Kızılötesi termografi, cinsiyet, yaş veya farklı patolojik durumların etkilerinden bağımsız olarak laboratuvar hayvanlarında ve insan katılımcılarında kahverengi yağ dokusu aktivitesinin tahmin edilmesini sağlar. PET-BT, özellikle yemekten sonra kahverengi yağ dokusu aktivitesini ölçmek için tercih edilen bir yöntem olarak başarısız olur. Bu nedenle, invaziv olmayan ve daha hassas bir kızılötesi termografi geliştirilmiştir.
Kızılötesi termografiyi kullanarak, obezite ve diabetes mellituslu kişilerde kahverengi yağ dokusu aktivitesindeki veya banyo aktivitesindeki patofizyolojik değişiklikleri belirleyebilir ve bu hastalarda kötü aktiviteyi gençleştirebilecek ilaçları belirleyebiliriz. Bu yöntem, hormonların fizyolojik etkilerini belirlemek veya terapötik maddeleri insanlarda ve laboratuvar hayvanlarında kötü aktivite üzerinde sentezlemek için kullanılabilir. Katılımcılara iyi dinlenmiş olup olmadıklarını ve gece boyunca oruç tutup tutmadıklarını sorun.
Olası kahverengi yağ dokusu aktivasyonunu önlemek için ölçümlerden önce en az 30 dakika dinleneceklerdir. Deneyleri sabah saatlerinde gerçekleştirin. Ölçümden 15 dakika önce, katılımcılardan üst kıyafetlerini çıkarmalarını isteyin.
Katılımcılar dinlenirken, termal kamerayı tripodun üzerine monte edin ve katılımcının oturacağı yerden bir metre uzağa yerleştirin. Termal kamerayı üretici tarafından talimat verildiği şekilde bir bilgisayara ve yazılıma bağlayın. Buruşuk alüminyum folyoyu bir metre odak mesafesinde kaydederek odanın yansıyan sıcaklığını belirleyin.
Bunu yapmak için, kamera yazılımında, sıfır metrelik mesafeyi ve birinin emisyonunu girin. Ardından, atmosferik basınç ve bağıl nem değerlerini girin. Yansıyan sıcaklığı belirlemek için kare şekli seçin ve alüminyum folyo üzerinde bir yatırım getirisi seçin.
Ardından, ana kamera penceresinde soldan ilk simgeyi seçin ve daha fazla analiz için gerekli olan ortalama sıcaklığı okuyun. Ölçümlere başlamadan hemen önce, oda hava sıcaklığını ve hava nemini belirleyin. Yazılımda, ana kamera penceresinin üstünde, soldan üçüncü simgeyi seçin.
Açılır menüde, yeni bir pencere açan Kayıt ayarlarını düzenle'yi seçin. Kayıt modunda, Diske kaydet'i seçin ve bu süre için kaydı istediğiniz zaman ayarlayın. Aynı pencerenin Kayıt Seçenekleri'nde, kayıt hızını beş hertz ile sınırlayın ve kayıtların kaydedileceği konumu seçin.
Mevcut pencereyi kapatın, ana menüde Düzenle'yi açın ve Tercihler'i seçin. Hedef kare hızına beş girin. Kısayol Tuşu / Uzaktan Başlat kaydı durdurabilir'i seçin.
Ve açılır menüden Başlat / Durdur Modunda'yı seçin. Ölçüm sırasında, yalnızca katılımcının ve deneycinin hazır bulunduğundan emin olun. Hava hareketinden kaçının ve katılımcının soğuk cereyandan, güneş ışığından veya ampuller gibi herhangi bir ısı kaynağından uzak durduğundan emin olun.
Boynun supraklaviküler alanını, kahverengi yağ dokusunun bulunduğu köprücük kemiğinin üzerine yerleştirin. Katılımcıyı, bu alan bir metre odak mesafesinde olacak şekilde konumlandırın. F5 tuşuna basarak 5 FPS kare hızında 10 ila 15 saniye boyunca kısa bir film kaydedin.
Tüm katılımcıların aynı yemeği yediğinden emin olun. Yemekten sonra, aynı ayar değerlerini kullanarak F5 tuşuna basarak 30 dakika ve ardından bir, iki ve üç saatte yeni bir kayıt yapın. Deneyden bir gün önce, hayvanın vajinal çubuğunu toplayın ve hücreleri bir cam slayta yayın.
Hava kurumasına izin verin. Hücreleri bir dakika boyunca 500 mikrolitre% 0.1 kresil menekşe asetat ile lekeleyin ve ardından suyla üç kez durulayın. Hücreleri 100 kat büyütme ve parlak alan aydınlatması ile ışık mikroskobu altında görüntüleyin.
Östrus döngüsünün fazını, yaymada gözlenen lökositlerin ve çekirdekli ve niceliklendirilmiş epitel hücrelerinin sayısına göre belirleyin. Deney sabahı termal kamera ve kayıt ayarlarını hazırlayın. Hayvanı dikkatlice temiz bir kafese yerleştirin ve kafesi termal kameranın altına bir metre odak mesafesinde yerleştirin.
F5 tuşuna basarak bir film kaydedin. Yiyecek alımını hesaplamak için her hayvana vermeden önce yiyecek peletini tartın. Hayvanın kafesinde 30 dakika yemesine izin verin ve yemekten sonra yiyecek peletini tekrar tartın. IR ölçümlerini yemeğe başladıktan 30 dakika, bir saat ve iki saat sonra tekrarlayın.
Deneyden sonra, daha önce gösterildiği gibi, dişi hayvanlarda östrus döngüsünün aşamasını test edin. Her film için, cilt yayılımı, yansıyan oda sıcaklığı, hava sıcaklığı, bağıl nem ve nesneye uzaklık gibi değişkenleri kamera yazılımına girin. Oynatma kafasını ekranın alt kısmında hareket ettirerek veya Duraklat düğmesine basarak filmden uygun kareyi seçin.
Ana pencerenin sol tarafındaki alanın istediğiniz şeklini seçerek ilgilendiğiniz bölgeyi seçin. Kürek kemiği arasındaki cilt alanına en uygun şekli seçin. İlgilenilen bölgeyi seçtikten sonra, minimum, maksimum ve ortalama sıcaklıklar sağda gösterilecektir.
Görüntüde, kırmızı üçgen kaydedilen maksimum sıcaklık noktasını temsil eder ve mavi üçgen kaydedilen minimum sıcaklığı temsil eder. Kaydın birkaç saniyesi boyunca ölçülen sıcaklığın sabit olduğundan emin olmak için bu adımı birkaç kare boyunca tekrarlayın. Postprandiyal aktivitedeki artışı belirlemek için bir yemekten önce kahverengi yağ dokusunun üzerindeki cildin maksimum sıcaklıklarını, yemekten sonraki maksimum sıcaklıklardan çıkarın.
Kahverengi yağ dokusu aktivitesi iki cilt alanı analiz edilerek belirlendi: biri kahverengi yağ dokusunun üstünde, ikincisi ise referans noktası olarak inter klaviküler alanda. Kahverengi yağ dokusu aktivitesi, her iki cilt bölgesindeki maksimum sıcaklıklar arasındaki farklardan 1.8 santigrat derece olarak hesaplandı. Ancak aktivite, kahverengi yağ dokusunun üzerindeki cildin maksimum sıcaklıkları ile sunulamaz, çünkü yemekten üç saat sonra bile cilt sıcaklığında bir düşüş olmaz.
Farelerde, bir yemekten sonra aktivitedeki değişiklikler, kahverengi yağ dokusunun üzerindeki cildin ortalama sıcaklığını ölçerek diestrus dişilerinde ölçülmüştür. Aktivitedeki önemli değişiklikler, yemekten 30 dakika sonra sadece maksimum sıcaklık ölçüldüğünde belirlendi. Eşleşen kontrol deneklerinin doğru seçimi, klinik çalışmaların en zor kısmıdır, çünkü sağlıklı kontroller ve patolojik koşulları olan katılımcılar mümkün olduğunca benzer olmalı ve sadece araştırılan hastalıkta farklılık göstermelidir.
Bu protokole ek olarak, kan şekeri konsantrasyonu ve vücut ısısı ölçülebilir, bu da kötü aktivite ile glikoz kullanımı veya vücut ısısındaki artış arasındaki korelasyon analizine izin verir. Bu hassas ve non-invaziv teknik, diğer deneysel ortamlarda ve çalışmalarda kahverengi yağ dokusu aktivitesinin fizyolojik ve patofizyolojik değişikliklerinin belirlenmesinde sayısız olasılık açmaktadır.
