التقييم الطولي للهند ماوس الاطراف فقدان العظام بعد اصابة النخاع الشوكي به الرواية ، في الجسم الحي ، منهجية

Summary

وأجري الفحص طولية من فقدان العظام في femurs وظنبوب من فئران بالغة بعد إصابة الحبل الشوكي باستخدام متسلسلة جرعة منخفضة من الأشعة السينية بالاشعة. تم الكشف عن الساق فقدان العظام طوال فترة الدراسة ، في حين لم يتم الكشف عن فقدان العظام في عظم الفخذ حتى 40 إصابة آخر أيام.

Abstract

وغالبا ما يترافق اصابات الحبل الشوكي (النخاع الشوكي) من ترقق العظم في مناطق تحت الآفة من الحوض والأطراف السفلية ، مما أدى إلى ارتفاع وتيرة للكسور ^1. وهذه الكسور كثيرا ما تحدث في المناطق التي فقدت الوظيفة الحسية العادية ، والمريض هو في خطر أكبر من الأمراض التي تعتمد على كسر ، بما في ذلك الوفاة. وقد عزا اصابات النخاع الشوكي التي تعتمد على الخسارة في كلا كثافة المعادن في العظام (BMD ، غرام / سم ²⁾ والعظام المحتوى المعدني (BMC ، غراما) إلى الترك الميكانيكية ² ، ³ إشارات العصبية الشاذة والتغيرات الهرمونية ^4. ويمكن استخدام نماذج من القوارض اصابات النخاع الشوكي التي يسببها ترقق العظام توفر معلومات لا تقدر بثمن فيما يتعلق بآليات الكامنة وراء تطور هشاشة العظام بعد اصابات النخاع الشوكي وكذلك بيئة اختبار للجيل الجديد من العلاجات ^5-7 (، واستعرض في ^8). نماذج الماوس من اصابات النخاع الشوكي ذات أهمية كبيرة لأنها تسمح لنهج الاختزالية لآلية BA -تقييم الحوار الاقتصادي الاستراتيجي من خلال استخدام الفئران المعدلة وراثيا لاغية و. في حين أن مثل هذه النماذج قدمت بيانات مهمة ، لا تزال هناك حاجة لأساليب الحد الأدنى الغازية موثوق بها ، ويمكن استنساخه ، وقابلة للقياس في تحديد مدى فقدان العظام بعد اصابات النخاع الشوكي ، وخصوصا مع مرور الوقت وضمن نفس الفوج من حيوانات التجارب ، لتحسين التشخيص وأساليب العلاج ، و / أو الوقاية من اصابات النخاع الشوكي التي يسببها ترقق العظام.

سيكون وسيلة مثالية لقياس كثافة العظام لدى القوارض تسمح التعرض متعددة ، متتابعة (بمرور الوقت) إلى مستويات منخفضة من الأشعة السينية. هذه الدراسة توضح استخدام ماسح ضوئي لكامل حيوانية جديدة ، لومينا IVIS XR (الفرجار الآلات) التي يمكن استخدامها لتوفير الطاقة المنخفضة (milligray 1-3 (mGy)) عالية الدقة وعالية التكبير صور الأشعة السينية عظام أطرافهم هند الماوس مع مرور الوقت بعد اصابات النخاع الشوكي. واعتبرت خسارة كبيرة في الكثافة العظمية للظن من الفئران بنسبة 10 أيام آخر الشوكي transection مقارنة يصب السيطرة العمر المتطابقة ، (السذاجة) الفئران (13 ٪ انخفاضا ، ف <0.0005). كانت خسارة كثافة العظام في عظم الفخذ البعيدة أيضا كشفها اليوم 10 بعد اصابات النخاع الشوكي ، في حين أن فقدان كثافة في عظم الفخذ والداني لا يمكن كشفها حتى 40 إصابة آخر أيام (انخفاض بنسبة 7 ٪ ، P <0.05). وتم تأكيد اصابات النخاع الشوكي والتي تعتمد على فقدان كثافة عظم الفخذ الماوس بعد الوفاة من خلال استخدام الطاقة المزدوجة قياس امتصاص الأشعة السينية (DXA) ، و "المعيار الذهبي" الحالية لقياس كثافة العظم. يمكننا الكشف عن فقدان 12 ٪ من BMC في femurs من الفئران في 40 يوما بعد اصابات النخاع الشوكي باستخدام ومينا IVIS XR. هذا يقارن ايجابيا مع خسارة BMC ذكرت سابقا ، 13.5 ٪ بواسطة بيكار وزملائه الذين اعتادوا على تحليل DXA femurs الماوس بعد الوفاة 30 يوما بعد اصابات النخاع الشوكي ^9. نتائجنا تشير الى ان لومينا IVIS XR يوفر رواية ، high-resolution/high-magnification طريقة لأداء على المدى الطويل ، والقياسات الطولي للهند أطرافهم كثافة العظام في الماوس بعد اصابات النخاع الشوكي.

Protocol

1. نموذج الفأر الشوكي transection

1. الكبار ، الذكور ، C57BL6 الفئران (حوالي 20-25 ز) تخدير باستخدام مزيج من الكيتامين (200 ملغ / كلغ) وزيلازين (10 ملغ / كلغ). يتم تنفيذ كافة العمليات الجراحية في جناح IACUC المؤسسية التي وافق عليها والجراحية تحت ظروف معقمة.
2. مرة واحدة تخدير عميق ، يتم قطع الفراء من الظهر باستخدام مقصات كهربائية. الجزء الخلفي هو حلق نقيت الأولى مع محلول اليود تليها الايثانول 70 ٪.
3. قبل شق الأولي ، مخترقة المجال لأول مرة من الجزء الخلفي لتكون قطعي مع مخدر موضعي (Marcaine) بتركيز (0.25 ٪ ، <1ml/kg) لتقليل الألم بعد الجراحة.
4. باستخدام مقص صغير ، يتم إجراء فتحة صغيرة في الجلد في جميع أنحاء المنطقة L2. يتم توسيع هذا الانفتاح مع نفس المجموعة من المقص ، وتمتد طوليا في منطقة T2. وتعقد بعد ذلك حواف من الجلد بعيدا عن طريق استخدام المشابك البلدغ.
5. ثم يتم استخدام المقص الصغيرلمسح الأنسجة العضلية من الصفيحة الظهرية الشوكي في المستوى الصدري 8 (T8). ويمكن تحديد T8 كما هو موضح في وWrathall كوه (1998) ^10. باختصار ، يمكن تحديدها من خلال عمليته T13 الشائكة الظهرية. باستخدام زوج من ملقط دومون # 5 ، يمكن تحسس الضلع اخيرة / حددت وعدها مرة أخرى إلى T8. وتستخدم مرة واحدة مسح ، Rongeurs العظام لإجراء استئصال الصفيحه الظهرية في T8.
6. كامل الآفة Transection الشوكي : بمجرد ما يتعرض له الحبل الشوكي في T8 ، يتم استخدام مجموعة إضافية من مقص الدقيقة معقمة لقطع الحبل الشوكي في عمودي على محور طويل من الحبل تحت المجهر الجراحي. نستخدم # 5 دومون ملقط لرفع بلطف قطب واحد من الحبل الشوكي للتأكد من اكتمال الآفة.
7. التالية transection الشوكي ، وقطعة صغيرة من جلفوم عقيمة ، غارقة في المياه المالحة عقيمة (0.9 ٪) وضعت بعناية في تجويف آفة لتعزيز الإرقاء.
8. ثم يتم وضع قطعة إضافية من خلال زيادة ونقصان جلفوم يتعرضبن السلك. ثم يتم إغلاق الجلد مع المواد الغذائية معقمة من فولاذ لا يصدأ والجراحية. وعاد بعدها إلى الموضوعات أقفاص وطنهم ، وتوضع على منشفة ورقية لمنع تطلع من المواد الفراش وتحسنت مع وسادة تدفئة لمدة 12 ساعة تقريبا. كما يتم توفير المواد مع حزم هيدروجيل (ClearH2O) وكريات الغذاء على أرضية أقفاصها خلال استرداد المبكر. الموضوعات جرح قادرون على الحصول على الغذاء / المياه في أقفاص وطنهم مرة واحدة تعافى من التخدير.
9. جميع الموضوعات جرح تلقي مرتين يوميا الإجلاء المثانة اليدوية (في فترات ما يقرب من 12 ساعة) باستخدام أسلوب تعديل يدوي Crede لمدة الدراسة (40 يوما).
10. وقدمت أيضا حقن الفئران المصابين داخل الصفاق مرتين يوميا من 0.9 ٪ المالحة لمدة ثلاثة أيام (0.5 سم) للمساعدة في الحفاظ على الماء ، والحقن مرتين يوميا من البوبرينورفين الأفيونية (0.05 ملغ / كلغ) للسيطرة على الألم بعد الجراحة لفترة 5 أيام. إذا الحيوانات تظهر علامات سو الألم بعد فترة أولية يوم 5 ، وأنهم سيحصلون على البوبرينورفين إضافية (0.05 ملغ / كلغ) يوميا حتى علامات الألم (التنقل مخفضة ، القامة منحنية ، وعدم النطق ، العريس عندما تعالج) قد حلت.

2. طولية تقييم كثافة العظام باستخدام ومينا IVIS XR على الفوج نفسه من spinally - مقطوع الفئران

1. ابتداء من اليوم 10 بعد اصابات النخاع الشوكي والمستمر على فترات يوم 10 حتى يوم 40 ، قمنا بتقييم femurs اليمين واليسار ، والذين يعيشون في للظن ، والموضوعات تخدير (transection اصابات النخاع الشوكي ويصب الضوابط العمر متطابق).
2. في يوم المسح ، تم نقل المواضيع في أقفاص وطنهم من منطقة الحظيرة المؤسسة الى الغرفة التي يوجد مقرها في لومينا XR IVIS الفرجار. جميع الموضوعات ثم يتم تخدير باستخدام نفس الكيتامين / زيلازين الكوكتيل التي سبق استخدامها في إيصال اصابات النخاع الشوكي. هذا الكوكتيل يؤكد حالة من التخدير لفترة من 1 إلى 1.5 ساعة ؛ كافية لمدة scannجي الداخلي.
3. المحقق تهيئة الجهاز XR ومينا وتسمح الكاميرا الداخلية للوصول إلى درجة حرارة التشغيل (-90 درجة مئوية) (~ 10 دقيقة).
4. تخدير مرة واحدة ، يتم وضعها برفق هذا الموضوع (transection أو السيطرة) على منصة الحيوان داخل XR ومينا. يتم إدخال عدسة التكبير عالية في الجهاز للسماح للتركيز على كل من عظم الفخذ والظنبوب مناطق (حقل 2.4X2.4cm عرض مع عدسة التكبير العالية). إذا تم وضع هذا الموضوع غير صحيح خارج مجال الرؤية ، يتم فتح الباب وموضوع إعادة وضعه حتى يتم توسيط طرف اليسار أو اليمين الخلفيتين (انظر الشكل 2A لتحديد المكان المناسب للطرف الخلفيتين).
5. بمجرد وضعه بشكل صحيح ، يمكن تنفيذ الدالة الأشعة السينية. بالاختيار من القائمة المنسدلة للطاقة مناسبة للحيوانات (موضوع المعيشة ، و 35 كيلو فولت 100uA وتصفيتها الأشعة السينية)
6. مرة واحدة للحيوان في الموضع الصحيح ، تمكين ميزة الأشعة السينية بواسطة شيك يترك علامات الأشعة السينية فيلوحة التحكم. الحصول على صورة الأشعة السينية. تأكد من أن عظم الفخذ والساق بأكملها مرئية (انظر الشكل 2B). يتم حفظ البيانات تلقائيا صورة الخام إلى القرص الثابت. يتم أيضا حفظ التمثيلية. TIFF الملفات. ومن ثم عاد الماوس لقفص وطنه ، وسمح لاسترداد تحت الملاحظة محقق. ثم يتم تكرار العملية مع الماوس المقبل.
   ملاحظة : البرنامج يعرض صورة حية تحويل صور الأشعة السينية افتراضيا. الخام لعرض صور الأشعة السينية ، وإزالة علامة الاختيار بجانب امتصاص الأشعة السينية في تصحيحات / أدوات تصفية. عندما تم تصحيح بيانات الأشعة السينية الاستيعاب ، يمكنك تقييم نسبة كثافة العظام عن طريق مقارنة شدة إشارة رويس القياس. كثافة ROI يزداد مع زيادة كثافة الأنسجة.

3. تحليل صورة بفحص الأشعة السينية IVIS

1. فتح البرنامج عن طريق النقر المزدوج على صورة رمز الحياة.
2. تحميل صورة الأشعة السينية بالضغط على استعراض. في مربع الحوار الذي يظهر ، حدد المجلد المصالح وفوق موافق. المستعرض يعرض صورة حية للبيانات مختارة جنبا إلى جنب مع هوية المستخدم ، والمعلومات التسمية ، وكاميرا معلومات التكوين. لفتح البيانات ، نفذ أحد الإجراءات التالية : انقر نقرا مزدوجا فوق صف البيانات ، وانقر بالزر الأيمن على اسم وحدد تحميل البيانات في القائمة المختصرة ، حدد الصف وانقر تحميل البيانات ، أو انقر نقرا مزدوجا فوق الصورة المصغرة. يتم عرض لوحة وصورة أداة. ومن ابرز البيانات المفتوحة في أخضر في المستعرض.
3. انقر على أدوات العائد على الاستثمار في لوحة أداة. في أدوات العائد على الاستثمار ، حدد قياس العائد على الاستثمار من نوع القائمة المنسدلة. لتحميل ROI 3 لاستخدامها في هذه التجربة ، انقر فوق رمز مربع وحمولة 3 مربعات.
4. باستخدام مسطرة ، وقياس طول عظم الفخذ. ضبط طول اثنين من المربعات ليكون ^ال 1 / 8 من مجموع طول عظم الفخذ. ضبط عرض هذه المربعات اثنين يتم 1/24th طول عظم الفخذ الكلي. مع حاكم الخاص ، وقياس 08/01 ^عشرة للمسافة واحدة من نهاية القريبة من عظم الفخذ ، وضعه في مربع بحيث يتم توسيط في عظم الفخذ. وضعه في المربع الثاني بحيث انها تقع 1/4th من طول عظم الفخذ الكلي من نهاية البعيدة للفخذ (الشكل 3). ويمكن استخدام هذه الصورة لقياس العائد على الاستثمار الفخذ المناطق القريبة والبعيدة على حد سواء.
5. باستخدام المسطرة ، وقياس طول الساق. ضبط طول مربع ليصبح ثالث ^عشر 1 / 8 من مجموع طول عظام الساق. ضبط العرض الى 1 / ³⁰ من مجموع طول عظام الساق. وضعه في مربع بحيث يتركز و08/01 ^عشر ويبلغ طول المسافة من نهاية الساق القريبة من الساق (انظر الشكل 3).
6. انقر على أيقونة قس (قلم رصاص ومسطرة). قياسات كثافة ROI تظهر في صورة الأشعة السينية ويظهر الجدول قياسات العائد على الاستثمار. تصدير هذا الجدول رس موقعك على النحو المرغوب فيه ملف CSV. هذا سيسمح لك لفتح جدول باستخدام اكسل.
7. كرر هذا الأمر مع كل من الصور المحفوظة.
8. توحيد جميع البيانات الخاصة بك على ورقة اكسل واحد. تم تحديد الدلالة الإحصائية عن طريق اختبار ر الطالب باستخدام إما Microsoft Excel أو SigmaPlot 11.0 البرمجيات (Systat البرمجيات).

4. بعد الوفاة تحليل كثافة العظام :

1. بعد الحصول على الفحص بالأشعة السينية طولية داخل XR النهائي لومينا IVIS والفئران في وقت لاحق يتم تخدير عميق مع Beuthanasia (75 ملغ بنتوباربيتال / كلغ). مرة واحدة أحرز تخدير عميق ، وperfused transcardially الفئران مع المثلج الباردة الفوسفات مخزنة المالحة مع heparain (40 ملغم / لتر) ليستنزف.
2. exsanguinated مرة واحدة ، سواء femurs المكوس. دفع عناية خاصة لإزالة الأنسجة الناعمة قدر الإمكان ، لهذا فقد تبين أن تؤثر على قياسات الكثافة ^11. التفاف femurs بشاش المياه وتخزينها في غارقة- 20C حتى تكون مستعدا لتحليلها.

5. DXA التحليل باستخدام Hologic QDR كثافة العظام 4000

1. الشاش غارقة في دفء femurs ونقل الى جناح كثافة العظام.
2. معايرة الأجهزة وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة ، وضمان أن القيم BMC BMD وتقع ضمن حدود مقبولة.
3. وضع ميزاء النحاس في الجهاز. هذا يسمح للمستخدم لتحديد حجم وزاوية شعاع الأشعة السينية للتركيز على هدف محدد.
4. يغرق في عظم الفخذ إذابة طبق بيتري مملوءة بالماء (condyles إلى اليسار ، وبالتوازي مع عظم الفخذ إلى السرير) ، وضعه لمجرد حق الليزر.
5. إدخال السيرة الذاتية (عنوان وصفي يتضمن معلومات عن الهوية الحيوانية ، والعلاج ، الخ) لعظم الفخذ كنت على وشك أن الفحص.
6. أدخل مسح من قائمة اختيارات ، ثم حدد regionA مرحبا الدقة. يشير المسح الخاص المعلمات: أ مسح منطقة 0.7489 X 2 بوصة ، مع تباعد الأسطر 0.01 بوصة و0،00499 نقطة القرار بوصة.
   ملاحظة : مراقب الفحص أثناء وجوده في التقدم. كما الأشعة السينية شعاع النقطية بفحص العينة ، ورصد لضمان عدم وجود ما يكفي من المياه في الغرفة لتغطية كامل العينة العظام.
7. يدخل في إطار التحليل تحليل القائمة التحديد. اتبع المطالبات لتسليط الضوء على عظم الفخذ بأكمله بوصفه العائد على الاستثمار. وهناك صفحة التقرير يأتي مع BMC محسوب (غرام) وBMD (جم / سم ^2).
8. كرر هذه الخطوات لتحليل femurs المتبقية.
9. توحيد جميع البيانات الخاصة بك على ورقة واحدة ويتفوق أداء التحليل الإحصائي (اختبار t).

6. ممثل النتائج :

كثافة العظم النسبي خسارة الساق والفخذ الماوس بعد إصابة الحبل الشوكي عند الفئران مقارنة ساذجة قابلا للاكتشاف باستخدام الأسلوب أعلاه. هناك انخفاض كبير في كشف كثافة العظام بعد10 أيام فقط (12 ٪ ، P <0.0005) ، مع ما يصل الى 15 ٪ هشاشة العظام في 40 يوما (ف <0.0005 ، الشكل 4). ولوحظ كثافة العظام الخسارة في عظم الفخذ في 40 إصابة آخر أيام (انخفاض بنسبة 7 ٪ ، P <0.05 ، الشكل 5). هذه النتائج تقدم دليلا على استخدام التصوير بالأشعة السينية غير الغازية لمراقبة الطولي للتغيير كثافة العظام بعد إصابة الحبل الشوكي.

من أجل مقارنة مدى فعالية هذه الطريقة على ما هو متاح حاليا ، ونحن حللت femurs استئصاله من هذه الفئران بعد 40 يوما من الإصابة به DXA التصوير. ويمكن الاطلاع على تمثيل إخراج البيانات في الشكل 6. وجدنا أن هناك خسائر كبيرة في محتوى المعادن في العظام لدى الفئران اصابات النخاع الشوكي عند مقارنة ساذجة (12 ٪ انخفاضا ، P <0.05 ، الشكل 7). لم كثافة المعادن في العظام لا تتغير بشكل كبير ، ولكن لم تتبع اتجاها مماثلا (الشكل 8). هذه النتائج مشابهة لتلك التي وجدت في الأدب ؛ بيكار وآخرون وحظ انخفاض 13.5 ٪ (P <0.001) في BMC ، ولكن لا decr كبيرةسهولة في BMD (بيكار 2008).

الشكل 1. الجدول الزمني التجريبي.

الشكل 2 التوجه ممثل أطرافه الخلفية اليسرى : صورة) و ب) الأشعة السينية.

الشكل 3. أبعاد دوروا والتوجيه داخل المناطق القريبة من عظم الفخذ والساق.

الشكل 4. فقدان كثافة العظام بعد اصابات النخاع الشوكي في الساق القريبة 10 و 20 و 30 و 40 يوما بعد الإصابة (ن = 5) مقارنة naives في العمر كعينة (ن = 5). أشرطة الخطأ تمثل SEM ** ؛ ع <0.005 ، *** ع <0.0005.

الشكل 5. هشاشة العظام بعد اصابات النخاع الشوكي في عظم الفخذ القريبة 10 و 20 و 30 و 40 يوما بعد الإصابة (ن = 5) مقارنة naives في العمر كعينة (ن = 5). أشرطة الخطأ تمثل SEM ؛ * P <0.05.

الشكل 6. هشاشة العظام بعد اصابات النخاع الشوكي في عظم الفخذ البعيدة أيام 10 و 20 و 30 و 40 بعد اصابة (ن = 5) مقابل العمر المتطابقة ضوابط ساذجة (ن = 5). أشرطة الخطأ تمثل SEM ؛ * ع <0،01-0،05 ؛ ** ع <،001-،01 ؛ *** ع <0،0001-،001 ؛ **** ع <0.0001.

الرقم 7. صورة الممثل تظهر البيانات DXA BMC والإخراج BMD.

الرقم 8. DXA تحليل محتوى المعادن في العظام (غرام) في النخاع الشوكي للفئران femurs 40 يوما آخر إصابة (ن = 5) مقابل العمر المتطابقة naives (ن = 5).أشرطة الخطأ تمثل SEM ؛ * P <0.05.

الرقم 9. DXA تحليل كثافة المعادن في العظام (ملغم / سم ²⁾ في femurs من الفئران اصابات النخاع الشوكي إصابة آخر 40 أيام (ن = 5) مقابل العمر المتطابقة naives (ن = 5). أشرطة الخطأ تمثل SEM ، لا يوجد فرق كبير.

Discussion

هذه الدراسة تقدم الرواية ، غير الغازية طريقة لتقييم التغيرات في كثافة العظام الفردية (للظن وfemurs) طوليا ، ضمن فوج واحد من الفئران ، وذلك باستخدام IVIS الفرجار ومينا نظام التصوير XR. اصابات النخاع الشوكي تنتج انخفاضا في كثافة العظام في كل من femurs ظنبوب وعندما درس ضمن فوج واحد من spinally - مقطوع الفئران على مدى 40 يوما مقايسة مقارنة بالعمر المتطابقة ، لم يصب الفئران السيطرة. وقد أكد نتائجنا في عظم الفخذ ، بعد الوفاة ، من خلال استخدام DXA ، مما يوحي بأن تطبيق الصكوك الفرجار XR ومينا IVIS يمكن أن تكون بمثابة أداة قياس حساسة لتقييم الآثار الطويلة الأجل والتدريجي للاصابات النخاع الشوكي في فقدان العظام .

وإحدى هذه المنافع المحتملة للمحققين باستخدام هذا النظام هو القدرة على متابعة تطور طوليا تغيرات مرضية في العظام أطرافهم هند من الحيوانات التالية اصابات النخاع الشوكي. القدرة على تقييم فوج واحد على مدى فترات زمنية طويلة توفر شمزايا رونغ للمحقق من حيث : التكاليف) 1 المرتبطة شراء الحيوانات والرعاية الطويلة الأجل. بدلا من الدراسة التي تتطلب أعدادا كبيرة من الحيوانات التي تحتاج إلى أن تكون التضحية في نقطة زمنية محددة من أجل تقييم التغيرات التي تعتمد على الوقت ، يمكن اتباع هذه النتائج المرضية داخل الفوج نفسه خلال تلك الفترة الزمنية نفسها ، 2) التباين : بالإضافة إلى مقارنة مع الأفواج التحكم ، يمكن تقييم النتائج المتولدة داخل فوج واحد من الموضوعات المصابين ومقارنة بين نقاط الوقت نفسه للحيوانات في جميع أنحاء نطاق الدراسة ؛ مرة أخرى ، والحد من التقلبات سواء داخل الحيوان فضلا عن الحاجة للحصول على أكبر أفواج من الموضوعات التجريبية.

في حين أن IVIS الفرجار ومينا XR قدمت لنا معلومات هامة تتعلق طولية تطوير اصابات النخاع الشوكي التي يسببها ترقق العظام ، وهناك القيود التي ينبغي النظر فيها هي : 1) في حين أن هذا أتاح لنا منصة لتوليد عالية الدقة للأشعة السينية DATA في عظام أطرافهم هند من الفئران بعد اصابات النخاع الشوكي ، قد تكون محدودة فائدته إلى القوارض الصغيرة مثل الفئران. ارتفاع موضوع الحد الأقصى المسموح به داخل XR ومينا هو 2.8 سم. لا يمكن أي شيء أعلاه أن ارتفاع يمكن تصوير بنجاح باستخدام الأشعة السينية مكون من XR لومينا. في أيدينا ، وهذا يحول دون قدرتنا على دراسة الفئران في الوزن غرام 200-250. في حين أنه قد يكون من الممكن للفئران صورة تحت هذا النطاق الوزن أو غيرها من القوارض مثل الفئران البيضاء أو الجربوع ، وهذا يتطلب إجراء اختبارات إضافية من جانب بي. 2) التوجه المشترك. فمن الأهمية بمكان أن يقدم الباحث بعناية أطرافه في اتجاه استنساخه بسهولة من شأنها أن تسمح بالمقارنة بين نجاح جلسات التصوير. وتوحيد التنسيب أطرافهم السماح للمحقق لتوليد وتطبيق موحد لROI التي يمكن حفظها وتطبيقها عبر هذين الموضوعين والوقت.

عموما ، فإننا نعتقد أن لومينا IVIS XR يوفر منصة ممتازة مع الذي لنموذجتطوير اصابات النخاع الشوكي التي تعتمد على هشاشة العظام لدى الفئران. فإن القدرة على دراسة فقدان العظام طوليا داخل الفوج الماوس نفسه يسمح لنا : 1) فهم أفضل لطبيعة الزماني للخسارة العظم والنخاع الشوكي بعد التنقيه ، 2) تحديد ما إذا كانت هذه التغييرات استقرار مع مرور الوقت ، 3) يستكشف ، مع توافر على حد سواء وراثيا وخطوط الماوس فارغة ، والقدرة على دراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه التغيرات المرضية بطريقة اختزالية ، و 4) من المحتمل جدا أن أهم ميزة ، والبدء في اختبار تدخلات جديدة ترمي إلى منع أي تطور مرض هشاشة العظام في مراحل مبكرة الإصابة ، أو لعكس هذه التغييرات ترقق العظام مرة واحدة وقد وضعت بالفعل. أخيرا ، لومينا XR ، بالإضافة إلى توفير إمكانيات ممتازة التصوير بالأشعة السينية ، ويمكن أن تستخدم أيضا لدراسة كل الإشارات bioluminescent والحيوانات التي تعيش في نيون. يمكن للمرء أن يتصور بسهولة دمج طرائق أخرى عرضت ضمن هذا النظام للنظر في مولtitude من العوامل التي تحدد ديناميات العظام ميكانيكيا بعد اصابات النخاع الشوكي أو أي مرض آخر عملية ينتج عنه هشاشة العظام.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
اسم الكاشف	شركة	فهرس العدد	تعليقات
Beuthanasia	بتلر شين الحيوان الصحة	001848
Ketathesia (الكيتامين هيدروكلوريد)	بتلر شين الحيوان الصحة	023061
زيلازين	بتلر شين الحيوان الصحة	037849
Bupivicaine	بتلر شين الحيوان الصحة	021801
جلفوم ؛ 7MM	فيشر العلمية	NC0085178	من أجل تعزيز خلال الإرقاء عملية جراحية
IVIS ومينا XR	الفرجار العلوم الحياتية	135400
ZFOV ، و 2.5 سم من الميدان عرض العدسة	الفرجار العلوم الحياتية	127285	الضرورة القصوى إلىتوليد عالية التكبير الأشعة السينية صور للعظم هيكل
QDR العظام مقياس الكثافة	Hologic		يستخدم النموذج لم يعد في الإنتاج