وأيد هذا البحث في جزء من برنامج بحوث جماعية للمعهد الوطني للسرطان.

1. خلية نائمة ثقافة الصيانة وخطوط الخلايا السرطانية النقيلي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنمو الخلايا السرطانية النائمة (D2OR / MCF7/K7M2-AS.46) ، والمتنقل (D2A1 / MDA - MB - 231 / K7M2) في 10 سم تحتوي على لوحات ثقافة متوسطة Dulbecco في التعديل النسر (DMEM) الجلوكوز 10 ٪ وارتفاع مصل بقري جنيني ( FBS) والمضادات الحيوية. بمجرد الوصول إلى نقطة التقاء الخلايا 70-80 ٪ ، والمضي قدما في المقايسات التالية. </li></ol> 2. مقايسة الخلايا انتشار الخلايا السرطانية النائمة (هادئة) ، والمتنقل (تكاثر) تربيتها في نظام 3D - BME زراعة خلايا نائمة / المتنقل في نظام 3D <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ذوبان الجليد عامل انخفاض النمو Cultrex سرداب استخراج الأغشية (BME) في الثلاجة 4 درجة مئوية ليلة قبل تنفيذ الفحص. ملاحظة يجب أن يكون التعامل مع BME على الجليد في جميع الأوقات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في اليوم التالي ، وضع لوحة بشكل جيد على 96 علبة من الجليد داخل غطاء الصفحي. معطف جيدا مع كل 100μl - 50 من BME الجليد الباردة مع موزع باستخدام حقنة. تأكد من أن يتم تشكيل أي فقاعات في الآبار. 96 مكان لوحة مغطاة جيدا BME في حاضنة ترطيب مع 5 ٪ CO 2 عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في غضون ذلك نضح وسائل الإعلام من الخلايا النائمة والورم النقيلي أو (المعد في الفرع 1). شطف لوحات الثقافة مع 10 مل من الفوسفات مخزنة المالحة ، ودرجة الحموضة 7.4 (PBS). نضح في برنامج تلفزيوني وإضافة التربسين 2ml قبل حرارة بلغت 37 درجة مئوية ، لوحات الثقافة. احتضان لوحات في ترطيب 5 ٪ CO 2 عند 37 درجة مئوية ، لمدة 5 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الخلايا إلى أنبوب مخروطي يحتوي على 15 مل من الجلوكوز 5ml DMEM عالية تستكمل مع FCS 10 ٪ والمضادات الحيوية وعدد الخلايا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تدور باستمرار عدد الخلايا الإجمالي للمثقف في نسيج الثقافة الطرد المركزي بسرعة 1500g ، في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق. في المقايسات نحن نستعد لدينا خلايا 2X10 3 / جيد لكل خط الخلية أو نقطة من الوقت لدراستها. ولكن هذا قد تختلف تبعا لخطوط الخلايا المستخدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نضح بعناية طاف. نلاحظ ، في معظم الحالات بيليه غير مرئية. لذلك ، وراء ترك بعض وسائل الإعلام. اضغط على الجزء السفلي من الأنبوب المخروطية 15ml بأصابعك لضمان الحصول على تعليق من الخلايا واحد. إعادة تعليق بيليه مع الجلوكوز DMEM منخفضة بالمضادات الحيوية تستكمل مع 2 ٪ FCS BME + 2 ٪ (مقايسة وسائل الاعلام). وينبغي أن يضاف 100 ميكرولتر من وسائل الإعلام لفحص كل الخلايا 3 2x10. متمزج الخلايا مرات عديدة مع ماصة 5ml لضمان الحفاظ على تعليق خلية واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صحن 100μl الخليط جيدا على الخلية في أعلى لوحة 96 المغلفة جيدا BME. لتقييم الخلفية (في القسم 2.8) في لوحة 100μl بالإضافة لكل بئر فقط من وسائل الإعلام مقايسة على أعلى من 96 لوحة BME مغلفة جيدا. احتضان المثقف 96 لوحات بشكل جيد في ترطيب حاضنة 5 ٪ CO 2 عند 37 درجة مئوية. وينبغي إعادة تغذية الخلايا كل 4 أيام مع وسائل الإعلام مقايسة. </li></ol> مقايسة الانتشار : <ol start="8" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقايسة انتشار الخلايا : إضافة إلى الآبار في الوقت المطلوب 20 نقطة ميكرولتر من العيار الحجمي 96 خلية خلية مائي حل واحد عدة مقايسة انتشار الأسلحة النووية. احتضان في حاضنة ترطيب 5 ٪ CO 2 عند درجة 37 ل2H. باستخدام قارئ اللوحة إليسا تسجيل الامتصاصية في 490nm. لتقييم الخلفية والطرح ، إضافة 20μl من العيار الحجمي 96 خلية خلية مائي حل واحد لعدة مقايسة انتشار الآبار المغلفة مسبقا مع BME ومضافين فقط مقايسة مع وسائل الاعلام. باستخدام قارئ اللوحة إليسا تسجيل الامتصاصية في 490 نانومتر. </li></ol> 3. مناعي تلطيخ لجزيئات الخلايا في الخلايا إشارات (هادئة) نائمة الورم و / أو المتنقل (تكاثر) الخلايا السرطانية زراعة خلايا نائمة / المتنقل في نظام 3D لتلطيخ immunfluorescence * البروتوكول التالي هو تعديل لبروتوكول الثقافة 3D نشرتها J Debnath 18 آخرون. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد BME كما هو موضح في القسم 2.1. في اليوم التالي : مكان شريحة زجاجية 8 الغرفة النظام على صينية من الجليد داخل غطاء الصفحي. معطف جيدا مع كل من 50ul BME الجليد الباردة باستخدام pipetman 200μl. تأكد من انتشار BME بالتساوي ويتم تشكيل أي فقاعات في الآبار. وضع زجاج الغرفة 8 الشرائح المغلفة مع ثاني BME في ترطيب 5 2 ٪ عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الخلايا النائمة والحصاد أو النقيلي من الباب 1 والاستعداد للثقافة كما هو موضح في القسم 2،3-2،4. جمع العدد الكلي للخلايا أن يكون المثقف في أنبوب مخروطي 15 مل. نحن نستعد 5 X10 3 خلايا / جيد لكل خط الخلية ونقطة من الوقت لدراستها. تدور باستمرار الخلايا في نسيج الثقافة الطرد المركزي بسرعة 1500g ، في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق. نضح في الطافي بعناية. علما بأن بيليه غير مرئية ، ولذلك ترك وراء بعض وسائل الاعلام. اضغط على الجزء السفلي من الأنبوب المخروطية 15ml بأصابعك لضمان الحصول على تعليق خلية واحدة.إعادة تعليق بيليه مقايسة مع وسائل الاعلام. وينبغي أن يضاف 400μl وسائل الإعلام لفحص كل الخلايا 3 5x10. متمزج الخلايا الماصة عدة مرات مع 5ml. هذه الخطوة مهمة جدا لضمان الحفاظ على تعليق خلية واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 400μl صفيحة الخليط جيدا لكل خلية على رأس كل دائرة من الدوائر 8 المغلفة مع BME. احتضان المثقف زجاج غرف 8 نظام الشرائح في ترطيب حاضنة 5 ٪ CO 2 عند 37 درجة مئوية. وينبغي إعادة تغذية الخلايا كل 4 أيام مع وسائل الإعلام مقايسة. </li></ol> تلوين المناعي : <ol start="4" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند نقاط الوقت المطلوب ، نضح في الطبقة العليا من وسائل الإعلام وإضافة 200μl من تثبيتي لامتصاص العرق تحتوي على 4 ٪ (PFA) ، 5 ٪ والسكروز 0.1 ٪ تريتون X - 100 واحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق. نضح لتثبيتي ، وإضافة 200μl PFA من 4 ٪ التي تحتوي على 5 ٪ سكروز ويحضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 25 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة مخزنة 400 ميكرولتر من الفوسفات الملحي (PBS) إلى كل جيدا ؛ نضح لتثبيتي. احتضان لمدة 10 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. نضح في برنامج تلفزيوني وإضافة 400 برنامج تلفزيوني μ تحتوي على 0.05 ٪ توين 20 لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كتلة الخلايا في درجة حرارة الغرفة ثابتة مع 200μl إما مصل حمار 10 ٪ أو 3 ٪ مع جيش صرب البوسنة ل1hour (عرقلة الحل ينبغي أن تحدد لاستخدامها تجريبيا لكل الضد الابتدائي). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نضح عرقلة الحل وإضافة 200μl من الأجسام المضادة الأولية (وينبغي أن تحدد تخفيف تجريبيا لكل الأجسام المضادة الأولية لاستخدامها). تمييع الضد الابتدائية في المصل حمار 10 ٪ إذا تم استخدام 10 ٪ حمار مصل لعرقلة أو إضعاف الضد الرئيسي في جيش صرب البوسنة 3 ٪ إذا تم استخدام 3 ٪ BSA حل حظر. احتضان مع الأجسام المضادة الأولية بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نضح الأجسام المضادة ، وغسل الآبار مع PBS 400μl لمدة 15 دقيقة وكرر مرتين. نضح في برنامج تلفزيوني وإضافة 200μl من الحمير ، منها مكافحة مترافق مفتش الحكومة إلى الأحمر رودامين (ينبغي أن تحدد تخفيف تجريبيا) ، وتغطي الشريحة الغرفة 8 بورق الألمنيوم واحتضان لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل الآبار مع PBS 400μl (3x15 دقيقة كل غسل). نضح برنامج تلفزيوني. تصاعدت مع تصاعد VECTASHIELD المتوسطة مع دابي. الشرائح جافة لمدة 40 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام. يمكن الاحتفاظ الشرائح : 1 درجة مئوية في الاسبوع 4 تخزين الشرائح في الظلام. صورة الشرائح من خلال الفحص المجهري متحد البؤر. </li></ol> 4. ممثل النتائج : ويرد مثال لتحليل انتشار الخلايا النائمة وD2.0R الورم النقيلي D2A1 في الثقافة 1A 3D في الشكل. خلايا نائمة وD2.0R (هادئة) من خلال التجربة بأكملها 14 يوما في حين أن الفترة ثقافة عالية D2A1 النقيلي خلايا نائمة تبقى فقط لمدة أربعة إلى ستة أيام وبعد ذلك يبدأون في الانتشار. خلال المرحلة الأولي نائمة ، لا تزال العديد من الخلايا في الثقافة الانفرادي 3 - D (1B الشكل ؛ يوم 4) في حين أن غيرها من الخلايا المتكاثرة غير شكل متعددة الخلايا الأجسام الشبه الكروية. ويرتبط مع التغيرات الهائلة في التشكل الخلية ، وانتقال D2A1 خلايا نائمة من التكاثري للدولة في 3 - D الثقافة (يوم 12 1B الشكل). وبالتالي ، يمكن استخدام هذا الاختبار لاختبار ما عامل / ثانية قد تؤدي إلى خلايا نائمة D2.0R للخروج من حالتها نائمة وما عامل / ثانية قد تمنع الخلايا D2A1 الانتقال من دولتهم في سبات عميق. الشكل 2 مثالا وكيلا D2A1 منع الخلايا النائمة إلى الانتقال من دولة إلى التكاثري. حافظت العلاجات D2A1 الخلايا مع مثبط محددة من الضوء الميوسين كيناز السلسلة (ML - 7) كما هو موضح في الشكل 2 ، D2A1 الخلايا في حالة سبات. ويمكن دراسة الخلية إشارات في الخلايا النائمة الورم وتنتشر تربيتها في نظام 3D بواسطة تلوين المناعي لجزيئات الخلايا إشارة. كما هو موضح في الشكل (3) زيادة كبيرة في ضوء سلسلة الفسفرة الميوسين D2A1 في الخلايا (تلوين أحمر) ، يليه إعادة تنظيم شعيرات F - أكتين تشكيل ألياف الأكتين الإجهاد (تلطيخ الأخضر) يحدث أثناء انتقالهم من السكون (1-4 أيام) ل انتشار (يوم 7). ومع ذلك ، وعرقلة الميوسين كيناز سلسلة النشاط في ضوء D2A1 الخلايا shRNA أو دواء معين (ML - 7) يحتفظ D2A1 الخلايا في حالة سبات والنتائج في تثبيط الفسفرة الميوسين الخفيفة وسلسلة من طراز F - أكتين منظمة الألياف الإجهاد (الشكل 4). <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/2914/2914fig1.jpg" /> الشكل 1. نموذجية في المختبر لدراسة الانفرادي السكون الخلية السرطانية والتحول إلى النمو النقيلي. أ) انتشار D2.0R نائمة وD2A1 المنتشر في 3 - D BME Cultrex ، ن = 8 (يعني ± SE). ممثل نتائج ثلاث تجارب (* P ≤ 0.05). B) صور المجهر ضوء D2.0R والخلايا المستزرعة في D2A1 3 - ​​D X20 Cultrex التكبير BME.تعديل الرقم من 17 باركان وآخرون. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/2914/2914fig2.jpg" /> الشكل 2. منع تبديل D2A1 من الخلايا من السكون (سكون) في الانتشار في منظومة الثقافة 3D بواسطة تثبيط الميوسين كيناز ضوء سلسلة (MLCK). بالطبع وقت تكاثر الخلايا المستزرعة في D2A1 3 - ​​D BME Cultrex ، ن = 8 (يعني ± SE). وكانت الخلايا غير المعالجة (السيطرة) ، أو تعامل مع مثبط محددة من MLCK (ML - 7 ، 5 ميكرومتر) لبداية يوم 48 ساعة 5 الثقافة. تعديل الرقم من 17 باركان وآخرون. <img alt="الشكل 3" src="/files/ftp_upload/2914/2914fig3.jpg" /> الشكل 3. الميوسين الفسفرة ضوء تليها سلسلة من طراز F - أكتين اعادة التنظيم خلال التحول من D2A1 الخلايا من السكون إلى النمو التكاثري. وكان المثقف D2A1 الخلايا في 3 - D BME Cultrex في 8 الغرفة شريحة زجاجية. تم إصلاح الخلايا وملطخة دابي (الأزرق) لتوطين النووية ، phalloidin (الخضراء) لطراز F - أكتين ومع جسم مضاد ضد فسفرته شكل سلسلة ضوء الميوسين (MLC - P) (الحمراء) ، كما هو مبين في نقاط زمنية مختلفة. دمج أكتين - F ، وحركة تحرير الكونغو ف التلوين (الأصفر). وقد زاد من حركة تحرير الكونغو التعبير ف خلال فترة الانتقال من D2A1 الخلايا من السكون (days1 - 4) في النمو التكاثري (يوم 7) تليها الإجهاد أكتين تشكيل الألياف (الأسهم). مبائر المجهري والتكبير x63. شريط بيضاء يساوي 20 ميكرون. تعديل الرقم من 17 باركان وآخرون. <img alt="الشكل 4" src="/files/ftp_upload/2914/2914fig4.jpg" /> الشكل 4. . تثبيط الميوسين كيناز ضوء سلسلة (MLCK) بوساطة الألياف الإجهاد F - أكتين في تشكيل خلايا D2A1 كانت D2A1 خلايا غير المعالجة (السيطرة) ، أو للتعامل مع مثبط MLCK (ML - 7 ، 5 ميكرون) ، لتبدأ ساعة 48 يوم الثقافة 5 ، أو تعامل مع تدافعت أو shRNA MLCK والملون للنموذج فسفرته سلسلة ضوء الميوسين (MLC - P) (الحمراء) ، F - الأكتين (الأخضر) ، ونوى (الأزرق). دمج أكتين - F ، وحركة تحرير الكونغو ف التلوين (الأصفر). مبائر المجهري والتكبير x63. شريط بيضاء يساوي 20 ميكرون.

<ol>
	<li>Aguirre-Ghiso, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models,+mechanisms+and+clinical+evidence+for+cancer+dormancy.">Models, mechanisms and clinical evidence for cancer dormancy.</a> Nat Rev Cancer. 7, 834-846 (2007).</li><li>Pantel, K., Woelfle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micrometastasis+in+breast+cancer+and+other+solid+tumors.">Micrometastasis in breast cancer and other solid tumors.</a> J Biol Regul Homeost Agents. 18, 120-125 (2004).</li><li>Naumov, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ineffectiveness+of+doxorubicin+treatment+on+solitary+dormant+mammary+carcinoma+cells+or+late-developing+metastases.">Ineffectiveness of doxorubicin treatment on solitary dormant mammary carcinoma cells or late-developing metastases.</a> Breast Cancer Res Treat. 82, 199-206 (2003).</li><li>Klein, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Framework+models+of+tumor+dormancy+from+patient-derived+observations.">Framework models of tumor dormancy from patient-derived observations.</a> Curr Opin Genet Dev. , (2010).</li><li>Naumov, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+solitary+mammary+carcinoma+cells+in+a+secondary+site:+a+possible+contributor+to+dormancy.">Persistence of solitary mammary carcinoma cells in a secondary site: a possible contributor to dormancy.</a> Cancer Res. 62, 2162-2168 (2002).</li><li>Townson, J. L., Chambers, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dormancy+of+solitary+metastatic+cells.">Dormancy of solitary metastatic cells.</a> Cell Cycle. 5, 1744-1750 (2006).</li><li>Chambers, A. F., Groom, A. C., MacDonald, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissemination+and+growth+of+cancer+cells+in+metastatic+sites.">Dissemination and growth of cancer cells in metastatic sites.</a> Nat Rev Cancer. 2, 563-572 (2002).</li><li>Pantel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+expression+of+proliferation-associated+molecules+in+individual+micrometastatic+carcinoma+cells.">Differential expression of proliferation-associated molecules in individual micrometastatic carcinoma cells.</a> J Natl Cancer Inst. 85, 1419-1424 (1993).</li><li>Demicheli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+dormancy:+findings+and+hypotheses+from+clinical+research+on+breast+cancer.">Tumour dormancy: findings and hypotheses from clinical research on breast cancer.</a> Semin Cancer Biol. 11, 297-306 (2001).</li><li>Braun, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pooled+analysis+of+bone+marrow+micrometastasis+in+breast+cancer.">A pooled analysis of bone marrow micrometastasis in breast cancer.</a> N Engl J Med. 353, 793-802 (2005).</li><li>Pantel, K., Alix-Panabieres, C., Riethdorf, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+micrometastases.">Cancer micrometastases.</a> Nat Rev Clin Oncol. 6, 339-351 (2009).</li><li>Goss, P. E., Chambers, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+tumour+dormancy+offer+a+therapeutic+target.">Does tumour dormancy offer a therapeutic target.</a> Nat Rev Cancer. 10, 871-877 (2010).</li><li>Mendoza, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+metastasis+biology+and+therapy+in+real+time+in+the+mouse+lung.">Modeling metastasis biology and therapy in real time in the mouse lung.</a> J Clin Invest. 120, 2979-2988 (2010).</li><li>Naumov, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+human+tumor+dormancy:+an+angiogenic+switch+from+the+nonangiogenic+phenotype.">A model of human tumor dormancy: an angiogenic switch from the nonangiogenic phenotype.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 316-325 (2006).</li><li>Barkan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastatic+growth+from+dormant+cells+induced+by+a+col-I-enriched+fibrotic+environment.">Metastatic growth from dormant cells induced by a col-I-enriched fibrotic environment.</a> Cancer Res. 70, 5706-5716 (2010).</li><li>Barkan, D., Green, J. E., Chambers, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix:+A+gatekeeper+in+the+transition+from+dormancy+to+metastatic+growth.">Extracellular matrix: A gatekeeper in the transition from dormancy to metastatic growth.</a> Eur J Cancer. , (2010).</li><li>Barkan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+metastatic+outgrowth+from+single+dormant+tumor+cells+by+targeting+the+cytoskeleton.">Inhibition of metastatic outgrowth from single dormant tumor cells by targeting the cytoskeleton.</a> Cancer Res. 68, 6241-6250 (2008).</li><li>Debnath, J., Muthuswamy, S. K., Brugge, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphogenesis+and+oncogenesis+of+MCF-10A+mammary+epithelial+acini+grown+in+three-dimensional+basement+membrane+cultures.">Morphogenesis and oncogenesis of MCF-10A mammary epithelial acini grown in three-dimensional basement membrane cultures.</a> Methods. 30, 256-268 (2003).</li><li>Morris, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+carcinoma+cell+lines+of+high+and+low+metastatic+potential+differ+not+in+extravasation+but+in+subsequent+migration+and+growth.">Mammary carcinoma cell lines of high and low metastatic potential differ not in extravasation but in subsequent migration and growth.</a> Clin Exp Metastasis. 12, 357-367 (1994).</li><li>Khanna, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+membrane-cytoskeleton+linker+ezrin+is+necessary+for+osteosarcoma+metastasis.">The membrane-cytoskeleton linker ezrin is necessary for osteosarcoma metastasis.</a> Nat Med. 10, 182-186 (2004).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

الآليات الأساسية التي تحافظ على نشر الخلايا السرطانية في حالة سبات أو التي تمر بمرحلة انتقالية نتيجة لنمو النقيلي لا تزال مجهولة إلى حد كبير. وقد تحققت هذه الظاهرة في غاية الصعوبة للدراسة في المرضى من البشر 4،12 ونماذج قليلة قبل السريرية وضعت لمعالجة هذه المسأل?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات </th></tr><tr><td> ارتفاع الجلوكوز DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> 11965-118 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM انخفاض الجلوكوز </td><td> Invitrogen </td><td> 11885-092 </td><td></td></tr><tr><td> الجنين مصل البقر (FBS) </td><td> Invitrogen </td><td> 10091-148 </td><td></td></tr><tr><td> عامل نمو مخفض سرداب Cultrex 3 - D استخراج الغشائية </td><td> شركة Trevigen </td><td></td><td> تركيز البروتين بين 14-15mg/ml </td></tr><tr><td> D2.0R وخطوط الخلية D2A1 </td><td></td><td></td><td> 5،19 </td></tr><tr><td> والخلايا K7M2 K7M2AS1.46 </td><td></td><td></td><td> 20 </td></tr><tr><td> MCF - 7 و MDA - MB - 231 خلايا سرطان الثدي </td><td> ATCC </td><td></td><td></td></tr><tr><td> على زجاج الغرفة 8 الشريحة نظام </td><td> (لاب تيك ، الحرارية العلمية) </td><td> 177402 </td><td></td></tr><tr><td> العيار الحجمي 96 خلية خلية مائي حل واحد الانتشار مقايسة طقم </td><td> Promega </td><td> G3580 </td><td></td></tr><tr><td> VECTASHIELD تصاعد المتوسطة مع دابي </td><td> مختبرات شركة ناقلات </td><td> H - 1200 </td><td></td></tr><tr><td> الحمار العادي المصل </td><td> جاكسون ImmunoResearch </td><td> 017-000-121 </td><td></td></tr><tr><td> إليسا قارئ اللوحة </td><td> الحيوي تك </td><td></td><td> سجل 490nm </td></tr><tr><td> مبائر المجهر </td><td> زايس LSM - 510 - </td><td></td><td> التكبير x63 </td></tr></tbody></table>

an in vitro system to study tumor dormancy and the switch to metastatic growth

تكرار الاصابة بسرطان الثدي غالبا ما يلي فترة طويلة الكامنة التي لا توجد مؤشرات على السرطان ، والانبثاث قد لا تصبح واضحة سريريا حتى سنوات عديدة بعد إزالة الورم الأولي والعلاج المساعد. والتفسير المحتمل لهذه الظاهرة هو أن الخلايا السرطانية والمواقع المصنفة المتنقل ، ومقاومة للعلاجات التقليدية ، وتظل ساكنة لفترات طويلة من الزمن 1-4. وقد وصفت وجود خلايا سرطانية نائمة في مواقع الثانوية سابقا زنازين انفرادية هادئة التي تتكاثر ولا تخضع لموت الخلايا المبرمج 5-7. علاوة على ذلك ، وقد تبين هذه الخلايا لنشر الانفرادي من الورم الأساسي في مرحلة مبكرة من تطور المرض و80-10 يقيمون نمو اعتقل في نخاع العظم للمرضى ، والدم والغدد الليمفاوية 1،4،11. لذا ، فهم الآليات التي تنظم السكون أو التبديل إلى حالة التكاثري هو أمر حاسم لاكتشاف أهداف الرواية والتدخلات اللازمة لمنع تكرار المرض. ومع ذلك ، كشف آليات تنظيم التحول من السكون إلى نمو الورم النقيلي قد تعرقلت بسبب عدم وجود نظم نموذج المتاحة. في الجسم الحي ، ونظم السابقين نموذج الجسم الحي لدراسة تطور الخلايا السرطانية المنتشر وقد وصفت سابقا 1،12-14. لكن هذه الأنظمة لم تقدم النموذج في الوقت الحقيقي ، وارتفاع في رؤى الإنتاجية بطريقة ميكانيكية الى ما يتسبب في ظهور الخلايا السرطانية النائمة الانفرادي لتتكاثر والمرض المنتشر. وقد وضعنا مؤخرا 3D في نظام المختبر إلى النموذج في خصائص نمو خلايا الجسم الحي الذي يحمل السلوك المنتشر نائمة إما (D2.OR ، MCF7 ، K7M2 - AS.46) أو التكاثري (D2A1 ، MDA - MB - 231 ، K7M2) في الجسم الحي. أظهرنا ان الخلايا السرطانية التي تظهر في الجسم الحي السكون في موقع النقيلي تبقى هادئة عند المثقف في 3 البعد (3D) القبو استخراج غشاء (BME) ، في حين أن خلايا الجسم الحي المنتشر بشكل كبير في تتكاثر بسهولة في الثقافة 3D بعد المتغير ، لكنها قصيرة نسبيا فترات من الهدوء. الأهم من خلال الاستفادة من نموذج 3D في نظام المختبر أثبتنا للمرة الأولى أن تكوين ECM يلعب دورا مهما في تنظيم ما إذا كانت الخلايا السرطانية النائمة ستتحول الى دولة التكاثري وأكدت هذه الدراسات المجراة في عام 15-17. وبالتالي ، فإن النظام النموذجي المبينة في هذا التقرير يوفر الأسلوب في المختبر لنموذج الورم السكون ودراسة التحول إلى النمو التكاثري يسببها المكروية.

Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro System to Study Tumor Dormancy and the Switch to Metastatic Growth at JoVE.com

An In Vitro System to Study Tumor Dormancy and the Switch to Metastatic Growth

ويرد تعديل 3 - D في النظام المختبر الذي خصائص النمو للعديد من خطوط الخلايا السرطانية في الغشاء القاعدي إعادة ربط مع السلوك التكاثري نائمة أو خلايا الورم في موقع ثانوي النقيلي<em&gt; في الجسم الحي</em&gt;.

و في المختبر النظام الدراسي لاستئصال ورم من الخمول وتبديل للنمو النقيلي

Recurrence of breast cancer often follows a long latent period in which there are no signs of cancer, and metastases may not become clinically apparent ...

an-vitro-system-to-study-tumor-dormancy-switch-to-metastatic

Research

JoVE Journal

Medicine

An In Vitro System to Study Tumor Dormancy and the Switch to Metastatic Growth

15.8K Views.  University of Haifa. ويرد تعديل 3 - D في النظام المختبر الذي خصائص النمو للعديد من خطوط الخلايا السرطانية في الغشاء القاعدي إعادة ربط مع السلوك التكاثري نائمة أو خلايا الورم في موقع ثانوي النقيلي في الجسم الحي.

Video: An In Vitro System to Study Tumor Dormancy and the Switch to Metastatic Growth

Utilizing Transcranial Magnetic Stimulation to Study the Human Neuromuscular System

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been in use for more than 20 years 1, and has grown exponentially in popularity over the past decade. While the use of TMS has expanded to the study of many systems and processes during this time, the original application and perhaps one of the most common uses of TMS involves studying the physiology, plasticity and function of the human neuromuscular system. Single pulse TMS applied to the motor cortex excites pyramidal neurons transsynaptically 2 (Figure 1) and results in a measurable electromyographic response that can be used to study and evaluate the integrity and excitability of the corticospinal tract in humans 3. Additionally, recent advances in magnetic stimulation now allows for partitioning of cortical versus spinal excitability 4,5. For example, paired-pulse TMS can be used to assess intracortical facilitatory and inhibitory properties by combining a conditioning stimulus and a test stimulus at different interstimulus intervals 3,4,6-8. In this video article we will demonstrate the methodological and technical aspects of these techniques. Specifically, we will demonstrate single-pulse and paired-pulse TMS techniques as applied to the flexor carpi radialis (FCR) muscle as well as the erector spinae (ES) musculature. Our laboratory studies the FCR muscle as it is of interest to our research on the effects of wrist-hand cast immobilization on reduced muscle performance6,9, and we study the ES muscles due to these muscles clinical relevance as it relates to low back pain8. With this stated, we should note that TMS has been used to study many muscles of the hand, arm and legs, and should iterate that our demonstrations in the FCR and ES muscle groups are only selected examples of TMS being used to study the human neuromuscular system.

Transcranial magnetic stimulation (TMS) is a non-invasive tool to gain insight on the physiology and function of the human nervous system. Here, we present our TMS techniques to study cortical excitability of the upper limb and lumbar musculature.

استخدام التنشيط المغناطيسي عبر الجمجمة لدراسة النظام العصبي العضلي الإنسان

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been in use for more than 20 years 1, and has grown exponentially in popularity over the past decade.  While ...

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current estimates put the prevalence of amblyopia at approximately 1-3%1-3, the majority of cases being monocular2. Amblyopia is most frequently caused by ocular misalignment (strabismus), blur induced by unequal refractive error (anisometropia), and in some cases by form deprivation.
Although amblyopia is initially caused by abnormal visual input in infancy, once established, the visual deficit often remains when normal visual input has been restored using surgery and/or refractive correction. This is because amblyopia is the result of abnormal visual cortex development rather than a problem with the amblyopic eye itself4,5 . Amblyopia is characterized by both monocular and binocular deficits6,7 which include impaired visual acuity and poor or absent stereopsis respectively. The visual dysfunction in amblyopia is often associated with a strong suppression of the inputs from the amblyopic eye under binocular viewing conditions8. Recent work has indicated that suppression may play a central role in both the monocular and binocular deficits associated with amblyopia9,10 .
Current clinical tests for suppression tend to verify the presence or absence of suppression rather than giving a quantitative measurement of the degree of suppression. Here we describe a technique for measuring amblyopic suppression with a compact, portable device11,12 . The device consists of a laptop computer connected to a pair of virtual reality goggles. The novelty of the technique lies in the way we present visual stimuli to measure suppression. Stimuli are shown to the amblyopic eye at high contrast while the contrast of the stimuli shown to the non-amblyopic eye are varied. Patients perform a simple signal/noise task that allows for a precise measurement of the strength of excitatory binocular interactions. The contrast offset at which neither eye has a performance advantage is a measure of the "balance point" and is a direct measure of suppression. This technique has been validated psychophysically both in control13,14 and patient6,9,11 populations.
In addition to measuring suppression this technique also forms the basis of a novel form of treatment to decrease suppression over time and improve binocular and often monocular function in adult patients with amblyopia12,15,16 . This new treatment approach can be deployed either on the goggle system described above or on a specially modified iPod touch device15.

Amblyopia is a developmental disorder of the visual cortex that is often accompanied by strong suppression of one eye. We present a new technique for measuring and treating interocular suppression in patients with amblyopia that can be deployed using virtual reality goggles or a portable iPod Touch device.

قياس وعلاج الحول في قمع

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a novel platform that allows for direct long-term visualization of tissue structure changes intracranially. Imaging at a single cell resolution in a real-time fashion provides supplementary dynamic information beyond that provided by standard end-point histological analysis, which looks solely at 'snap-shot' cross sections of tissue.
Establishing this intravital imaging technique in fluorescent chimeric mice, we are able to image four fluorescent channels simultaneously. By incorporating fluorescently labeled cells, such as GFP+ bone marrow, it is possible to track the fate of these cells studying their long-term migration, integration and differentiation within tissue. Further integration of a secondary reporter cell, such as an mCherry glioma tumor line, allows for characterization of cell:cell interactions. Structural changes in the tissue microenvironment can be highlighted through the addition of intra-vital dyes and antibodies, for example CD31 tagged antibodies and Dextran molecules.
Moreover, we describe the combination of our ICW imaging model with a small animal micro-irradiator that provides stereotactic irradiation, creating a platform through which the dynamic tissue changes that occur following the administration of ionizing irradiation can be assessed.
Current limitations of our model include penetrance of the microscope, which is limited to a depth of up to 900 &mu;m from the sub cortical surface, limiting imaging to the dorsal axis of the brain. The presence of the skull bone makes the ICW a more challenging technical procedure, compared to the more established and utilized chamber models currently used to study mammary tissue and fat pads 5-7. In addition, the ICW provides many challenges when optimizing the imaging.

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

We describe a novel in vivo imaging technique that couples fluorescent chimeric mice with intracranial windows and high-resolution 2-photon microscopy. This imaging platform aids studies of dynamic changes in brain tissue and microvasculature, at a single-cell level, following pathological insults and is adaptable to assess intracranial drug delivery and distribution.

رواية عالية الدقة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; تقنية التصوير لدراسة الاستجابة الديناميكية للمنشآت داخل القحف لنمو الورم والتداوي

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the functions of proteins involved in oncogenic progression or help to discover new tumor suppressors. In addition, injecting cancer cells into mice with different genotypes might provide a better understanding of the importance of the stromal compartment. Many models may be useful to investigate certain aspects of disease progression but do not recapitulate the entire cancerous process. In contrast, breast cancer cells engraftment to the mammary fat pad of mice better recapitulates the location of the disease and presence of the proper stromal compartment and therefore better mimics human cancerous disease. In this article, we describe how to implant breast cancer cells into mice orthotopically and explain how to collect tissues to analyse the tumor milieu and metastasis to distant organs. Using this model, many aspects (growth, angiogenesis, and metastasis) of cancer can be investigated simply by providing a proper environment for tumor cells to grow.

Cancer is a complex disease that is influenced by the tissue surrounding the tumor as well as local pro- and anti-inflammatory mediators. Therefore, orthotropic injection models, rather than subcutaneous models may be useful to study cancer progression in a manner that better mimics human pathology.

حقن مثلي من خلايا سرطان الثدي في الثديية الدهون وسادة من الفئران لدراسة نمو الأورام.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the lack of the bone microenvironment and auto/paracrine growth factors human MM cells are difficult to cultivate. Therefore, there is an urgent need to establish proper in vitro and in vivo culture systems to study the action of novel therapeutics on human MM cells. Here we present a model to grow human multiple myeloma cells in a complex 3D environment in vitro and in vivo. MM cell lines OPM-2 and RPMI-8226 were transfected to express the transgene GFP and were cultivated in the presence of human mesenchymal cells and collagen type-I matrix as three-dimensional spheroids. In addition, spheroids were grafted on the chorioallantoic membrane (CAM) of chicken embryos and tumor growth was monitored by stereo fluorescence microscopy. Both models allow the study of novel therapeutic drugs in a complex 3D environment and the quantification of the tumor cell mass after homogenization of grafts in a transgene-specific GFP-ELISA. Moreover, angiogenic responses of the host and invasion of tumor cells into the subjacent host tissue can be monitored daily by a stereo microscope and analyzed by immunohistochemical staining against human tumor cells (Ki-67, CD138, Vimentin) or host mural cells covering blood vessels (desmin/ASMA).
In conclusion, the onplant system allows studying MM cell growth and angiogenesis in a complex 3D environment and enables screening for novel therapeutic compounds targeting survival and proliferation of MM cells.

Human multiple myeloma (MM) cells require the supportive microenvironment of mesenchymal cells and extracellular matrix components for survival and proliferation. We established an in vivo chicken embryo model with engrafted human myeloma and mesenchymal cells to study effects of cancer drugs on tumor growth, invasion and angiogenesis.

إنشاء طعم أجنبي نموذج المايلوما المتعددة الإنسان في الدجاج لدراسة نمو الورم والغزو والأوعية الدموية

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of women are alive 5 years after diagnosis. The omentum is a preferred site of HGSC metastasis formation. Despite the clinical importance of this microenvironment, the contribution of omental adipose tissue to ovarian cancer progression remains understudied. Omental adipose is unusual in that it contains structures known as milky spots, which are comprised of B, T, and NK cells, macrophages, and progenitor cells surrounding dense nests of vasculature. Milky spots play a key role in the physiologic functions of the omentum, which are required for peritoneal homeostasis. We have shown that milky spots also promote ovarian cancer metastatic colonization of peritoneal adipose, a key step in the development of peritoneal metastases. Here we describe the approaches we developed to evaluate and quantify milky spots in peritoneal adipose and study their functional contribution to ovarian cancer cell metastatic colonization of omental tissues both in vivo and ex vivo. These approaches are generalizable to additional mouse models and cell lines, thus enabling the study of ovarian cancer metastasis formation from initial localization of cells to milky spot structures to the development of widespread peritoneal metastases.

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

We outline a protocol that implements both in vivo and ex vivo approaches to study ovarian cancer colonization of peritoneal adipose tissues, particularly the omentum. Furthermore, we present a protocol to quantitate and analyze immune cell-structures in the omentum known as milky spots, which promote metastases of peritoneal adipose.

في فيفو وفيفو السابقين المداخل لدراسة سرطان المبيض النقيلي الاستعمار من الهياكل التبانة بقعة في البريتوني الدهنية

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of ...

Injection of Syngeneic Murine Melanoma Cells to Determine Their Metastatic Potential in the Lungs

Approximately 90% of human cancer deaths are linked to metastasis. Despite the prevalence and relative harm of metastasis, therapeutics for treatment or prevention are lacking. We report a method for the establishment of pulmonary metastases in mice, useful for the study of this phenomenon. Tail vein injection of B57BL/6J mice with B16-BL6 is among the most used models for melanoma metastases. Some of the circulating tumor cells establish themselves in the lungs of the mouse, creating "experimental" metastatic foci. With this model it is possible to measure the relative effects of therapeutic agents on the development of cancer metastasis. The difference in enumerated lung foci between treated and untreated mice indicates the efficacy of metastases neutralization. However, prior to the investigation of a therapeutic agent, it is necessary to determine an optimal number of injected B16-BL6 cells for the quantitative analysis of metastatic foci. Injection of too many cells may result in an overabundance of metastatic foci, impairing proper quantification and overwhelming the effects of anti-cancer therapies, while injection of too few cells will hinder the comparison between treated and controls.

Metastasis plays a profound role in the virulence of cancer, accounting for an estimated 90% of deaths. We report a protocol for a metastatic melanoma model in mice that is useful for determining the efficacy of therapeutic agents against this clinical phenomenon.

حقن خلايا الفئران مسانج الميلانوما لتحديد ما إمكاناتهم الإنتقالية في الرئتين

Approximately 90% of human cancer deaths are linked to metastasis.  Despite the prevalence and relative harm of metastasis, therapeutics for treatment or ...

Using Retinal Imaging to Study Dementia

The retina offers a unique &#8220;window&#8221; to study pathophysiological processes of dementia in the brain, as it is an extension of the central nervous system (CNS) and shares prominent similarities with the brain in terms of embryological origin, anatomical features and physiological properties.&#160; The vascular and neuronal structure in the retina can now be visualized easily and non-invasively using retinal imaging techniques, including fundus photography and optical coherence tomography (OCT), and quantified semi-automatically using computer-assisted analysis programs. Studying the associations between vascular and neuronal changes in the retina and dementia could improve our understanding of dementia and, potentially, aid in diagnosis and risk assessment.&#160; This protocol aims to describe a method of quantifying and analyzing retinal vasculature and neuronal structure, which are potentially associated with dementia. This protocol also provides examples of retinal changes in subjects with dementia, and discusses technical issues and current limitations of retinal imaging.

The retina shares prominent similarities with the brain and thus represents a unique window to study vasculature and neuronal structure in the brain non-invasively. This protocol describes a method to study dementia using retinal imaging techniques. This method can potentially aid in diagnosis and risk assessment of dementia.

باستخدام تصوير الشبكية لدراسة الخرف

The retina offers a unique &#8220;window&#8221; to study pathophysiological processes of dementia in the brain, as it is an extension of the central ...

Surgical Labyrinthectomy of the Rat to Study the Vestibular System

To study the vestibular system or the vestibular compensation process, a number of methods have been developed to cause vestibular damage, including surgical or chemical labyrinthectomy and vestibular neurectomy. Surgical labyrinthectomy is a relatively simple, reliable, and rapid method. Here, we describe the surgical technique for rat labyrinthectomy. A postauricular incision is made under general anesthesia to expose the external auditory canal and the tympanic membrane, after which the tympanic membrane and the ossicles are removed without the stapes. The stapes artery, which is located between the stapes and the oval window, is a vulnerable structure and must be preserved to obtain a clear surgical field. A hole to fenestrate the vestibule is made with a 2.1-mm drill bur superior to the stapes. Then, 100% ethanol is injected through this hole and aspirated several times. Meticulous dissection under a microscope and careful bleeding control are essential to obtain reliable results. Symptoms of vestibular loss, such as nystagmus, head tilting, and a rolling motion, are seen immediately after surgery. The rotarod or rotation chair test can be used to objectively and quantitatively evaluate the vestibular function.

This protocol describes the surgical labyrinthectomy of a rat, which is a useful method for studying the vestibular system.

لابيرينثيكتومي الجراحية من الفئران لدراسة نظام الدهليزية

To study the vestibular system or the vestibular compensation process, a number of methods have been developed to cause vestibular damage, including ...

بروتوكول Tuina الموحد لنموذج ضغط DRG للفئران

Analgesic Effect of Tuina on Rat Models with Compression of the Dorsal Root Ganglion Pain

Neuropathic pain is a prevalent condition that affects 6.9%-10% of the population and results from nerve damage due to various etiologies, such as lumbar disc herniation, spinal canal stenosis, and intervertebral foramen stenosis. Although Tuina, a traditional Chinese manual therapy, has shown analgesic effects in clinical practice for the treatment of neuropathic pain, its underlying neurobiological mechanisms remain unclear. Animal models are essential for elucidating the basic principles of Tuina. In this study, we propose a standardized Tuina protocol for rats with compression of the dorsal root ganglion (DRG), which involves inducing DRG compression by inserting a stainless steel rod into the intervertebral foramen, performing Tuina manipulation with specific parameters of location, intensity, and frequency in a controlled environment, and assessing the behavioral and histopathological outcomes of Tuina treatment. This article also discusses the potential clinical implications and limitations of the study and suggests directions for future research on Tuina.

تسليط الضوء على المؤلف: تأثير مسكن من Tuina على نماذج الفئران مع ضغط آلام العقدة الجذر الظهرية  

This article presents a manipulation for treating chronic compression of the dorsal root ganglion in rats using Tuina therapy, along with a method for evaluating its effectiveness based on pain behavior and histopathological results.

تأثير مسكن التوينا على نماذج الفئران مع ضغط آلام العقدة الجذرية الظهرية

Neuropathic pain is a prevalent condition that affects 6.9%-10% of the population and results from nerve damage due to various etiologies, such as lumbar ...