وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل شعبة برنامج بحوث جماعية (DIRP) من المعهد الوطني للصحة العقلية ، المعاهد الوطنية للصحة.

<ol>
	<li>Spitzer, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+activity+in+early+neuronal+development.">Electrical activity in early neuronal development.</a> Nature. 444, 707-712 (2006).</li><li>Beggs, J. M., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+avalanches+in+neocortical+circuits.">Neuronal avalanches in neocortical circuits.</a> J. Neurosci. 23, 11167-11177 (2003).</li><li>Beggs, J. M., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+avalanches+are+diverse+and+precise+activity+patterns+that+are+stable+for+many+hours+in+cortical+slice+cultures.">Neuronal avalanches are diverse and precise activity patterns that are stable for many hours in cortical slice cultures.</a> J Neurosci. 24, 5216-5229 (2004).</li><li>Stewart, C. V., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inverted-U+profile+of+dopamine-NMDA-mediated+spontaneous+avalanche+recurrence+in+superficial+layers+of+rat+prefrontal+cortex.">Inverted-U profile of dopamine-NMDA-mediated spontaneous avalanche recurrence in superficial layers of rat prefrontal cortex.</a> J. Neurosci. 26, 8148-8159 (2006).</li><li>Stewart, C. V., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homeostasis+of+neuronal+avalanches+during+postnatal+cortex+development+in+vitro.">Homeostasis of neuronal avalanches during postnatal cortex development in vitro.</a> J. Neurosci. Meth. 169, 405-416 (2007).</li><li>Gireesh, E. D., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+avalanches+organize+as+nested+theta-+and+beta/gamma-oscillations+during+development+of+cortical+layer+2/3.">Neuronal avalanches organize as nested theta- and beta/gamma-oscillations during development of cortical layer 2/3.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 105, 7576-7581 (2008).</li><li>Petermann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+cortical+activity+in+awake+monkeys+composed+of+neuronal+avalanches.">Spontaneous cortical activity in awake monkeys composed of neuronal avalanches.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106, 15921-15926 (2009).</li><li>Kinouchi, O., Copelli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimal+dynamical+range+of+excitable+networks+at+criticality.">Optimal dynamical range of excitable networks at criticality.</a> Nature Physics. 2, 348-351 (2006).</li><li>Shew, W. L., Yang, H., Petermann, T., Roy, R., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+avalanches+imply+maximum+dynamic+range+in+cortical+networks+at+criticality.">Neuronal avalanches imply maximum dynamic range in cortical networks at criticality.</a> J. Neurosci. 29, 15595-15600 (2009).</li><li>Shew, W. L., Yang, H., Yu, S., Roy, R., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Information+capacity+is+maximized+in+balanced+cortical+networks+with+neuronal+avalanches.">Information capacity is maximized in balanced cortical networks with neuronal avalanches.</a> J Neurosci. 5, 55-63 (2011).</li><li>Karpiak, V., Plenz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+maintenance+of+organotypic+cultures+for+multi-electrode+array+recordings.">Preparation and maintenance of organotypic cultures for multi-electrode array recordings.</a> Current Protocols in Neuroscience. 1, 6-6 (2002).</li><li>Hammerle, H., Egert, U., Mohr, A., Nisch, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+recording+in+neuronal+networks+with+substrate+integrated+microelectrode+arrays.">Extracellular recording in neuronal networks with substrate integrated microelectrode arrays.</a> Biosens. Bioelectron. 9, 691-696 (1994).</li><li>Nisch, W., Bock, J., Egert, U., Hammerle, H., Mohr, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+thin+film+microelectrode+array+for+monitoring+extracellular+neuronal+activity+in+vitro.">A thin film microelectrode array for monitoring extracellular neuronal activity in vitro.</a> Biosens. Bioelectron. 9, 737-741 (1994).</li><li>Egert, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+organotypic+long-term+culture+of+the+rat+hippocampus+on+substrate-integrated+multielectrode+arrays.">A novel organotypic long-term culture of the rat hippocampus on substrate-integrated multielectrode arrays.</a> Brain Res. Protoc. 2, 229-242 (1998).</li><li>Altman, J., Bayer, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Atlas of Prenatal Rat Brain Development. , (1995).</li><li>Clauset, A., Shalizi, C. R., Newman, M. E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Power-law+distributions+in+empirical+data.">Power-law distributions in empirical data.</a> arXiv. , (2009).</li><li>Plenz, D., Thiagarajan, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+organizing+principles+of+neuronal+avalanches:+cell+assemblies+in+the+cortex?.">The organizing principles of neuronal avalanches: cell assemblies in the cortex?.</a> Trends Neurosci. 30, 101-110 (2007).</li><li>C&#228;ser, M., Bonhoeffer, T., Bolz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+organization+and+development+of+slice+cultures+from+rat+visual+cortex.">Cellular organization and development of slice cultures from rat visual cortex.</a> Exp. Brain Res. 477, 234-244 (1989).</li><li>C&#228;ser, M., Sch&#252;z, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturation+of+neurons+in+neocortical+slice+cultures.+A+light+and+electron+microscopic+study+on+in+situ+and+in+vitro+material.">Maturation of neurons in neocortical slice cultures. A light and electron microscopic study on in situ and in vitro material.</a> J. Hirnforsch. 33, 429-443 (1992).</li><li>G&#246;tz, M., Bolz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+vasoactive+intestinal+polypeptide+(VIP)-containing+neurons+in+organotypic+slice+cultures+from+rat+visual+cortex.">Development of vasoactive intestinal polypeptide (VIP)-containing neurons in organotypic slice cultures from rat visual cortex.</a> Neurosci. Lett. 107, 6-11 (1989).</li><li>G&#246;tz, M., Bolz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+and+Preservation+of+cortical+layers+in+slice+cultures.">Formation and Preservation of cortical layers in slice cultures.</a> J. Neurobiol. 23, 783-802 (1992).</li><li>Bolz, J., Novak, N., G&#246;tz, M., Bonhoeffer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+target-specific+neuronal+projections+in+organotypic+slice+cultures+from+rat+visual+cortex.">Formation of target-specific neuronal projections in organotypic slice cultures from rat visual cortex.</a> Nature. 346, 359-362 (1990).</li><li>Bolz, J., Novak, N., Staiger, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+specific+afferent+connections+in+organotypic+slice+cultures+from+rat+visual+cortex+cocultured+with+lateral+geniculate+nucleus.">Formation of specific afferent connections in organotypic slice cultures from rat visual cortex cocultured with lateral geniculate nucleus.</a> J. Neurosci. 12, 3054-3070 (1992).</li><li>Novak, N., Bolz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+specific+efferent+connections+in+organotypic+slice+cultures+from+rat+visual+cortex+cocultured+with+lateral+geniculate+nucleus+and+superior+colliculus.">Formation of specific efferent connections in organotypic slice cultures from rat visual cortex cocultured with lateral geniculate nucleus and superior colliculus.</a> Eur. J. Neurosci. 5, 15-24 (1993).</li><li>Plenz, D., Aertsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+dynamics+in+cortex-striatum+co-cultures.+I.+Anatomy+and+electrophysiology+of+neuronal+cell+types.">Neural dynamics in cortex-striatum co-cultures. I. Anatomy and electrophysiology of neuronal cell types.</a> Neurosci. 70, 861-891 (1996).</li><li>Plenz, D., Aertsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+dynamics+in+cortex-striatum+co-cultures.+II.+Spatio-temporal+characteristics+of+neuronal+activity.">Neuronal dynamics in cortex-striatum co-cultures. II. Spatio-temporal characteristics of neuronal activity.</a> Neurosci. 70, 893-924 (1996).</li><li>Plenz, D., Kitai, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypic+cortex-striatum-mesencephalon+cultures:+the+nigro-striatal+pathway.">Organotypic cortex-striatum-mesencephalon cultures: the nigro-striatal pathway.</a> Neurosci. Lett. 209, 177-180 (1996).</li><li>Plenz, D., Kitai, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Up'+and+'down'+states+in+striatal+medium+spiny+neurons+simultaneously+recorded+with+spontaneous+activity+in+fast-spiking+interneurons+studied+in+cortex-striatum-substantia+nigra+organotypic+cultures.">Up' and 'down' states in striatal medium spiny neurons simultaneously recorded with spontaneous activity in fast-spiking interneurons studied in cortex-striatum-substantia nigra organotypic cultures.</a> J. Neurosci. 18, 266-283 (1998).</li><li>Plenz, D., Herrera-Marschitz, M., Kitai, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+organization+of+the+globus+pallidus-subthalamic+nucleus+system+studied+in+organotypic+cultures.">Morphological organization of the globus pallidus-subthalamic nucleus system studied in organotypic cultures.</a> J. Comp. Neurol. 397, 437-457 (1998).</li><li>Plenz, D., Kitai, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+basal+ganglia+pacemaker+formed+by+the+subthalamic+nucleus+and+external+globus+pallidus+[see+comments].">A basal ganglia pacemaker formed by the subthalamic nucleus and external globus pallidus [see comments].</a> Nature. 400, 677-682 (1999).</li><li>Plenz, D., Kitai, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+high-frequency+oscillations+in+local+circuits+of+rat+somatosensory+cortex+cultures.">Generation of high-frequency oscillations in local circuits of rat somatosensory cortex cultures.</a> J Neurophysiol. 76, 4180-4184 (1996).</li><li>Klostermann, O., Wahle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+spontaneous+activity+and+morphology+of+interneuron+types+in+organotypic+cortex+and+thalamus-cortex+cultures.">Patterns of spontaneous activity and morphology of interneuron types in organotypic cortex and thalamus-cortex cultures.</a> Neurosci. 92, 1243-1259 (1999).</li><li>Cowan, R. L., Wilson, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+firing+patterns+and+axonal+projections+of+single+cortico-striatal+neurons+in+the+rat+medial+agranular+cortex.">Spontaneous firing patterns and axonal projections of single cortico-striatal neurons in the rat medial agranular cortex.</a> J. Neurophysiol. 71, 17-32 (1994).</li><li>Porter, L. L., Rizzo, E., Hornung, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopamine+affects+parvalbumin+expression+during+cortical+development+in+vitro.">Dopamine affects parvalbumin expression during cortical development in vitro.</a> J Neurosci. 19, 8990-9003 (1999).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

1. المسائل التقنية : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقنية معقمة ويتم تنفيذ كافة وإعداد الاتفاقات وإعداد ثقافة داخل غطاء تدفق الصفحي تحت ظروف معقمة. لا يتم استخدام المضادات الحيوية ، والتي تؤثر على نشاط الخلايا العصبية ، في أي وقت أثناء عملية إعداد والثقافة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> البلازما / ثرومبين التخثر والتقيد الأنسجة على بقاء الشرق الأوسط وأفريقيا. الأنسجة على شركة طيران الشرق الأوسط يتطلب توازنا دقيقا بين الوقت اللازم للبلازما / ثرومبين تجلط الدم والأنسجة وقت التعرض إلى الغلاف الجوي. زمن التخثر قصيرة المخاطر مفرزة من السابق لأوانه المقاطع من الشرق الأوسط وأفريقيا ، في حين أن التعرض لفترات طويلة في الغلاف الجوي يؤدي تدهور الأنسجة. لأن قوة الحل ثرومبين يحدد سرعة عملية تخثر الدم ، وهو معيار مهم لربط بنجاح والثقافات صحية على سطح الشرق الأوسط وأفريقيا. نحصل على أفضل النتائج باستخدام 1000 وحدة (1KU ؛ 1 = 0،324 وحدة NIH ± 0.073 ملغ). الأهم من ذلك ، غير مكتملة من نتائج الاختلاط حل البلازما / ثرومبين في تجلط الدم غير متجانسة مكانيا تعزيز البلازما تصدعات خلال زراعة. &quot;الثقوب&quot; هذه البلازما تؤثر بشدة على صحة الثقافة وفصل الثقافة عن microelectrodes ، مما يهدد بالتالي نوعية تسجيل الكهربية. العمل مع لوحات التبريد خلال MEA / الأنسجة تجميع يبطئ من التخثر ، ويسمح لخلط متجانسة من الحل البلازما / ثرومبين وتحديد المواقع المناسبة للأقسام الأنسجة. وبالمثل ، وذلك بإضافة قطرات المتوسطة في غرفة واحدة في ثقافة لغمر الثقافة بعد 5 دقائق فقط من حالات تخثر الدم ، ويقلل كثيرا من خطر انفصال الأنسجة بسبب التوترات السطح. إن ثقافة ناجحة تتسطح على شركة طيران الشرق الأوسط وتوسيع قليلا تظهر نمو صحي لمدة أسابيع ، من دون أي علامات كبرى للاتصال الأنسجة MEA ناقصة أو تنكس النسيج (مثل الشكل 1D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وقد تحسنت تشريح الأنسجة. سكاكين مايكرو كثيرا عمليتنا تشريح. نحن الاستعمال المزدوج شفرات الحلاقة حافة (أدوات العلوم الجميلة -- كسر شفرات المشرط -- 100050-00) ، والتي من ننقسم ~ 2 ملم واسعة &#39;ريش&#39; باستخدام كماشة ، وتحميلهم مع حامل المشرط. تشريح عينات الأنسجة من شريحة الاكليلية به على نحو سلس ، والحركة شركة العمودي للشفرة بالتالي خفض كبير للإجهاد بسبب الانسحاب من النسيج العام وتحسين الصحة الثقافة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نسيج التبريد. التبريد المناسب للشرائح وقطاعات الأنسجة أثناء إعداد أمر ضروري لنجاح الثقافة. نستخدمها لوحات مصنوعة خصيصا الباردة مبنية من العناصر المرفقة تحت بلتيير إلى قرص معدني. تتم إزالة الحرارة التي تنتجها من خلال العنصر بلتيير نضح الماء البارد. هذا يقلل بدرجة كبيرة من الوقت اللازم لإعداد ويوحد التبريد خلال كل مرحلة من مراحل التحضير (Dold مختبرات الهندسة و 131 مزرعة الدكتور سيغان ، TX 78155 ، (830) 560-1471)). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وقد حاضنة الشرط. وحاضنة مصنوعة خصيصا مع دقة الظروف الداخلية هزاز حاسم لنجاحنا في زراعة شرائح على الاتفاقات. على أساس الأصلي في منزل التصميم Multichannelsystems (غير متوفر حاليا تجاريا) ، وجهاز هزاز الداخلية تتكون من الصواني التي تعلق على عجلتين الجانب كبيرة. محركات التنقل والضوابط المحوسبة تسمح لمسار دقيق هزاز (هزاز الزاوية ، هزاز السرعة ، وتوقف متقطع). في نهاية المطاف ، والثقافات شريحة بحاجة إلى أن يتعرض إلى متوسطة الغلاف الجوي والثقافة في تداول بطيئة. النهج التقليدي لوضع شريحة الثقافات في أنابيب ضيقة التي تدور ببطء على طول محور أطول هناك. هنا ، وبطء دوران لا ينتج إجهاد نتيجة لدوران نفسه ، وسرعة دوران عالية بما فيه الكفاية للحصول على الأمثل &quot;التغذية / التنفس&#39; دورة من حوالي 5-10 مدة دقيقة. الداخلية أكثر إحكاما للغرفة MEA ، حجمه الكلي من سم 2 ~ والمتوسطة الصغيرة الحجم الثقافة المطلوبة لتكييف المتوسطة من الأنسجة نفسها ، ويشكل تحديا كبيرا. التي تعصف بين شركة طيران الشرق الأوسط زاوية ° ± ~ 70 (دورة الزمن : ~ 200 ق) ، وتباطؤ سرعة هزاز والتحولات الثقافية بين المرحلة السائلة والغلاف الجوي ، ووقف هزاز في الزوايا المتطرفة لمدد التعرض للجو و كانت ضرورية للبقاء الثقافة. </li></ol> 2. العمر النمائي للثقافات لدراسة القشرة الثلجية العصبية وتؤخذ عادة من شرائح القشرة الحادة في الفئران PND 0-1 والمثقف لعدة أسابيع في الشرق الأوسط وأفريقيا. وقد أظهرت الدراسات المبكرة بوضوح أن شريحة واحدة الثقافات القشرة ، وبعد عدة أسابيع في المختبر ، والحفاظ على بنية الطبقات مع أنواع الخلايا التي يمكن تحديدها ويمكن مقارنة بسهولة إلى الخلية الحية في الطبقات 18،18-21. وقد تم تنظيم الطبقات في هذا النظام في المختبر تستخدم بشكل ملائم لدراسة مهاديتعصيب من القشرة خلال التنمية 22-24 ، فضلا عن هياكل القيادة تحت القشرية مثل المخطط 25،26. في الواقع ، والدقة في تشكيل الوصلات العصبية داخل وعبر مناطق الدماغ تسمح لبناء مجمع في المختبر الذي نظم استعادة العديد من نظم الإسقاط تفصيلا ، على سبيل المثال أن من العقد القاعدية ، قشرة الدوائر 27-30. بعد 4 -- 6 أسابيع في المختبر ، واحد شرائح القشرة 31 و شرائح قشرة شارك في تربيتها مع المخطط 26 أو 32 المهاد عفوية تظهر أعلى ولأسفل الدول التي توجد عادة في الجسم الحي في الفئران يوريتان تخدير 33. التنظيم الزمني للغرامة تصل هذه الدول تحمل السمة المميزة لθ متداخلة وγ - التذبذبات الإرشادية لشبكة من الخلايا العصبية الناضجة electrophysiologically الهرمية وسريع التشويك interneurons GABAergic 31. الأهم من ذلك ، في غياب التحفيز D2 مستقبلات الدوبامين ، تأخر نضج parvalbumin إيجابية interneurons القشرية اسابيع حوالي 2 في الثقافات شريحة قشرة 34. تمشيا مع هذه النتائج ، ودوام التنموية للθ متداخلة ، وβ γ - يتم مطابقة لتلك التذبذبات في الجسم الحي عند شرائح القشرة التعاون مع مثقف المنطقة الجوفية السقيفية (VTA) ، الذي يحتوي على الخلايا العصبية الدوبامين إلى إسقاط 6 القشرة. هذه الدراسات تشير إلى أن الخلايا العصبية عند دراسة الانهيارات الثلجية ، والتي تعتمد بشكل حاسم على تثبيط ناضجة GABAergic سريع وتقع في الطبقات السطحية للقشرة 2،4 ، والرعاية العظيمة التي يجب اتخاذها لضمان النضج السليم للأنسجة القشرية. بينما الانهيارات العصبية تنشأ في الثقافات قشرة واحدة على مدار الساعة من 2 -- 4 5 أسابيع ، وعندما تتطلب دوام التنموية التي يتم مطابقة للتنمية في الجسم الحي ، وشرائح القشرة في حاجة الى تحفيز مستقبلات الدوبامين المناسبة ، على سبيل المثال من قبل شرائح القشرة شارك في زراعة مع VTA 6.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات (اختياري) </th></tr><tr><td> مجموعة متكاملة multielectrode مستو </td><td> نظم متعددة ( <a href="http://www.multichannelsystems.com">www.multichannelsystems.com</a> ) ALA الآلات العلمية (www.alascience.com) </td><td> <a href="http://www.multichannelsystems.com/products-mea/product-details/products/158/20030ir-ito-wo.html">200/30iR-ITO-w/o</a> </td><td> التيتانيوم النترات (القصدير) أقطاب (30 مم) ذات سطح كبير مما أدى إلى انخفاض مقاومة (~ 1،5 أوم في 1 كيلو هرتز) وممتازة واسعة النطاق تسجيلات (ث / س -- من دون الدائري) </td></tr><tr><td> الغرفة الزجاجية </td><td> www.aceglass.com </td><td> 7620-32 </td><td> الخيوط الزجاجية اسطوانة </td></tr><tr><td> سقف الغرفة </td><td> www.aceglass.com </td><td> 7622-114 </td><td> غطاء من البلاستيك مع إدراج تفلون </td></tr><tr><td> Sylgard 184 </td><td> www.wpiinc.com </td><td> SYLG184 </td><td> جزئين سيليكون الاستومر </td></tr><tr><td> بولي - D - يسين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P6407 - 5mg </td><td> γ - المشع ، مجفف بالتجميد مسحوق ، مثقف الخلايا التي تم اختبارها. أعيد بالماء 5 مل deionised قبل الاستخدام. </td></tr><tr><td> محلول ملح Gey المتوازن </td><td> سيغما الدريخ </td><td> G9779 - 500mL </td><td> العقيمة التي تمت تصفيتها والمثقف اختبار </td></tr><tr><td> الدجاج البلازما </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P3266 - 5mL </td><td> مجفف بالتجميد ، إعادة المياه مع 5 مل منزوع الأيونات قبل الاستخدام. </td></tr><tr><td> ثرومبين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> T6634 - 1KU </td><td> من البلازما البقري ، شكل مسحوق مجفف بالتجميد. </td></tr><tr><td> حصان المصل </td><td> سيغما الدريخ </td><td> H1138 - 100ML </td><td> قطيع من الجهات المانحة ، واختبارها الحرارة المعطل ، والثقافة الخلية </td></tr><tr><td> القاعدية متوسطة النسر </td><td> Invitrogen </td><td> 21010-046 </td><td> 1X ، 500 مل -- (+) أملاح ايرل و(--) L - الجلوتامين) ، </td></tr><tr><td> هانك في محلول ملحي التخزين المؤقت </td><td> Invitrogen </td><td> 24020-117 </td><td> 500 مل -- (+) المغنيسيوم ، (+) الكالسيوم ، ث / أحمر الفينول) </td></tr><tr><td> غرفة الشرائح </td><td> مختبر تيك - غرفة الشرائح ث / الغطاء (نونك) ، معقمة </td><td> 177429 </td><td></td></tr><tr><td> يوريدين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> U3003 </td><td></td></tr><tr><td> ARA - C - السيتوزين β - D - arabinofuranoside </td><td> سيغما الدريخ </td><td> C6645 </td><td></td></tr><tr><td> 5 - الفلورية 2&#39; - deoxyuridine </td><td> سيغما الدريخ </td><td> F0503 </td><td></td></tr></tbody></table>

multi-electrode array recordings of neuronal avalanches in organotypic cultures

القشرة نشطة بشكل عفوي ، حتى في غياب أي إدخال أو إخراج خاص السيارات. خلال التنمية ، وهذا النشاط هو المهم بالنسبة للهجرة ، والتفريق بين أنواع خلايا القشرة وتشكيل الوصلات العصبية 1. في الحيوانات الناضجة والنشاط المستمر يعكس الماضي والوضع الراهن للحيوان فيه ومتكاملة بسلاسة المنبهات الحسية لحساب الأعمال في المستقبل. وبالتالي ، فهم واضح لتنظيم أي نشاط مستمر العفوي هو شرط أساسي لفهم وظيفة القشرة. كشفت تقنيات التسجيل العديدة التي يتألف النشاط الجاري في القشرة العديد من الخلايا العصبية التي أنشطة فردية عابرة إلى مبلغ أكبر الأحداث التي يمكن أن يتم الكشف في الحقل المحتملة المحلي (LFP) مع microelectrodes خارج الخلية ، أو في الكهربائي (EEG) ، وmagnetoencephalogram (MEG ) ، وإشارة جريئة من التصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي (fMRI). وLFP حاليا طريقة الاختيار عند دراسة الخلايا العصبية مع النشاط السكاني وارتفاع القرار الزماني والمكاني في نطاق جرحشاعثزرحشرتاد (عدة آلاف من الخلايا العصبية). في microelectrode خارج الخلية ، متزامنة محليا أنشطة الخلايا العصبية نتيجة جارا مكانيا في الانحرافات السريع في LFP يصل الى عدة مئات من microvolts. عند استخدام صفيف microelectrodes ، يمكن لمؤسسات مثل هذه الانحرافات رصدها بسهولة في المكان والزمان. الانهيارات العصبية تصف منظمة النطاق ثابتة spatiotemporal من نشاط الخلايا العصبية في الدماغ الجارية 2،3. فهي محددة إلى الطبقات السطحية للقشرة على النحو المنصوص عليه في المختبر 4،5 في الجسم الحي في الفئران تخدير 6 ، وقرد في مستيقظا 7 الأهم ، والدراسات النظرية والتجريبية تشير إلى أن 2،8-10 الانهيارات العصبية تشير إلى وجود متوازن بشكل رائع ديناميات حالة حرجة من القشرة التي يحسن نقل المعلومات ومعالجة المعلومات. من أجل دراسة آليات تطوير الانهيار العصبي ، والصيانة ، والتنظيم ، في التحضيرات المختبر هي مفيدة للغاية ، كما أنها تسمح للتسجيلات مستقر من النشاط في ظل ظروف الانهيار تسيطر على وجه التحديد. البروتوكول الحالي توضح كيفية دراسة الانهيارات العصبية في المختبر عن طريق الاستفادة من التنمية طبقة سطحية في القشرة عضوي النمط الثقافات والثقافات شريحة أي نمت على مستو ، صفائف microelectrode المتكاملة (MEA ، وانظر أيضا 11-14).

Watch this Scientific Journal Video about Multi-electrode Array Recordings of Neuronal Avalanches in Organotypic Cultures at JoVE.com

Multi-electrode Array Recordings of Neuronal Avalanches in Organotypic Cultures

وهناك طريقة قوية لدراسة الانهيارات العصبية ، أي الحجم ثابتة رشقات نارية النشاط المكانية والزمانية ، مما يدل على دينامية حالة حرجة في القشرة. الانهيارات الثلجية تظهر تلقائيا في وضع طبقات القشرة السطحية للمثقف الذي يسمح على المدى الطويل قياسات للنشاط متكامل مع المصفوفات مستو متعددة القطب (MEA) في ظل الظروف تسيطر على وجه التحديد.

تسجيلات صفيف متعدد القطب من الانهيارات الجليدية الخلايا العصبية في الثقافات عضوي النمط

The cortex is spontaneously active, even in the absence of any particular input or motor output.  During development, this activity is important for the ...

multi-electrode-array-recordings-neuronal-avalanches-organotypic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

26.3K Views.  National Institute of Mental Health. وهناك طريقة قوية لدراسة الانهيارات العصبية ، أي الحجم ثابتة رشقات نارية النشاط المكانية والزمانية ، مما يدل على دينامية حالة حرجة في القشرة. الانهيارات الثلجية تظهر تلقائيا في وضع طبقات القشرة السطحية للمثقف الذي يسمح على المدى الطويل قياسات للنشاط متكامل مع ا...

Video: Multi-electrode Array Recordings of Neuronal Avalanches in Organotypic Cultures

Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium

Understanding neural circuits requires methods to record from many neurons simultaneously. For in vitro studies, one currently available technology is planar multielectrode array (MEA) recording. Here we document the use of MEAs to study the mouse vomeronasal organ (VNO), which plays an essential role in the detection of pheromones and social cues via a diverse population of sensory neurons expressing hundreds of types of receptors. Combining MEA recording with a robotic liquid handler to deliver chemical stimuli, the sensory responses of a large and diverse population of neurons can be recorded. The preparation allows us to remove the intact neuroepithelium of the VNO from the mouse and stimulate with a battery of chemicals or potential ligands while monitoring the electrical activity of the neurons for several hours. Therefore, this technique serves as a useful method for assessing ligand activity as well as exploring the properties of receptor neurons. We present the techniques needed to prepare the vomeronasal epithelium, MEA recording, and chemical stimulation.

Multielectrode array (MEA) recordings provide a method for studying the electrical activity of large populations of neurons. Here, we present the details of a MEA preparation to record from the mouse vomeronasal epithelium while simultaneously stimulating the tissue.

تسجيلات صفيف Multielectrode من الطلائية الميكعي

Understanding neural circuits requires methods to record from many neurons simultaneously. For in vitro studies, one currently available technology is ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the strength of their connections after brief periods of strong activation. This phenomenon, known as long-term potentiation (LTP) can last for hours or days and has become the best candidate mechanism for learning and memory 2. In addition, the well defined anatomy and connectivity of the hippocampus 3 has made it a classical model system to study synaptic transmission and synaptic plasticity4.
As our understanding of the physiology of hippocampal synapses grew and molecular players became identified, a need to manipulate synaptic proteins became imperative. Organotypic hippocampal cultures offer the possibility for easy gene manipulation and precise pharmacological intervention but maintain synaptic organization that is critical to understanding synapse function in a more naturalistic context than routine culture dissociated neurons methods.
Here we present a method to prepare and culture hippocampal slices that can be easily adapted to other brain regions. This method allows easy access to the slices for genetic manipulation using different approaches like viral infection 5,6 or biolistics 7. In addition, slices can be easily recovered for biochemical assays 8, or transferred to microscopes for imaging 9 or electrophysiological experiments 10.

We describe a method to prepare organotypic hippocampal slices that can be easily adapted to other brain regions. Brain slices are laid on porous membranes and culture media is allowed to form an interface. This method preserves the gross architecture of the hippocampus for up to 2 weeks in culture.

عضوي النمط الثقافات شريحة الحصين

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

The mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due to the abundance of molecular and genetic data. However, the developing mouse brain is not suitable for easy manipulation and imaging in vivo since the mouse embryo is inaccessible and opaque. Organotypic slice cultures of embryonic brains are therefore widely used to study murine brain development in vitro. Ex-vivo manipulation or the use of transgenic mice allows the modification of gene expression so that subpopulations of neuronal or glial cells can be labeled with fluorescent proteins. The behavior of labeled cells can then be observed using time-lapse imaging. Time-lapse imaging has been particularly successful for studying cell behaviors that underlie the development of the cerebral cortex at late embryonic stages 1-2. Embryonic organotypic slice culture systems in brain regions outside of the forebrain are less well established. Therefore, the wealth of time-lapse imaging data describing neuronal cell migration is restricted to the forebrain 3,4. It is still not known, whether the principles discovered for the dorsal brain hold true for ventral brain areas. In the ventral brain, neurons are organized in neuronal clusters rather than layers and they often have to undergo complicated migratory trajectories to reach their final position. The ventral midbrain is not only a good model system for ventral brain development, but also contains neuronal populations such as dopaminergic neurons that are relevant in disease processes. While the function and degeneration of dopaminergic neurons has been investigated in great detail in the adult and ageing brain, little is known about the behavior of these neurons during their differentiation and migration phase 5. We describe here the generation of slice cultures from the embryonic day (E) 12.5 mouse ventral midbrain. These slice cultures are potentially suitable for monitoring dopaminergic neuron development over several days in vitro. We highlight the critical steps in generating brain slices at these early stages of embryonic development and discuss the conditions necessary for maintaining normal development of dopaminergic neurons in vitro. We also present results from time lapse imaging experiments. In these experiments, ventral midbrain precursors (including dopaminergic precursors) and their descendants were labeled in a mosaic manner using a Cre/loxP based inducible fate mapping system 6.

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

A method to generate organotypic slices from the E12.5 murine embryonic midbrain is described. The organotypic slice cultures can be used to observe the behavior of dopaminergic neurons or other ventral midbrain neurons.

الثقافات شريحة عضوي النمط من المخ الأوسط بطني الجنينية : نظام لدراسة التنمية متعلق بالخلايا العصبية الدوبامينية في المختبر</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly oriented in the sagittal plane and develops mostly in the postnatal period in small rodents 3. Furthermore, several antibodies are available which selectively and intensively label Purkinje cells including all processes, with anti-Calbindin D28K being the most widely used. For viewing of dendrites in living cells, mice expressing EGFP selectively in Purkinje cells 11 are available through Jackson labs. Organotypic cerebellar slice cultures cells allow easy experimental manipulation of Purkinje cell dendritic development because most of the dendritic expansion of the Purkinje cell dendritic tree is actually taking place during the culture period 4. We present here a short, reliable and easy protocol for viewing and analyzing the dendritic morphology of Purkinje cells grown in organotypic cerebellar slice cultures. For many purposes, a quantitative evaluation of the Purkinje cell dendritic tree is desirable. We focus here on two parameters, dendritic tree size and branch point numbers, which can be rapidly and easily determined from anti-calbindin stained cerebellar slice cultures. These two parameters yield a reliable and sensitive measure of changes of the Purkinje cell dendritic tree. Using the example of treatments with the protein kinase C (PKC) activator PMA and the metabotropic glutamate receptor 1 (mGluR1) we demonstrate how differences in the dendritic development are visualized and quantitatively assessed. The combination of the presence of an extensive dendritic tree, selective and intense immunostaining methods, organotypic slice cultures which cover the period of dendritic growth and a mouse model with Purkinje cell specific EGFP expression make Purkinje cells a powerful model system for revealing the mechanisms of dendritic development.

We present a protocol that permits to view and to quantitatively asses the morphology of the dendritic tree of individual Purkinje cells grown in organotypic cerebellar slice cultures. This protocol is intended to promote studies on the mechanisms of Purkinje cell dendritic development.

على تحليل من الخليوي بركينيي علم الصرف شجيرى في الثقافات شريحة عضوي النمط

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs through activation of their ion channels and neurotransmitter receptors, and process information in part through activity-dependent release of gliotransmitters. Furthermore, astrocytes constitute the main uptake system for glutamate, contribute to potassium spatial buffering, as well as to GABA clearance. These cells therefore constantly monitor synaptic activity, and are thereby sensitive indicators for alterations in synaptically-released glutamate, GABA and extracellular potassium levels. Additionally, alterations in astroglial uptake activity or buffering capacity can have severe effects on neuronal functions, and might be overlooked when characterizing physiopathological situations or knockout mice. Dual recording of neuronal and astroglial activities is therefore an important method to study alterations in synaptic strength associated to concomitant changes in astroglial uptake and buffering capacities. Here we describe how to prepare hippocampal slices, how to identify stratum radiatum astrocytes, and how to record simultaneously neuronal and astroglial electrophysiological responses. Furthermore, we describe how to isolate pharmacologically the synaptically-evoked astroglial currents.

The preparation of acute brain slices from isolated hippocampi, as well as the simultaneous electrophysiological recordings of astrocytes and neurons in stratum radiatum during stimulation of schaffer collaterals is described. The pharmacological isolation of astroglial potassium and glutamate transporter currents is demonstrated.

تسجيلات الكهربية المزدوجة للSynaptically-استجابات Astroglial والخلايا العصبية في الحصين شرائح الحاد

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Design and Fabrication of Ultralight Weight, Adjustable Multi-electrode Probes for Electrophysiological Recordings in Mice

The number of physiological investigations in the mouse, mus musculus, has experienced a recent surge, paralleling the growth in methods of genetic targeting for microcircuit dissection and disease modeling. The introduction of optogenetics, for example, has allowed for bidirectional manipulation of genetically-identified neurons, at an unprecedented temporal resolution. To capitalize on these tools and gain insight into dynamic interactions among brain microcircuits, it is essential that one has the ability to record from ensembles of neurons deep within the brain of this small rodent, in both head-fixed and freely behaving preparations. To record from deep structures and distinct cell layers requires a preparation that allows precise advancement of electrodes towards desired brain regions. To record neural ensembles, it is necessary that each electrode be independently movable, allowing the experimenter to resolve individual cells while leaving neighboring electrodes undisturbed. To do both in a freely behaving mouse requires an electrode drive that is lightweight, resilient, and highly customizable for targeting specific brain structures.
A technique for designing and fabricating miniature, ultralight weight, microdrive electrode arrays that are individually customizable and easily assembled from commercially available parts is presented. These devices are easily scalable and can be customized to the structure being targeted; it has been used successfully to record from thalamic and cortical regions in a freely behaving animal during natural behavior.

Understanding the neural substrates of behavior requires brain circuit ensemble recording. Because of its genetic tractability, the mouse offers a model for circuit dissection and disease mimicry. Here, a method of designing and fabricating miniaturized probes is described that is suitable for targeting deep brain structure in the mouse.

تصميم وتصنيع وخفيفة الوزن، قابل للتعديل تحقيقات متعددة القطب للتسجيلات الكهربية في الفئران

The number of physiological investigations in the mouse, mus musculus, has experienced a recent surge, paralleling the growth in methods of genetic ...

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct electrophysiological characterization of the synaptic connections between individual neurons, but also pharmacological manipulation of either the presynaptic or the postsynaptic neuron. When carried out in organotypic hippocampal slice cultures, the probability that two neurons are synaptically connected is significantly increased. This preparation readily enables identification of cell types, and the neurons maintain their morphology and properties of synaptic function similar to that in native brain tissue. A major advantage of paired whole cell recordings is the highly precise information it can provide on the properties of synaptic transmission and plasticity that are not possible with other more crude techniques utilizing extracellular axonal stimulation. Paired whole cell recordings are often perceived as too challenging to perform. While there are challenging aspects to this technique, paired recordings can be performed by anyone trained in whole cell patch clamping provided specific hardware and methodological criteria are followed. The probability of attaining synaptically connected paired recordings significantly increases with healthy organotypic slices and stable micromanipulation allowing independent attainment of pre- and postsynaptic whole cell recordings. While CA3-CA3 pyramidal cell pairs are most widely used in the organotypic slice hippocampal preparation, this technique has also been successful in CA3-CA1 pairs and can be adapted to any neurons that are synaptically connected in the same slice preparation. In this manuscript we provide the detailed methodology and requirements for establishing this technique in any laboratory equipped for electrophysiology.

Pair recordings are simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling precise electrophysiological and pharmacological characterization of the synapses between individual neurons. Here we describe the detailed methodology and requirements for establishing this technique in organotypic hippocampal slice cultures in any laboratory equipped for electrophysiology.

تقرن تسجيلات خلية كاملة في عضوي شرائح الحصين

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct ...

Investigating Functional Regeneration in Organotypic Spinal Cord Co-cultures Grown on Multi-electrode Arrays

Adult higher vertebrates have a limited potential to recover from spinal cord injury. Recently, evidence emerged that propriospinal connections are a promising target for intervention to improve functional regeneration. So far, no in vitro model exists that grants the possibility to examine functional recovery of propriospinal fibers. Therefore, a representative model that is based on two organotypic spinal cord sections of embryonic rat, cultured next to each other on multi-electrode arrays (MEAs) was developed. These slices grow and, within a few days in vitro, fuse along the sides facing each other. The design of the used MEAs permits the performance of lesions with a scalpel blade through this fusion site without inflicting damage on the MEAs. The slices show spontaneous activity, usually organized in network activity bursts, and spatial and temporal activity parameters such as the location of burst origins, speed and direction of their propagation and latencies between bursts can be characterized. Using these features, it is also possible to assess functional connection of the slices by calculating the amount of synchronized bursts between the two sides. Furthermore, the slices can be morphologically analyzed by performing immunohistochemical stainings after the recordings. 
Several advantages of the used techniques are combined in this model: the slices largely preserve the original tissue architecture with intact local synaptic circuitry, the tissue is easily and repeatedly accessible and neuronal activity can be detected simultaneously and non-invasively in a large number of spots at high temporal resolution. These features allow the investigation of functional regeneration of intraspinal connections in isolation in vitro in a sophisticated and efficient way.

Here we present a protocol that is based on spinal cord slices cultured on multi-electrode arrays to study functional regeneration of propriospinal connections in vitro.

التحقيق التجديد الوظيفي في الحبل الشوكي عضوي النمط المشارك الثقافات نمت على صفائف متعدد القطب

Adult higher vertebrates have a limited potential to recover from spinal cord injury. Recently, evidence emerged that propriospinal connections are a ...

Direct-current Stimulation and Multi-electrode Array Recording of Seizure-like Activity in Mice Brain Slice Preparation

Cathodal transcranial direct-current stimulation (tDCS) induces suppressive effects on drug-resistant seizures. To perform effective actions, the stimulation parameters (e.g., orientation, field strength, and stimulation duration) need to be examined in mice brain slice preparations. Testing and arranging the orientation of the electrode relative to the position of the mice brain slice are feasible. The present method preserves the thalamocingulate pathway to evaluate the effect of DCS on anterior cingulate cortex seizure-like activities. The results of the multichannel array recordings indicated that cathodal DCS significantly decreased the amplitude of the stimulation-evoked responses and duration of 4-aminopyridine and bicuculline-induced seizure-like activity. This study also found that cathodal DCS applications at 15 min caused long-term depression in the thalamocingulate pathway. The present study investigates the effects of DCS on thalamocingulate synaptic plasticity and acute seizure-like activities. The current procedure can test the optimal stimulation parameters including orientation, field strength, and stimulation duration in an in vitro mouse model. Also, the method can evaluate the effects of DCS on cortical seizure-like activities at both the cellular and network levels.

Studies have shown that cathodal transcranial direct-current stimulation can produce suppressive effects on drug-resistant seizures. In this study, an in vitro experimental setup was devised in which the direct-current stimulation and multielectrode array recording of seizure-like activity were evaluated in mice brain slice preparation. The direct-current stimulation parameters were evaluated.

تحفيز التيار المباشر ومتعدد القطب تسجيل صفيف من مثل الاستيلاء آخر في الفئران إعداد شريحة الدماغ

Cathodal transcranial direct-current stimulation (tDCS) induces suppressive effects on drug-resistant seizures. To perform effective actions, the ...

Purkinje Cell Survival in Organotypic Cerebellar Slice Cultures

Organotypic slice culture is a powerful in vitro model that mimicks in vivo conditions more closely than dissociated primary cell cultures. In early postnatal development, cerebellar Purkinje cells are known to go through a vulnerable period, during which they undergo programmed cell death. Here, we provide a detailed protocol to perform mouse organotypic cerebellar slice culture during this critical time. The slices are further labeled to assess Purkinje cell survival and the efficacy of neuroprotective treatments. This method can be extremely valuable to screen for new neuroactive molecules.

Organotypic slice cultures are a powerful tool to study neurodevelopmental or degenerative/regenerative processes. Here, we describe a protocol that models the neurodevelopmental death of Purkinje cells in mouse cerebellar slice cultures. This method may benefit research in neuroprotective drug discovery.

البقاء علي قيد الحياة خليه purkinje في الثقافات شريحة المخيخ الوراثية

Organotypic slice culture is a powerful in vitro model that mimicks in vivo conditions more closely than dissociated primary cell cultures. In early ...