الدقة تنفيذ الحد الأدنى من جرعه حمامي (MED) اختبار لتقييم الاختلاف الفردي في الاستجابة التهابيه البشرية

Summary

يتم استخدام الحد الأدنى من جرعه حمامي (MED) اختبار لوضع جداول الجرعة للاشعه فوق البنفسجية العلاج بالضوء الضوئي. ويمكن تقييم التباين الفردي في الاستجابة التهابيه ولكنه يفتقر إلى منهجيه لتحقيق نتائج قابله للتكرار. هنا ، نقدم الدقة في تنفيذ ميد وإثبات قدرته علي التقاط الاختلافات الفردية في الاستجابة التهابيه.

Abstract

الحد الأدنى من جرعه حمامي (ميد) وكثيرا ما يستخدم في الإعدادات السريرية لتحديد أصغر كميه من الاشعه فوق البنفسجية (UV) الإشعاع اللازمة لإنتاج حمامي (احمرار التهابي) علي سطح الجلد. وفي هذا السياق ، يعتبر المتوسط عاملا رئيسيا في تحديد جرعات البدء للعلاج بالاشعه فوق البنفسجية لحالات الجلد الشائعة مثل الصدفية والاكزيما. في إعدادات البحث, اختبار ميد أيضا لديه القدرة علي ان تكون أداه قويه لتقييم داخل-وبين الأشخاص الاختلاف في الاستجابات التهابيه. ومع ذلك ، لم يتم اعتماد اختبار MED علي نطاق واسع للاستخدام في إعدادات البحث ، وذلك علي الأرجح بسبب الافتقار إلى المبادئ التوجيهية المنشورة ، والتي تشكل عائقا امام الحصول علي نتائج قابله للتكرار من هذا الفحص. كما ان البروتوكولات والمعدات الخاصة بإنشاء المتوسط تتفاوت بشكل واسع ، مما يجعل من الصعب مقارنه النتائج عبر المختبرات. هنا ، ونحن وصف طريقه دقيقه وقابله للتكرار للحث وقياس حمامي سطحيه باستخدام البروتوكولات المصممة حديثا والأساليب التي يمكن تكييفها بسهوله لغيرها من المعدات والبيئات المختبرية. وتتضمن الطريقة الموصوفة هنا تفاصيل عن الإجراءات التي من شانها ان تسمح باستقراء جدول الجرعات الموحد للمعدات الأخرى بحيث يمكن تكييف هذا البروتوكول مع اي مصدر للاشعه فوق البنفسجية.

Introduction

الحد الأدنى من جرعه حمامي (MED) اختبار هو اجراء وافقت عليها FDA لتقييم الحساسية الجلدية للإشعاع عاده في نطاق UVB ، علي الرغم من ان ميد يمكن تحديدها في أطوال موجية أخرى في الاشعه فوق البنفسجية والطيف المرئي¹. يتم تعريف حمامي كما احمرار سطحيه علي سطح الجلد الناجم عن انجرغمنت من الشعيرات الدموية (المراحل اللاحقة من حمامي هي أكثر شيوعا المعروفة باسم حروق الشمس). وقد استخدمت اختبار ميد علي نطاق واسع في الأدب الجلدية وإعدادات العلاج الضوئي السريرية لتحديد كميه الحد الأدنى من الاشعه فوق البنفسجية (UV) التي من شانها ان تنتج أصغر وحده من التغيير القابل للقياس في احمرار الجلد. ويمكن إنجاز اختبار ميد مع مصباح الاشعه فوق البنفسجية المتاحة تجاريا ، وهو ما يعادل ما يستخدم في معظم مرافق الدباغة التجارية.

اختبار ميد ينطوي علي تشتت مستمر من الاشعه فوق البنفسجية أو الضوء من الطيف مرئية علي سطح الجلد لمده محدده سلفا من الزمن ، مع جداول الجرعة اعتمادا في المقام الأول علي تصبغ الجلد وكثافة ونوع من الإشعاع . ويشيع استخدام هذا الاجراء في الإعدادات السريرية لتحديد جداول الجرعة للمرضي الذين يتلقون العلاج بالاشعه فوق البنفسجية لحالات الجلد مثل الصدفية والاكزيما^2,3. وقد وصفت الإجراءات الاساسيه لتحديد ميد في الإعدادات السريرية في مكان آخر⁴، ويمكن استخدامها لضبط الجرعة الاجماليه من الاشعه فوق البنفسجية إلى الأعلى أو الأسفل ، اعتمادا علي الاختلاف الفردية في حساسية الجلد.

ولعل تصبغ الجلد هو أهم متغير محدد الموضوع في اجراء وقياس النتائج من الاجراء ميد⁶. وذلك لان مده التعرض للاشعه فوق البنفسجية المطلوبة لاستحضار استجابه حمامي الحد الأدنى يتحدد أساسا من قبل خفه أو الظلام من جلد المشارك ، كما هو محدد من قبل المشارك فيفتباتريك نوع الجلد (FST). FST⁷ هو مخطط عددي لتصنيف لون البشرة البشرية. مقياس فيتزباتريك هو أداه معترف بها للبحوث الجلدية في تصبغ الجلد البشري^8,9, ويصنف الجلد البشري في واحده من ست فئات من الأخف وزنا (fst ط) إلى أحلك (fst السادس).

قتامة FST الأنماط تتطلب فتره أطول UV ، التالي تصنيف دقيق لل FST مهم. وهناك مؤلفات مستفيضة عن أساليب لتقييم دقيق لل FST ، وذلك باستخدام مجموعه واسعه من النهج بما في ذلك التقرير الذاتي ، ومقابله طبيب الامراض الجلدية والتقييم القائم علي الاجهزه. وقد ثبت تصنيفات المراقبين من FST ان تكون مرتبطة مع الحالي ، ولكن ليس لون البشرة الطبيعية¹⁰، ولكن يمكن تحديد fst بشكل ذاتي¹¹ باستخدام التقرير الذاتي عبر الاستبيان¹² و/أو تقييم موضوعي عن طريق طيفي. وقد ثبت فيتزباتريك الكتابة عن طريق القياس الطيفي لربط وثيق إلى التقرير الذاتي للمشاركين في عدد من الدراسات^{10،13،14،15}.

علي الرغم من فائده واستخدام واسع النطاق للاختبار ميد في الخدمات السريرية ، لم يتم اعتماد هذا الاجراء علي نطاق واسع في الإعدادات المختبرية لقياس الاختلاف الفردية استجابه لتحفيز الموالية للالتهابات. الغرض من المنهجية المبينة هنا هو توفير التقنيات والإجراءات خطوه بخطوه التي تزيد من دقه واستنساخ اجراء الاختبار ميد ، من أجل تسهيل العمل في المستقبل في الإعدادات المختبرية التي تركز علي غرامه الحبيبات القياس الكمي للتغير داخل الفرد في الاستجابة التهابيه. كما نقدم نتائج تمثيليه توضح قدره هذا البروتوكول الموحد علي التقاط الدقيق للاختلاف بين الشخص والشخص في التهاب.

Protocol

وقد استعرض مجلس المراجعة المؤسسية المحلي جميع الأساليب الموصوفة أدناه بما في ذلك استخدام المتطوعين البشريين ووافق عليها ، وهي تتفق مع إعلان هلسنكي وتقرير بلمونت. ووقع جميع المشاركين (العدد = 72) الموافقة المستنيرة التي يحظرها بروتوكول الهجرة. وقد صممت معايير الادراج/الاستبعاد وإجراءات الوقف لتعظيم سلامه المشاركين ، وينبغي النظر في اي انحراف عن هذه الإجراءات في ضوء تاثيرها علي المخاطر والتحمل علي الأشخاص البشرية. وفي سياق العمل المعروض هنا ، اقتصرت معايير الاستبعاد علي مشاركه الافراد الذين لا يملكون تاريخا شخصيا أو عائليا للظروف التهابيه ، أو اي مواد مشروعه أو غير مشروعه. والمبرر للقيام بذلك هو ان هذه العوامل قد تؤثر علي الاستجابات لاجراء اختبار ميد.

1. اختيار المشاركين

1. استخدم معايير التضمين التالية: 18-55 سنوات من العمر; في الصحة العامة الجيدة كما تحددها قائمه الاعراض الطبية (MSCL)⁵; يمكن فهم والتواصل حول بروتوكول سلامه المختبر المقدمة باللغة الانجليزيه; يمكن ان توفر موافقه خطيه.
2. استخدم معايير الاستبعاد التالية: نوع الجلد فيتزباتريك الأول ، كما يحددها التقرير الذاتي ؛ يستخدم معدات الدباغة التجارية بانتظام ؛ الجروح أو آلافات الجلدية في الموقع المخطط للتعرض ؛ سرطان الجلد الحالي ، أو التاريخ الشخصي لسرطان الجلد. تاريخ الاسره من سرطان الجلد. سكري الصدفية أو غيرها من حاله التهاب الجلد ؛ امراض الاوعيه الدموية الطرفية ، ومرض الشرايين المحيطي ، ومرض رينو ، أو اي اضطرابات الجهاز الهضمي تشخيص أخرى ؛ اي اضطرابات حركيه غير اراديه ؛ حساسية لشريط لاصق. ياخذ المنشطات استنشاق لمرض الربو (علي سبيل المثال ، فلوتياسوني) ؛ ياخذ اي الكورتيكوستيرويدات. 2 أو أكثر من ما يلي (تشخيص ارتفاع ضغط الدم ، الدهون ، ارتفاع الكولسترول ، دخان السجائر ، التاريخ العائلي من مرض الشريان التاجي أو تصلب الشرايين (الاباء/الاشقاء قبل سن 55)) ؛ التبعية الفعلية للمادة-قانونيه أو غير مشروعه ؛ الأشخاص الذين لديهم ماده الاعتماد جديده علي الانتعاش (اقل من سنه واحده) ؛ استخدام الادويه التي تؤثر علي وظيفة CNS, بما في ذلك الذهان, الادويه الافيونيه أو الكورتيكوستيرويدات, خلال الأشهر الثلاثة الماضية; اي الادويه العقلية الموصوفة ، حاليا أو خلال الأشهر الثلاثة الاخيره (وتشمل هذه الادويه للقلق ، والاكتئاب ، أو غيرها من المشاكل النفسانية).

2. الجدولة والاعداد لل MED

1. جدوله المشاركين لموعدين: الأول ، حدث التعرض ميد (حوالي 45 دقيقه) ، والثانية ، متابعه لجمع قراءات القياس الطيفي (حوالي 10 دقيقه). جدوله موعد المتابعة لمده 24 ساعة بعد الموعد الأول.
2. قبل وصول المشاركين ، وضع واعداد المعدات الاساسيه بما في ذلك اثنين من الأصفاد اختبار الجرعة ومعدات السلامة. الاشعاع.
3. معايره مقياس الطيف وفقا لمواصفات الشركة المصنعة. القيام بذلك لكل موضوع وكل جلسة.

3. تحديد نوع الجلد فيتزباتريك (FST)

1. عندما يصل المشارك للحدث التعرض ميد (زيارة 1) ، وتحديد FST اما من خلال التقرير الذاتي أو القياس الطيفي. لتحقيق اقصي قدر من سلامه المشاركين ، لا تقم باجراء اختبار MED علي المشاركين المصنفين علي انهم FST 1. لجميع أنواع البشرة الأخرى فيتزباتريك (2-6) ، استخدم نقاط FST لتحديد جدول التعرض الذي يجب استخدامه.

4. الكفة 1 التطبيق

1. اشرح للمشارك كيف يعمل اختبار ميد ويلتمس الاسئله قبل المتابعة.
2. عموما ، تنفيذ اجراء ميد علي الداخل من الساعد غير المهيمنة.
3. وضع الكفة 1 (مع جميع أغطيه الفتحة أزاله) تجنب النمش ، والشامات ، والندوب ، والشعر (إلى اقصي حد ممكن) ، وأي جروح ، كدمات أو آفات علي الجلد. قم بازاله الشمع الواقي فقط من الجزء الجانبي (وليس المركزي) من الكفة 1. من المهم ان الشمع ورقه الدعم من الجزء الأوسط من الكفة 1 لا يمكن ازالتها ، كما لاصقه لديه إمكانات قويه لتهيج الجلد عندما مقشر قباله بعد قراءات الأساس ، مما تسبب احمرار الجلد القريب إلى الفتحات.
4. بعد وضع الكفة 1 في موقع التعرض المقصود ، ضع المعالم باستخدام علامة دائمة لضمان ان الكفة 2 ستكون موجودة في نفس الموقع بالبالضبط. وضع علامة علي الجلد في أربع نقاط خارج التجاعيد من كل من اللوحات الجانبية من الكفة 1 ، الجزء العلوي الأيمن ، العلوي الأيسر ، اليمين السفلي والنقاط السفلية اليسرى.
   1. جعل هذه العلامات الظلام بما فيه الكفاية للبقاء علي قيد الحياة حوالي 24 ساعة ، كما انها سوف تستخدم أيضا لوضع الكفة 3 في نفس الموقع بالبالضبط في موعد المتابعة 24 ساعة في وقت لاحق.

5. خط الأساس القراءة: الكفة 1 التطبيق

1. باستخدام مقياس الطيف الطيفي الذي تم معايره وفقا لمواصفات الشركة المصنعة ، والحصول علي وتسجيل القراءات بشكل دائم في كل من فتحات سته مفتوحة في تسلسل.
2. تاكد من وضع مقياس الطيف الطيفي وسط الفتحات الكفة مع تجنب الشامات أو الندوب أو غيرها من العيوب إلى اقصي حد ممكن.
3. تسجيل جميع قيم "SCI" بشكل دائم (L ، A ، B). لضمان قراءات متسقة مع نفس نقطه المعايرة ، والحفاظ علي مقياس الطيف في علي لمده الاجراء ميد وعدم إيقاف حتى يتم إكمال قراءات ما بعد التعرض.
4. بعد ان تم تسجيل قياسات مقياس الطيف القاعدي ، قم بازاله الكفة 1. للتقليل من إزعاج المشاركين ، ضع المذيبات اللاصقة الطبية علي محيط الكفة 1 حيث انها مقشره ، والتي ستمنع الازاله المؤلمة للشعر علي الذراع.

6. ما قبل التعرض القراءة: الكفة 2 التطبيق

1. بعد أزاله الكفة 1 ، وضع الكفة 2 في نفس الموقع باستخدام المعالم المرسومة علي الجلد لصفعه 1. قد يتم كشف العبوه اللاصقة الكاملة وتطبيقها لضمان ان الكفة 2 مختومه بما يكفي لمنع التعرض المتقاطع بين الفتحات بسبب عدم التصاق الجلد بشكل كاف.
2. لديك كل من المشارك والباحث دون الاشعه فوق البنفسجية واقيه من الملابس والإكسسوارات السلامة. علي الأقل ، يجب علي المشارك ، الفني الذي يدير الاجراء وأي أطراف أخرى في الغرفة ارتداء نظارات واقيه من الاشعه فوق البنفسجية. يجب علي الفنيين ارتداء أكمام طويلة أو استخدام الاشعه فوق البنفسجية واقيه من الأكمام.
3. قبل تفعيل المصباح ، علي الفني مساعده المشارك في تغطيه جميع الجلد المكشوف ، بما في ذلك الذراع فوق الرقعة ، والذراع والمعصم تحت الرقعة ، واليد ، وأجزاء من الجزء الامامي أو الخلفي من الذراع التي قد تتعرض علي جانبي الرقعة (UV- أوراق واقيه والشريط للقب أوراق قد تكون مفيده لهذا). بالاضافه إلى ذلك ، قد يرغب بعض المشاركين في ارتداء القمصان ذات خطوط الرقبة المفتوحة في ثني القماش الواقي من الاشعه فوق البنفسجية علي رقبتهم وصدرهم إذا كانت هذه المناطق قريبه من مصدر الاشعه فوق البنفسجية.
4. نشر قطعه قماش واقيه من الاشعه فوق البنفسجية تحت ذراع المشارك (للحد من انعكاس سطح الطاولة).

7. ميد الاجراء: قبل التعرض

ملاحظه: يجب ان تكون الاشعه من المصباح متعامدة مع موقع التعرض. بشكل عام ، الحركة البدنية للمصابيح اقل ممكنة من الحركة أو ترتيب زاوية ذراع المشاركين.

1. قبل تفعيل المصباح ، رتب ذراع المشارك بحيث تكون الاشعه فوق البنفسجية من المصباح متعامدة مع زاوية الكفة 2 علي ذراع المشارك.
2. تحديد المسافة المناسبة بين المصباح والكفة 2 علي ذراع المشارك. ضع مستشعر المقياس الإشعاعي الذي يواجه مصباح الاشعه فوق البنفسجية بالتوازي مع سطح الجلد وأقرب ما يمكن إلى موقع الكفة 2.
3. غط ذراع المشاركين بقطعه قماش مضاده للاشعه فوق البنفسجية لمنع التعرض ، وشغل المصباح لفتره وجيزة لضبط المسافة إلى الكفة 2 حتى يقرا مستشعر المقياس الإشعاعي 270 μW/cm².
   1. لتحقيق هذه القراءة ، وضبط المسافة بين المصباح وسطح الجلد حتى يقرا مقياس الإشعاع 270 μW/سم² (± 10 μw). مره واحده وقد تم تحديد المسافة المناسبة ، وإلغاء تنشيط المصباح.
      ملاحظه: من المهم ان نلاحظ هنا ان الاختلافات الصغيرة في زاوية مقياس الإشعاع سوف تؤثر بشكل كبير علي القراءة. التالي ، يجب ان تكون زاوية المقياس الإشعاعي قريبه من التوازي مع سطح الجلد قدر الإمكان.
4. اجراء المزيد من التعديلات في المسافة طوال جلسة التعرض لمنع الانجراف في موقع الذراع. في كل قراءه ، تاكد من المسافة وأعاده ضبط حسب الضرورة للحفاظ علي قراءات مقياس الإشعاع في حوالي 270 μW/سم² (± 10 μw).

8. ميد الاجراء: التعرض

1. استخدم ساعة توقيت لتنفيذ جدول MED. أزاله الفتحة الاولي التي تغطي قبل تفعيل مصدر الاشعه فوق البنفسجية. تفعيل المصدر وساعة التوقيت في وقت واحد وأزاله كل فتحه تغطي علي الكفة 2 وفقا للجدول الزمني المحدد أدناه ، استنادا إلى FST.
2. عند نقطه الازاله لكل غطاء فتحه ، سجل مقياس الإشعاع قراءه عندما يتم عقد مقياس الإشعاع موازيه لسطح الجلد وأشار في المصباح. إذا تغيرت المسافة ، اضبط المسافة إلى المصباح للتاكد من ان مقياس الإشعاع يقرا مره أخرى 270 (± 10) μW/cm².
3. يجب علي الفني مراقبه ذراع المشارك لضمان ثبات الموضع. علي وجه الخصوص ، أعاده ضبط الذراع إذا كان الذراع يدور ، كما سيقوم العديد من المشاركين بتدوير الذراع عند الاسترخاء. لاحقا لأي تعديلات ، أعاده تاكيد ان مقياس الإشعاع يقرا 270 μW/سم² (± 10 μw).
4. إيقاف تشغيل المصباح في الوقت المحدد من قبل جدول الجرعة في الجدول 1. لا تقم بإلغاء تنشيط ساعة الإيقاف ، حيث يجب جمع سلسله اضافيه من قراءات مقياس الطيف الطيفي بالبالضبط بعد 7 دقائق من تعطيل المصباح ، كما هو موضح أدناه.

9.7 دقيقه بعد التعرض القراءة

1. بالبالضبط 7 دقائق بعد تعطيل المصباح ، سجل قراءات الطيف النهائي من كل فتحه في الكفة 2. والغرض من جمع البيانات فورا بعد اجراء التعرض هو التاكد أولا من عدم وجود رد فعل سلبي علي الاشعه فوق البنفسجية ، وثانيا تقييم الاستجابات الاوليه ، التي يمكن ان تكون طفيفه في بعض الحالات ، ولكنها تختلف اختلافا ملموسا عن خط الأساس ( قيم ما قبل التعرض. اي زيادة في احمرار بعد 7 دقائق من المرجح ان يكون لها تاثير الحرارية وليس حمامي.
   ملاحظه: رد فعل سلبي للتعرض للاشعه فوق البنفسجية بعد 7 دقائق من المحتمل ان يرتبط بالجرعة الشرويه الدنيا من الشري الشمسي ، وهو اضطراب الحساسية المكتسبة. يتم تقييم اضطرابات الحساسية الضوئية قبل اجراء الطب الطبي المتوسط وينبغي استبعاد المواضيع التي لها هذه الاضطرابات. ومع ذلك ، إذا لوحظ ذلك في اي وقت اثناء اختبار بروتوكول التعرض يجب ان يوقف علي الفور.
2. بعد التعرض للاشعه فوق البنفسجية ، الكفة 2 يمكن ان يكون من الصعب بشكل خاص لأزاله. استخدام الطبية الصف المذيبات لاصقه ، إذا لزم الأمر ، للحد من عدم الراحة للمشاركين اثناء أزاله الكفة 2. قد يجد المشاركون المصابون بالحساسية الشديدة أو غيرها من البشرة الحساسة انه من المفيد تطبيق اما زيت الزيتون أو مزيل اللاصق القائم علي الكحول تحت حافه الكفة 2 ، حيث انهم يزيلون الرقعة ببطء. بعد أزاله الكفة 2 قد يكون المشاركين لاصقه المتبقية علي بشرتهم ، والتي يمكن أيضا ازالتها مع زيت الزيتون أو المذيبات الطبية لاصقه.
3. قبل المغادرة من جلسة التعرض ، اذكر المشاركين بعدم غسل المعالم وعدم تطبيق اي مستحضرات علي موقع التعرض.

10. متابعه التعيين: الكفة 3 التطبيق

1. قبل وصول المشارك ، معايره مقياس الطيف وفقا لمواصفات الشركة المصنعة.
2. اعداد الكفة 3 عن طريق أزاله كل من أغطيه الفتحة (تاركا ورقه الشمع الأبيض دعم علي الجزء الأوسط من التصحيح). عند وضع الكفة 3 علي ذراع المشارك ، قم بازاله ورق الشمع الأبيض المدعوم من اللوحتين الجانبيتين للتصحيح. باستخدام المعالم الموجودة علي ساعد المشارك ، ضع الكفة 3 في نفس الموقع مثل الرقعين السابقتين.
3. خذ القراءة في كل من الفتحات الستة المفتوحة في تسلسل. بالاضافه إلى ذلك ، فحص بصريا كل فتحه وتسجيل ما إذا كان هناك يبدو ان هناك أدله بصريه لاستجابه حمامي في كل من الفتحات الست (الأحمر أو الوردي الجلد يشير إلى حمامي). بعد تسجيل قراءات الطيف الطيفي بشكل دائم ، وأزاله الكفة 3 ، وذلك باستخدام المذيبات إذا لزم الأمر.
4. لزيادة تعزيز الراحة والسلامة للمشاركين ، وتوفير 4-6 واحد--استخدام هلام الحرق أو الالوه فيرا ، وتشير إلى المشارك انه إذا كان موقع التعرض للحكة أو غير مريحه ، فانه يمكن ان يعامل مثل حروق الشمس مع هذه أو ما شابه ذلك علي منتجات مضاده.

النتائج

جدول التوقيت المعروض في الجدول 1 هو جدول الجرعة الجديدة التي تم حسابها للقبض علي ميد ، في المتوسط ، عند نقطه منتصف الحدث التعرض (اي الفتحة 3 أو 4) لكل fst. والأساس الذي يستند اليه الجدول الزمني المحسوب هو كما يلي.

وقد ثبت العمل السابق انه بالنسبة للافراد مع FST 2 ، متوسط مي?...

Discussion

التنفيذ الدقيق للاختبار ميد كما هو موضح هنا يمكن ان توفر العديد من المزايا علي التحديات الأخرى القائمة علي المختبر القائم علي التهابات التي حققت الاستخدام الشعبي. علي سبيل المثال ، شفط البروتوكولات نفطه^17،18،19 رفع نفطه مملوءة بالسوائل عل?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
6-aperture dose testing patch (“Cuff”)	Daavlin
Medical grade adhesive solvent
Non-reflective UV proof cloth
Radiometer	SolarLight	Model 6.2 UVB Meter
Single use aloe or burn gel
Spectrophotometer	Konika-Minolta	CM-2600D
Stopwatch
UV lamp – Fiji Sun	Sperti		Emission spectrum 280 nm-400 nm, approximately 25% UVB
UV-proof safety glasses (2 pair)
UV-proof sleeve
White cotton gloves (2 pair)