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Purification d'un extrait lipidique par chromatographie sur colonne

Overview

Source : Laboratoire de Jeff Sanoussi - University of Massachusetts Amherst

Le produit d’une extraction par solvant organique, un extrait de lipides totaux (TLE), est souvent un mélange complexe de centaines, voire des milliers de différents composés. Le chercheur est souvent seulement intéressé par une poignée de composés. Les composés d’intérêt peuvent appartenir à l’un de plusieurs classes de composés, tels que les alcanes, cétones, alcools ou acides (Figure 1), et il peut être utile supprimer les classes de composés auquel il n’appartient-elle pas afin d’obtenir une vision plus claire des composés que vous intéresse. Par exemple, un TLE peut contenir 1 000 composés, mais l’Uk'37 proxy de mer la température de surface est basé sur seulement deux composés (alkénones) et le proxy de température de surface de mer de86 TEX repose sur quatre seulement (glycérol dialkyl glycérol tetraethers). Il incombe au chercheur de retirer autant de composés qu’ils ne sont pas intéressés. Cela rend l’analyse instrumentale des composés d’intérêt (alkénones ou GDGTs), moins susceptible d’être compliquée par d’autres composés superflues.

Dans d’autres cas, une technique de purification en amont peut avoir produit des composés que vous souhaitez maintenant supprimer de l’échantillon, comme la production d’acides carboxyliques pendant la saponification dans notre précédente vidéo. Dans les deux cas ci-dessus, la technique de purification par chromatographie sur colonne est très utile.

Figure 1
La figure 1. La géochimie importants groupes fonctionnels. De Killops et Killops1.

Procedure

1. le programme d’installation et préparation du matériel

  1. Obtenir un lipide total extrait (TLE) en utilisant une méthode d’extraction par solvant (Sonication, Soxhlet ou Accelerated Solvent Extraction (ASE)).
  2. Rassembler ce qui suit : en verre borosilicaté tible pipettes et ampoules, gel de silice, hexane, le dichlorométhane (DCM) et du méthanol.
    1. Ces matériaux peut être achetés à partir de n’importe quel détaillant de produits chimique. Les réactifs doivent être pure et ...

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Results

Cette technique de purification produit trois flacons différents, chacun contenant une classe de composés différent ou un groupe de classes de composés. La complexité d’un échantillon à analyser sur un instrument a été considérablement réduite. Ce procédé élimine également les composés, tels que les acides produites au cours de la saponification, qui peut réellement s’en tenir aux parties des instruments, en raison de leur faible volatilité, ce qui diminuerait leur e...

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Application and Summary

Alkénones et isoprenoidal GDGTs sont les deux constituants très courants de sédiments marins et peuvent être trouvés à travers les océans du monde. Alkénones sont plus détectés dans les sédiments lacustres, bien que les organismes responsables de leur production sont différents dans l’océan et donc la relation entre l’Uk'37 ratio et l’eau de la température (étalonnage) est différente de l’océan et même entre les lacs séparés. Isoprenoidal GDGTs se trouvent dans certains g...

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References

Killops, S. and Killops, V. Introduction to Organic Geochemistry. Blackwell Publishing, Malden, MA (2005).

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Principles of Column Chromatography

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Silica Gel Column and Sample Preparation

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Silica Gel Column Chromatography

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