JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يتم تقديم بروتوكول لإجراء تحد في مرفق غرفة التعرض للحساسية (AEC). أثبتت AECs أنها أدوات آمنة وفعالة لتحريض أعراض الحساسية أو كنقطة نهاية في اختبار فعالية العلاج المناعي للحساسية نظرا لقدرتها على الحفاظ على تركيزات الجسيمات المستقرة والظروف البيئية.

Abstract

غرف التعرض للحساسية (AECs) هي مرافق سريرية تسمح بتعرض المشاركين للجزيئات المسببة للحساسية وغير المسببة للحساسية المحمولة جوا. أنها توفر تركيزات الجسيمات مستقرة في ظل ظروف بيئية خاضعة للرقابة. هذا له أهمية كبيرة سواء لأغراض التشخيص أو لرصد آثار العلاج.

هنا ، يتم تقديم بروتوكول والمتطلبات الفنية لأداء تحدي آمن وفعال لمسببات الحساسية في الأشخاص الذين تم توعيتهم بمسببات الحساسية المحمولة جوا (أي عث غبار المنزل [HDM]) في ALL-MED AEC. مع هذه الطريقة ، فإن إثارة أعراض الحساسية يتوافق مع التعرض الطبيعي. يمكن استخدام هذا لتشخيص الحساسية أو كنقطة نهاية معقولة في التجارب السريرية ، خاصة للعلاج المناعي للحساسية (AIT). يجب الحفاظ على بيئة خاضعة للرقابة (درجة الحرارة والرطوبة وثاني أكسيد الكربون [CO2]) في الغرفة. يجب أن تنتشر جزيئات مسببات الحساسية بالتساوي داخل AEC بمستويات مستقرة طوال التحدي. لهذا العرض التقديمي ، تم تسجيل مرضى التهاب الأنف التحسسي (AR) الحساسين لمسببات الحساسية HDM. تم تقييم أعراض AR من خلال المعلمات التالية: إجمالي درجة أعراض الأنف (TNSS) ، وقياس الأنف السمعي (ARM) ، وذروة تدفق الشهيق الأنفي (PNIF) ، ووزن إفراز الأنف. تم تقييم سلامة الإجراء من خلال ذروة معدل تدفق الزفير (PEFR) وحجم الزفير القسري في الثانية الأولى (FEV1). ظهرت الأعراض على الأشخاص الذين يعانون من الحساسية في غضون 120 دقيقة من التجربة. في المتوسط ، ظهرت الأعراض الأكثر حدة بعد 60-90 دقيقة ، وبعد الوصول إلى الهضبة ، ظلت مستقرة حتى نهاية التجربة.

Introduction

أصبحت الحساسية المحمولة جوا مشكلة اجتماعية متنامية. التشخيص السليم ، وتقييم فعالية العلاج المناعي الخاص بمسببات الحساسية (AIT) ، وفهم العلاجات الدوائية هي النقاط الرئيسية في معالجة هذه المشكلة. ومع ذلك ، فإن توحيد هذه الإجراءات يتطلب تركيزات مستقرة من مسببات الحساسية ، وظروف بيئية مستقرة (مثل الرطوبة ودرجة الحرارة) ، والقدرة على التسبب في علامات الحساسية بطريقة متكررة. توفر غرف التعرض للحساسية (AECs) ظروفا بيئية مستقرة ، بغض النظر عن العوامل الخارجية ، ويتم التحكم في تركيز جزيئات مسببات الحساسية المشتتة بشكل جيد ومستقر أثناء التحديات في AECs 1,2.

اختبار تحدي مسببات الحساسية هو الأساس لتشخيص الحساسية المحمولة جوا لأنه يوفر دليلا مباشرا على الصلة السريرية لمسببات الحساسية المحددة بأعراض وشدة مرض الحساسية. تشمل تشخيصات الحساسية الكلاسيكية استفزازات الأنف والملتحمة والشعب الهوائية3،4،5. ومع ذلك ، يبدو أن اختبار تحدي مسببات الحساسية في AEC هو الأقرب إلى التعرض الطبيعي لمسببات الحساسية6.

تهدف هذه الدراسة إلى تقديم طريقة آمنة وفعالة لتحدي المشاركين الذين يعانون من مسببات الحساسية المختلفة المحمولة جوا في AEC لإثارة أعراض حساسية كبيرة تتوافق مع التعرض الطبيعي. هذه الطريقة مناسبة لتحريض السمات المرضية لأمراض الجهاز التنفسي ، بما في ذلك التهاب الأنف التحسسي والربو ، كنقطة نهاية في اختبار فعالية AIT وقد تساهم في تسريع التطوير السريري للعلاجات الدوائية2،3،7،8،9،10.

هناك أكثر من اثني عشر AECs في العالم11. ومع ذلك ، فإن AECs لا يمكن مقارنتها ببعضها البعض لأنها مصممة بشكل فردي ، وتستخدم أنواعا مختلفة من مسببات الحساسية (على سبيل المثال ، سوس غبار المنزل [HDM] ، أو حبوب لقاح البتولا ، أو حبوب لقاح العشب ، أو قطط ، أو حبوب لقاح عشبة الرجيد ، أو حبوب لقاح الأرز الياباني) ، ولها أنظمة قياس مختلفة للجزيئات الموزعة12،13،14،15،16،17،18،19 . لذلك ، يجب التحقق من صحة كل AEC لمسببات الحساسية الفردية. يضمن التحقق من صحة AEC أن التركيز المناسب لمسببات الحساسية آمن وأن الأعراض تحدث في المرضى. تم التحقق من صحة ALL-MED AEC لمسببات الحساسيةHDM 20.

يقع ALL-MED AEC في معهد البحوث الطبية في فروتسواف ، بولندا. يمكن أن يستوعب المرفق بشكل مريح 15-20 شخصا خلال تجربة واحدة. يتكون المرفق من غرفة بمساحة 12 م2 ، والتي يتم الوصول إليها عن طريق غرفة معادلة الضغط لمنع الجسيمات من البيئة الخارجية من دخولها. تتكون المعدات (المقاعد والجدران وما إلى ذلك) من أسطح غير لاصقة يمكن الوصول إليها ويمكن غسلها ، مثل الجلود البيئية والبلاستيك والمعدن. الكراسي متحركة ، مما يسمح بإعدادات مختلفة. تسمح نافذة العرض واتصال الميكروفون بالمراقبة المستمرة للأهداف (الشكل 1). يتم قياس تراكم الجسيمات بواسطة عداد جزيئات الليزر (LPC). يمكن تصنيف الجسيمات إلى نطاقات مختلفة ، بما في ذلك 0-20 ميكرومتر ، 20-50 ميكرومتر ، و 50-100 ميكرومتر ، ويتم إعطاء النتائج في الجسيمات لكل متر مكعب (p / m3) خلال وحدة زمنية محددة (على سبيل المثال ، كل دقيقة). توجد غرفتان ملحقتان بجوار AEC ، حيث يخضع المرضى للاختبارات قبل دخول الغرفة. تتكون معدات الإنقاذ من مزيل الرجفان وأجهزة الإنعاش الأخرى الموجودة في المنشأة. يحضر اثنان على الأقل من العاملين في مجال الرعاية الصحية ، بما في ذلك الطبيب ، خلال كل تحد.

Protocol

تقدم هذه المقالة بروتوكولا يلتزم بإرشادات لجنة أخلاقيات البيولوجيا في جامعة فروتسواف الطبية في بولندا. كان جميع المشاركين مؤهلين قانونيا وقدموا موافقة خطية مستنيرة للمشاركة في الدراسة. كما تم إبلاغهم بأن لديهم خيار الانسحاب في أي وقت دون إبداء الأسباب.

1. تنظيف AEC

ملاحظة: يمكن إجراء التنظيف في وقت أبكر من يوم التجربة.

  1. نظف جميع الأسطح بالمكنسة الكهربائية ، بما في ذلك الأثاث والأرضية ، باستخدام مكنسة كهربائية عالية الكفاءة لمرشح الجسيمات (HEPA).
  2. نظف جميع الأسطح القابلة للغسل بمنديل رطب ، بما في ذلك الأثاث والجدران والنوافذ والأرضية.
  3. قم بتشغيل الضاغط ، الذي يقوم بتدوير الهواء عبر نظام AEC (قناة إمداد مسببات الحساسية).
  4. قم بتشغيل مراوح الأرضية والسقف بحيث يتم خلط الهواء الوارد بانتظام في ظل ظروف مضطربة.
  5. قم بتفجير قناة إمداد مسببات الحساسية بهواء نظيف لمدة 30 دقيقة عن طريق ضبط "طول الحقن" و "الفاصل بين الحقن" لمحطة التحكم في وحدة التغذية على قيمها القصوى.
  6. تحقق من التلوث الناجم عن مسببات الحساسية من خلال مراقبة رقم الجسيمات على عداد جزيئات الليزر (LPC)21.
    1. في القائمة الرئيسية، اضغط على التكوين | عينة. استخدم المعلمات التالية: عينة لمدة 1 دقيقة ، 000 دورة ، تأخير 0 دقيقة ، عقد لمدة 0 دقيقة ، ووحدات متر مكعب (م3).
      ملاحظة: سيبدأ LPC في عد الجسيمات على الفور ثم عد الجسيمات لمدة 1 دقيقة دون فاصل زمني بين كل قياس. سيقوم LPC بقياس العينات حتى يتم إيقافها يدويا ثم حساب الجسيمات لكل متر مكعب (p / m3).
    2. في القائمة الرئيسية، اضغط على التكوين | الجزيئات. حدد جميع الخيارات.
      ملاحظة: سيقيس LPC جميع الجسيمات حتى 100 ميكرومتر (النطاق الكامل).
    3. اقرأ النتيجة في برنامج الكمبيوتر (على سبيل المثال ، LMS Express 7).
      ملاحظة: تكون المقصورة نظيفة عندما يكون عدد الجسيمات لكل متر مكعب (p / m 3) أقل من 50 p / m3 والجسيمات في النطاق بين 0-100 μm لمدة 10 دقائق على الأقل.

2. تشغيل AEC

ملاحظة: يجب مراقبة الجو في المقصورة بانتظام من قبل مهندس ، والذي يثبت أن المعلمات ثابتة أثناء التجربة. يجب تثبيت المعلمات قبل دخول المشاركين.

  1. وسط
  2. قم بتشغيل الضاغط ، الذي يقوم بتدوير الهواء في جميع أنحاء AEC.
    1. اضبط درجة الحرارة على 21 درجة مئوية ± 0.5 درجة مئوية على نظام التحكم في درجة الحرارة (جدول المواد).
      ملاحظة: قد تتراوح درجة الحرارة بين 18 درجة مئوية و 27 درجة مئوية ، إذا لزم الأمر.
    2. قم بتشغيل مراوح دوامة الأرضية والسقف.
    3. قم بتشغيل المرطب في محطة التحكم في وحدة التغذية (جدول المواد).
    4. اضبط تغيير الهواء في الساعة (ACH) ليكون بين 5 و 20 عن طريق ضبط "إمداد الهواء" للمقبض في محطة التحكم في وحدة التغذية على الموضع بين 40٪ -100٪. قم بقياس الرطوبة النسبية وتركيز CO2 باستخدام مقياس جودة الهواء.
      ملاحظة: يتم سحب الهواء الخارجي النقي عبر مرشحات HEPA. التحكم في الرطوبة النسبية (عادة 40٪ إلى 58٪) وتركيز ثاني أكسيد الكربون (CO2) (أقل من 900 جزء في المليون [جزء في المليون]). اضبط ACH بحيث تكون كل من الرطوبة وثاني أكسيد الكربون2 ضمن المعدل الطبيعي. الرطوبة وقيم CO2 معرضة جدا لعدد المشاركين.
  3. توليد وعد الجسيمات
    ملاحظة: يتم استخدام مستخلصات مسببات الحساسية الموحدة والمجففة بالتجميد. يتم حقن الجسيمات في قناة إمداد الهواء ونفخها في AEC من خلال وحدة تغذية يتم التحكم فيها بواسطة الكمبيوتر. يمكن تعديل تركيز الجسيمات بين 500 / م 3 و 10000 /م 3. يتم الحصول على توزيع متجانس ومستقر مكانيا للجزيئات عن طريق الخلط المضطرب لضمان دوران جزيئات مسببات الحساسية بدلا من السقوط والتراكم على الأرض.
    1. اضبط LPC لحساب الجسيمات لمدة دقيقة واحدة (كرر الخطوة 1.6.1).
    2. اضبط قيمة الجسيمات المراقبة في حدود 0-20 ميكرومتر. في القائمة الرئيسية، اضغط على التكوين | الجزيئات. ضع علامة "5 ، 10 ، 20 ميكرومتر". سيقيس LPC جميع الجسيمات في حدود 0-20 ميكرومتر.
      ملاحظة: يمكن تصنيف الجسيمات إلى نطاقات ، بما في ذلك 0-20 ميكرومتر ، 20-50 ميكرومتر ، و 50-100 ميكرومتر ، إذا لزم الأمر لمراقبة مسببات الحساسية المختلفة.
    3. ضع مسببات الحساسية في وحدة التغذية. اضبط "طول الحقن" على 100 مللي ثانية (النطاق 10-200 مللي ثانية) و "الفاصل بين الحقن" على 1.5 دقيقة (النطاق 0.3-3.0 دقيقة) على محطة التحكم في وحدة التغذية.
      ملاحظة: للتحقق من صحة ALL-MED AEC ، تم استخدام أجسام سوس Dermatophagoides pteronyssinus (Dp ) المجففة والمنقاة (جدول المواد) لتحدي HMD ، وكان 5000 p / m3 هو التركيز الأمثل20.
    4. مراقبة عدد الجسيمات (p / m3). اضبط كلا المعلمتين بشكل مستمر عن طريق تغيير قيمهما.
  4. بعد اكتمال كل تجربة ، قم بتنزيل جميع البيانات المقاسة (p / m3 ، تركيز CO2 ) من الكمبيوتر إلى محرك أقراص خارجي. تحليل البيانات (الشكل 2).

3. تدابير أمنية

  1. اختبر المشاركين باختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل لفيروس كورونا 2 المسبب للمتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة (SARS-CoV-2) قبل 36-24 ساعة من دخولهم إلى AEC. اسمح فقط للمشاركين الذين لديهم نتيجة PCR سلبية بدخول AEC.
    ملاحظة: هذه الخطوة ليست إلزامية وتعتمد على قيود مرض فيروس كورونا المحلي 2019 (COVID-19). المرضى في المقصورة لا يرتدون أقنعة واقية.

4. الفحص في المقصورة ونقاط النهاية السريرية

ملاحظة: للاطلاع على معايير الإدراج والاستبعاد، فضلا عن خصائص المشاركين، انظر الجدول التكميلي 1. تعرض المشاركون لمسببات الحساسية HDM بتركيز 5000 p / m3 لمدة 120 دقيقة ، وفقا للتحقق من صحة ALL-MEDAEC 20.

  1. تطهير أيدي المشاركين قبل الفحوصات ، لأن مكونات الجهاز التي يلمسونها قد تكون مصدرا لانتقال العدوى. هذه التوصية ضرورية ، خاصة أثناء وباء أو جائحة مرض فيروسي.
  2. راقب باستمرار حالة المشاركين من خلال نافذة العرض وكن على اتصال صوتي عبر نظام الميكروفون (جدول المواد).
  3. قبل دخول المشارك إلى AEC ، اطلب منه ارتداء معاطف يمكن التخلص منها بغطاء (جدول المواد) للحماية من تسلل الجسيمات غير المسببة للحساسية والتلوث المحتمل للملابس.
  4. قبل أن يدخل المشارك إلى AEC ، زوده بصندوق يحتوي على جميع النصائح الضرورية التي يمكن التخلص منها للاستخدام أثناء الفحص: طرف قياس التنفس وسدادة الأنف ، وقناع مادة التدفق الشهيقي القابل للتصرف ، وطرف مقياس تدفق الذروة (PFM) ، ونصائح ARM ، وجهاز تحكم عن بعد للاستبيان ، وحزمة واحدة من المناديل ، وكيس بلاستيكي بيولوجي لإفراز الأنف.
  5. قم بإجراء نقاط النهاية السريرية باتباع الخطوات أدناه. كرر ARM و PNIF و PERF و FEV1 الاختبارات قبل التجربة وبعد 60 دقيقة و 120 دقيقة. تأكد من أن المشاركين يكملون استبيان TNSS كل 30 دقيقة (الشكل 3). لراحة المشاركين ، قم بإجراء الاختبارات بشكل فردي في غرفة بجوار AEC.
    ملاحظة: لإجراء اختبار فعال ، اطلب من المشاركين دخول المقصورة كل 10 دقائق. نتيجة لذلك ، سيتم أخذ القياسات لكل موضوع في أوقات حقيقية مختلفة ، حيث يقضي كل مريض ما مجموعه 120 دقيقة داخل AEC. كما يسمح التحول الزمني للموظفين بمساعدة المشاركين والتفاعل معهم أثناء عملية الاختبار. في المجموع ، تعمل AEC لمدة 210 دقيقة تقريبا.
    1. إفراز الأنف (معلمة موضوعية)
      ملاحظة: يجب أن يكون لدى المشاركين عبوات متطابقة من المناديل والأكياس البلاستيكية. هذا ضروري لمقارنة الأوزان.
      1. اطلب من المشاركين وضع أي مناديل مستعملة في كيس بلاستيكي. بعد الانتهاء من تحدي 2 ساعة ، اطلب من المشاركين أيضا وضع أي مناديل غير مستخدمة في نفس الحقيبة. إذا لزم الأمر ، قم بتوفير مناديل وأكياس بلاستيكية إضافية.
      2. اجمع كل الحقائب بعد انتهاء التجربة. تحديد وزن إفرازات الأنف عن طريق وزن المناديل المستخدمة في الأكياس البلاستيكية. اطرح وزن المناديل والأكياس البلاستيكية غير المستخدمة من كل قياس للحصول على وزن إفرازات الأنف (الشكل 4 أ).
    2. مسح أعراض الأنف (تقييم شخصي)
      1. اعرض أسئلة الاستطلاع على شاشة التلفزيون.
      2. اطلب من المريض إجراء تقييم ذاتي قبل التحدي وكل 30 دقيقة أثناء التحدي عن طريق تحديد الرقم الموجود على جهاز التحكم عن بعد والذي يتوافق مع شدة كل عرض (سؤال). تقييم أعراض الأنف بناء على مسح إجمالي درجة أعراض الأنف (TNSS) (الجدول 1).
      3. أرسل إلى المشارك بريدا إلكترونيا يحتوي على استبيان TNSS. اطلب منهم إكمال الاستبيان في المنزل في 4 ساعات و 24 ساعة بعد التحدي وإرسال النتائج.
      4. بعد انتهاء التحدي ، قم بتنزيل الإجابات ، واحسب النتيجة الإجمالية لكل استطلاع (الشكل 4 ب).
    3. قياس الأنف الصوتي (ARM) (معلمة موضوعية)
      ملاحظة: من أجل حساب الاختلافات في الحد الأدنى من مساحة المقطع العرضي (MCA) ، يجب حفظ جميع قياسات مشارك واحد في ملف واحد. خلاف ذلك ، لن يكون التحليل ممكنا.
      1. قم بإجراء الاختبار ثلاث مرات: قبل التحدي ، و 60 دقيقة بعد التحدي ، و 120 دقيقة بعد التحدي.
      2. ضع الطرف المناسب لرأس مقياس الأنف مقابل فتحة الأنف (أزرق لفتحة الأنف اليسرى). تحقق مما إذا كانت ضيقة. اطلب من المشارك أن يحبس أنفاسه لمدة 3 ثوان ، ثم ابدأ البرنامج.
        ملاحظة: في حالة وجود نتيجة غير واضحة ، كرر الاختبار.
      3. كرر لفتحة الأنف الأخرى مع الطرف المناسب (أحمر لفتحة الأنف اليمنى).
      4. بعد انتهاء التحدي ، احسب MCA (الشكل 4C).
    4. ذروة تدفق الشهيق الأنفي (PNIF) (معلمة موضوعية)
      ملاحظة: يقيس PNIF مباشرة تدفق الهواء الأنفي أثناء الإلهام الأقصى ويحدد درجة انسداد الأنف.
      1. قم بإجراء الاختبار ثلاث مرات: قبل التحدي ، و 60 دقيقة بعد التحدي ، و 120 دقيقة بعد التحدي.
      2. اطلب من المشارك تفريغ رئتيه بعمق. بعد ذلك ، ضع قناع مقياس التدفق الشهيقي القابل للتصرف المتصل بمقياس التدفق على وجوههم ، واطلب منهم التنفس من خلال أنفهم إلى أقصى حد (الشكل 4 د).
      3. تأكد من أن مقياس التدفق الشهيقي في وضع أفقي طوال الاختبار بأكمله. سجل متوسط أفضل ثلاثة قياسات.
    5. ذروة معدل تدفق الزفير PEFR (معلمة السلامة)
      ملاحظة: PEFR هو مؤشر موثوق لكفاية التهوية وكذلك انسداد تدفق الهواء.
      1. قم بإجراء الاختبار ثلاث مرات: قبل التحدي ، و 60 دقيقة بعد التحدي ، و 120 دقيقة بعد التحدي.
      2. اطلب من المشارك أن يأخذ نفسا عميقا قدر الإمكان ، وضع شفتيه حول طرف مادة تدفق الذروة القابل للتصرف ، والزفير بسرعة وقوة (الشكل 4E).
      3. سجل متوسط أفضل ثلاثة قياسات.
      4. بعد انتهاء التحدي ، زود المشارك ب PFM. اطلب منهم إجراء الاختبار في المنزل في 4 ساعات و 24 ساعة بعد التحدي وإرسال النتائج.
    6. قياس التنفس (معلمة الرئة للسلامة)
      ملاحظة: يتم إجراء قياس التنفس وفقا لمعايير الجمعية الأوروبية للجهاز التنفسي (ERS)22 لتقييم السلامة ومراقبة انسداد الشعب الهوائية المحتمل23.
      1. قم بإجراء الاختبار ثلاث مرات: قبل التحدي ، و 60 دقيقة بعد التحدي ، و 120 دقيقة بعد التحدي.
      2. قبل القياس ، اضبط المعلمات على مقياس التنفس لكل مشارك: الجنس والعمر والوزن والطول.
      3. اطلب من المشارك الجلوس ووضع سدادة الأنف. بعد ذلك ، اطلب من المشارك وضع شفتيه حول طرف مقياس التنفس القابل للتصرف والتنفس بهدوء وحذر.
      4. اطلب من المشارك أن يأخذ نفسا عميقا وزفيرا قويا دون تأخير لا داعي له ، والذي لا يمكن مقاطعته إلا عندما يعطي مقياس التنفس إشارة. كرر 3x.
      5. بعد فحص جميع المشاركين ، قم بتنزيل النتائج وتسجيل حجم الزفير القسري في الثانية الأولى (FEV1) (الشكل 4F).
  6. إذا تدهورت معايير رفاهية المشارك أو سلامته بشكل كبير أثناء تحدي مسببات الحساسية ، فقم بإيقاف الاختبار على الفور.
  7. حافظ على سلامة المشاركين وراحتهم بعد مغادرة مرفق AEC من خلال تزويدهم بأدوية الإنقاذ (إذا لزم الأمر).
  8. إجراء مكالمات متابعة السلامة مع كل مشارك بعد 24 ساعة من التحدي.

النتائج

تمت مراقبة بيئة AEC طوال وقت التشغيل لعدد المواد المسببة للحساسية (p / m3) ، ودرجة الحرارة ، والرطوبة ، وتركيز CO 2 (الشكل 2). تم العثور على مستويات مسببات الحساسية HDM لتكون مستقرة (الشكل 2A). بالإضافة إلى ذلك ، تم عرض تجربة لم يتم فيها توزيع أي مواد مسببة للحساسية ، مع جزيئات في حدود 0-20 ميكرومتر وعدد الجسيمات بحد أقصى 50 p / m3 (الشكل 2A). كان هناك تدفق للجسيمات الناشئة من المشاركين الذين يدخلون AEC ، مما أدى إلى حوالي 100 p / m3 للمشاركين ال 15 مقارنة بغرفة فارغة. ونتيجة لذلك ، تضمنت القيم التي تم قياسها بواسطة LPC أثناء التجربة التركيز المستهدف بتدفق حوالي 100 p / m3.

تمت مقارنة البيانات المزدوجة مع اختبار Mann-Whitney U. اعتبرت القيم ذات دلالة إحصائية لجميع الاختبارات مع p < 0.05. تم إجراء الحسابات الإحصائية ، وتم إنشاء الرسوم البيانية باستخدام برنامج الرسوم البيانية.

تم تضمين مجموعتين في الدراسة لإظهار الفرق بين النتائج الإيجابية والسلبية: ثمانية أفراد يعانون من حساسية HDM يعانون من أعراض التهاب الأنف التحسسي (AR) وسبعة أفراد أصحاء (HC) بدون حساسية. يعرض الجدول التكميلي 1 معايير الإدراج والاستبعاد ، فضلا عن خصائص المشاركين. تعرض المشاركون ل HDM بتركيز 5000 p / m3 لمدة 120 دقيقة ، وفقا للتحقق من صحة ALL-MEDAEC 20.

خضع جميع المشاركين للاختبارات التالية (ARM ، PNIF ، PERF ، قياس التنفس) وأكملوا أسئلة TNSS ، وتم جمع تصريفاتهم الأنفية. كان وزن TNSS وإفرازات الأنف أعلى بشكل ملحوظ في أفراد AR مقارنة بمجموعة HC (الشكل 4A ، B). وصل TNSS إلى قيم الذروة بعد 60 دقيقة من التعرض ثم استقر (p < 0.0001). بالإضافة إلى ذلك ، كان وزن إفراز الأنف أعلى بكثير في مجموعة AR (p < 0.0001). لوحظ ضعف سالكية مجرى الهواء في قياس الأنف الصوتي. انخفض MCA بشكل ملحوظ بعد القياس الأول عند 60 دقيقة عند مقارنة مجموعة AR بمجموعة HC. من تلك النقطة فصاعدا حتى نهاية التحدي ، ظلت القيم مستقرة (p < 0.001). واتفق ذلك مع قياسات الصندوق، التي لوحظ فيها انخفاض كبير عند نفس التركيزات (p < 0.01) (الشكل 4C، D).

تم قياس FEV1 و PEFR خلال تحدي AEC (الشكل 4E ، F). بالإضافة إلى ذلك ، قام المشاركون بقياس PEFR في المنزل في 4 ساعات و 24 ساعة بعد التحدي وأعادوا النتائج عن طريق البريد. كانت القيم ضمن النطاق الطبيعي وظلت مستقرة أثناء التحدي ولمدة تصل إلى 24 ساعة بعد ذلك. لم يتم العثور على فروق ذات دلالة إحصائية بين الأشخاص الذين يعانون من الحساسية مع AR و HCs ، مما يشير إلى أن التعرض لمسببات الحساسية HDM لم يكن له أي آثار على وظائف الرئة في أي من المجموعتين.

figure-results-2847
الشكل 1: التخطيط التخطيطي ل AEC. يدخل المشاركون من خلال غرفة معادلة الضغط. يتم توزيع الجسيمات من خلال نظام فتحات التهوية بواسطة وحدة تغذية يتم التحكم فيها بواسطة الكمبيوتر. تتم مراقبة ظروف AEC (تركيز الجسيمات ، تركيز CO2 ، الرطوبة ، ودرجة الحرارة) باستمرار بواسطة LPC. تتم مراقبة المشاركين من خلال النافذة والاتصال الصوتي. الاختصارات: AEC = غرفة التعرض للحساسية. CO2 = ثاني أكسيد الكربون ؛ LPC = عداد جسيمات الليزر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-3626
الشكل 2: النتائج التمثيلية لاستقرار البيئة في AEC أثناء التجربة. (أ) تم تقييم تركيز الجسيمات ووجد أنه في حدود 0-20 ميكرومتر بواسطة LPC. كانت القيمة المستهدفة لتركيز مسببات الحساسية HDM 5000 p / m3. للمقارنة ، يتم عرض تجربة لم يتم فيها استخدام مسببات الحساسية. ب: الرطوبة، ج: تركيز ثاني أكسيد الكربون 2، (د) ودرجة الحرارة موضحة. الاختصارات: °C = درجة مئوية ؛ CO2 = ثاني أكسيد الكربون ؛ HDM = سوس غبار المنزل ؛ LPC = عداد جسيمات الليزر ؛ م = متر ؛ دقيقة = دقيقة (دقائق) ؛ ع = الجسيمات ؛ جزء في المليون = أجزاء في المليون. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-4588
الشكل 3: قائمة الاختبارات التي يتعين إجراؤها أثناء تحدي AEC ، مع النقاط الزمنية (لكل مشارك). لضمان تنفيذ الاختبارات الفردية في الوقت المناسب ، يجب على المشاركين دخول AEC كل 10 دقائق. نتيجة لذلك ، سيتم إجراء الاختبار لكل مشارك في أوقات حقيقية مختلفة. علاوة على ذلك ، يسمح التحول الزمني للموظفين بمساعدة المشاركين أثناء الاختبار. الاختصارات: AEC = غرفة التعرض للحساسية. ARM = قياس الأنف الصوتي. FEV1 = حجم الزفير القسري في الثانية الأولى ؛ PEFR = ذروة معدل تدفق الزفير ؛ PNIF = ذروة تدفق الشهيق الأنفي. TNSS = إجمالي درجة أعراض الأنف. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-5473
الشكل 4: النتائج التمثيلية لنقاط النهاية المختلفة خلال تحدي AEC في المرضى الذين يعانون من AR (الأشرطة الحمراء) و HCs (الأشرطة الزرقاء). تعرض الأشخاص الذين يعانون من الحساسية التي يسببها HMD (مع AR) و HC ، بما في ذلك ثمانية وسبعة مشاركين ، على التوالي ، لتركيزات مسببات الحساسية HDM البالغة 5000 p / m3 في AEC. (أ) وزن إفراز الأنف ، (ب) أعراض الأنف ، (ج) MCA في قياس الأنف السمعي ، (د) PNIF ، (ه) PEFR ، و (F) FEV1 . يتم تقديم النتائج كتكرارات فردية مع القيمة المتوسطة. الاختصارات: AEC = غرفة التعرض للحساسية. AR = التهاب الأنف التحسسي. FEV1 = حجم الزفير القسري في الثانية الأولى ؛ HC = ضوابط صحية ؛ HDM = سوس غبار المنزل ؛ ز = غرام (ق) ؛ MCA = الحد الأدنى من مساحة المقطع العرضي ؛ ع = الجسيمات ؛ PEFR = ذروة معدل تدفق الزفير ؛ PNIF = ذروة تدفق الشهيق الأنفي. TNSS = إجمالي درجة أعراض الأنف. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

عَرَضالسؤال المعروض على شاشة التلفزيوندرجة TNSS لكل عرض
سيلان الأنفقيم كيف كان سيلان أنفك في هذه اللحظة0 = لا شيء (الأعراض غائبة تماما)
انسداد الأنفقيم كيف كان احتقان الأنف في هذه اللحظة1 = خفيف (الأعراض موجودة ، ولكنها ليست مؤلمة)
العطسقيم كيف كان عطسك في هذه اللحظة2 = معتدل (أعراض مؤلمة ، ولكن مقبولة)
حكة الأنفقيم كيف كانت حكة الأنف في هذه اللحظة3 = شديد (أعراض يصعب تحملها ، أقصى شدة)
0 - 12 نقطة المجموع

الجدول 1: الأعراض وطريقة النتيجة ل TNSS. تم استخدام نظام تصنيف من قبل المشاركين لتقييم أربعة أعراض. يتم تقديم نتائج الاستطلاع كقيمة واحدة - درجة إجمالية للأسئلة الأربعة لفترة معينة (قبل التجربة وكل 30 دقيقة من التجربة). اختصار: TNSS = مجموع نقاط أعراض الأنف.

الجدول التكميلي 1: معايير الإدراج والاستبعاد للدراسة وخصائص المشاركين المسجلين في الدراسة. ثمانية مرضى يعانون من أعراض AR ، الناجمة عن HDM ، وسبعة مرضى بدون أعراض (HCs). الاختصارات: AR = التهاب الأنف التحسسي. Df = ديرماتوفاجويدس فارينا. Dp = جلدية بتيرونيسينوس. F = أنثى ؛ HC = تحكم صحي ؛ HDM = سوس غبار المنزل ؛ kU / L = كيلو وحدة / لتر ؛ م = ذكر ؛ md = متوسط القطر ؛ sIgE = الغلوبولين المناعي المحدد E ؛ SPT = اختبار وخز الجلد. الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الملف.

Discussion

هناك عدد محدود من مرافق AEC تعمل على مستوى العالم. تم اختبار مجموعة متنوعة من مسببات الحساسية في هذه المرافق ، وأكثرها شيوعا هو حبوب لقاح عشبة الرجيد وحبوب لقاح البتولا وحبوب لقاح العشب وحبوب لقاح الأرز الياباني و HDM. لا يتم تصنيف AECs كمنتجات طبية (وفقا للتوجيه 2001/83 / EC) أو الأجهزة الطبية (وفقا لتوجيه الأجهزة الطبية 93/42 / EEC) 24. تعتبر AECs أداة محتملة لقياس نقاط النهاية الأولية في دراسات تحديد الجرعة وفقا لإرشادات وكالة الأدوية الأوروبية (EMA) لتطوير منتجات AIT25,26.

الخطوات الحاسمة في البروتوكول
من الضروري توفير تركيزات مستقرة وعالية بما فيه الكفاية من مسببات الحساسية طوال التجربة بأكملها في AEC. تظهر الأبحاث أن مرضى AR لا تظهر عليهم أعراض الحساسية بتركيزات منخفضة من مسببات الحساسية20. حتى تركيزات مسببات الحساسية المعتدلة لا تؤدي إلى ظهور الأعراض ذات الصلة27. قد تسبب التركيزات العالية جدا ردود فعل شديدة، مثل تضيق الشعب الهوائية. لذلك ، فإن تركيزات مسببات الحساسية المثلى والمستدامة هي المفتاح لتجربة ناجحة. نظرا لأن AECs تختلف (كما هو موضح في المقدمة) ، يجب التحقق من صحة كل مادة مسببة للحساسية مستخدمة. تم التحقق من صحة ALL-MED AEC لمسببات الحساسية HDM. وجد أن نقطة النهاية المثلى لتقييم الأعراض كانت 120 دقيقة ، حيث وصلت الأعراض إلى هضبة بعد 60-90 دقيقة. تم اختيار وقت التحدي الأمثل وتركيز مسببات الحساسية بناء على التحديات مع تركيزات HMD المختلفة في أوقات مختلفة20. والجدير بالذكر أن الأعراض الحادة قد تحدث بعد تحدي مسببات الحساسية ، وخاصة تفاقم الربو.

وفقا للبروتوكول ، يكمل المشاركون استطلاعات TNSS في خمس نقاط زمنية أثناء التجربة. من الضروري ألا يروا ردودهم السابقة لتجنب الإيحاء الذاتي. لذلك ، إذا تم إكمال الاستبيانات على الورق ، فيجب جمع الاستبيانات المكتملة على الفور.

التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها للطريقة
يمكن استخدام نقاط نهاية سريرية مختلفة اعتمادا على الأعراض التي يجب ملاحظتها أثناء التحدي (على سبيل المثال ، إجمالي درجة أعراض العين [TOSS] لتقييم التهاب الأنف والملتحمة أو درجة الأعراض غير الأنفية [NNSS] لتقييم الجهاز التنفسي).

يمكن استخدام قياس الأنف كبديل لقياس الأنف الصوتي. تستخدم كلتا الطريقتين لاختبار سالكية الأنف بموضوعية. قياس الأنف هو اختبار قياسي لتجويف الأنف. يتيح إجراء تقييم موضوعي لسالكية الممرات الأنفية عن طريق قياس المقاومة في تجويف الأنف أثناء الاستنشاق والزفير. قياس الأنف الصوتي هو دراسة حجم تجاويف الأنف. يتم تقييم سالكية تجويف الأنف بواسطة الموجات فوق الصوتية. لا توجد بيانات متاحة حول الطريقة الأكثر دقة لتحديات AEC28,29.

تمثل مجموعة سائل الأنف من إسفنجة رغوية واحدة وقياسات مستوى محددة من IgA1 و IgA2 و IgG و IgG و IgG4 و IgE اختبارات إضافية يمكن إجراؤها خلال تحدي AEC30,31. يمكن أيضا جمع خلايا المصل والدم المحيطي أحادي النواة (PBMCs) لتحديد الآليات الجزيئية AIT بشكل أكبر.

لا يسمح للمرضى باستخدام الأدوية التي قد تؤثر على ظهور أعراض الحساسية. أهم الفئات ، إلى جانب الحد الأدنى من الأوقات بين الجرعة الأخيرة وتحدي AEC ، هي مضادات الهيستامين (7 أيام) ، الكورتيكوستيرويدات المستنشقة و / أو الأنف (14 يوما) ؛ كرومولين مستنشق و / أو عن طريق الأنف (14 يوما) ، والكورتيكوستيرويدات الجهازية و / أو أستميزول (30 يوما) 18.

حدود الطريقة
يعد اختبار تحدي AEC أكثر تكلفة من اختبارات الاستفزاز المباشر (الأنف والملتحمة والشعب الهوائية) ، مما يعني أنه لا يستخدم في الممارسة اليومية. تختلف AECs من حيث مصادر مسببات الحساسية ، وقياس الجسيمات الموزعة ، ووقت التجربة ، مما يجعل من الصعب للغاية مقارنة الدراسات. عندما تم استخدام مسببات الحساسية HDM في AEC ، تم تطبيق مصادر مواد مختلفة: Der p 1 و Der f 1 ، مادة برازية Dp تحتوي بشكل أساسي على Der p1 بنسبة 20: 1 محددة مسبقا من Der p 1 إلى Der p 232 ، HDM مسببات الحساسية SQ 503 من الجسم والبراز الذي يحتوي على Der p 1 و Der p 233 ، ومقتطفات Dp. في ALL-MED AEC ، تم استخدام أجسام سوس Dp المجففة والمنقاة ، بما في ذلك Der p 1 و Der p 2 ،20. لذلك ، يجب إدخال معايير موحدة في المستقبل بحيث يمكن مقارنة النتائج بين AECs.

أهمية الطريقة فيما يتعلق بالطرق الحالية / البديلة
AECs مفيدة للغاية ولكنها ممثلة تمثيلا ناقصا في طريقة الجسم الحي في تشخيص الحساسية. بالإضافة إلى ذلك ، كنقطة نهاية لتقييم التجارب السريرية ، تظهر AECs تفوقا كبيرا على التقييمات الكلاسيكية "في الميدان". من المهم فحص الارتباطات بين نقاط النهاية السريرية المختلفة ، لا سيما تشابه المعلمات الذاتية التي تم تقييمها من قبل المرضى (TNSS) والمقاييس الموضوعية (قياس الأنف الصوتي ، PNIF ، إفرازات الأنف) التي جمعها الباحث ، كخطوة أولية في التحقق من صحة نتائج AEC مقابل تلك التي تم الحصول عليها في إعداد "ميداني".

التطبيقات أو الاتجاهات المستقبلية للطريقة
تقدم AECs طريقة ممكنة لتقسيم المرضى إلى مستجيبين محتملين وغير مستجيبين. تظهر هذه الطريقة وعدا كبيرا لتسريع التطورات السريرية في كل من العلاج الدوائي والعلاج المناعي لأمراض الحساسية34. وبالتالي ، كانت AECs واحدة من مجالات الاهتمام الرئيسية في السنوات الأخيرة. يمكن أن تكون AECs مفيدة في الدراسات طويلة الأجل عندما لا يكون من الممكن تقييم التعرض الطبيعي بسبب انخفاض عدد مسببات الحساسية.

Disclosures

يقدم ماريك جوتل تقارير عن الرسوم الشخصية من ALK-Abello و Allergopharma و Stallergenes و Anergis و Allergy Therapeutics و Leti و HAL و GSK و Novartis و Teva و Takeda و Chiesi. المؤلفون الآخرون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

تم إعداد المنشور في إطار مشروع ممول من الأموال الممنوحة من وزارة العلوم والتعليم العالي في برنامج "المبادرة الإقليمية للتميز" للسنوات 2019-2022 ، المشروع رقم 016 / RID / 2018/19 ، مبلغ التمويل 11 998 121.30 زلوتي بولندي ، وعن طريق الإعانة الفرعية. A020.21.018 من الجامعة الطبية في فروتسواف ، بولندا.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Allergen exposure chamber (AEC)custom made---with the air supply duct (with HEPA filters) and allergen blew into the AEC through a computer-controlled feeder
Acoustic rhinometer GM Instruments (Irvine, UK)A1 clinical/ reseachwith reusable plastic tips, contoured for the right and left nostrils
Air humidifierOhyamaSHM120D
Air quality meterAZ InstrumentGreen Eye VZ 7798termometer, humidity and CO2 meter
Air-conditioning DeLonghiCKP 20EBtemperature range 18 - 25 °C
Ceiling  fansArgos Manhattan Ceiling Fan - 432/8317
Computer-controlled feeder station custom made---with control of "injection length", "break between injections ", “air supply”
Disposable coveralls VWR (Radnor, Pennsylvania, United States)with hoodies
Floor fansAEGTVL 5537, column
Graphing programGraphPad Software Inc.Graph Pad Prism, v. 9.4.0
House dust mite (HDM)Allergopharma (Reinbek, Germany)customized orderdried, purified Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) mite bodies, stored at 4 °C until use
Inspiratory flow meter Clement Clarke International Ltd. (Harlow, UK)portable inspiratory flow meterwith the disposable mask (size M), measuring inspiratory flow between 30 - 370 L/ min
Laser particle counter (LPC)Lighthouse Worldwide Solutions (USA)SOLAIR Boulder Counte
Microphone systemAunaVHF wireless microphone system
Peak flow matter (PFM)CareFusion (Basingstoke, UK) MicroPeak with a standard range of 60 – 900 L/ minwith the disposable paper tips
Remote controls for filling questionnairesTurning TechnologiesPilot TT ResponseCard LT, SAP: G040602A010a set of 32 remote controls for TT LT tests
SpirometerMedizintechnik AG (Zurich, Switzerland)EasyOne 2001, NDDwith the disposable paper tips; the spirometer should meet the ISO 26 782: 2009 standard; daily calibration of the spirometer is required
TV screenLevelLevel one 32"
VacuumSiemensextreme silencePower VSQ5X1230with the HEPA filters

References

  1. Clark, D., Karpecki, P., Salapatek, A. M., Sheppard, J. D., Brady, T. C. Reproxalap improves signs and symptoms of allergic conjunctivitis in an allergen chamber: A real-world model of allergen exposure. Clinical Ophthalmology. 16, 15-23 (2022).
  2. Hossenbaccus, L., Steacy, L. M., Walker, T., Ellis, A. K. Utility of environmental exposure unit challenge protocols for the study of allergic rhinitis therapies. Current Allergy and Asthma Reports. 20 (8), 34(2020).
  3. Hossenbaccus, L., Ellis, A. K. The use of nasal allergen vs allergen exposure chambers to evaluate allergen immunotherapy. Expert Review of Clinical Immunology. 17 (5), 461-470 (2021).
  4. Schröder, J., Mösges, R. Conjunctival provocation tests: Prediction of seasonal allergy. Current Opinion in Allergy and Clinical Immunology. 18 (5), 393-397 (2018).
  5. Gauvreau, G. M., et al. Allergen provocation tests in respiratory research: Building on 50 of experience. European Respiratory Journal. 60 (2), 2102782(2022).
  6. Hohlfeld, J. M., et al. Diagnostic value of outcome measures following allergen exposure in an environmental challenge chamber compared with natural conditions. Clinical and Experimental Allergy. 40 (7), 998-1006 (2010).
  7. Rösner-Friese, K., Kaul, S., Vieths, S., Pfaar, O. Environmental exposure chambers in allergen immunotherapy trials: Current status and clinical validation needs. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 135 (3), 636-643 (2015).
  8. Jacobs, R. L., et al. Responses to ragweed pollen in a pollen challenge chamber versus seasonal exposure identify allergic rhinoconjunctivitis endotypes. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 130 (1), 122-127 (2012).
  9. Khayath, N., et al. Validation of Strasbourg environmental exposure chamber (EEC) ALYATEC® in mite allergic subjects with asthma. Journal of Asthma. 57 (2), 140-148 (2020).
  10. Bousquet, J., et al. Onset of action of the fixed combination intranasal azelastine-fluticasone propionate in an allergen exposure chamber. The Journal of Allergy and Clinical Immunology: In Practice. 6 (5), 1726-1732 (2018).
  11. Pfaar, O., et al. Technical standards in allergen exposure chambers worldwide - An EAACI Task Force Report. Allergy. 76 (12), 3589-3612 (2021).
  12. Rønborg, S. M., Mosbech, H., Poulsen, L. K. Exposure chamber for allergen challenge. A placebo-controlled, double-blind trial in house-dust-mite asthma. Allergy. 52 (8), 821-828 (1997).
  13. Yang, W. H., et al. Cat allergen exposure in a naturalistic exposure chamber: A prospective observational study in cat-allergic subjects. Clinical and Experimental Allergy. 52 (2), 265-275 (2022).
  14. Hamasaki, S., et al. Characteristics of the Chiba environmental challenge chamber. Allergology International. 63 (1), 41-50 (2014).
  15. Okuma, Y., et al. Persistent nasal symptoms and mediator release after continuous pollen exposure in an environmental challenge chamber. Annals of Allergy, Asthma & Immunology. 117 (2), 150-157 (2016).
  16. Zuberbier, T., et al. Global Allergy and Asthma European Network (GA(2)LEN) European Union Network of Excellence in Allergy and Asthma. Validation of the Global Allergy and Asthma European Network (GA2LEN) chamber for trials in allergy: Innovation of a mobile allergen exposure chamber. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 139 (2), 1158-1166 (2017).
  17. Bergmann, K. C., et al. First evaluation of a symbiotic food supplement in an allergen exposure chamber in birch pollen allergic patients. World Allergy Organization Journal. 14 (1), 100494(2020).
  18. Ellis, A. K., Steacy, L. M., Hobsbawn, B., Conway, C. E., Walker, T. J. Clinical validation of controlled grass pollen challenge in the Environmental Exposure Unit (EEU). Allergy, Asthma, and Clinical Immunology. 11 (1), 5(2015).
  19. Day, J. H., Briscoe, M., Widlitz, M. D. Cetirizine, loratadine, or placebo in subjects with seasonal allergic rhinitis: Effects after controlled ragweed pollen challenge in an environmental exposure unit. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 101 (5), 638-645 (1998).
  20. Zemelka-Wiacek, M., Kosowska, A., Winiarska, E., Sobanska, E., Jutel, M. Validated allergen exposure chamber is plausible tool for the assessment of house dust mite-triggered allergic rhinitis. Allergy. 78 (1), 168(2022).
  21. Lighthouse World Solutions. , Available from: https://www.golighthouse.com (2022).
  22. Graham, B. L., et al. Standardization of Spirometry 2019 Update. An Official American Thoracic Society and European Respiratory Society Technical Statement. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 200 (8), 70-88 (2019).
  23. Buslau, A., et al. Can we predict allergen-induced asthma in patients with allergic rhinitis. Clinical and Experimental Allergy. 44 (12), 1494-1502 (2014).
  24. European Medicines Agency. Guideline for clinical development of allergen immunotherapy products CHMP/EWP/18504/2006. European Medicines Agency. , (2006).
  25. Pfaar, O., et al. Recommendations for the standardization of clinical outcomes used in allergen immunotherapy trials for allergic rhinoconjunctivitis: An EAACI Position Paper. Allergy. 69 (7), 854-867 (2014).
  26. Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP). Guideline on the clinical development of products for specific immunotherapy for the treatment of allergic diseases. European Medicines Agency. , (2008).
  27. Krug, N., et al. Validation of an environmental exposure unit for controlled human inhalation studies with grass pollen in patients with seasonal allergic rhinitis. Clinical and Experimental Allergy. 33 (12), 1667-1674 (2003).
  28. Passali, D., Bellussi, L. Monitoring methods for local nasal immunotherapy. Allergy. 52 (33), 22-25 (1997).
  29. Keck, T., Wiesmiller, K., Lindemann, J., Rozsasi, A. Acoustic rhinometry in nasal provocation test in perennial allergic rhinitis. European Archives of Oto-rhino-laryngology. 263 (10), 910-916 (2006).
  30. Shamji, M. H., et al. Differential induction of allergen-specific IgA responses following timothy grass subcutaneous and sublingual immunotherapy. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 148 (4), 1061-1071 (2021).
  31. Thwaites, R. S., et al. Absorption of nasal and bronchial fluids: Precision sampling of the human respiratory mucosa and laboratory processing of samples. Journal of Visualized Experiments. (131), e56413(2018).
  32. Zieglmayer, P., et al. Clinical validation of a house dust mite environmental challenge chamber model. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 140 (1), 266-268 (2017).
  33. Lueer, K., et al. efficacy and repeatability of a novel house dust mite allergen challenge technique in the Fraunhofer allergen challenge chamber. Allergy. 71 (12), 1693-1700 (2016).
  34. Pfaar, O., et al. Allergen exposure chambers: Harmonizing current concepts and projecting the needs for the future - An EAACI Position Paper. Allergy. 72 (7), 1035-1042 (2017).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

193 AEC AR HDM PEFR PNIF Phleum pratense TNSS

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved