge üzerinde ölçün. Plazma total kolesterol ve trigliserid ölçümü için, 12.
Aspire yavaş yavaş, kan bir mililitre şırınga içine akar kadar, ve 0.5 molar EDTA on mikrolitre içeren 1.5 mililitre toplama tüpü içine örnek dağıtmak. EDTA'yı kana karıştırmak için tüpü birkaç kez iyice tersine çevirin ve tüpü hemen buza yerleştirin. Toplama 30 dakika içinde, 400 kez G ve dört derece santigrat 20 dakika için örnek santrifüj.
Eksi 80 santigrat derecede depolamak için plazma süpernatantını dikkatlice toplayın. Aortu izole etmek için, 12. Perfüzyondan kaynaklanan yüksek basıncı önlemek için sağ atriyumu kesin ve kardiyak dokuyu dakikada 05-08 mililitre PBS hızında perfüzyonleyin.
Laboratuvar dokuları ile perfüzyon sıvısı absorbe ve kaburga ve akciğerlerkaldırmak için makas ve forceps kullanın. Aort daha iyi bir görünüm için, iç organları kaldırmak için karın boşluğu açın. Aort dorsally ayrılmasını sağlamak için mikro forceps ile kalp kavramak, omurgadan, iliak bifurkasyon kadar.
Daha sonra 4% paraformaldehit 48 saat boyunca kalp ve aort düzeltmek, oda sıcaklığında tuzlu doku örneği depolamadan önce veya birkaç saat için 2-8 santigrat derece. Yüksek kolesterol diyet on iki hafta sonra, ovariectomized fareler plazma toplam kolesterol ve trigliserid konsantrasyonlarında dikkate değer bir artış göstermektedir. 17-beta oestradiol veya ppd ile fındık yayılımı yoluyla oral olarak uygulanan ovariectomized fareler, sham-operated farelere göre önemli ölçüde daha düşük plazma toplam kolesterol konsantrasyonları sergiler.
Plazma trigliserid düzeyleri ovariektomized farelerde azalır, oral olarak uygulanan 17-beta oestradiol, ama PPD ile değil. Ovariektomized farelerde vücut ağırlığının artma eğilimi gözlenirken, şam'ın işletilen farelerine kıyasla, dört grup hayvan arasında genel olarak vücut ağırlığında önemli bir değişiklik gözlenmemektedir. Yükselen aortmitin maksimal plağı ovariektomized farelerde, diğer tüm gruplara göre, kardiyak fonksiyonda genel bir azalma ile birlikte, bu hayvanlarda gözlenen artar.
Ayrıca, aort lezyon alanının ortalama yüzdesi, tüm aort bölgesine göre, ovariektomized farelerde önemli ölçüde artmıştır. Beklendiği gibi 17-beta oestradiol veya PPD tedavisi ile bu lezyonların varlığı azalır. Ovariektomi ameliyatıiçin en önemli risk üreteral ligasyondur ve bu da yüksek mortalite ile sonuçlanır.
Ayrıca derinböbrek arter dalları yakınında kesmek için hatırlıyorum, aort hasarı önlemek için.
