Name: an orthotopic bladder tumor model and the evaluation of intravesical sarna treatment
Uploaded: 2012-07-28T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment at JoVE.com

Cette recherche est financée par l&#39;AACR Henry Shepard vessie Cancer Research Grant (09-60-30-LI).

Procédures portant sur des sujets animaux ont été approuvés par le soin des animaux et le Comité institutionnel d&#39;utilisation (IACUC) à l&#39;Université de Californie, San Francisco. 1. Préparation des cellules <ol><li> La ligne de cellules humaines de cancer de la vessie KU-7-luc2-GFP (Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA) est cultivé dans un milieu RPMI-1640 supplémenté avec 10% sérum de veau foetal et 50 pg / ml de gentamicine. </li><li> Les cultures sont maintenues à 3...

<ol>
	<li>Semple, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+cationic+lipids+for+siRNA+delivery.">Rational design of cationic lipids for siRNA delivery.</a> Nature. 28, 172-176 (2010).</li><li>Li, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+dsRNAs+induce+transcriptional+activation+in+human+cells.">Small dsRNAs induce transcriptional activation in human cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103, 17337-17342 (2006).</li><li>Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antitumor+effect+of+dsRNA-induced+p21(WAF1/CIP1)+gene+activation+in+human+bladder+cancer+cells.">Antitumor effect of dsRNA-induced p21(WAF1/CIP1) gene activation in human bladder cancer cells.</a> Molecular cancer therapeutics. 7, 698-703 (2008).</li><li>Chancellor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+results+of+myoblast+injection+into+the+urethra+and+bladder+wall:+a+possible+method+for+the+treatment+of+stress+urinary+incontinence+and+impaired+detrusor+contractility.">Preliminary results of myoblast injection into the urethra and bladder wall: a possible method for the treatment of stress urinary incontinence and impaired detrusor contractility.</a> Neurourology and urodynamics. 19, 279-287 (2000).</li><li>Hadaschik, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+validated+mouse+model+for+orthotopic+bladder+cancer+using+transurethral+tumour+inoculation+and+bioluminescence+imaging.">A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumour inoculation and bioluminescence imaging.</a> BJU international. 100, 1377-1384 (2007).</li><li>Fu, C., Apelo, C. A., Torres, B., Thai, K. H., Hsieh, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Bladder+Wall+Injection.">Mouse Bladder Wall Injection.</a> J. Vis. Exp. (53), e2523 (2011).</li><li>Dobek, G. L., Godbey, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Orthotopic+Model+of+Murine+Bladder.">An Orthotopic Model of Murine Bladder.</a> Cancer. J. Vis. Exp. (48), 2535 (2011).</li><li>Dinney, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+metastatic+variants+from+human+transitional+cell+carcinoma+passaged+by+orthotopic+implantation+in+athymic+nude+mice.">Isolation and characterization of metastatic variants from human transitional cell carcinoma passaged by orthotopic implantation in athymic nude mice.</a> The Journal of urology. 154, 1532-1538 (1995).</li></ol>

Nous présentons un protocole pour la mise en place d&#39;une souris modèle de xénogreffes tumorales de la vessie orthotopique suivie d&#39;un traitement par voie intravésicale des tumeurs avec SARNA TNL formulé qui cible le promoteur de p21 CIP1/WAF1 (p21) pour l&#39;activation transcriptionnelle. 2, 3 Les tumeurs qui en résultent peuvent être confirmée et surveillée par imagerie bioluminescente et l&#39;échographie de la vessie. Modèles orthotopiques peut être supérieure à intrapéri...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires (optionnel) </td></tr><tr><td> KU-7-luc-cellules GFP </td><td> Caliper </td><td> 128091 </td><td></td></tr><tr><td> thymiques chez la souris nude (nu / nu) </td><td> Laboratoires Simonsen </td><td> 6-7 semaines </td><td> Sim: (RCN) nu / nu Fisol </td></tr><tr><td> Appareil à ultrasons </td><td> Visualsonics </td><td> Vevo 770 </td><td> RMV-704 de sonde </td></tr><tr><td> Unité de bioluminescence </td><td> Caliper </td><td> IVIS spectre </td><td></td></tr><tr><td> Exel safelet cathéter </td><td> Pêcheur </td><td> 14-841-21 </td><td> 24G X ¾ &quot; </td></tr><tr><td> Le nitrate d&#39;argent </td><td> Sigma </td><td> S8157 </td><td></td></tr><tr><td> Hamilton seringue </td><td> Hamilton company </td><td> 80301 </td><td></td></tr><tr><td> TNL-SARNA </td><td> Pharmaceuticals Alnylam </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> Tableau 1. Réactifs et équipements spécifiques.

an orthotopic bladder tumor model and the evaluation of intravesical sarna treatment

Nous présentons une nouvelle méthode pour traiter le cancer de la vessie avec intravésicale livré activation petit ARN (SARNA) dans un modèle de xénogreffe de souris tumeur orthotopique de la vessie. Le modèle de la souris est mis en place par cathétérisme urétral sous anesthésie générale par inhalation. Brûlure chimique est ensuite introduit à la muqueuse de la vessie à l&#39;aide intravésicale solution de nitrate d&#39;argent pour perturber la couche glycosaminoglycane de la vessie et permet aux cellules d&#39;attacher. Après plusieurs lavages à l&#39;eau stérile, cancer de la vessie humaine KU-7-luc2-GFP cellules sont inculquées à travers le cathéter dans la vessie pour habiter pendant 2 heures. La croissance ultérieure de tumeurs de la vessie est confirmée et surveillée par échographie de la vessie dans l&#39;imagerie in vivo et bioluminescente. Les tumeurs sont alors traitées par voie intravésicale avec SARNA formulée dans des nanoparticules lipidiques (LNPs). La croissance tumorale est contrôlée par échographie et la bioluminescence. Toutes les étapes de cette procédure sont mises en évidence dans la vidéo qui l&#39;accompagne.

Watch this Scientific Journal Video about An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment at JoVE.com

An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment

L&#39;établissement d&#39;un modèle de la vessie orthotopique tumeur à évaluer les effets antitumoraux de Sarna par voie intravésicale livré et suivi de la croissance tumorale par échographie et l&#39;imagerie bioluminescente.

Un modèle de la vessie orthotopique tumorale et l&#39;évaluation de Sarna traitement intravésicale

We present a novel method for treating bladder cancer with intravesically delivered small activating RNA (saRNA) in an orthotopic xenograft mouse bladder ...

Research

JoVE Journal

Medicine

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

Un modèle orthotopique de cancer de la vessie murin

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Recherche

Médecine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Multi-photon imagerie de l&#39;invasion des cellules tumorales dans un modèle de souris orthotopique du carcinome épidermoïde oral

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Combination Radiotherapy in an Orthotopic Mouse Brain Tumor Model

La radiothérapie combinée à un modèle de tumeur de cerveau de souris orthotopique

Glioblastoma multiforme (GBM) are the most common and aggressive adult primary brain tumors1. In recent years there has been substantial progress in the ...

An Orthotopic Mouse Model of Anaplastic Thyroid Carcinoma

Un modèle de souris orthotopique de cancer de la thyroïde anaplasique

Several types of animal models of human thyroid carcinomas have been established, including subcutaneous xenograft and orthotopic implantation of cancer ...

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

Un modèle de cancer de la vessie orthotopique d&#39;études livraison Gene

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

Un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate humain métastases

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Minimally Invasive Establishment of Murine Orthotopic Bladder Xenografts

Minimalement invasive Création d&#39;murin orthotopique de la vessie xénogreffes

Orthotopic bladder cancer xenografts are the gold standard to study molecular cellular manipulations and new therapeutic agents&#160;in vivo. Suitable ...

Evaluation of Tumor-infiltrating Leukocyte Subsets in a Subcutaneous Tumor Model

Évaluation des leucocytes infiltrant les tumeurs sous-ensembles dans un Modèle de tumeur sous-cutanée

Specialized immune cells that infiltrate the tumor microenvironment regulate the growth and survival of neoplasia.&#160; Malignant cells must elude or ...

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Évaluation de l&#39;efficacité de la<em&gt; H. pylori</em&gt; Protéines HP-NAP comme outil thérapeutique pour le traitement du cancer de la vessie dans un modèle murin orthotopique

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold ...

A "Patient-Like" Orthotopic Syngeneic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma Metastasis

Un «Patient-Like&quot; Orthotopique Syngénique modèle de souris de carcinome hépatocellulaire Métastases

The majority of cancer-related deaths are caused by the metastasis of the cancer rather than the primary tumor itself. Yet, the underlying mechanisms of ...