Biz Sean Fitzwater ve Carmen Giannina Luna Colombo tüberküloz büyüme time-lapse video segment için kabul etmek istiyorum. Biz eksiksiz ve mükemmel bir geri bildirim için geçerli protokol çoğunlukla birebir alındığı Kullanım Kılavuzu, düzenleme sırasında Marty Roper teşekkür ediyorum ve co-yazma. Bu video Üretim NIH / Fogarty Uluslararası Merkezi tarafından finanse edildi <a href="http://www.fic.nih.gov/">http://www.fic.nih.gov/</a> David AJ Moore Imperial College London Bulaşıcı Hastalıklar Tropikal Tıp ve Reader Wellcome Trust Klinik Araştırma Görevlisi (Fellowship olarak katkıda ödül sayısı 078067/Z/05). Mark F. Brady bir NIH / Fogarty Uluslararası Araştırma Merkezi Araştırma Görevlisi olarak katkıda bulundu.

<ol><li> Stok çözelti hazırlayın <ol><li> Fosfat tampon stok <ol><li> , Potasyum fosfat tekbazlı çözüm 950ml (1000ml distile su içinde çözünmüş potasyum fosfat tekbazlı 9.07g) ve karıştırın, sodyum dibazik çözüm 950ml (1000ml distile su içinde çözünmüş sodyum fosfat dibazik 9.47g) karıştırın; ayarlamak için her çözümün geri 50ml tutabilecek pH gerekli özelliğine </li><li> PH 6.8 ± 0.2 ayarlayın: pH yükseltmek eklemek sodyum fosfat dibazik çözümü; düşük pH potasyum fosfat tekbazlı çözüm eklemek </li><li> 121-124 az Otoklav ° C&#39;de 15 dakika sterilize </li><li> Plaka 48 saat için 37 Petri kabı ve inkübe besin agar fosfat tampon çözeltisi ° C 100μl kısım kısırlık onaylamak için </li><li> Buzdolabında saklayın 2-8 ° C için bir ay kadar Not: Her balgam örneği fosfat tampon çözelti 10ml gerektirir . </li></ol></li><li> Dekontaminasyon stok <ol><li> Kombine sodyum hidroksit çözeltisi eşit hacimlerde (200 ml steril distile su içinde çözünmüş sodyum hidroksit 8.0g) ve sodyum sitrat solüsyonu (5.8g, 200 ml steril distile su distile sodyum sitrat) </li><li> 121-124 ° C&#39;de 15 dakika boyunca karıştırın ve otoklav </li><li> Buzdolabında saklayın 2-8 ° C için bir ay kadar Not: Her bir balgam örneği dekontaminasyon stokunun 2ml gerektirir </li></ol></li><li> Kültür medya stok <ol><li> Steril distile su 900ml içine gliserol ve casitone 7H9 orta toz ve 5.9g 1.25g 3.1ml ekleyin; tamamen eriyene kadar sürekli ajitasyon ile karıştırın </li><li> 15 dakika süreyle 121-124 ° C&#39;de Otoklav </li><li> Serin ve antibiyotik çözümleri ve iç kontrollerin hazırlanması için steril numune hazırlama için 16x 100 mm cam tüpler ve 10.8ml alikotları 4.5ml alikotları içine steril ortamda bölmek </li><li> Kısırlık (bulanıklık eksikliği) doğrulamak için 37 ° C&#39;de 48 saat süreyle inkübe </li><li> 2-8 ° C kap ile saklayın sıkı bir ay kadar kapalı Not: Her bir balgam örneği 7H9 orta bir tüp içeren 4.5ml gerektirir. </li></ol></li><li> Antibiyotik stok çözümleri <ol><li> A. İzoniyazid stok (8 mg / ml) <ol><li> 20 mg 2.5ml steril distile su tamamen izoniazid çözülür </li><li> Sulu solvent 0.2μm şırınga filtresi ile filtreleme </li><li> 6 aya kadar -20 ° C&#39;de steril mikro santrifüj tüpleri 20μl alikotları saklayın Not: Her saklanan 20μl kısım 100 numune (fire dahil) için yeterli </li></ol></li><li> B. Rifampisin stok (8 mg / ml) </li></ol><ol><li> 20 mg rifampisin 1.25ml DMSO tamamen çözülür </li><li> 1.25ml steril distile su eklenir ve karıştırılır </li><li> Organik çözücü 0.2μm şırınga filtresi ile filtreleme </li><li> 6 aya kadar -20 ° C&#39;de steril mikrosantrifüj tüpler 20μl alikotları saklayın Not: Her saklanan 20μl kısım 100 numune (fire dahil) için yeterli </li></ol></li></ol></li><li> Çalışma çözümler hazırlayın <ol><li> Dekontaminasyon çalışma çözümü <ol><li> NALC kristalleri gerekli dekontaminasyon çözüm her 20ml 0.1g çözülür Not: Her bir örnek dekontaminasyon çözüm 2ml ihtiyacı Not: NALC mukolitik faaliyet zaman içinde kaybeder gibi 24 saat sonra kullanılmayan kalan NaOH-NALC dekontaminasyon çözümü atın </li></ol></li><li> Kültür medya çalışma çözüm <ol><li> Şu şekilde anlatılır: <ol><li> 7H9 orta her balgam örneği için 1 tüp işlenmiş olması, artı her plaka için 1 tüp (negatif kontrol sütun için) </li><li> 7H9 orta pozitif kontrol için 2 tüp (3 monoresistant suşları kullanılmıştır) </li><li> 10.8ml 7H9 antibiyotik çözeltisi ile 1-2 tüpler </li></ol></li><li> Her bir örnek tüp 7H9 4.5ml 0.5 ml OADC </li><li> 10.8ml 7H9 tüpler 1.2ml OADC </li><li> (Bu PANTA gerekmez) antibiyotik çözelti hazırlama için kullanılacak 12ml 7H9 OADC (ler) pozitif kontrol için 5ml 7H9-OADC ve tüp 2 tüpleri kenara koyun </li><li> PANTA sulandırın ve her numune tüpü ve negatif kontrol tüpleri (7H9-OADC-PANTA: toplam hacim = 5.1ml) 0.1ml eklemek Not: PANTA (7H9-OADC-PANTA) ile tam orta balgam örnekleri ve negatif kontroller için kullanılır; pozitif kontrol ve antibiyotik çözeltisi PANTA olmadan 7H9-OADC </li></ol></li><li> Antibiyotik çalışma çözümleri <ol><li> 1. Kullanılmayan bir 24 plaka antibiyotik çalışma çözümü için adımlar için Bkz: Şekil 1 Not: doğru bir duyarlılık sonuç için, son antibiyotik konsantrasyonları kritik öneme sahiptir. Aşağıdaki yordam l için uygundur.aboratories mikropipetler ile donatılmıştır. Mikropipetler mevcut değilse, tüberkülin şırınga Kılavuzu Ek 3 modsperu.org Kullanıcı açıklanan dilüsyonları farklı bir dizi ile kullanılabilir Not: yeniden dondurmak veya ilaç aktivitesi yok olabilir antibiyotik çalışma veya hisse senedi çözümleri yeniden kullanımı, işlem günü Şekil 1 sonunda tüm kullanılmayan antibiyotik çözümler atın . Antibiyotik çalışma çözümler (modsperu.org Kullanım Kılavuzu) </li></ol></li></ol></li><li> Balgam örneği ve plaka hazırlama <ol><li> Arındırma <ol><li> 15ml bir santrifüj tüpü içine balgam örneği Yeri 2ml (eğer daha az, 2 ml fosfat tamponu ile makyaj daha varsa, sadece 2ml kullanın) </li><li> 2ml NaOH-NALC çözüm ekle </li><li> Kap sıkıca tüp ve 20 saniye boyunca girdap; NaOH-NALC çözüm kişiler, tüm iç tüp yüzey ve kapak sağlamak için tüp ters </li><li> En az 15 dakika bekletin örnek özellikle viskoz ise bir kaç dakika uzatabilir. Tedavi üzerinde önlemek için, 20 dakikayı geçmemelidir </li><li> 4 kez alkali nötralize ve dekontaminasyon işlemi sona erdirmek ve tüpü ters çevirerek iyice karıştırın fosfat tamponu (pH 6.8) ile 14ml tüp doldurun </li><li> 3000 g de 15 dakika süreyle santrifüj (3000 g ulaşmak için gerekli dakikadaki dönüş denklemi için modsperu.org Kullanım Kılavuzu Ek 2) </li><li> Dikkatlice bir sıvı atık kap içine% 10 sodyum hipoklorit veya diğer uygun bir dezenfektan ile süpernatant kapalı dökün ve pelet korumak </li></ol></li><li> Son örneği süspansiyon ve yedekleme hazırlanması <ol><li> 7H9-OADC-PANTA (5.1ml içeren tüp), Pasteur pipeti ile santrifüj tüpüne toplam hacmi 2 ml örnek pelet tekrar süspansiyon, iyice karıştırın </li><li> Yedek olarak 2-8 örnek bir mikrosantrifüj tüp içinde süspansiyon ve mağaza ° C 1 ml çıkarın </li><li> Ikinci 1ml örnek süspansiyon kalan 7H9-OADC-PANTA ile tüp ekleyin, iyice karıştırın. Bu kaplama için hazır son örnek çözümdür </li></ol></li><li> 24-plaka örnek süspansiyonlar yerleştirilmesi <ol><li> 24 plaka bir sütun 4 kuyuların her birine son örnek süspansiyon Yeri 900μl </li><li> Sütun 3 ek örnekler dışında, plaka tüm sütunlar kadar tekrarlayın (ya da tüm örnekler kaplama kadar) doldurulur </li><li> Her numune plaka Sütun 3 4 kuyu (negatif iç kontrollerin) örnek olmadan 7H9 OADC orta Yeri 900μl </li></ol></li><li> Örnekler antibiyotik ekleme <ol><li> Çok kanallı pipet kullanarak, dikkatli bir şekilde 7H9-OADC ve antibiyotik çalışma çözümleri (Sütun 2 antibiyotik seyreltme plaka Şekil 1) ile kuyulardan 100μl doldurmak 4 ipucu </li><li> Levha veya örnek dokunmadan 900μl örnek çözümleri ile sütun 1 kuyu 100μl alikotları ekle </li><li> Tüm sütunları orta ek 100μl (ilaçsız kuyular) veya (negatif kontrol sütun 3 de dahil olmak üzere) antibiyotik çözümler aldık kadar bu işlemi tekrarlayın </li><li> Yapışmalı, polietilen (KİLİTLİ) çanta ve mühür kapak ve yer ile plaka kapatın (çanta Bu noktadan itibaren tekrar açıldı) </li><li> 37 ° C (CO 2 zenginleştirme gerekli değildir) inkübe </li></ol></li></ol></li><li> Kalite kontrolü <ol><li> Negatif kontroller, her bir plaka üzerinde çalıştırılır. Negatif kontrol sütununda herhangi bir kuyu herhangi bir büyüme varlığı, çapraz kontaminasyon, bu nedenle tüm plaka atılmalıdır ve örnekleri yeniden kaplama gösterir. </li><li> Pozitif kontrolleri günün sonunda ayrı bir plaka üzerinde çalıştırılır. Bir tümüyle ilaçlara duyarlı gerginlik, bir sütun ve başka bir sütun çalıştırmak INH ve RIF bir yük dayanıklı çalıştırılır . MDR gerginlik çalıştırma hakkında endişe, INH monoresistant gerginlik hem RIF monoresistant suşu duyarlı ve MDR suşlarının yerde çalıştırılabilir varsa. Tüm pozitif kontrol medya desteği büyüme göstermek için uyuşturucu ücretsiz kuyularda büyüme olmalıdır. Ilaç konsantrasyonları doğru olduğunu göstermek için, duyarlı bir gerginlik INH veya RIF kuyuları büyümek değil, ancak MDR gerginlik INH ve RIF kuyuları da büyümeye büyümek gerekir. </li></ol></li><li> Plaka okuma <ol><li> &quot;Gün 0&quot; olarak kaplama gün ile plaka okuma 5. gününde başlar, ve eğer negatifse Günü&#39;nde okuma 5 gün 14 ve 15 gün sonra her 2-3 gün kadar (ya da iş yüküne bağlı olarak alternatif gün) her gün yapılıyor -21. Tabaklar bir incelenir10x hedefi ile ters ışık mikroskobu </li><li> Olumlu bir kültür İKİ uyuşturucu ücretsiz kuyulardan iki veya daha fazla koloni oluşturan birim (2 CFU) var olan biridir. Erken mikobakteriyel büyüme küçük kavisli virgül veya spiral (5-9 gün) gibi görünüyor. Colony oluşumu genellikle &quot;kordonlar&quot; veya &quot;Tangles&quot; (modsperu.org görüntü kütüphanesi) ilerler </li><li> Günü uyuşturucu içeren kuyu okunacağı 2 kuyu, uyuşturucu ücretsiz bir kültür pozitif bir ilacın varlığında herhangi bir büyüme bu ilaca karşı direnç gösterir . Not: Ara sıra uyuşturucu ücretsiz kuyularda pozitif bir kültür olduğunu kaydetti&gt; 1 hafta sonra ilaç içeren kuyuların okuma yapılırsa, bu büyüme break-direnci temsil olmayabilir görülür </li><li> Gün 21 ile pozitif numune negatif kültürler kabul edilir </li><li> Mikobakteriyel büyüme bulutluluk sonuç vermez ise kuyuların bulutluluk, kirlenme aşırı çoğalma sonucu </li><li> 21 gün tamamlanması kültürler atılabilir. Kültürler mühürlü torbalar içinde kalır ve otoklav torbaları yerleştirilir ve 45-60 dakika süreyle 121-124 ° C&#39;de otoklava </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Arias, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+the+microscopic-observation+drug-susceptibility+assay+for+detection+of+tuberculosis.">Clinical evaluation of the microscopic-observation drug-susceptibility assay for detection of tuberculosis.</a> Clin Infect Dis. 44, 674-674 (2007).</li><li>Caviedes, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid,+efficient+detection+and+drug+susceptibility+testing+of+Mycobacterium+tuberculosis+in+sputum+by+microscopic+observation+of+broth+cultures.+The+Tuberculosis+Working+Group+in+Peru.">Rapid, efficient detection and drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis in sputum by microscopic observation of broth cultures. The Tuberculosis Working Group in Peru.</a> J Clin Microbiol. 38, 1203-1203 (2000).</li><li>Caviedes, L., Moore, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introducing+MODS:+a+low-cost,+low-tech+tool+for+high-performance+detection+of+tuberculosis+and+multidrug+resistant+tuberculosis.">Introducing MODS: a low-cost, low-tech tool for high-performance detection of tuberculosis and multidrug resistant tuberculosis.</a> Indian J Med Microbiol. 25, 87-87 (2007).</li><li>Caws, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+MODS+culture+technique+for+the+diagnosis+of+tuberculous+meningitis.">Evaluation of the MODS culture technique for the diagnosis of tuberculous meningitis.</a> PLoS ONE. 2, e1173-e1173 (2007).</li><li>Ejigu, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic-observation+drug+susceptibility+assay+provides+rapid+and+reliable+identification+of+MDR-TB.">Microscopic-observation drug susceptibility assay provides rapid and reliable identification of MDR-TB.</a> Int J Tuberc Lung Dis. 12, 332-332 (2008).</li><li>Kim, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+of+occupational+tuberculosis+in+National+Tuberculosis+Programme+laboratories+in+Korea.">Risk of occupational tuberculosis in National Tuberculosis Programme laboratories in Korea.</a> Int J Tuberc Lung Dis. 11, 138-138 (2007).</li><li>Mello, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+the+microscopic+observation+drug+susceptibility+assay+for+detection+of+Mycobacterium+tuberculosis+resistance+to+isoniazid+or+rifampin.">Clinical evaluation of the microscopic observation drug susceptibility assay for detection of Mycobacterium tuberculosis resistance to isoniazid or rifampin.</a> J Clin Microbiol. 45, 3387-3387 (2007).</li><li>Moore, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Future+prospects+for+the+MODS+assay+in+multidrug-resistant+tuberculosis+diagnosis.">Future prospects for the MODS assay in multidrug-resistant tuberculosis diagnosis.</a> Future Microbiol. 2, 97-97 (2007).</li><li>Moore, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infrequent+MODS+TB+culture+cross-contamination+in+a+high-burden+resource-poor+setting.">Infrequent MODS TB culture cross-contamination in a high-burden resource-poor setting.</a> Diagn Microbiol Infect Dis. 56, 35-35 (2006).</li><li>Moore, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic-observation+drug-susceptibility+assay+for+the+diagnosis+of+TB.">Microscopic-observation drug-susceptibility assay for the diagnosis of TB.</a> N Engl J Med. 355, 1539-1539 (2006).</li><li>Moore, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+observation+drug+susceptibility+assay,+a+rapid,+reliable+diagnostic+test+for+multidrug-resistant+tuberculosis+suitable+for+use+in+resource-poor+settings.">Microscopic observation drug susceptibility assay, a rapid, reliable diagnostic test for multidrug-resistant tuberculosis suitable for use in resource-poor settings.</a> J Clin Microbiol. 42, 4432-4432 (2004).</li><li>Moore, D. A., Roper, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+smear-negative+tuberculosis+in+people+with+HIV/AIDS.">Diagnosis of smear-negative tuberculosis in people with HIV/AIDS.</a> Lancet. 370, 1033-1033 (2007).</li><li>Oberhelman, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+recovery+of+Mycobacterium+tuberculosis+from+children+using+the+microscopic+observation+drug+susceptibility+method.">Improved recovery of Mycobacterium tuberculosis from children using the microscopic observation drug susceptibility method.</a> Pediatrics. 118, e100-e100 (2006).</li><li>Palomino, J. C., Martin, A., Portaels, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MODS+assay+for+the+diagnosis+of+TB.">MODS assay for the diagnosis of TB.</a> N Engl J Med. 356, 188-189 (2007).</li><li>Park, W. G., Bishai, W. R., Chaisson, R. E., Dorman, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+the+microscopic+observation+drug+susceptibility+assay+in+drug+susceptibility+testing+for+Mycobacterium+tuberculosis.">Performance of the microscopic observation drug susceptibility assay in drug susceptibility testing for Mycobacterium tuberculosis.</a> J Clin Microbiol. 40, 4750-4750 (2002).</li><li>Shiferaw, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+microscopic+observation+drug+susceptibility+assay+for+detection+of+multidrug-resistant+Mycobacterium+tuberculosis.">Evaluation of microscopic observation drug susceptibility assay for detection of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis.</a> J Clin Microbiol. 45, 1093-1093 (2007).</li><li>Tovar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+diagnosis+of+pleural+tuberculosis+using+the+microscopic-+observation+drug-susceptibility+technique.">Improved diagnosis of pleural tuberculosis using the microscopic- observation drug-susceptibility technique.</a> Clin Infect Dis. 46, 909-909 (2008).</li><li>Vargas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+sputum-scarce+HIV-associated+pulmonary+tuberculosis+in+Lima,+Peru.">Diagnosis of sputum-scarce HIV-associated pulmonary tuberculosis in Lima, Peru.</a> Lancet. 365, 150-150 (2005).</li></ol>

MODS tahlil, kaynak sınırlı ayarları hedeflenmektedir. Ilk kez, MODS tüberküloz hızlı sıvı kültür algılama yeteneği getiriyor ve hemen altında test başına 3 $ kaynak sınırlı ayarları dirençli tüberküloz ilaca. MODS ticari olmayan, iteratif metodoloji ve MODS topluluk her zaman diğer laboratuvarlardan yapmak başarmış iyileştirmelerini de ilgileniyor. Sıvı dökülürse veya aerosolize olabilir, çünkü tüberküloz sıvı medya kültürü, nükseden bir endişe biyogüvenlik. MODS testi dolaylı olarak ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Refrigerator/ freezer</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to store pre-prepared broth and antibiotic stocks</td>
</tr>
<tr>
<td>Vortex</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to aid sputum decontamination</td>
</tr>
<tr>
<td>Centrifuge</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>for sputum concentration; capable of reaching 3000 g; does not need to be refrigerated, but MUST be biosafe (buckets can be sealed)</td>
</tr>
<tr>
<td>Incubator (37 degree C)</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>for culture; need not be CO2 enriched</td>
</tr>
<tr>
<td>Inverted light microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to read MODS plates</td>
</tr>
<tr>
<td>Autoclave</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to sterilize media, PBS and used plates</td>
</tr>
<tr>
<td>Balance</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to weigh isoniazid, rifampicin and NALC</td>
</tr>
<tr>
<td>Middlebrook 7H9 broth (Difco)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>DF0713-17-9</td>
<td>500gr/bottle; culture media base</td>
</tr>
<tr>
<td>Casitone (pancreatic digest casein)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>DF0259&#x2010;17&#x2010;9</td>
<td>500gr/bottle; culture media base</td>
</tr>
<tr>
<td>Glycerol (glycerin) lyophilized</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G&#x2010;33&#x2010;500</td>
<td>500ml/bottle; culture media base</td>
</tr>
<tr>
<td>PANTA (Antibiotic mixture lyophilized BD) </td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>B4345114</td>
<td>6 bottles/pack; antibiotic media supplement</td>
</tr>
<tr>
<td>OADC (Middlebrook OADC enrichment BD)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>B11886</td>
<td>10 x 20ml/pack; nutritional media supplement</td>
</tr>
<tr>
<td>Dimethyl sulphoxide (Hibri-Max)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>D-2650</td>
<td>100ml/bottle; to prepare rifampicin stock</td>
</tr>
<tr>
<td>Antibiotic stocks: isoniazid</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>I-3377</td>
<td>50gr/bottle; direct susceptibility testing</td>
</tr>
<tr>
<td>Antibiotic stocks: rifampicin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma 99</td>
<td>R-3501</td>
<td>1gr/bottle; direct susceptibility testing</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium hydroxide (pellets)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>221465</td>
<td>500gr/bottle; sputum decontamination</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium citrate (trisodium salt dihydrate)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>S-4641</td>
<td>500gr/bottle; sputum decontamination</td>
</tr>
<tr>
<td>N-acetyl-L-cysteine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-7250</td>
<td>50gr/bottle; sputum decontamination</td>
</tr>
<tr>
<td>Potassium Phosphate Monobasic crystal. KH2PO4</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P0662</td>
<td>500gr/bottle; sputum decontamination</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium Phosphate Dibasic, anhydrous. Na2HPO4</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0876</td>
<td>500gr/bottle; sputum decontamination</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium hypochlorite</td>
<td>Reagent</td>
<td>household bleach</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to discard contaminated waste</td>
</tr>
<tr>
<td>15ml centrifuge tubes (polypropylene 15ml Falcon 35&#x2010;2096)</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>14&#x2010;959&#x2010;49B</td>
<td>500ea/case; for sputum decontamination and concentration</td>
</tr>
<tr>
<td>24 well plates (Plates Tissue 24 wells BD Falcon 35&#x2010;3047)</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>08-772-1</td>
<td>50 plates/case; for culture and reading</td>
</tr>
<tr>
<td>Sealable polythene bags 6 X 6 &#x201C; (ziplock)</td>
<td>Consumable</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>for biosecurity to contain 24 well plate</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass tubes with lid (16 x 100mm and 18 x 145mm)</td>
<td>Consumable</td>
<td>VWR</td>
<td>47729-583</td>
<td>500 tubes/case; to store aliquots of prepared broth</td>
</tr>
<tr>
<td>Screw cap microcentrifuge tubes (1.5ml)</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>05&#x2010;669&#x2010;22</td>
<td>1000ea/case; to store aliquots of antibiotic stocks</td>
</tr>
<tr>
<td>0.22&#x03BC;m filters (aqueous solvents) Syringe filter Millex blue</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>SLGL 025 OS</td>
<td>50 units/case; to filter antibiotic stocks</td>
</tr>
<tr>
<td>0.22&#x03BC;m filters (organic solvents) Syringe filter Millex yellow</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>SLGV 033 RS</td>
<td>50 units/case; to filter antibiotic stocks</td>
</tr>
<tr>
<td>Disposable Pasteur pipettes borosilicate glass 9&#x2033;</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>13&#x2010;678&#x2010;20C</td>
<td>720ea/case; to mix PANTA with media mix</td>
</tr>
<tr>
<td>Aerosol barrier tips 1000&#x2010;1300&#x03BC;l</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>02&#x2010;707&#x2010;51</td>
<td>1000ea/pk; to dispense media into plate</td>
</tr>
<tr>
<td>USA Scientific Tips One 1&#x2010;200&#x03BC;l yellow tips</td>
<td>Consumable</td>
<td>Fisher</td>
<td>1111&#x2010;0006</td>
<td>1000 tips/bag; to dilute antibiotic stocks</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

the mods method for diagnosis of tuberculosis and multidrug resistant tuberculosis

Aktif akciğer tüberküloz (TB) olan hastalar, hasta kür ve yeni enfeksiyonların önlenmesi için gerekli aktif verem teşhis yapma, yılda 10-15 kişi enfekte. Ayrıca, çok ilaca dirençli tüberküloz (MDRTB) ortaya çıkması, ilaç direncinin saptanması ilaca dirençli suşların yayılmasını durdurmak için gerekli anlamına gelir. Mikroskopik gözlem ilaç duyarlılık (MODS) testi, TB ve MDRTB yüksek performanslı bir algılama için düşük maliyetli, düşük teknolojili bir araçtır. Mycobacterium tuberculosis (MTB) mikroskobik MTB büyüme katı ortam kolonilerinin makroskopik görünüm için beklemek yerine sıvı ortamda daha önce tespit ve olabilir) katı ortam 2 daha sıvı ortamda hızlı büyür 1): MODS testi üç temel ilkeye dayanır büyüme altkültürü gerçekleştirmek için ihtiyaç kalmayabilir, MTB karakteristik ilaçlar izoniazid ve rifampisin MDRTB eş zamanlı olarak doğrudan tespiti için izin MODS testi dahil edilebilir atipik mikobakteriler veya mantar veya bakteriyel kontaminasyon 3) ayırt edilmesi için izin dolaylı bir ilaç duyarlılık testi. Rekabet mevcut teşhis balgam smear ile düşük hassasiyet, katı ortam kültürü, mevcut sıvı ortam kültür yöntemleri ile yasaklı yüksek maliyet ve MDRTB tespit etmek için dolaylı olarak ilaç duyarlılık testi için altkültürü yapmak ihtiyacı ile tanıya kadar uzun gecikmeler engel. Buna karşılık, ticari olmayan MODS yöntemi, TB ve MDRTB için bir yüksek hassasiyet vardır bir görece hızlı kültür yöntemi, MDRTB için eş zamanlı olarak ilaç duyarlılık testi sağlar, ve TB için test için sadece altında ABD doları 3 kaynak sınırlı ayarları erişilebilir ve MDRTB.

Watch this Scientific Journal Video about The MODS method for diagnosis of tuberculosis and multidrug resistant tuberculosis at JoVE.com

The MODS method for diagnosis of tuberculosis and multidrug resistant tuberculosis

Mikroskopik gözlem ilaç duyarlılık (MODS) tayini, düşük maliyetli, yüksek performanslı bir algılama tüberküloz (TB) ve çoklu ilaca dirençli tüberküloz (MDRTB) düşük teknolojili bir araçtır. Bu video MODS sıvı medya kültürü yöntemi açıklanmıştır.

MODS tüberküloz tanısı için yöntem ve dirençli tüberküloz ilaca

Patients with active pulmonary tuberculosis (TB) infect 10-15 other persons per year, making diagnosing active TB essential to both curing the patient and ...

the-mods-method-for-diagnosis-tuberculosis-multidrug-resistant

Research

JoVE Journal

Biology

18.9K Görüntüleme.  The Warren Alpert Medical School of Brown University. Mikroskopik gözlem ilaç duyarlılık (MODS) tayini, düşük maliyetli, yüksek performanslı bir algılama tüberküloz (TB) ve çoklu ilaca dirençli tüberküloz (MDRTB) düşük teknolojili bir araçtır. Bu video MODS sıvı medya kültürü yöntemi açıklanmıştır.