Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

تقدم مقالة المنهجية هذه بروتوكول قياس كمي بمساعدة البرمجيات لقياس سمك العظام تحت الغضروف النسيجي في مفاصل الركبة الفئرانية المصابة بالتهاب المفاصل العظمي الفئراني ومفاصل الركبة الطبيعية كضوابط. هذا البروتوكول حساس للغاية للسماكة الدقيقة وهو مناسب للكشف المبكر عن تغيرات العظام تحت الغضروف العظمية المبكرة.

Abstract

سماكة العظام تحت الغضروف والتصلب هي السمات المميزة الرئيسية لهشاشة العظام (OA) ، سواء في النماذج الحيوانية أو في البشر. حاليا ، يتم تحديد شدة سماكة العظام تحت الغضروف النسيجي في الغالب من خلال أنظمة التصنيف شبه الكمي القائمة على التقدير البصري. تقدم هذه المقالة بروتوكولا قابلا للتكرار وسهل التنفيذ لقياس سمك العظام تحت الغضروف الكمي كميا في نموذج فأر من OA الركبة الناجم عن زعزعة استقرار الغضروف المفصلي الإنسي (DMM). استخدم هذا البروتوكول برنامج ImageJ لقياس سمك العظام تحت الغضروف على الصور النسيجية بعد تحديد منطقة ذات أهمية في اللقمة الفخذية الإنسية وهضبة الظنبوب الطبية حيث يحدث سماكة العظام تحت الغضروف عادة في OA الركبة الناجم عن DMM. تم استخدام الصور النسيجية من مفاصل الركبة مع إجراء صوري كضوابط. وأشار التحليل الإحصائي إلى أن نظام قياس العظام الكمي تحت الغضروف الذي تم تطويره حديثا كان قابلا للتكرار بدرجة كبيرة مع وجود اختلافات منخفضة داخل المراقبين وفيما بينهم. تشير النتائج إلى أن البروتوكول الجديد أكثر حساسية لسماكة العظام تحت الغضروف الدقيقة أو الخفيفة من أنظمة التصنيف البصري المستخدمة على نطاق واسع. هذا البروتوكول مناسب للكشف عن كل من التغيرات المبكرة والمتقدمة في العظام تحت الغضروف ولتقييم فعالية علاجات OA في الجسم الحي بالتنسيق مع تصنيف غضروف OA.

Introduction

هشاشة العظام (OA) ، التي تتميز شعاعيا بتضييق مساحة المفاصل بسبب فقدان الغضروف المفصلي ، والخلايا العظمية ، وتصلب العظام تحت الغضروف (SCB) ، هي الشكل الأكثر شيوعا لالتهاب المفاصل 1,2. على الرغم من أن دور العظام المحيطة بالمفصل في مسببات OA غير مفهوم تماما ، إلا أن تكوين الخلايا العظمية والتصلب SCB يعتقد عموما أنهما نتائج لعملية المرض وليس العوامل المسببة ، ولكن التغييرات في بنية / شكل العظام حول المفصل والبيولوجيا قد تسهم في تطور وتطور OA3,4 . يعد تطوير نظام دقيق وسهل التنفيذ لتصنيف الزراعة العضوية ، بما في ذلك قياس SCB ، أمرا بالغ الأهمية للدراسات المقارنة بين مختبرات الأبحاث وفي تقييم فعالية العوامل العلاجية المصممة لمنع أو تخفيف تطور OA.

تم بناء SCB مع صفيحة عظمية رقيقة تشبه القبة وطبقة أساسية من العظام التربيقية. صفيحة SCB هي الصفيحة القشرية ، التي تقع بالتوازي مع الغضروف المتكلس وتحته مباشرة. تخترق الفروع الصغيرة من الأوعية الشريانية والوريدية ، وكذلك الأعصاب ، القنوات الموجودة في صفيحة SCB ، وتتواصل بين الغضروف المتكلس والعظم التربيقي. يحتوي العظم التربيقي تحت الغضروف على أوعية دموية وأعصاب حسية ونخاع عظمي وهو أكثر مسامية ونشاطا استقلابيا من لوحة SCB. لذلك ، يمارس SCB وظائف امتصاص الصدمات والداعمة وهو مهم أيضا لإمدادات المغذيات الغضروفية والتمثيل الغذائي في المفاصل الطبيعية5،6،7،8.

سماكة SCB (في علم الأنسجة) والتصلب (في التصوير الشعاعي) هي السمات المميزة الرئيسية للزراعة العضوية ومجالات البحث الرئيسية في الفيزيولوجيا المرضية OA. يعد قياس سماكة SCB مكونا مهما في التقييمات النسيجية لشدة OA. وقد أدى التصوير الشعاعي المجهري الرقمي الذي تم الإبلاغ عنه سابقا لقياس الكثافة المعدنية للقوارض SCB9 وكذلك التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (micro-CT) القائم على قياس SCB الكمي في نماذج القوارض من OA10,11,12,13 إلى تحسين فهمنا لبنية SCB ودور تغيرات SCB في الفيزيولوجيا المرضية ل OA. كما تم تحديد مساحة SCB وسمكها كميا باستخدام شرائح نسيجية باستخدام نظام كمبيوتر متطور مع برنامج محدد ومكلف لقياس الأنسجة العظمية14. ومع ذلك، فإن أنظمة تصنيف النفاذ المفتوح شبه الكمي القائمة على التقدير البصري، بما في ذلك تصنيف سماكة SCB، تستخدم على نطاق أوسع من التصوير المقطعي المحوسب الجزئي في الوقت الحالي لأن أنظمة الدرجات سهلة الاستخدام، خاصة لفحص العديد من الصور النسيجية. ومع ذلك ، فإن معظم أنظمة تصنيف OA الحالية تركز بشكل أساسي على تغيرات الغضاريف15،16،17. طريقة تصنيف سمك SCB العظمية المستخدمة على نطاق واسع والتي تصنف سماكة SCB على أنها خفيفة ومعتدلة وشديدة هي طريقة ذاتية إلى حد كبير ، ولم يتم التحقق من موثوقيتها بالكامل15. بروتوكول قياس سمك SCB الموثوق به وسهل التنفيذ خطوة بخطوة إما غير مطور بالكامل أو غير موحد.

هدفت هذه الدراسة إلى تطوير بروتوكول قابل للتكرار وحساس وسهل التنفيذ لقياس سمك SCB كميا في نموذج الماوس من الزراعة العضوية (OA). أظهرت اختبارات القياس الصارمة والتحليل الإحصائي أن بروتوكول القياس الكمي المدعوم ببرنامج ImageJ هذا يمكن أن يحدد سمك SCB في كل من مفاصل الركبة العادية والتهاب المفاصل العظمي. البروتوكول الذي تم تطويره حديثا قابل للتكرار وأكثر حساسية لتغيرات SCB الخفيفة من أنظمة التصنيف المرئي المستخدمة على نطاق واسع. يمكن استخدامه للكشف المبكر عن تغيرات SCB العظمية المفصلية وتقييم فعالية علاجات OA في الجسم الحي بالتنسيق مع تصنيف غضروف OA.

Protocol

تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية المدرجة في هذا البروتوكول من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات (IACUC) في المركز الطبي بجامعة كانساس ، وفقا لجميع القوانين واللوائح الفيدرالية والولائية.

1. إنشاء OA الركبة في الفئران

  1. إنشاء نموذج فأر من OA الركبة عن طريق زعزعة الاستقرار الجراحي للغضروف المفصلي الإنسي (DMM) كما هو موضح من قبل Glasson et al.18 في 22 فئران BALB / c من النوع البري في عمر 10-11 أسبوعا. إجراء جراحة صورية كإجراء تحكم على ثمانية فئران لها نفس الخلفية والعمر.
    ملاحظة: تم استخدام كلا الجنسين في المشروع الأصلي لتلبية متطلبات المعاهد الوطنية للصحة للنظر في الجنس كمتغير بيولوجي ، على الرغم من أن فحص الفرق بين الجنسين ليس هو نطاق هذا البروتوكول.
  2. تخدير الحيوانات عن طريق استنشاق الأيزوفلوران. تحقق من عمق التخدير من خلال مراقبة معدل التنفس / الجهد وعدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم / الذيل. ضع الحيوانات في وضع ضعيف.
  3. حلق الجلد في منطقة الركبة وتنظيف الجلد باستخدام Povidone-Iodine + فرك الجلد الكحولي ؛ ثلاث دورات بالتناوب.
  4. قم بإجراء DMM على الركبة اليمنى تحت المجهر الجراحي. كشف مفصل الركبة من خلال شق شبه رضفي إنسي (طوله 1.2-1.5 سم) وشق كبسولة المفصل. حافظ على سلامة الرضفة والوتر الرضفي. بعد التعرض الدقيق للرباط السحفي الإنسي (MML) الذي يثبت الغضروف المفصلي الإنسي بهضبة الظنبوب، قم بنقله بمقص جراحي مجهري لزعزعة استقرار الغضروف المفصلي الإنسي.
  5. قم بإجراء جراحة صورية على الركبة اليمنى كإجراء تحكم ، حيث تم تصور MML ولكن لم يتم نقله.
  6. أغلق كبسولة المفصل مع 8-0 خيوط متعددة الغلاكتين قابلة للامتصاص وشق الجلد مع 7-0 خيوط غير قابلة للامتصاص لكل من إجراءات DMM و sham لضمان الاستخدام السليم للركبة بمجرد حدوث الشفاء.
  7. حقن SR Buprenorphine (0.20-0.5 ملغم / كغ) تحت الجلد (SC) مباشرة قبل الإجراء الجراحي للتسكين ، والذي يوفر تخفيف الألم لمدة تصل إلى 72 ساعة بعد حقنة واحدة. مراقبة الحيوانات التي يتم تشغيلها بعد الجراحة.
  8. القتل الرحيم للحيوانات باستخدام غرفة CO2 في 2 و 8 و 16 أسبوعا بعد الجراحة. بعد فقدان الوعي ، تأكد من وفاة الحيوانات بطريقة فيزيائية (فتح تجويف الصدر). وتتفق أساليب القتل الرحيم هذه مع توصيات الفريق المعني بالقتل الرحيم التابع للجمعية الطبية البيطرية الأمريكية (AVMA).
  9. حصاد مفاصل الركبة للتحليلات النسيجية في 2 و 8 و 16 أسبوعا بعد جراحة DMM وفي 2 و 16 أسبوعا بعد جراحة الشام للحصول على مفاصل ركبة الفأر بدرجات مختلفة من شدة OA أو سماكة SCB.

2. إعداد أقسام الأنسجة والصور النسيجية

  1. إصلاح عينات أنسجة مفصل ركبة الفأر في 2٪ من بارافورمالديهايد ، وإزالة الكلس منها في 25٪ من حمض الفورميك ، وتضمينها في البارافين ، وقسم كوروناليا لفحص كل من المقصورات الإنسية والجانبية.
  2. قطع عينات الركبة من الجانب الخلفي من الركبة باستخدام ميكروتوم وجمع أقسام الأنسجة التي يبلغ سمكها 5 ميكرومتر على فترات 70-80 ميكرومتر للحصول على حوالي 40 شريحة أنسجة عبر مفصل الركبة بأكمله. يشير تقدير بمساعدة الميكرومتر إلى أن أرقام الشرائح 1-6 هي من الجزء الخلفي البعيد ، و 11-18 من منتصف الخلف ، و 23-30 من الوسط الأمامي ، و 35-40 من الجزء الأمامي البعيد من مفصل الركبة. تخلص من الأقسام المتداخلة أو اجمعها بحثا عن بقع إضافية.
  3. قم بإجراء Safranin-O والبقع الخضراء السريعة وفقا لتعليمات الشركة المصنعة لتحديد خلايا الغضروف والمصفوفات على وجه التحديد في كل خمس شرائح. قم بإجراء تلطيخ الهيماتوكسيلين إيوسين وفقا لتعليمات الشركة المصنعة لفحص مفاصل الركبة على المستويات الخلوية والأنسجة كما هو موضح سابقا19،20،21،22.
  4. احصل على صور نسيجية باستخدام مجهر مجهز بكاميرا رقمية. تم إجراء التحليل النسيجي المرضي العام ودرجات OA النسيجية كما هو موضح سابقا15،19،20،21،22.

3. القياس الكمي للعظم تحت الغضروفي العظمي مع برنامج ImageJ

  1. قم بتنزيل برنامج ImageJ وافتح الصور النسيجية ذات الاهتمام.
    1. قم بتنزيل ImageJ المجمعة مع Java 1.8.0_172 من https://imagej.nih.gov/ij/.
    2. افتح برنامج ImageJ. انقر فوق علامة التبويب ملف على الشريط وانقر فوق الخيار فتح لفتح الصورة النسيجية.
    3. ابحث عن عنوان دليل الملفات، وحدد ملف الصورة، ثم انقر فوق فتح.
  2. معايرة ImageJ مع الميكرومتر على الصور النسيجية.
    1. استخدم أداة الخط المستقيم لرسم وحدة طول واحدة على الميكرومتر وانقر فوق تحليل > (ثم) تعيين المقياس. اضبط المسافة المعروفة ونسبة العرض إلى الارتفاع للبكسل على 1 وانقر فوق موافق. يمكن ل ImageJ تحويل طول البكسل إلى طول الوحدة على الميكرومتر.
    2. اضبط العامل المقاس على المساحة. انقر فوق تحليل > تعيين القياس وتحديد المنطقة والحد من المربع الحد إلى العتبة ضمن نافذة جديدة. تقوم هذه الخطوة بتعيين ImageJ لقياس المعلمة "Area" ضمن "العتبة" المحددة.
  3. قياس إجمالي منطقة اهتمام العظام تحت الغضروفية (SCB).
    1. حدد منطقة اهتمام SCB (ROI) كما هو موضح في المربعات البرتقالية في الشكل 1A ، والتي تغطي الصفيحة القشرية SCB وجزء من العظم التربيقي الأساسي المجاور للصفيحة القشرية في اللقمة الفخذية الإنسية (MFC) وهضبة الظنبوب الإنسية (MTP) بأبعاد محددة لكل عائد على الاستثمار. عادة ما يحدث سماكة SCB العظمية المفصلية في هذه المناطق. حدد عائد الاستثمار SCB بنفس الشكل والبعد في كل MFC أو MTP لجميع المفاصل التي تم فحصها لضمان قياس نفس حجم عائد الاستثمار المحدد لجميع الحيوانات.
    2. ارسم المخطط التفصيلي لإجمالي مساحة اهتمام SCB باستخدام أداة تحديد المضلع أسفل النافذة الرئيسية ل ImageJ.
      ملاحظة: تمنح أدوات التحديد النظام عتبة للحد من المساحة المقاسة.
    3. قياس إجمالي مساحة SCB: بعد تحديد العتبة، انقر على تحليل > قياس. سيتم فتح نافذة "النتائج" مع قياس المنطقة.
  4. قياس منطقة مادة العظام التي تحتوي على عظام صلبة بدون نخاع العظم.
    1. انقر فوق تحرير > مسح خارج لاستبعاد المساحة خارج مساحة SCB الإجمالية.
      ملاحظة: تكون منطقة SCB الإجمالية مرئية فقط بعد النقر فوق الخيار مسح خارجي. ستتحول الصورة خارج إجمالي مساحة SCB إلى اللون الأسود. تسمح هذه الخطوة للمراقبين بالتركيز على منطقة مادة العظام داخل منطقة الاهتمام.
    2. انقر فوق صورة > ضبط عتبة اللون > لفتح نافذة "لون العتبة". انقر على الأصل في أسفل نافذة "لون العتبة" لاستعادة الصورة إلى الحالة الأصلية. استخدم أدوات التحديد في الخطوة 3.3.2 لرسم مربع صغير في منطقة المادة العظمية. انقر على خيار العينة في أسفل نافذة "لون العتبة" لتحديد منطقة مادة العظام.
      ملاحظة: يسمح خيار "العينة" في نافذة "لون العتبة" ل ImageJ بتحديد جميع وحدات البكسل نفسها على إجمالي مساحة SCB مثل منطقة عينة مادة العظام. ستتحول منطقة المادة العظمية المحددة إلى اللون الأحمر.
    3. انقر فوق تحديد في أسفل نافذة توازن لون العتبة لإنشاء عتبة قياس مساحة. انقر على تحليل > القياس في القائمة الرئيسية ImageJ ، وستظهر نتيجة قياس منطقة مادة العظام في نافذة "النتائج".
    4. احفظ بيانات إجمالي مساحة SCB ومنطقة مادة العظام.
  5. احسب نسبة مساحة مادة العظام (mm2) إلى إجمالي مساحة SCB (mm2) ذات الأهمية والتي تمثل سمك مادة العظام (mm2/1.0 mm2) داخل إجمالي مساحة SCB.
  6. قم بقياس سمك SCB للمقاطع/الصور النسيجية (كما هو موضح في الخطوات 3.1-3.5) للمناطق الخلفية البعيدة والوسطى الخلفية والوسطى الأمامية والبعيدة (كما هو موضح في الخطوة 2.2) من النفاذ المفتوح الناجم عن DMM لتقييم سمك SCB الخاص بالمنطقة من 6 مفاصل ركبة (الشكل 1B).
    ملاحظة: يمكن أن يؤدي ذلك إلى التحقق من موثوقية بروتوكول القياس الكمي هذا لأنه من المعروف أن تغيرات SCB لالتهاب المفاصل العظمي تتزامن مع آفات الغضاريف وأن تلف الغضروف العظمي المفصلي مع سماكة SCB يكون أكثر حدة في المناطق الحاملة للوزن (الجزء الأوسط) من مفاصل ركبة القوارض14,15. لذلك ، من المناسب استخدام الأقسام المتوسطة للقياس الكمي لسماكة SCB العظمية المفصلية.

4. الإحصائيات

  1. إجراء التحليلات الإحصائية باستخدام البيانات من القياس الكمي والدرجات البصرية لسمك SCB. تحديد التباين بين المراقبين وداخلهم وقابليتهم للتكرار من خلال تحليلات معامل الارتباط من بيرسون.
  2. تحديد أهمية الاختلافات بين مجموعات الدراسة باستخدام اختبارات t الخاصة بالطالب أو ANOVA أحادية الاتجاه ، متبوعة باختبار ما بعد مخصص (Tukey) باستخدام برنامج جداول البيانات. ضع في اعتبارك أن قيمة p التي تقل عن 0.05 ذات دلالة إحصائية.

النتائج

مقارنة قابلية التكرار بين تقدير التقدير البصري والقياس الكمي بمساعدة ImageJ:
تم تسجيل سمك SCB في 48 منطقة ذات أهمية (ROI) (24 MFC و 24 MTP) ، تم تعريفه من قسم منتصف كل ركبة من 24 ركبة / من قبل ثلاثة أفراد مستقلين باستخدام مخطط التسجيل البصري الحالي 0-3 كما هو موضح في الأدبيات 15,23<...

Discussion

يعد قياس سماكة SCB مكونا مهما في التقييمات النسيجية لشدة OA. تركز معظم أنظمة تصنيف OA الحالية بشكل أساسي على تغيرات الغضاريف15،16،17. طريقة تصنيف سمك SCB العظمية الفئرانية المستخدمة على نطاق واسع والتي تصنف سماكة SCB على أنها خفيفة ومعتدلة وشديدة ...

Disclosures

يعلن المؤلفون عدم وجود تضارب تنافسي في المصالح.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل المعهد الوطني لالتهاب المفاصل والأمراض العضلية الهيكلية والجلدية التابعة للمعاهد الوطنية للصحة (NIH) تحت رقم الجائزة R01 AR059088 ، ووزارة الدفاع (DoD) تحت رقم جائزة البحث W81XWH-12-1-0304 ، ومنحة ماري وبول هارينغتون للأستاذية المتميزة.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Safranin-OSigma-AldrichS8884
Fast greenSigma-AldrichF7252
HematoxylinSigma-AldrichGHS216
EosinSigma-AldrichE4382
illustratorAdobeNot applicable

References

  1. Kotlarz, H., Gunnarsson, C. L., Fang, H., Rizzo, J. A. Insurer and out-of-pocket costs of osteoarthritis in the US: evidence from national survey data. Arthritis and Rheumatology. 60 (12), 3546-3553 (2009).
  2. Buckwalter, J. A., Martin, J. A. Osteoarthritis. Advanced Drug Delivery Reviews. 58 (2), 150-167 (2006).
  3. Weinans, H., et al. Pathophysiology of peri-articular bone changes in osteoarthritis. Bone. 51 (2), 190-196 (2012).
  4. Baker-LePain, J. C., Lane, N. E. Role of bone architecture and anatomy in osteoarthritis. Bone. 51 (2), 197-203 (2012).
  5. Li, G., et al. Subchondral bone in osteoarthritis: Insight into risk factors and microstructural changes. Arthritis Research and Therapy. 15 (6), 223 (2013).
  6. Madry, H., van Dijk, C. N., Mueller-Gerbl, M. The basic science of the subchondral bone. Knee Surgery, Sports, Traumatology, Arthrosclerosis. 18 (4), 419-433 (2010).
  7. Milz, S., Putz, R. Quantitative morphology of the subchondral plate of the tibial plateau. Journal of Anatomy. 185, 103-110 (1994).
  8. Blalock, D., Miller, A., Tilley, M., Wang, J. Joint instability and osteoarthritis. Clinical Medicine Insights: Arthritis and Musculoskeleton Disorders. 8, 15-23 (2015).
  9. Waung, J. A., et al. Quantitative X-ray microradiography for high-throughput phenotyping of osteoarthritis in mice. Osteoarthritis Cartilage. 22 (10), 1396-1400 (2014).
  10. Botter, S. M., et al. Cartilage damage pattern in relation to subchondral plate thickness in a collagenase-induced model of osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 16 (4), 506-514 (2008).
  11. Nalesso, G., et al. Calcium calmodulin kinase II activity is required for cartilage homeostasis in osteoarthritis. Science Reports. 11 (1), 5682 (2021).
  12. Ding, M., Christian Danielsen, C., Hvid, I. Effects of hyaluronan on three-dimensional microarchitecture of subchondral bone tissues in guinea pig primary osteoarthrosis. Bone. 36 (3), 489-501 (2005).
  13. Kraus, V. B., Huebner, J. L., DeGroot, J., Bendele, A. The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the guinea pig. Osteoarthritis Cartilage. 18, 35-52 (2010).
  14. McNulty, M. A., et al. A comprehensive histological assessment of osteoarthritis lesions in Mice. Cartilage. 2 (4), 354-363 (2011).
  15. Glasson, S. S., Chambers, M. G., Van Den Berg, W. B., Little, C. B. The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse. Osteoarthritis Cartilage. 18, 17-23 (2010).
  16. Pritzker, K. P., et al. Osteoarthritis cartilage histopathology: grading and staging. Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).
  17. Mankin, H. J., Dorfman, H., Lippiello, L., Zarins, A. Biochemical and metabolic abnormalities in articular cartilage from osteo-arthritic human hips. II. Correlation of morphology with biochemical and metabolic data. Journal of Bone and Joint Surgery American. 53 (3), 523-537 (1971).
  18. Glasson, S. S., Blanchet, T. J., Morris, E. A. The surgical destabilization of the medial meniscus (DMM) model of osteoarthritis in the 129/SvEv mouse. Osteoarthritis Cartilage. 15 (9), 1061-1069 (2007).
  19. Wang, J., et al. Transcription factor Nfat1 deficiency causes osteoarthritis through dysfunction of adult articular chondrocytes. Journal of Pathology. 219 (2), 163-172 (2009).
  20. Zhang, M., Lu, Q., Budden, T., Wang, J. NFAT1 protects articular cartilage against osteoarthritic degradation by directly regulating transcription of specific anabolic and catabolic genes. Bone Joint Research. 8 (2), 90-100 (2019).
  21. Zhang, M., et al. Epigenetically mediated spontaneous reduction of NFAT1 expression causes imbalanced metabolic activities of articular chondrocytes in aged mice. Osteoarthritis Cartilage. 24 (7), 1274-1283 (2016).
  22. Rodova, M., et al. Nfat1 regulates adult articular chondrocyte function through its age-dependent expression mediated by epigenetic histone methylation. Journal of Bone and Mineral Research. 26 (8), 1974-1986 (2011).
  23. Jackson, M. T., et al. Depletion of protease-activated receptor 2 but not protease-activated receptor 1 may confer protection against osteoarthritis in mice through extracartilaginous mechanisms. Arthritis and Rheumatology. 66 (12), 3337-3348 (2014).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

181

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved