Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
Bu el yazması fare 5/6inci kısmi nefrektomi (PNx) kutup ligasyonu ile gerçekleştirmek için detaylı iki aşamalı cerrahi işlem sağlar. Dört hafta sonra ameliyat, fareler, sham işletilen ile karşılaştırıldığında PNx fareler geliştirilen bozulmuş böbrek fonksiyonu, anemi, kalp hipertrofisi, kardiyak fibrozis ve kalp sistolik ve diyastolik fonksiyonu azalmıştır.
Kronik böbrek hastalığı (CKD) kardiyovasküler hastalık ve ölüm için büyük bir risk faktörüdür ve giderek "üremik kardiyomiyopati" denilen klinik fenotip geliştirir. Burada dört hafta ameliyat sonrası, üremik kardiyomiyopati geliştirilen kutup ligasyonu ile 5/6inci kısmi nefrektomi (PNx) adında bir deneme CKD fare modeli açıklar. Bu PNx model iki aşamalı cerrahi ile gerçekleştirildi. Adım-bir ameliyatta her iki Polonyalılar sol böbrek tane. 7 gün sonra adım-bir ameliyat gerçekleştirildi, adım iki ameliyatta sağ böbrek kaldırıldı. Sham ameliyat için aynı cerrahi prosedürler yapıldı ama olmadan ligasyonu sol böbrek veya sağ böbrek kaldırılması kutup. Cerrahi işlemler diğer yöntemlerine göre daha kolay ve daha az zaman alıcı. Ancak, kalan fonksiyonel renal kitle kolayca renal arter ligasyonu kontrol edilmez. Dört hafta sonra ameliyat, sham çalışan fareler karşılaştırıldığında PNx fareler geliştirilen bozulmuş böbrek fonksiyonu, anemi, kalp hipertrofisi, kardiyak fibrozis ve kalp sistolik ve diyastolik fonksiyonu azalmıştır.
CKD, olarak da bilinen kronik böbrek yetmezliği, böbrek fonksiyon ilerici kaybı sonunda kalıcı böbrek yetmezliği gelişir zaman sona erdi. Son aşama böbrek hastalığı (ESRD), erken aşamada böbrek hastalığı devletlerden CKD kardiyovasküler hastalık ve ölüm için büyük bir risk faktörüdür ve giderek "üremik kardiyomiyopati"1, adlı klinik fenotip geliştirir 2,3. Üremik kardiyomiyopati CKD veya ESRD olan hastalarda kardiyovasküler anormallikler, özellikle aşırı sol ventrikül (LV) basınç ve/veya LV hipertrofisi (SVH), LV dilatasyon ve LV sistolik disfonksiyon4 giden birim, neden ile ilişkilidir ,5,6. Kardiyak fibrozis başka bir ortak patolojik kalp uyum LV diyastolik disfonksiyonu kaynaklanan azaltır üremik kardiyomiyopati sürecidir. Ciddi kardiyak fibrozis ani kardiyak ölüm kardiyak belirtiler7olmayanlar içinde bile yol açabilir.
5/6inci PNx böbrek yetmezliği, üremik kardiyomiyopati ve hipertansiyon hayvan çalışmaları için yaygın olarak kullanılan CKD hayvan modeli olduğunu. PNx 5/6 böbrek parankimi ablasyon tarafından sağlanır. Fare modeli başlangıçta en yaygın iki ile geliştirilmiş iletişim kuralları istihdam cerrahi rezeksiyon veya enfarktüsü olmak. Sıçan PNx modeli ile kan basıncı, kalp hipertrofisi ve Engelli diyastolik fonksiyon önemli yükselmeler üremik kardiyomiyopati çalışmaya son derece yararlı bir modeldir. Daha sonra fare PNx modelleri, benzer teknikleri ile fare modeli olarak işletilen geniş yer ve genetik manipülasyon fare sisteminde yapma kolaylığı nedeniyle geliştirilmiştir.
İyi belgelenmiş sistemik oksidan stres her iki klinik ve deneysel üremik kardiyomiyopati8,9sabit bir özelliktir. Ayrıca, oksidan stres üremik Sendromu10' a katkıda bulunur ve üremik kardiyomiyopati11,12,13' te görülen kalp anormallikleri patogenezinde kritik bir rol oynamaktadır. Şu ana kadar biz bu göstermiştir kemirgen 5/6inci PNx modelinin belirsizleşmesine neden olur fizyolojik, morfolojik ve biyokimyasal özellikleri üremik kardiyomiyopati14,15,16, 17. burada açıklanan fare PNx modelde PNx ile çalışan fareler önemli oksidatif stres, en azından kısmen aracılı Na/K-ATPaz deneysel üremik kardiyomiyopati PNx-aracılı önemlidir fonksiyonlu tarafından geliştirilmiştir. Na/K-ATPaz sinyal zayıflama sadece oksidatif amplifikasyon azaltır, ama aynı zamanda PNx-aracılı deneysel üremik kardiyomiyopati18phenotypical değişimler matlaşmış.
tüm hayvan bakımı ve deneyler Marshall Üniversitesi Kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı Komitesi (IACUC) uygun olarak Ulusal kurumları Sağlık (NIH) Kılavuzu tarafından bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanım için onaylanmıştır. Erkek C57BL/6 fare (10-12 haftalık) bir patojen ücretsiz hayvan tesiste 12 h açık/koyu döngüsü altında saflaştırılmış hava tedarik kafesleri belirlenmiş odalarda yer alan. Yiyecek ve su vardı sağlanan ad libitum.
1. cerrahi hazırlık
Not: Cerrahi aletler ve malzemeler cerrahi operasyonlara özel olmayan farklı kaynaklardan elde edilir. Aletleri ve malzemeler başka kaynaklardan da aynı amaç için kullanılabilir. Tablo malzemeler cerrahi aletler listesi için bkz:.
2. Adım-bir cerrahi: Pole ligasyonu sol böbrek
Not: steril koşullar ameliyat sırasında korumak. Autoclaved cerrahi aletler steril bir yastık ile kapak. Birden fazla araç kümesi, cerrahi el ameliyatı sırasında çapraz kontaminasyonu önlemek birden fazla ameliyat için tutun. Aletleri tekrar kullanılması gerekiyorsa, birden çok ameliyat durumunda betadin çözüm ve % 70 etanol ile aletler dezenfekte ve germinator cam boncuk Sterilizatör 5 dk. dezenfekte % 70 etanol ile çalışma alanı içinde sterilize. Bir elbise giymek, maske (kapak burun ve ağız için), kap (kafa kapsayacak şekilde) ve bir çift steril eldiven. Her ameliyattan sonra değiştirmek eldiven.
3. Adım iki ameliyat: sağ böbrek çıkarılması
4. Sham ameliyat
5. değerlendirme deneysel üremik kardiyomiyopati
Bu değiştirilmiş verileri belirtilen 5/6inci kutup ligasyonu tarafından PNx modelidir üremik kardiyomiyopati araştırmak için basit ve etkili bir model. Dört hafta ameliyat sonrası, bu PNx modeli sunar bozulmuş böbrek fonksiyonu, anemi, kalp hipertrofisi, kardiyak fibrozis ve kalp sistolik ve diyastolik fonksiyonu azalmıştır. Sonuçları aşağıda özetlenmiştir.
Dört hafta ameliyat s...
Sıçan 5/6inci PNx modeli yaygın CKD çalışma için kullanılmıştır. Çok daha küçük böbrek boyutu nedeniyle Mouse, klasik arter ligasyonu ve Kutup rezeksiyon mümkün yüksek mortalite oranları ve beklenmedik kanama/kan kaybı ile fare modellerinde çok zor.
Kutup ligasyonu kanamayı/kan kaybı üstesinden gelmek için bir fare PNx modeliyle evlat edindik. Bu PNx modeli geliştirilmiş sağkalım oranı ve yüksek tekrarlanabilirlik ile daha kısa sürer. Bu kutup ligas...
Yazarlar ifşa gerek yok.
Bu eser NIH R15 1R15DK106666-01A1 (için J. Liu) ve NIH RO1 HL071556 (için J.I. Shapiro) tarafından desteklenmiştir.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Iris Scissors, 11.5 cm, Straight | World Precision Instruments | 501758 | |
WPI Swiss Tweezers #5 11 cm, 0.1x0.06 mm Tips | World Precision Instruments | 504506 | |
Jewelers #5 Forceps, 11cm, Straight, Titanium | World Precision Instruments | 555227F | |
Iris Forceps, 10cm, Straight, Serrated | World Precision Instruments | 15914 | |
Tweezers #3, 11cm, 0.2x0.4mm Tips | World Precision Instruments | 501976 | |
Medesy Iris 4.5" Curved Scissors, Stainless Steel | Net23 | 3512 | www.Net32.com |
Dr. Slick Iris Scissors; 3.5" | Avid Max | 220-1-965-IrisScsrs-P | www.Avid Max.com |
Miltex Iris Scissors 4 1/8" Curved | 4mdmedical | V95-306 | www.4mdmedical.com |
5" Hemostat clap, curved jaw | PJTool | 4355 | www.pjtool.com |
sklar Knapp Iris scissors, straight and sharp/blunt 4" | Medical Device depot | 64-3430 | www.medicaldevicedepot.com |
Kelly Hemostatic Forceps straight 5.5" | Pilgtimmedical | FA710-50 | www.pilgtimmedical.com |
C57BL/6 mice | Hilltop Lab Animals Inc. | ||
Mouse Handling Table and rectal thermometer | Visualsonics | ||
MicroScan transducer | Vevo 1100 | MS400 | |
Vevo 1100 Imaging System | FUJIFILM VisualSonics Inc. | ||
Cystatin C ELISA kit and mouse creatinine kit | Crystal Chem. Inc. | ||
Mouse BUN ELISA kit | MyBioSource Inc |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır