وأيد هذا البحث المقدمة هنا من نهر تشارلز.

<ol>
	<li>Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+of+substances+to+laboratory+animals:+routes+of+administration+and+factors+to+consider.">Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider.</a> JAALAS. 50, 600-613 (2011).</li><li>Diehl, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood,+including+routes+and+volumes.">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J. Appl. Toxicol. 21, 15-23 (2001).</li><li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taming+anxiety+in+laboratory+mice.">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nat. Methods. 7, 825-826 (2010).</li><li>Maurer, B. M., D&#246;ring, D., Scheipl, F., K&#252;chenhoff, H., Erhard, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+gentling+programme+on+the+behaviour+of+laboratory+rats+towards+humans.">Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 111, 329-341 (2008).</li><li>Cloutier, S., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+conditioning+technique+to+reduce+stress+associated+with+repeated+intra-peritoneal+injections+in+laboratory+rats.">Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 112, 158-173 (2008).</li><li>Romanovsky, A. A., Kulchitsky, V. A., Simons, C. T., Sugimoto, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methodology+of+fever+research:+why+are+polyphasic+fevers+often+thought+to+be+biphasic.">Methodology of fever research: why are polyphasic fevers often thought to be biphasic.</a> Am. J. Physiol. 275, 332-338 (1998).</li><li>Turner, P. V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., Brabb, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+of+substances+to+laboratory+animals:+equipment+considerations,+vehicle+selection,+and+solute+preparation.">Administration of substances to laboratory animals: equipment considerations, vehicle selection, and solute preparation.</a> JAALAS. 50, 614-627 (2011).</li><li>Lukas, G., Brindle, S. D., Greengard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+route+of+absorption+of+intraperitoneally+administered+compounds.">The route of absorption of intraperitoneally administered compounds.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 178, 562-564 (1971).</li><li>AALAS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory Mouse Handbook. , (2009).</li><li>AALAS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> LAT Training Manual. , (2009).</li><li>AALAS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> LATg Training Manual. , (2009).</li><li>Barnett, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Animal Technology. , 440 (2007).</li><li>Baumans, V., Pekow, C. A., Hau, J., Schapiro, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of Laboratory Animal Science. 1, 401-446 (2010).</li><li>Bogdanske, J. J., Hubbard-Van Stelle, S., Riley, M. R., Schiffman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory Mouse Procedural Techniques. , (2011).</li><li>Danneman, P., Suckow, M. A., Brayton, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Mouse. , (2000).</li><li>Sharp, P. E., La Regina, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Rat. , (1998).</li></ol>

الكتاب هم موظفون من نهر تشارلز.

وينبغي النظر إلى هذا البروتوكول كمقدمة لإدارة والتعامل مع الحيوانات مادة تهدف إلى استكمال التدريب العملي على التدريب المقدم في منشأة الباحث. وسائل ضبط النفس التي سيتم استخدامها وينبغي النظر في طرق إدارة المواد في التصميم التجريبي وعندما يتم كتابة بروتوكول البحث أو الأخلاق بروتوكول اللجنة. التدريب في الإجراءات المتعلقة بالحيوان هو أمر حيوي لنجاح البحث. لتنفيذ معظم التجارب، لا بد من التعامل معها من قبل موظفي البحوث الحيوانات، وكلما كان ذلك أفضل التعامل مع الحيوانات، وأقل شدد على الحيوان 3. يمكن تعويد الحيوانات على الاتصال البشري لطيف خفض التوتر وتجعل الحيوانات أكثر الموضوعات البحثية لين العريكة 4،5. وقد تبين لمعالجة الإجهاد يؤثر على بعض أنواع البحوث 6 و أنه من الممكن أنها يمكن أن تؤثر الآخرين أيضا. ينبغي أن يتم ضبط النفس من القوارض مع الحذر، ولكن التعامل مع شركة (أ مؤقتقبضة من المرجح أن يؤدي إلى إصابة القوارض ومعالج) وينبغي أن يكون لأقصر مدة العملية. عادة ما يتم اختيار أساليب ضبط النفس استنادا إلى حجم الحيوان أو سعى الوصول. على سبيل المثال، التعامل مع الفئران الكبار من القفا، على الرغم من ذلك ممكنا، وكثيرا ما التقى مع مقاومة قوية من قبل الجرذان، وخاصة إذا كان المعالج هو عديم الخبرة. يمكن عقد الماوس أو الفئران باليد جعل الوصول إلى عروق الذيل صعبة وغالبا ما يتم اختيار جهاز ضبط النفس للحفاظ على الحيوانات بأسرع ما زالت. عندما تعامل مع الحيوانات الباحثين، انهم يسعون في كثير من الأحيان لإدارة مركب بيولوجي أو لمزيد من الدراسة. يمكن للمسار إدارة المواد تؤثر على الاستيعاب، التوافر البيولوجي، ومدى صلاحيتها للتجربة معينة. يجب الإلمام طرق مختلفة توفر للباحثين لديهم القدرة على إدارة مضمونها في أفضل طريقة ممكنة لأبحاثهم. على سبيل المثال، الطريق الذي يعزز امتصاص السريع للمادةمثل الوريد أو داخل الصفاق، لا ينبغي ان تستخدم اذا كان الباحث يريد أن يقر استخدام هذه المادة بطريقة أبطأ المفعول. ويمكن الاطلاع على المشاركات من بعض هذه التقنيات والاعتبارات لحجم والمعدات والمذاب في ورقتين من تيرنر وآخرون 1،7 كلما المواد هي لأن تدار على القوارض المختبر، ينبغي إيلاء الاعتبار لحجم مناسب من المعدات وحجم مادة (المبينة في الجدول رقم 1). بشكل غير صحيح قد المعدات أو كميات كبيرة الحجم يؤدي إلى عدم الراحة، والإصابة، أو وفاة الحيوان. عموما، تدار المواد المعقمة هي حقنا، إلا إذا كانت أهداف البحث من شأنه أن يجعل هذا الأمر مستحيلا (أي دراسات البكتيرية). يجب أن تكون المركبات والمستحضرات البيولوجية في المذاب أو مركبة التي سيكون لها تأثير أقل على الحيوان. A الرقم الهيدروجيني الفسيولوجية (7.3 -7.4) هو عادة مقبولة تماما، وخاصة بالنسبة تحت الجلد، العضلي، وintraperitoneal الطرق. قد مستويات الحموضة الفسيولوجية في غير المواد التي تديرها هذه الطرق يؤدي إلى الألم أو نخر وتلف الأنسجة. والتسامح أوسع نطاقات درجة الحموضة مع الطرق المعدة والوريد 7. في القوارض الصغيرة، وهناك اعتبار آخر مهم هو إمكانية تقشعر لها الأبدان إذا أعطيت كميات كبيرة من السوائل درجة حرارة الغرفة. إذا سوائل عن طريق الوريد تدار أو الغشاء البريتونى، وخاصة في دعم حيوان سوء، ينبغي أن تكون درجة حرارة درجة حرارة الجسم لأنها (37 ° C). طرق الإدارة التي تمت مناقشتها في هذا البروتوكول هي تلك التي يشيع استخدامها في العديد من البرامج البحثية، بسيطة لدرجة الماجستير، وعموما لا تتطلب التخدير. طائفة لا حصر لها تقريبا من طرق إدارة ممكنة، ومع ذلك، بما في ذلك، داخل القراب داخل الجمجمة، فوق الجافية، داخل العظم، داخل القصبة الهوائية، وداخل المفصل على سبيل المثال لا الحصر. وينبغي السعي التدريب في هذه الطرق متخصصة في إدارة الناس من ذوي الخوذات البيضاءس ديهم خبرة واسعة مع الطريق ونتائج جيدة. في القوارض، وعادة ما تستخدم الطريق داخل الأنف لدراسة المواد التي أدخلت على الرئتين عن طريق أكثر &quot;طبيعية&quot;؛ طريقة التقطير داخل القصبة الهوائية من. الفئران والجرذان هي تلزم الأنف الاستراحات، الأمر الذي أدى إلى ذلك يستنشق منها كميات صغيرة جدا من السوائل وليس من الصعب، حتى في الحيوانات واعية. يمكن لأن الغشاء المخاطي للأنف وفرة في المعروض مع الأوعية الدموية، والإدارة داخل الأنف من بعض المواد تكون مشابهة لإدارة الوريد. لا ينصح هذا الطريق في الحيوانات مع التهاب الأنف، لكن، وكما يمكن أن تكون ضارة الاستيعاب. قد محاولات لإدارة كميات كبيرة من الطريق داخل الأنف ضيق التنفس يؤدي إلى الغرق أو الحيوان. الحقن العضلي توفير المواد سريعة الامتصاص. يمكن أن يكون تحديا الحقن العضلي في الفئران والجرذان بسبب صغر حجمها والعضلات الصغيرة تبعا لذلك. وأدوا في الساق الخلفيةق. نظرا لاحتمال حدوث ضرر من العصب الوركي، والفخذية الرباعية الرؤوس هو العضلات في الاختيار. على الرغم من أن كلا من تحت الجلد والأدمة الطرق تنطوي على الجلد، وهناك اختلافات بين التوافر البيولوجي للمواد وضعت في الجلد في مقابل تحت الجلد. وغالبا ما يعتبر تحت الجلد الادارة &quot;ترسب&quot; الطريق، مع تباطؤ امتصاص من طرق أخرى، مثل الوريد أو داخل الصفاق. يتم استخدام وحدات التخزين داخل الأدمة إدارة صغيرة جدا من المواد، وعادة المواد مناعة مثل المواد المساعدة مستضد المخاليط. في كلتا الحالتين، يجب أن تكون المواد تدار من درجة الحموضة الفسيولوجية وغير مزعجة. لا ينبغي أن الأدمة تحت الجلد أو الحقن أن يؤديها في القفا، لأن هذا هو موقع يستخدم عادة لتقييد القوارض. غالبا ما تعتبر الوريد والغشاء البريتوني ما يعادلها في القوارض. طرق الوريد من توفير المزيد من الجرعات صAPID امتصاص مركبات، ومع ذلك، في حين ينبغي النظر تعاطيه في التجويف الجنبي يعادل تقريبا تناوله عن طريق الفم 8. ينبغي الحرص مع الغشاء البريتونى مركبات تدار كما أنها قد تسبب الألم إذا مخزنة بطريقة غير سليمة. الطريق الموحد لإدارة شؤون البلعة في الوريد في القوارض هو عن طريق الأوردة الذيل. إذا هو المطلوب الوريد المزمن لمادة، ينبغي النظر في غرس الوريدي أو الشرياني القنيات. وينبغي تسليم المواد تدار عن طريق الوريد جو معقم و مطهر وينبغي أن تظهر لتكون آمنة لإدارة عن طريق الوريد. على سبيل المثال، والمواد التي ربما تتسبب في انحلال الدم، تخثر الدم، التهاب الأوعية الدموية أو ليست مناسبة للإعطاء في الوريد. وغالبا ما تستخدم الطريق بالتزقيم المعدة عن طريق الفم أو لتقليد شائع في الطريق الجرعات البشر. كما يسمح لجرعات دقيقة من المواد بالمقارنة مع تناوله عن طريق الفم من خلال الغذاء أو الماء. التوافر البيولوجي للمركباتوسوف تدار من خلال أنبوب تغذية تختلف عن حالة فدان / صام من الحيوان، وكذلك المذاب أو مركبة من المجمع أو البيولوجية. يجب بالتزقيم أو تغذية الإبر يكون من الحجم المناسب للحيوان المستخدمة، ويجب تنظيف بين الحيوانات، إذا الإبر المتاح بالتزقيم ليست عملية. الإصابات الناجمة عن بالتزقيم ليست غير شائعة، وتشمل ترسب هذه المادة في الرئة أو تمزق المعدة أو المريء. وحاول التدريب وأن تكون تحت إشراف من قبل الطرف من ذوي الخبرة والاضطلاع على الحيوانات الموت الرحيم أولا، ثم تخدير الحيوانات (التي سوف يتم التخلص) قبل بالتزقيم على الحيوانات مستيقظا. يجب أن المحاولات الأولى بالتزقيم على الحيوانات مستيقظا إشراك متوسط ​​الحجم الحيوانات وكميات صغيرة من مادة، مثل المالحة، التي من شأنها أن تسبب إصابات لا إذا كان الإجراء يذهب منحرف. وينبغي تقييم الحيوانات عن كثب بحثا عن علامات على الضيق، مثل يلهث، ثم الازرق، والنزيف، أو اللعاب الزائد، والموت الرحيم بعد بالتزقيم إذا لزم الأمر. إذا euthمطلوب انسيا، ينبغي necropsied الحيوان لتحديد سبب فشل الإجراء بالتزقيم.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> الإبر </td><td> مختلف </td><td> مختلف </td><td> وتباع من قبل كل من الإبر قياس طول و. تحقق سواء قبل الطلب. </td></tr><tr><td> المحاقن </td><td> مختلف </td><td> مختلف </td><td> اختيار الحجم المناسب دائما لوحدة التخزين على أن تدار. </td></tr><tr><td> DecapiCones </td><td> برينتري العلمية </td><td> DC-200، DCL-120، MDC-200 </td><td> تتوفر في أحجام الماوس والفئران. </td></tr><tr><td> القوارض restrainer </td><td> جهاز هارفارد، برينتري العلمية ومختبرات بلاس،، والبعض الآخر </td><td></td><td> المتاحة في زجاجي واضحة من البلاستيك قابل للتعديل، والحجم بالنسبة للفئران والجرذان. </td></tr><tr><td> أنبوب مخروطي 50 مل </td><td> مختلف </td><td> &amp; ملاحظة:س؛ </td><td></td></tr><tr><td> تغذية الإبر </td><td> VWR، بوبر وأولاده </td><td> مختلف </td><td> تناسب قياس طول الإبرة وللحيوانات كما هو موضح أعلاه. كل الإبر التغذية القابل للتصرف والتي يعاد استخدامها متوفرة. </td></tr></tbody></table>

manual restraint and common compound administration routes in mice and rats

أن تكون قادرة على كبح جماح بأمان وفعالية الفئران والجرذان هو جزء مهم من إجراء البحوث. العمل بثقة وإنسانية مع الفئران والجرذان يتطلب الكفاءة في أساليب التعامل مع الأساسية وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع الحيوانات بأمان. وسيتم توضيح بيد واحدة، باليدين، وضبط النفس مع الكائنات ضبط النفس المصممة خصيصا. في كثير من الأحيان، وآخر جزء من البحث أو استخدام اختبار الحيوانات هي الإدارة الفعالة للمركبات على الفئران والجرذان. بالرغم من وجود عدد كبير من الطرق الممكنة الإدارة (محدود فقط من حجم وأجهزة الحيوانية)، لا يتم استخدام معظم بانتظام في مجال البحوث. وهذا الفيديو يوضح العديد من الطرق الأكثر شيوعا، بما في ذلك عن طريق الوريد، العضل، تحت الجلد، وبالتزقيم عن طريق الفم. الهدف من هذه المقالة هو لفضح المشاهد غير مألوف مع هذه التقنيات لضبط النفس الأساسية وطرق إدارة المواد المخدرة. هذا الفيديولا يحل محل التدريب العملي على التدريب المطلوب في مرفق الخاص بك، ولكن المقصود لزيادة واستكمال هذا التدريب.

Watch this Scientific Journal Video about Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats at JoVE.com

Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats

العمل بأمان وإنسانية مع القوارض البحث يتطلب الكفاءات الأساسية في أساليب المناولة وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع بأمان وفعالية إدارة المركبات على الفئران والجرذان.

دليل ضبط النفس وطرق الإدارة المشتركة في مجمع الفئران والجرذان

Being able to safely and effectively restrain mice and rats is an important part of conducting research.  Working confidently and humanely with mice and ...

manual-restraint-common-compound-administration-routes-mice

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Biology

Unit 1

General Pharmacological Principles

SCIENTISTS IN ACTION

288.2K Views.  Charles River. العمل بأمان وإنسانية مع القوارض البحث يتطلب الكفاءات الأساسية في أساليب المناولة وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع بأمان وفعالية إدارة المركبات على الفئران والجرذان.

Video: Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats

Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats

Studies in rodent models of breast cancer show that exposures to dietary/hormonal factors during the in utero and pubertal periods, when the mammary gland undergoes extensive modeling and re-modeling, alter susceptibility to carcinogen-induced mammary tumors. Similar findings have been described in humans: for example, high birthweight increases later risk of developing breast cancer, and dietary intake of soy during childhood decreases breast cancer risk. It is thought that these prenatal and postnatal dietary modifications induce persistent morphological changes in the mammary gland that in turn modify breast cancer risk later in life. These morphological changes likely reflect epigenetic modifications, such as changes in DNA methylation, histones and miRNA expression that then affect gene transcription . In this article we describe how changes in mammary gland morphology can predict mammary cancer risk in rats. Our protocol specifically describes how to dissect and remove the rat abdominal mammary gland and how to prepare mammary gland whole mounts. It also describes how to analyze mammary gland morphology according to three end-points (number of terminal end buds, epithelial elongation and differentiation) and to use the data to predict risk of developing mammary cancer.

Our protocol describes how to dissect the rat abdominal mammary gland and how to prepare mammary gland whole mounts. It also describes how to analyze mammary gland morphology using three end-points (number of terminal end buds, epithelial elongation and differentiation) and to use these results to predict mammary cancer risk in rats which were exposed to dietary modifications in utero or during prepuberty.

التغيرات في الغدة الثديية المورفولوجيا واحتمال الاصابة بسرطان الثدي في الفئران

Studies in rodent models of breast cancer show that exposures to dietary/hormonal factors during the in utero and pubertal periods, when the mammary gland ...

Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal colony. Proper collection of tissues for further histological processing can impact the quality of testing results. This article describes the conduct of a basic gross examination including identification of heart, liver, lungs, kidneys, and spleen, as well as how to collect those organs. Additionally four of the more difficult tissue/sample collection techniques are demonstrated. Lung collection and perfusion can be particularly challenging as the tissue needs to be properly inflated with a fixative in order for inside of the tissue to fix properly and to enable thorough histologic evaluation. This article demonstrates the step by step technique to remove the lung and inflate it with fixative in order to achieve optimal fixation of the tissue within 24 hours. Brain collection can be similarly challenging as the tissue is soft and easily damaged. This article demonstrates the step by step technique to expose and remove the brain from the skull with minimal damage to the tissue. The mesenteric lymph node is a good sample type in which to detect many common infectious agents as enteric viruses persist longer in the lymph node than they are shed in feces. This article demonstrates the step by step procedure for locating and aseptically removing the mesenteric lymph node. Finally, identification of infectious agents of the respiratory tract may be performed by bacterial culture or PCR testing of nasal and/or bronchial fluid aspirates taken at necropsy. This procedure describes obtaining and preparing the respiratory aspirate sample for bacterial culture and PCR testing.

This article describes the procedures for conducting a basic postmortem examination of a mouse or rat, and the collection of basic organs, as well as more challenging sample types from for histological, microbiological, and PCR evaluation.

التشخيص والتشريح والأنسجة عينة مختارة كوكتيل في الجرذان والفئران

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal ...

Ovariectomy and 17&beta;-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

Estrogens are a family of female sexual hormones with an exceptionally wide spectrum of effects. When rats and mice are used in estrogen research they are commonly ovariectomized in order to ablate the rapidly cycling hormone production, replacing the 17&beta;-estradiol exogenously. There is, however, lack of consensus regarding how the hormone should be administered to obtain physiological serum concentrations. This is crucial since the 17&beta;-estradiol level/administration method profoundly influences the experimental results1-3. We have in a series of studies characterized the different modes of 17&beta;-estradiol administration, finding that subcutaneous silastic capsules and per-oral nut-cream Nutella are superior to commercially available slow-release pellets (produced by the company Innovative Research of America) and daily injections in terms of producing physiological serum concentrations of 17&beta;-estradiol4-6. Amongst the advantages of the nut-cream method, that previously has been used for buprenorphine administration7, is that when used for estrogen administration it resembles peroral hormone replacement therapy and is non-invasive. The subcutaneous silastic capsules are convenient and produce the most stable serum concentrations. This video article contains step-by-step demonstrations of ovariectomy and 17&beta;-estradiol hormone replacement by silastic capsules and peroral Nutella in rats and mice, followed by a discussion of important aspects of the administration procedures.

Ovariectomy and 17&amp;#946;-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

Ovariectomy and subsequent replacement of 17&beta;-estradiol by means of silastic capsules and peroral Nutella are demonstrated in rats and mice.

استئصال المبيض و17β استراديول، مع تبديل في الجرذان والفئران: تظاهرة البصرية

Estrogens are a family of female sexual hormones with an exceptionally wide spectrum of effects. When rats and mice are used in estrogen research they are ...

Detection of Live Escherichia coli O157:H7 Cells by PMA-qPCR

A unique open reading frame (ORF) Z3276 was identified as a specific genetic marker for E. coli O157:H7. A qPCR assay was developed for detection of E. coli O157:H7 by targeting ORF Z3276. With this assay, we can detect as low as a few copies of the genome of DNA of E. coli O157:H7. The sensitivity and specificity of the assay were confirmed by intensive validation tests with a large number of E. coli O157:H7 strains (n = 369) and non-O157 strains (n = 112). Furthermore, we have combined propidium monoazide (PMA) procedure with the newly developed qPCR protocol for selective detection of live cells from dead cells. Amplification of DNA from PMA-treated dead cells was almost completely inhibited in contrast to virtually unaffected amplification of DNA from PMA-treated live cells. Additionally, the protocol has been modified and adapted to a 96-well plate format for an easy and consistent handling of a large number of samples. This method is expected to have an impact on accurate microbiological and epidemiological monitoring of food safety and environmental source.

Detection of Live Escherichia coli O157:H7 Cells by PMA-qPCR

A qPCR assay was developed for detection of Escherichia coli O157:H7 targeting a unique genetic marker, Z3276. The qPCR was combined with propidium monoazide (PMA) treatment for live cell detection. This protocol has been modified and adapted to a 96-well plate format for easy and consistent handling of numerous samples

الكشف عن لايف<em&gt; كولاي</em&gt; O157: H7 من قبل خلايا PMA-QPCR

A unique open reading frame (ORF) Z3276 was identified as a specific genetic marker for E. coli O157:H7. A qPCR assay was developed for detection of E. ...

Plant Promoter Analysis: Identification and Characterization of Root Nodule Specific Promoter in the Common Bean

The upstream sequences of gene coding sequences are termed as promoter sequences. Studying the expression patterns of promoters are very significant in understanding the gene regulation and spatiotemporal expression patterns of target genes. On the other hand, it is also critical to establish promoter evaluation tools and genetic transformation techniques that are fast, efficient, and reproducible. In this study, we investigated the spatiotemporal expression pattern of the rhizobial symbiosis-specific nodule inception (NIN) promoter of Phaseolus vulgaris in the transgenic hairy roots. Using plant genome databases and analysis tools we identified, isolated, and cloned the P. vulgaris NIN promoter in a transcriptional fusion to the chimeric reporter &#946;-glucuronidase (GUS) GUS-enhanced::GFP. Further, this protocol describes a rapid and versatile system of genetic transformation in the P. vulgaris using Agrobacterium rhizogenes induced hairy roots. This system generates &#8805;2 cm hairy roots at 10 to 12 days after transformation. Next, we assessed the spatiotemporal expression of NIN promoter in Rhizobium inoculated hairy roots at periodic intervals of post-inoculation. Our results depicted by GUS activity show that the NIN promoter was active during the process of nodulation. Together, the present protocol demonstrates how to identify, isolate, clone, and characterize a plant promoter in the common bean hairy roots. Moreover, this protocol is easy to use in non-specialized laboratories.

Promoter expression analyses are crucial to improving the understanding of gene regulation and the spatiotemporal expression of target genes. Herein we present a protocol to identify, isolate, and clone a plant promoter. Further, we describe the characterization of the nodule-specific promoter in the common bean hairy roots.

نبات مروج التحليل: تحديد وتوصيف للعقيدات الجذرية المروج محددة في الفول المشتركة

The upstream sequences of gene coding sequences are termed as promoter sequences. Studying the expression patterns of promoters are very significant in ...

Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats

Assessment of reproductive competence is critical for understanding the impact of a treatment or genetic manipulation on the reproductive axis, also termed the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. The reproductive axis is a key integrator of environmental and internal input adapting fertility to favorable conditions for reproduction. Prior to embarking upon a fertility study in mice and rats, sexual maturity is evaluated to exclude the possibility that the observed reproductive phenotypes are caused by delayed or absent pubertal onset. This protocol describes a non-invasive approach to assess pubertal onset in males through the determination of preputial separation, and in females through vaginal opening and first estrus. After the confirmation of the completion of puberty and the achievement of sexual maturity, a fertility study can be initiated. The procedure describes the optimal breeding conditions for mice and rats, how to set up a fertility study, and what parameters to evaluate and determine if the treatment or gene deletion has an impact on fertility.

Many treatments and genetic mutations impact the timing of sexual maturity and fertility. This protocol describes a non-invasive method to evaluate pubertal onset in mice and rats prior to setting up a fertility study in sexually mature animals.

تحديد الكفاءة الإنجابية التي تؤكد بداية البلوغ، والقيام تحليل خصوبة في الفئران والجرذان

Assessment of reproductive competence is critical for understanding the impact of a treatment or genetic manipulation on the reproductive axis, also ...

Loop-Mediated Isothermal Amplification for Screening Salmonella in Animal Food and Confirming Salmonella from Culture Isolation

Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) has emerged as a powerful nucleic acid amplification test for the rapid detection of numerous bacterial, fungal, parasitic, and viral agents. Salmonella is a bacterial pathogen of worldwide food safety concern, including food for animals. Presented here is a multi-laboratory-validated Salmonella LAMP protocol that can be used to rapidly screen animal food for the presence of Salmonella contamination and can also be used to confirm presumptive Salmonella isolates recovered from all food categories. The LAMP assay specifically targets the Salmonella invasion gene (invA) and is rapid, sensitive, and highly specific. Template DNAs are prepared from enrichment broths of animal food or pure cultures of presumptive Salmonella isolates. The LAMP reagent mixture is prepared by combining an isothermal master mix, primers, DNA template, and water. The LAMP assay runs at a constant temperature of 65 &#176;C for 30 min. Positive results are monitored via real-time fluorescence and can be detected as early as 5 min. The LAMP assay exhibits high tolerance to inhibitors in animal food or culture medium, serving as a rapid, reliable, robust, cost-effective, and user-friendly method for screening and confirming Salmonella. The LAMP method has recently been incorporated into the U.S. Food and Drug Administration&#8217;s Bacteriological Analytical Manual (BAM) Chapter 5.

Loop-Mediated Isothermal Amplification for Screening Salmonella in Animal Food and Confirming Salmonella from Culture Isolation

Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) is an isothermal nucleic acid amplification test (iNAAT) that has attracted broad interest in the pathogen detection field. Here, we present a multi-laboratory-validated Salmonella LAMP protocol as a rapid, reliable, and robust method for screening Salmonella in animal food and confirming presumptive Salmonella from culture isolation.

Loop-بوساطة التضخيم متساوي الحرارة لفحص السالمونيلا في الغذاء الحيواني وتأكيد السالمونيلا من عزلة الثقافة

Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) has emerged as a powerful nucleic acid amplification test for the rapid detection of numerous bacterial, ...

Divergence of Root Microbiota in Different Habitats based on Weighted Correlation Networks

The root microbiome plays an important role in plant growth and environmental adaptation. Network analysis is an important tool for studying communities, which can effectively explore the interaction relationship or co-occurrence model of different microbial species in different environments. The purpose of this manuscript is to provide details on how to use the weighted correlation network algorithm to analyze different co-occurrence networks that may occur in microbial communities due to different ecological environments. All analysis of the experiment is performed in the WGCNA package. WGCNA is an R package for weighted correlation network analysis. The experimental data used to demonstrate these methods were microbial community data from the NCBI (National Center for Biotechnology Information) database for three niches of the rice (Oryza sativa) root system. We used the weighted correlation network algorithm to construct co-abundance networks of microbial community in each of the three niches. Then, differential co-abundance networks among endosphere, rhizoplane and rhizosphere soil were identified. In addition, the core genera in network were obtained by the "WGCNA" package, which plays an important regulated role in network functions. These methods enable researchers to analyze the response of microbial network to environmental disturbance and verify different microbial ecological response theories. The results of these methods show that the significant differential microbial networks identified in the endosphere, rhizoplane and rhizosphere soil of rice.

Network analysis was applied to evaluate the association of various ecological microbial communities, such as soil, water and rhizosphere. Presented here is a protocol on how to use the WGCNA algorithm to analyze different co-occurrence networks that may occur in the microbial communities due to different ecological environments.

اختلاف ميكروبيوتا الجذر في الموائل المختلفة على أساس شبكات الارتباط المرجح

The root microbiome plays an important role in plant growth and environmental adaptation. Network analysis is an important tool for studying communities, ...

Determination of Self-(In)compatibility and Inter-(In)compatibility Relationships in Citrus Using Manual Pollination, Microscopy, and S-Genotype Analyses

Citrus uses S-RNase-based self-incompatibility to reject self-pollen and, therefore, requires nearby pollinizer trees for successful pollination and fertilization. However, identifying suitable varieties to serve as pollinizers is a time-consuming process. To solve this problem, we have developed a rapid method for identifying pollination-compatible citrus cultivars that utilizes agarose gel electrophoresis and aniline blue staining. Pollen compatibility is determined based on the identification of S genotypes by extracting total DNA and performing PCR-based genotyping assays with specific primers. Additionally, styles are collected 3-4 days after manual pollination, and aniline blue staining is performed. Finally, the growth status of the pollen tubes is observed with a fluorescence microscope. Pollen compatibility and incompatibility can be established by observing whether the pollen tube growth is normal or suppressed, respectively. Due to its simplicity and cost-effectiveness, this method is an effective tool for determining the pollen compatibility and incompatibility of different citrus varieties to establish incompatibility groups and incompatibility relationships between different cultivars. This method provides information essential for the successful selection of suitable pollinizer trees and, thus, facilitates the establishment of new orchards and the selection of appropriate parents for breeding programs.

Determination of Self-Incompatibility and Inter-Incompatibility Relationships in Citrus Using Manual Pollination, Microscopy, and S-Genotype Analyses

This protocol provides a rapid method for determining pollen compatibility and incompatibility in citrus cultivars.

تحديد التوافق الذاتي (عدم) والعلاقات بين (عدم) التوافق في الحمضيات باستخدام التلقيح اليدوي والفحص المجهري وتحليلات النمط الجيني S

Citrus uses S-RNase-based self-incompatibility to reject self-pollen and, therefore, requires nearby pollinizer trees for successful pollination and ...

https://cloudfront.jove.com/CDNSource/teasers/65056.jpg

تطوير طرق تحويل الجينات وتحريرها في الخيزران

In Planta Gene Expression and Gene Editing in Moso Bamboo Leaves

A novel in planta gene transformation method was developed for bamboo, which avoids the need for time-consuming and labor-intensive callus induction and regeneration processes. This method involves Agrobacterium-mediated gene expression via wounding and vacuum for bamboo seedlings. It successfully demonstrated the expression of exogenous genes, such as the RUBY reporter and Cas9 gene, in bamboo leaves. The highest transformation efficiency for the accumulation of betalain in RUBY seedlings was achieved using the GV3101 strain, with a percentage of 85.2% after infection. Although the foreign DNA did not integrate into the bamboo genome, the method was efficient in expressing the exogenous genes. Furthermore, a gene editing system has also been developed with a native reporter using this method, from which an in situ mutant generated by the edited bamboo violaxanthin de-epoxidase gene (PeVDE) in bamboo leaves, with a mutation rate of 17.33%. The mutation of PeVDE resulted in decreased non-photochemical quenching (NPQ) values under high light, which can be accurately detected by a fluorometer. This makes the edited PeVDE a potential native reporter for both exogenous and endogenous genes in bamboo. With the reporter of PeVDE, a cinnamoyl-CoA reductase gene was successfully edited with a mutation rate of 8.3%. This operation avoids the process of tissue culture or callus induction, which is quick and efficient for expressing exogenous genes and endogenous gene editing in bamboo. This method can improve the efficiency of gene function verification and will help reveal the molecular mechanisms of key metabolic pathways in bamboo.

تسليط الضوء على المؤلف: النهوض بتحرير الجينات في أوراق الخيزران لبدائل بلاستيكية مستدامة 

In this study, a novel in planta gene expression and gene editing method mediated by Agrobacterium was developed in bamboo. This method greatly improved the efficiency of gene function validation in bamboo, which has significant implications for accelerating the process of bamboo breeding.

في بلانتا التعبير الجيني وتحرير الجينات في أوراق الخيزران موسو

A novel in planta gene transformation method was developed for bamboo, which avoids the need for time-consuming and labor-intensive callus induction and ...