Method Article
نحن لشرح كيفية تنفيذ أسلوب الصيدلة السلوكية في تكييف نموذج الشمية ترغبي في نحل العسل (أبيس mellifera) عن طريق التطبيق المنهجي للمخدرات. هذا الأسلوب يسمح التحقيق في آليات التعلم وتكوين الذاكرة الكامنة في طريقة بسيطة وموثوق بها.
ومن المعروف جيدا نحل العسل (أبيس mellifera) للاتصالات ومهاراتهم والتوجه لعروضه الرائعة التعلم 1،2 القدرة. لأن بقاء مستعمرة نحل العسل تعتمد على استغلال مصادر الغذاء ، والنحل ، تعلم وحفظ المؤن مواقع زهرة متغير فضلا عن ربحيتها. ويمكن بسهولة تدريب النحل المؤن في البيئات الطبيعية حيث العلف في موقع التغذية وتعلم الإشارات ذات الصلة مثل رائحة أو لون. ويمكن أيضا التعلم النقابي مشهي دراستها في ظل ظروف متحكم بها في المعمل عن طريق تكييف الاستجابة ملحق خرطوم (PER) من نحل العسل تسخيرها بشكل فردي 3،4. هذا النموذج يمكن تعلم ودراسة الآليات الجزيئية والخلايا العصبية التي تكمن وراء التعلم والذاكرة في تشكيل وسيلة بسيطة وموثوق بها للغاية 12/05. ويستخدم نهج الصيدلة السلوكية لدراسة الآليات الجزيئية. يتم حقن المخدرات بشكل منتظم في التدخل مع وظيفة جزيئات محددة أثناء أو بعد التعلم وتكوين الذاكرة 13-16.
نحن هنا لشرح كيفية تسخيرها في تدريب النحل على تكييف الواحد وكيفية تطبيق الأدوية بشكل منتظم عن طريق الحقن في عضلة طيران النحل.
1. اصطياد النحل من الخلية
2. نقل النحل من الهرم في قوارير الزجاج
3. النحل في تسخير أنابيب
4. تغذية النحل
5. حفظ النحل مسخر ليلة وضحاها
6. شمي هواء
في صباح الأول (10:00) من التجربة ويتم تكييف الشمية بها. الحافز مكيفة (CS) هو رائحة ، ودون شروط التحفيز (الولايات المتحدة) هو الحل السكروز.
7. ذاكرة الاستبقاء
8. حقن النظامية
النقطة النظامية وقت الحقن يعتمد على التصميم التجريبي.
9. تغذية النحل خلال التجربة
10. جمع البيانات وتحليل البيانات
11. ممثل النتائج :
يتم تقديم تجربتين هنا.
في التجربة الأولى أن ننظر في أثر حقن النظامية من الفوسفات مخزنة في برنامج تلفزيوني (المالحة ، وفي ملي : 137 كلوريد الصوديوم ، 2،7 بوكل ، 10،1 نا 2 هبو 4 ، 1،8 KH 2 PO 4 ، ودرجة الحموضة 7 ، 2) على التعلم وعلى المدى الطويل تكوين الذاكرة. تعامل مجموعة غير المعالجة ، وهي المجموعة التي تم حقنه مع 1 ميكرولتر 30 دقيقة برنامج تلفزيوني قبل التدريب ، ومجموعة الشام حقن : تم تدريب ثلاث مجموعات من النحل مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة مع فاصل بين محاكمة 10 دقيقة بنفس طريقة حقن مجموعة PBS ولكن من دون حقن PBS. تم اختبار الذاكرة بعد 24 ساعة تدريبية مع تقديم خدمات العملاء واحد في جميع الفئات الثلاث. النسبة المئوية للحيوانات التي تبين استجابة مشروطة خلال تكييف يزيد بشكل كبير عبر محاكمات تدريبية لمدة ثلاثة (Fig.1 ، ANOVA لقياس المتكرر للمرة عامل F 2378 = 340456 ، ف <0،05). ويمكن ملاحظة أي اختلاف في PER بين المجموعات الثلاث خلال تكييف (ANOVA لقياس المتكررة لعامل الجماعات F2 ، 189 = 1299 ، P> 0،05). هذا ينطبق على 24 اختبارا الاحتفاظ ح (F2 ، 187 = 0752 ، P> 0،05) عند المقارنة بين الحيوانات غير المعالجة مع PBS حقن حقن الحيوانات وزائفة.
في التجربة الثانية نبدي تثبيط للاحتفاظ الذاكرة الثلاثة وبعد أربعة أيام من التدريب عندما تم حقن مجموعيا المانع التوليف anisomycin البروتين (10 ملم) و 30 دقيقة بعد التزاوج CS - الامريكية الثلاثة. المقارنة بين جماعة anisomycin حقن مع مجموعة PBS حقن يكشف عن فارق كبير بين المجموعات خلال الاحتفاظ ربتوقيت شرق الولايات المتحدة (Fig.2 ، ANOVA لقياس المتكرر للعامل المجموعة F1 ، 94 = 8،86 ، ف <0،05). ويمكن ملاحظة اختلاف كبير في اختبار الذاكرة في يوم 3 و 4 ايام. هذا يشبه نتائج Wüstenberg آخرون 18 ، الذي اشترط أيضا النحل مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة ، ولكن مع بروتوكول آخر.
الشكل 1. آفة جليدة أو حقن PBS لا يغير اقتناء والاحتفاظ الذاكرة. تم تدريب الحيوانات مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة (اكتساب). بعد 24 ساعة ، واختبار الذاكرة (الاحتفاظ الذاكرة). ثلاثين دقيقة قبل التدريب ، وأدلى حفرة في جليدة للمجموعتين (الآفة ، PBS) وحقن واحدة من هذه المجموعات مع 1 ميكرولتر PBS (PBS). وقد غادرت المجموعة الثالثة سليمة (أي علاج). قدم هو النسبة المئوية للحيوانات لكل مجموعة الاستجابة للعرض مع رائحة PER. وANOVA لا يكشف عن أية فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعتين في مرحلة اكتساب (F2 ، 189 = 1.299 ، P> 0.05) أو في الاحتفاظ الذاكرة (F2 ، 187 = 0.752 ، P> 0.05)
الشكل 2. حقن 40 دقيقة anisomycin بعد الاقتران CS - الولايات المتحدة مشاركة يقلل الاحتفاظ الذاكرة ثلاثة ايام وبعد أربعة أيام من التدريب. الحيوانات وتدرب مع الأزواج CS - الامريكية الثلاثة (شراء) وحقنه مع 1 ميكرولتر anisomycin 10 ملم (التفاوت) أو 1 PBS ميكرولتر 1 ح بعد المحاكمة التدريبية الأولى. وكان اختبار الذاكرة (ذاكرة للاحتفاظ) 24 ساعة ، 48 ساعة و 72 ساعة و 96 ساعة في وقت لاحق. قدم هو النسبة المئوية لكل مجموعة من الحيوانات الاستجابة للعرض مع رائحة PER. حقن anisomycin يؤدي إلى خفض كبير في الذاكرة 72 ح ح 96 استبقاء وبعد التدريب (F1 ، 94 = 8.86 ، P <0.05) كما كشفت من قبل ANOVA.
وأيد هذا العمل من خلال منحة من الوزارة الاتحادية الألمانية للتعليم والبحوث (BMBF) داخل التركيز بيرنشتاين : أسس التعلم الخلايا العصبية (BFNL) لDE نشكر راندولف منزل للتعليق على قيمة إصدار سابق من المخطوطة.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Syringe Omnifix 20 ml | B. Braun Medical | 4616200 V | |
White refined household sugar | Kaisers Supermarket, Berlin, Germany | ||
Clove oil | Bombastus, Freital, Germany | ||
Multipette plus | Eppendorf | 4981 000.019 | |
Rack for 30 bee tubes | Home made | ||
Plastic tubes | Home made | ||
UV light-permeable plexiglass pyramid | Home made | height = 30cm,apex 3.5 x 3.5cm,base 18x18cm | |
Sticky tape | Tesa, Hamburg, Germany | ||
Capillator sticks 1-5μl | Selzer | ||
Capillator tips 1-5μl | Selzer | ||
Filter paper 0.16-0.2 mm thick | Macherey-Nagel | MN 616 or MN615 | Adjusted to circular pieces with a 1.3 cm diameter |
Disposable hypodermic needle | B. Braun Medical | 4657683 | 0.45 mm diameter |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved