Точность внедрения минимальной дозы эритема (MED) Тестирование для оценки индивидуальных вариаций в воспалительных реакции человека

Резюме

Минимальная доза эритемы (MED) тестирование используется для установления дозировки графиков для ультрафиолетовой лучевой фототерапии. Он может оценить индивидуальные изменения в воспалительных ответ, но не хватает методологии для достижения воспроизводимых результатов. Здесь мы представляем точность реализации MED и продемонстрировать свою способность фиксировать индивидуальные изменения в воспалительных ответ.

Аннотация

Минимальная доза эритемы (MED) тестирование часто используется в клинических условиях для определения наименьшего количества ультрафиолетового (УФ) облучения, необходимого для производства эритемы (воспалительное покраснение) на поверхности кожи. В этом контексте, MED рассматривается в качестве ключевого фактора при определении начальных доз для УФ-фототерапии для общих заболеваний кожи, таких как псориаз и экзема. В исследовательских условиях, MED тестирования также имеет потенциал, чтобы быть мощным инструментом для оценки внутри-и между людьми изменения воспалительных реакций. Тем не менее, med тестирование не было широко принято для использования в научно-исследовательских условиях, вероятно, из-за отсутствия опубликованных руководящих принципов, что является препятствием для получения воспроизводимых результатов от этого анализа. Кроме того, протоколы и оборудование для создания MED сильно различаются, что затрудняет сравнение результатов между лабораториями. Здесь мы описываем точный и воспроизводимый метод индуцирования и измерения поверхностной эритемы с помощью недавно разработанных протоколов и методов, которые могут быть легко адаптированы к другим оборудованием и лабораторным средам. Описанный здесь метод содержит подробную информацию о процедурах, которые позволят экстраполяции стандартизированного расписания дозировки на другое оборудование, чтобы этот протокол мог быть адаптирован к любому источнику УФ-излучения.

Введение

Минимальная доза эритемы (MED) тестирование FDA утвержденных процедура для оценки кожной чувствительности к радиации, как правило, в диапазоне UVB, хотя MED может быть определена на других длинах волн в УФ и видимого спектра¹. Эритема определяется как поверхностное покраснение на поверхности кожи, вызванное engorgement капилляров (более поздние стадии эритемы более широко известны как солнечные ожоги). Med тестирование широко используется в дерматологии литературы и клинической фототерапии настройки для выявления минимального количества ультрафиолетового (УФ) излучения, которое будет производить наименьшую единицу измеримых изменений в покраснение кожи. Тестирование MED может быть выполнено с помощью коммерчески доступной ультрафиолетовой лампы, эквивалентной тому, что используется в большинстве коммерческих загарных сооружений.

Med тестирование включает в себя непрерывное рассеивание УФ-излучения или света от видимого спектра на поверхность кожи в течение предопределенного периода времени, с дозировкой графики в зависимости в первую очередь от пигментации кожи и интенсивности и типа излучения . Эта процедура обычно используется в клинических условиях, чтобы определить графики дозировки для пациентов, получающих УФ лучевой терапии для кожных заболеваний, таких как псориаз и экзема^2,3. Основные процедуры для определения MED в клинических условиях были описаны в другом месте^4,и могут быть использованы для корректировки общей дозы УФ-излучения вверх или вниз, в зависимости от индивидуальных изменений в чувствительности кожи.

Пигментация кожи является, пожалуй, наиболее важной предметной переменной при проведении и измерении результатов процедуры MED^6. Это потому, что продолжительность УФ-облучения, необходимых для вызывая минимальный ответ эритема главным образом определяется легкость или темнота кожи участника, как это определено Типом кожи Фицпатрик участника (FST). FST⁷ — это численная схема классификации цвета кожи человека. Шкала Фицпатрик является признанным инструментом для дерматологических исследований пигментации кожи человека^8,9,и классифицирует кожу человека в одну из шести категорий от самых светлых (FST I) до самых темных (FST VI).

Более темные типологии FST требуют большей продолжительности УФ-излучения, поэтому важна точная классификация FST. Существует обширная литература о методах точной оценки ФСТ, используя широкий спектр подходов, включая самоотчет, интервью дерматолога и оценку на основе приборов. Наблюдатель рейтинги FST было показано, что коррелирует с текущим, но не естественный цвет кожи¹⁰, однако FST может быть определена субъективно¹¹ с помощью самостоятельного отчета через вопросник¹² и / или объективную оценку через Спектрофотометрии. Было показано, что Фицпатрик печатает спектрофотометрию, тесно соотнося с самим участником в ряде исследований^10,13,14,15.

Несмотря на полезность и широкое использование медашных испытаний в клинических службах, эта процедура не была широко принята в лабораторных условиях для измерения индивидуальных вариаций в ответ на провоспалительную стимуляцию. Цель методологии, изложенной здесь, заключается в предоставлении методов и поэтапных процедур, которые повышают точность и воспроизводимость процедуры тестирования MED, с тем чтобы облегчить будущую работу в лабораторных условиях, ориентированных на мелкозернистой количественное оценка внутрииндивидуальной изменчивости воспалительной реакции. Мы также предоставляем репрезентативные результаты, которые иллюстрируют способность этого стандартизированного протокола точно фиксировать изменения от человека к человеку воспаления.

протокол

Все методы, описанные ниже, включая использование добровольцев-людей, были рассмотрены и утверждены местным Институциональным наблюдательным советом (IRB) и соответствуют Хельсинкской и Белмонтской декларации. Все участники (НЗ72) подписали информированное согласие, запрещенное протоколом IRB. Критерии включения/исключения и процедуры прекращения были разработаны для обеспечения максимальной безопасности участников, и любое отклонение от этих процедур следует рассматривать с учетом их воздействия на риск и переносимость по отношению к субъектам. В контексте представленной здесь работы критерии исключения ограничивают участие лиц, не имеющих личной или семейной истории воспалительных состояний, или любых законных или незаконных веществ. Обоснованием этого является то, что эти факторы могут влиять на реакцию на процедуру тестирования MED.

1. Отбор участников

1. Используйте следующие критерии включения: 18-55 лет; в хорошем общем состоянии здоровья, как это определено медицинским итоговым контрольным списком (MSCL)⁵; может понимать и общаться о протоколе безопасности лаборатории, представленном на английском языке; может предоставить письменное согласие.
2. Используйте следующие критерии исключения: Тип кожи Фицпатрика I, определяемый самоотчетом; регулярно использует коммерческое оборудование для загара; раны кожи или поражения в запланированном месте воздействия; текущий рак кожи, или личная история рака кожи; семейная история рака кожи; диабет; псориаз или другие воспалительные заболевания кожи; периферических сосудистых заболеваний, периферических артериальных заболеваний, болезни Рейно, или любые другие диагностированные нарушения кровообращения; любые непроизвольные двигательные расстройства; аллергия на клеевую ленту; принимает ингаляционные стероиды для лечения астмы (например, флутикасон); принимает любые кортикостероиды; 2 или более из следующих (диагностированная гипертония, гиперлипидемия, высокий уровень холестерина, сигареты для курения, семейная история коронарных или атеросклеротических заболеваний (родители/братья и сестры до 55 лет)) ; активная зависимость от веществ - законная или незаконная; люди с зависимостью от вещества, новые для восстановления (менее одного года); использование лекарств, влияющих на функцию ЦНС, включая психотропные препараты, опиатные препараты или кортикостероиды, в течение последних 3 месяцев; любые предписанные психотропные препараты, в настоящее время или в течение последних 3 месяцев (они включают лекарства для беспокойства, депрессии, или других психологических проблем).

2. Планирование и подготовка к MED

1. Расписание участников для двух встреч: первый, MED воздействия событие (приблизительно 45 мин), а второй, последующей для сбора спектрофотометрических показаний (примерно 10 мин). Расписание последующего назначения на 24 ч после первого назначения.
2. Перед прибытием участников выложить и настроить необходимое оборудование, включая две дозы тестирования манжеты и безопасности оборудования. Ищите разнообразную УФ-защитную одежду (например, УФ-защитные спортивные рукава, УФ-защитные перчатки, медицинские скрабы с длинным рукавом, УФ-защитные листы и ленту, чтобы прикрепить листы) как для участника, так и для исследователя, чтобы покрыть всю кожу, подвергшуюся воздействию УФ-излучения Излучения.
3. Калибровать спектрофотометр в соответствии со спецификациями производителя. Сделайте это для каждого предмета и каждого сеанса.

3. Определение типа кожи Фицпатрик (FST)

1. Когда участник прибывает на мероприятие med экспозиции (Visit 1), определить FST либо через самоотчет или спектрофотометрии. Чтобы максимизировать безопасность участников, не проводите тестирование MED на участниках, классифицированных как FST 1. Для всех других типов кожи Fitzpatrick (2–6) используйте оценку FST, чтобы определить, какой график экспозиции следует использовать.

4. Манжета 1 Применение

1. Объясните участнику, как работает тестирование MED, и запросите вопросы перед началом работы.
2. Как правило, выполнять процедуру MED на внутренней стороне не доминирующего предплечья.
3. Место манжеты 1 (со всеми отверстиями удалены) избегая веснушек, родинок, шрамов, волос (по мере возможности), и любые порезы, синяки или поражения на коже. Удалите только защитную вощеную бумагу поддержку из боковой (не центральной) части манжеты 1. Важно, чтобы вощеная бумага поддержку от центральной части манжеты 1 не будут удалены, как клей имеет большой потенциал, чтобы раздражать кожу, когда слезли после базовых показаний, вызывая покраснение кожи проксимальной диафрагмы.
4. После размещения манжеты 1 на предполагаемом месте экспозиции, место ориентиры с помощью постоянного маркера, чтобы убедиться, что манжета 2 будет расположен точно в том же месте. Отметьте кожу в четырех точках за пределами складок каждого из боковых лоскутов манжеты 1, верхнего правого, верхнего левого, нижнего правого и нижнего левых точек.
   1. Сделать эти знаки достаточно темными, чтобы выжить примерно 24 ч, так как они также будут использоваться для размещения манжеты 3 в точно том же месте на последующей назначения 24 ч позже.

5. Базовое чтение: Манжета 1 Приложение

1. Используя спектрофотометр, который был откалиброван в соответствии со спецификациями производителя, получить и постоянно записывать показания на каждом из шести открытых диафрагм в последовательности.
2. Убедитесь, что спектрофотометр находится в центре отверстия манжеты, избегая при этом родинок, шрамов или других пятен в максимально возможной степени.
3. Постоянно записывать все значения "SCI" (L, A, B). Чтобы обеспечить согласованность показаний с той же точкой калибровки, держите спектрофотометр в ON в течение всей процедуры MED и не выключайте до тех пор, пока показания после экспозиции не будут завершены.
4. После того, как базовые измерения спектрофотометрии были зарегистрированы, удалите манжету 1. Чтобы свести к минимуму дискомфорт участника, нанесите медицинский клей растворитель по периметру манжеты 1, так как он отслаивается, что предотвратит болезненное удаление волос на руке.

6. Предварительное чтение экспозиции: Манжета 2 Приложение

1. После удаления манжеты 1, посидите манжеты 2 в том же месте, используя ориентиры, нарисованные на коже для манжеты 1. Полная клейкая поддержка может быть выставлена и применена для обеспечения того, чтобы манжета 2 была достаточно запечатана, чтобы предотвратить перекрестное воздействие среди диафрагм из-за недостаточной адгезии на коже.
2. Ите как участник, так и исследователь Дон УФ-защитной одежды и аксессуаров безопасности. Как минимум, участник, техник, управляющий процедурой, и любые другие стороны в комнате должны надеть УФ-защитные очки. Техники должны носить длинные рукава или использовать УФ-защитный рукав.
3. Перед активацией лампы, есть техник помочь участнику в покрытии всех открытых кожи, в том числе руку над патч, руки и запястья ниже патч, рука, и части передней или задней части руки, которые могут быть выставлены по бокам патча (УФ- защитные листы и ленты, чтобы прикрепить листы могут быть полезны для этого). Кроме того, некоторые участники носить рубашки с открытыми декольте, возможно, захотите драпировать УФ-защитной ткани на шее и груди, если эти области будут близки к уф-источнику.
4. Распространение УФ-защитной ткани под руку участника (чтобы уменьшить отражательность от поверхности стола).

7. Процедура MED: Предварительная экспозиция

ПРИМЕЧАНИЕ: Лучи от лампы должны быть перпендикулярны месту экспозиции. В общем, физическое движение лампы менее возможно, чем движение или расположение угла руки участников.

1. Перед активацией лампы, организовать руку участника так, что ультрафиолетовые лучи от лампы будет перпендикулярно угол манжеты 2 на руке участника.
2. Определите правильное расстояние между лампой и манжетой 2 на руке участника. Поместите датчик радиометра, обращенный к ультрафиолетовой лампе параллельно поверхности кожи и как можно ближе к расположению Манффа 2.
3. Обложка руку участников с УФ-доказательство ткани для предотвращения воздействия, и кратко активировать лампу, чтобы настроить расстояние до манжеты 2 до датчика радиометра читает 270 ЗВт /см².
   1. Для достижения этого показателя отрегулируйте расстояние между лампой и поверхностью кожи до тех пор, пока радиометр не считывает 270 ЗВт/см² (10 КВт). После того, как соответствующее расстояние было определено, обесточат лампу.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Здесь важно отметить, что небольшие различия в углу радиометра сильно повлияют на показания. Таким образом, угол радиометра должен быть как можно ближе к поверхности кожи.
4. Внести дополнительные коррективы в расстоянии на протяжении всего сеанса экспозиции, чтобы предотвратить дрейф в расположении руки. При каждом прочтении подтверждайте расстояние и перечитывайте по мере необходимости для поддержания показаний радиометра на уровне примерно 270 ЗВт/см² (10 КВт).

8. Процедура MED: Воздействие

1. Используйте стоп-час для выполнения графика MED. Удалите первое покрытие диафрагмы перед активацией УФ-источника. Активируйте источник и стоп-часы одновременно и удалите каждое покрытие диафрагмы на Cuff 2 в соответствии с графиком, указанным ниже, на основе FST.
2. В момент удаления для каждого покрытия диафрагмы, запись показания радиометра, когда радиометр проводится параллельно поверхности кожи и указал на лампу. Если расстояние изменилось, отрегулируйте расстояние до лампы, чтобы радиометр еще раз считывал 270 (10) ЗВ/см².
3. Поимеет специалиста следить за рукой участника, чтобы обеспечить последовательное позиционирование. В частности, отрежьте руку, если рука вращается, так как многие участники будут вращать руку, как они расслабляются. После любых корректировок, вновь подтвердить, что радиометр считывает 270 МВт / см² (- 10 ЗВт).
4. Выключите лампу в точное время, указанное графиком дозировки в таблице 1. Не отключайте стоп-час, так как дополнительная серия показаний спектрофотометра должна быть собрана ровно через 7 минут после деактивации лампы, как описано ниже.

9. 7 Мин пост-экспозиция Чтение

1. Ровно через 7 минут после деактивации лампы запишите окончательные показания спектрофотометра с каждой диафрагмы в манжете 2. Цель сбора данных сразу же после процедуры воздействия заключается в том, чтобы сначала подтвердить отсутствие побочных реакций на УФ-излучение, а во-вторых, оценить первоначальные ответы, которые в некоторых случаях могут быть незначительными, но заметно отличаться от исходных ( до экспозиции) значения. Любое увеличение покраснения через 7 минут, вероятно, будет тепловым эффектом, а не эритемой.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Неблагоприятная реакция на воздействие УФ-излучения через 7 минут, вероятно, связана с минимальной краской дозы солнечной краправовства, приобретенные расстройства светочувствительности. Нарушения фоточувствительности оцениваются до процедуры МЭР, и испытуемые с этими расстройствами должны быть исключены. Однако, если это наблюдается в любой момент во время тестирования, протокол экспозиции должен быть немедленно прекращен.
2. После воздействия УФ-излучения, манжеты 2 может быть особенно трудно удалить. Используйте лечебно-стельный растворитель, при необходимости, чтобы свести к минимуму дискомфорт участникам при удалении манжеты 2. Участники с особенно hirsute или иным образом чувствительной кожи может оказаться полезным применять либо оливковое масло или спирта на основе клей удаления под краем манжеты 2, так как они удаляют патч медленно. После того, как манжета 2 удаляется участники могут иметь остаточный клей на коже, которые также могут быть удалены либо с оливковым маслом или медицинский клей растворителя.
3. Перед отъездом из экспозиции напомните участникам не мыть ориентиры и не применять лосьоны к месту экспозиции.

10. Последующее назначение: Манффа 3 Применение

1. Перед прибытием участника откалибруйте спектрофотометр в соответствии со спецификациями производителя.
2. Подготовка манжеты 3, удалив все отверстия покрытия (оставляя белую восковую бумагу поддержку на центральной части патча). При размещении манжеты 3 на руке участника, удалить белую восковую бумагу поддержку из двух боковых закрылков патча. Используя ориентиры на предплечье участника, поместите Cuff 3 в том же месте, что и предыдущие два патча.
3. Возьмите чтение на каждом из шести открытых диафрагм в последовательности. Кроме того, визуально проверить каждое отверстие и зафиксировать, есть ли визуальные доказательства реакции эритемы в каждом из шести диафрагм (красная или розовая кожа указывает на эритему). После постоянной записи показаний спектрофотометра, удалить манжеты 3, используя растворитель при необходимости.
4. Для дальнейшего повышения комфорта и безопасности участников, обеспечить 4-6 одноразовых гель ожога или алоэ вера, и указать участнику, что если место экспозиции становится зуд или неудобно, он может рассматриваться как солнечный ожог с этими или аналогичными без рецепта продуктов.

Результаты

Расписание времени, представленное в таблице 1, представляет собой новый график дозировки, который был рассчитан для захвата MED, в среднем, в середине события экспозиции (т.е. диафрагмы 3 или 4) для каждого FST. Основа расчетного графика заключается в следующем.

Предв...

Обсуждение

Точность внедрения med тестирования, как описано здесь, может предложить несколько преимуществ по сравнению с другими сохранившимися лабораторными воспалительными проблемами, которые достигли широкого использования. Например, всасывающие волдыри протоколы^17,

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
6-aperture dose testing patch (“Cuff”)	Daavlin
Medical grade adhesive solvent
Non-reflective UV proof cloth
Radiometer	SolarLight	Model 6.2 UVB Meter
Single use aloe or burn gel
Spectrophotometer	Konika-Minolta	CM-2600D
Stopwatch
UV lamp – Fiji Sun	Sperti		Emission spectrum 280 nm-400 nm, approximately 25% UVB
UV-proof safety glasses (2 pair)
UV-proof sleeve
White cotton gloves (2 pair)