A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
ويقدم هذا المخطوط إجراء العمليات جراحية خطوتين مفصلة لأداء الماوس 5/6th الجزئي استئصال (بن) مع ربط القطب. أربعة أسابيع بعد الجراحة، مقارنة بالفئران التي تعمل بالشام، وضع ضعف في وظيفة الكلي، فقر الدم، وتضخم القلب، تليف القلب الفئران بنكس وانخفاض وظيفة القلب الانقباضي والانبساطي.
أمراض الكلي المزمنة (كد) هو عامل خطر كبير لإحداث الأمراض القلبية الوعائية والوفيات، ويتطور تدريجيا إلى النمط الظاهري السريرية التي تسمى "يوريمي اعتلال عضلة القلب". يصف لنا هنا نموذج ماوس كد تجريبية، المسماة 5/6ال استئصال جزئي (بن) مع ربط القطب، الذي وضعت يوريمي اعتلال عضلة القلب في أربعة أسابيع بعد الجراحة. هذا النموذج بنكس أجرى من قبل عملية جراحية في خطوتين. في خطوة واحدة من عملية جراحية، كانت متصلة كلا القطبين لاستئصال كليته اليسرى. في الخطوة اثنين الجراحة، التي كان يؤديها 7 أيام بعد الجراحة خطوة واحدة، تمت إزالة الكلي اليمنى. لعملية جراحية الشام، نفس إجراءات عملية جراحية أجريت لكن دون القطب ربط لاستئصال كليته اليسرى أو إزالة الكلي اليمنى. الإجراءات الجراحية أسهل وأقل استهلاكاً للوقت، مقارنة بالأساليب الأخرى. ومع ذلك، بقايا الكتلة الكلوي الوظيفي لا يتم التحكم بسهولة كربط الشريان الكلوي. أربعة أسابيع بعد الجراحة، مقارنة بالفئران تعمل بالشام، وضع ضعف في وظيفة الكلي، فقر الدم، وتضخم القلب، تليف القلب الفئران بن وانخفاض وظيفة القلب الانقباضي والانبساطي.
كد، يعرف أيضا باسم الفشل الكلوي المزمن، هو فقدان تدريجي لوظائف الكلي مع مرور الوقت أن تتطور في نهاية المطاف إلى الفشل الكلوي الدائم. كد، من أوائل الدول الكلوي المرحلة إلى نهاية مرحلة المرض الكلوي (المسببات)، هو عامل خطر كبير لإحداث الأمراض القلبية الوعائية والوفيات، ويتطور تدريجيا إلى النمط الظاهري السريرية يسمى "اعتلال عضلة القلب يوريمي"1، 2،3. عضلة يوريمي في المرضى الذين يعانون من كد أو المسببات ترتبط بتشوهات القلب والأوعية الدموية، نتج أساسا عن التحميل الزائد للضغط (LV) البطين الأيسر و/أو وحدة التخزين، مما أدى إلى تضخم LV (لفة) وتمدد LV LV خلل الانقباضي4 ،،من56. تليف القلب هو آخر عملية المرضية شيوعاً من اعتلال عضلة القلب يوريمي الذي يقلل من الامتثال القلب أدى إلى اختلال وظيفي الانبساطي LV. تليف القلب الحاد يمكن أن يؤدي إلى موت القلب المفاجئ حتى في تلك دون أعراض قلبية7.
5/6ال بن نموذج حيوان كد استخداماً للدراسات الحيوانية التي تشمل الفشل الكلوي، يوريمي اعتلال عضلة القلب وارتفاع ضغط الدم. بن يتحقق عن طريق الاستئصال حمة الكلوي 5/6. نموذج الفئران وضعت في البداية مع اثنين الأكثر شيوعاً البروتوكولات المستخدمة ويجري الاستئصال الجراحي أو احتشاء. يعتبر هذا النموذج بن الفئران نموذجا مفيداً للغاية لدراسة يوريمي اعتلال عضلة القلب مع ارتفاعات كبيرة في ضغط الدم وتضخم القلب وضعف االنبساطي الدالة. في وقت لاحق، تم استحداث نماذج بن الماوس، تعمل مع التقنيات المماثلة كنموذج الفئران، نظراً لتوافر واسعة وسهولة صنع التلاعبات الجينية في نظام الماوس.
أنها موثقة توثيقاً جيدا أن إجهاد الأكسدة الجهازية سمة دائمة لكل عضلة يوريمي السريرية والتجريبية8،9. وعلاوة على ذلك، إجهاد الأكسدة يسهم متلازمة يوريمي10، ويقوم بدور حاسم في أمراض تشوهات القلب ينظر في عضلة يوريمي11،،من1213. إلى هذه النقطة، وقد أثبتنا أن القوارض 5/6ال نموذج بنكس يسبب السمات الفيزيولوجية والمورفولوجية والكيميائية الحيوية لعضلة يوريمي14،،من1516، 17. في نموذج بن الماوس الموصوفة هنا، وضعت الفئران تعمل ببن كبيرة الأكسدة، على الأقل جزئيا التوفيقية قبل Na/K-ATPase الإشارات الدالة، هو أمر حاسم في بن بوساطة عضلة يوريمي التجريبية. التوهين من إشارات Na/K-ATPase لا يقلل من الأكسدة التضخيم فحسب، بل يساعد أيضا التغييرات الشكلية في عضلة يوريمي التجريبية بوساطة بنكس18.
وقد أقر جميع رعاية الحيوان وتجارب مارشال جامعة مؤسسات الرعاية الحيوانية واستخدام اللجنة (IACUC) وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. تم إيواء الفئران الذكور C57BL/6 (10-12 أسابيع من العمر) في منشأة مسببات الأمراض حيوانية مجاناً في مكان مخصص غرف مجهزة بأقفاص إمداد الهواء النقي تحت دائرة ضوء/الظلام ح 12. الأغذية والمياه قد تم توفيره إعلانية libitum.
1-"إعداد جراحة"
ملاحظة: الأدوات الجراحية ومواد تم الحصول عليها من مصادر مختلفة غير محددة لعمليات الجراحة. يمكن أيضا استخدام الأدوات والمواد من مصادر أخرى لنفس الغرض. انظر الجدول للمواد للحصول على قائمة أدوات الجراحية.
الجدول2. جراحة خطوة واحدة: "ربط القطب من اليسار الكلي"
ملاحظة: الحفاظ على ظروف معقمة أثناء الجراحة. وتشمل الأدوات الجراحية يعقم مع لوحة عقيمة. تبقى أكثر من مجموعة واحدة من الأدوات الجراحية في متناول اليد لأكثر من عملية جراحية لمنع حدوث التلوث المنتقل خلال الجراحة. إذا كانت الصكوك التي تحتاج إلى استخدامها مرة أخرى، في حالة عمليات جراحية متعددة، تطهير الأدوات مع الإيثانول 70% والحل تدين، وتعقيم ثم في جيرميناتور زجاج حبة معقم لأدنى 5 تطهير منطقة التشغيل مع الإيثانول 70%. ارتداء ثوب، قناع (لتغطية الآنف والفم)، الحد الأقصى (لتغطية الرأس)، وزوج من القفازات المعقمة. تغيير القفازات بعد كل عملية جراحية-
3. جراحة الخطوة الثانية: إزالة "الكلي حق"
4. شام جراحة
5-"تقييم عضلة يوريمي التجريبي"
وتشير البيانات إلى أن هذا التعديل 5/6ال بن النموذجي بربط القطب نموذج بسيط وفعال للتحقيق يوريمي اعتلال عضلة القلب. في أربعة أسابيع بعد الجراحة، بن هذا النموذج يعرض ضعف وظيفة الكلي، فقر الدم، وتضخم القلب، وتليف القلب، وانخفاض وظيفة القلب الانقباضي والانبساط...
الفأر 5/6ال بن النموذجي قد استخدمت على نطاق واسع لدراسة كد. نظراً حجم أصغر بكثير الكلي في الماوس، يتم ربط الشريان الكلاسيكية وبتر القطب صعبة للغاية في نماذج الماوس مع إمكانية ارتفاع معدلات الوفيات وخسائر غير متوقعة النزيف/الدم.
لقد اعتمدنا نموذج بن ماوس مع ربط القطب لل?...
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
أيد هذا العمل 1R15DK106666-01A1 R15 المعاهد الوطنية للصحة (إلى ليو جيه)، والمعاهد الوطنية للصحة RO1 HL071556 (لأن الجماعة الإسلامية شابيرو).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Iris Scissors, 11.5 cm, Straight | World Precision Instruments | 501758 | |
WPI Swiss Tweezers #5 11 cm, 0.1x0.06 mm Tips | World Precision Instruments | 504506 | |
Jewelers #5 Forceps, 11cm, Straight, Titanium | World Precision Instruments | 555227F | |
Iris Forceps, 10cm, Straight, Serrated | World Precision Instruments | 15914 | |
Tweezers #3, 11cm, 0.2x0.4mm Tips | World Precision Instruments | 501976 | |
Medesy Iris 4.5" Curved Scissors, Stainless Steel | Net23 | 3512 | www.Net32.com |
Dr. Slick Iris Scissors; 3.5" | Avid Max | 220-1-965-IrisScsrs-P | www.Avid Max.com |
Miltex Iris Scissors 4 1/8" Curved | 4mdmedical | V95-306 | www.4mdmedical.com |
5" Hemostat clap, curved jaw | PJTool | 4355 | www.pjtool.com |
sklar Knapp Iris scissors, straight and sharp/blunt 4" | Medical Device depot | 64-3430 | www.medicaldevicedepot.com |
Kelly Hemostatic Forceps straight 5.5" | Pilgtimmedical | FA710-50 | www.pilgtimmedical.com |
C57BL/6 mice | Hilltop Lab Animals Inc. | ||
Mouse Handling Table and rectal thermometer | Visualsonics | ||
MicroScan transducer | Vevo 1100 | MS400 | |
Vevo 1100 Imaging System | FUJIFILM VisualSonics Inc. | ||
Cystatin C ELISA kit and mouse creatinine kit | Crystal Chem. Inc. | ||
Mouse BUN ELISA kit | MyBioSource Inc |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved