وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) AI091759 وكرون والتهاب القولون من مؤسسة وليام أميركا وشيلبي Modell مؤسسة أبحاث العائلة جائزة (لMN). تم تزويد البلهارسيا المصابين الفئران عن طريق مركز الموارد البلهارسيا المعدية (العقد NIAID N01 A130026).

1. تنقية البلهارسيا المنسونية البيض <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصيب السويسري وبستر الفئران مع البلهارسيا السركاريا، وهي المرحلة المعدية في دورة حياة البلهارسيا 8. بدلا من ذلك، الحصول على البلهارسيا الفئران المصابة من مركز الموارد البلهارسيا المعدية ( <a href="http://www.schisto-resource.org/" target="_blank">http://www.schisto-resource.org/~~V</a> ). ترك الفئران ل6-7 أسابيع بعد الإصابة، وهو الوقت الذي نقطة، والبيض موجودة في الكبد ويمكن استردادها على النحو المبين أدناه (انظر الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الفئران مع CO 2، والرطب مع الايثانول 70٪. ضع الماوس على ظهره. استخدام الملقط حادة ومقص لقطع الجلد والغشاء البريتوني الكامنة. استئصال الكبد، وتقع أسفل القفص الصدري والحجاب الحاجز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اللحم المفروم ناعما الأكباد وإضافة 20 مل في الكبد من خليط الهضم، ويتألف من كولاجيناز / dispase (0.5 ملغ / مل)، البنسلين (100 يو / مل) والستربتوميسين (100 ميكروغرام / مل) في برنامج تلفزيوني. وضع mixtلدى عودتهم في أنبوب 50 مل الصقر واحتضان بين عشية وضحاها في شاكر 37 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منبذة الخليط في 400 XG / 3 دقيقة / 20 درجة مئوية. صب بلطف السائل الزائد وملء أنبوب مع برنامج تلفزيوني. منبذة مرة أخرى وكرر PBS غسيل. بعد الطرد المركزي الماضي، resuspend بيليه في برنامج تلفزيوني 25 مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجهد بيليه معلق من خلال مصفاة المطبخ المعدنية القياسية (استخدام 50 مل حقنة الغطاس إلى الهريس القطع من خلال الكبد في كوب زجاج)، تليها تمرير الخليط عبر منخل ناعم (استخدام 10 مل حقنة لدفع خليط من خلال منخل ناعم في كأس زجاج الثانية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع خليط المتوترة في أنبوب 50 مل الصقر. الطرد المركزي في 400 XG / 5 دقيقة / 20 درجة مئوية. بعناية من اجل الخروج طاف دون أن تفقد بيليه. Resuspend بيليه في برنامج تلفزيوني مل 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تراكب مزج بلطف في الصعود إلى Percoll 20٪، و 40 مل من الانحدار Percoll مل و 32 مل 8 السكروز 0.25M (FW = 342.3 ذلك 8،56 ز sucrose/100 مل H 2 0). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منبذة 10 دقيقة / 800 XG / 20 درجة مئوية. ماصة قبالةد تجاهل الطبقة العليا هلامي من خلايا الكبد. إزالة البيض بيليه في أسفل مع ماصة نقل وضعت في أنبوب 15 مل الصقر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسيل 3X بيليه في برنامج تلفزيوني مل 10/1 EDTA مم / 1 ملم الإعدادات EGTA باستخدام الطرد المركزي: 3 دقائق / 30 XG / 20 درجة مئوية. Resuspend في 500 برنامج تلفزيوني ميكرولتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تراكب المزيج على Percoll الجديدة 25٪، 10 مل التدرج (2.5 مل Percoll و 7.5 مل السكروز 0.25M) باستخدام إعدادات الطرد المركزي: 10 دقيقة / 800 XG / 20 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل 3X في برنامج تلفزيوني 10 مل باستخدام إعدادات الطرد المركزي: 3 دقائق / 30 XG / 20 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في غسيل مشاركة 10 مل، وإزالة 100 ميكروليتر لحساب البيض. بيض حل بسرعة، لذلك يجب أن تكون مختلطة الأنبوب الصقر جيدا قبل إزالة عينة. تمييع العينة 100 ميكروليتر مع 900 PBS ميكرولتر. ينبغي أن يحسب 100 ميكرولتر من المزيج كما قطرات على شريحة المجهر باستخدام مجهر تشريح (1:10 تخفيف). وينبغي أن تستخدم على نطاق وتتحمل نصائح ماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Resuspend البيض في البيض 50000 / مل في برنامج تلفزيوني. ويمكن تخزين البيض لعدة أشهر في -80 درجة مئوية وإذابة مرة واحدة أو تويكه للاستخدام. قبل الاستخدام، وفحص تحت المجهر للتأكد من أن البيض لا تزال على حالها (انظر الشكل 1). </li></ol> 2. داخل الصفاق توعية مع س. بيض المنسونية: يوم 0 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعد البيض في برنامج تلفزيوني eggs/100 5000 ميكرولتر في أنبوب 5 snapcap مل. للحقن، ويقدر البيض 50٪ أكثر من اللازم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحميل إبرة قياس 23 3/4inch وحقنة 1 مل مع 100 ميكرولتر من تعليق بيضة لكل فأر. بيض تسوية، حتى إبرة الحمل مع البيض مباشرة قبل استخدامها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقنة صخرة ذهابا وإيابا إلى مزيج البيض قبل كل حقن، وحقن intraperitoneally 100 ميكرولتر من تعليق لكل فأر. </li></ol> 3. الرجعية المدارية التحدي عن طريق الوريد مع س. بيض المنسونية: يوم 14 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير البيض على النحو الوارد أعلاه في ميكرولتر eggs/100 5000. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران في غرفة متخصصة مع isoflurane (4٪)، أو intraperitoneally مع زيلازين (10 ملغ / كلغ) والكيتامين (120 ملغ / كلغ). عمق anestيتم تحديد hesia بواسطة معسر من قاطع الطريق، وضمان عدم استجابة المادية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد التحميل من الحقنة مل 1 و 23 إبرة قياس 3/4inch مع البيض، واستخدام الملقط لثني الإبرة بزاوية 90 درجة مع شطبة أسفل إلى الزاوية. ضمان عدم وجود فقاعات موجودة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس على جانب واحد. تراجع الجلد حتى عين وسوف تبرز، وحقن 100 ميكروليتر في الأوعية وراء مقلة العين بزاوية 45 درجة إلى الأنف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب إبرة، وتطبيق ضغط خفيف للسيطرة على النزيف. </li></ol> يجب أن تتم كل هذه الإجراءات كان خارجا مع الرعاية، ويجب مراقبة الفئران حتى يشفى من التخدير. تمت الموافقة على هذه البروتوكولات من قبل جامعة ولاية بنسلفانيا رعاية الحيوان المؤسسية واللجنة الاستخدام (IACUC). 4. التجريبية الحصاد: يوم 22 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الفئران مع CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الرطب الفأر مع الايثانول 70٪، ومكان على ظهره. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام كليل forcالعائد على السهم، فهم بطن الفار وجعل شق صغير في الجلد. إزالة الجلد بعناية مع مقص وفضح القفص الصدري والصفاق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خفض فتح الصفاق. قطع الشريان الأورطي البطني لاسترداد الدم مع ماصة باستير. تخزين على الجليد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الكبد وصولا الى كشف الحجاب الحاجز. استخدام مقص لقطع غرامة الحجاب الحاجز. قطع بعناية فتح القفص الصدري لفضح أنسجة الرئة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استرداد العقد اللمفاوية parathymic التي تستنزف في الرئة مع ملقط غرامة. وهذه مدسوس تحت القفص الصدري، على جانبي الغدة الصعترية 9. متجر على الجليد في وسائل الاعلام عقيمة 1mL (DMEM تستكمل مع 10٪ للحرارة المعطل مصل العجل الجنين، و 100 وحدة / مل البنسلين، 100 ميكروغرام / مل الستربتومايسين، 2 مم L-الجلوتامين، 50 ميكرومتر 2-المركابتويثانول، كل ما هو متاح من إينفيتروجن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاسترداد BAL، وتضخم الرئتين لتحليل نسيجية، يجب إجراء التنبيب داخل الرغامى. فضح القصبة الهوائية عن طريق تحريك الغدد اللعابية إلى الجانب، وplaciغرامة ملقط نانوغرام تحت القصبة الهوائية. باستخدام مقص غرامة، وقطع حفرة في وسط القصبة الهوائية، وإدراج أنبوب إلى الرئتين. تأمين الأنابيب عن طريق ربط مع الموضوع الجراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نعلق PBS مملوءة 1 مل حقنة للأنابيب وتضخم الرئتين مع PBS 1 مل. استرداد بعناية غسيل BAL مع حقنة. تخزين على الجليد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نعلق بارافورمالدهيد 4٪ (منهاج العمل) في برنامج تلفزيوني مملوءة حقنة 1 مل إلى أنابيب وتضخم الرئتين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأنابيب، وتشديد الخيط الجراحي لمنع تسريب لمنهاج العمل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح بعناية أنسجة الرئة ومكان في أنبوب 50 مل مع الصقر PFA مل 5 4٪. </li></ol> 5. إعداد الأنسجة المستردة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المصل: تخزين التالية على الثلج لمدة 30 دقيقة إلى 2 ساعة لتجلط الدم، يتم استرداد المصل من الدم عن طريق الطرد المركزي (13000 XG / 10 دقيقة / 4 درجات مئوية). يتم تخزين المصل عند -20 درجة مئوية، ويمكن استخدامها لELISAs خلوى أو س. المنسونية بيضة مستضد محدد مفتش isotype ELISAs <sup&gt; 6 و 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الغدد الليمفاوية: مستعدون تعليق خلية واحدة وعدد الخلايا المستخدمة لتقييم حجم الاستجابة المناعية. لفحص TH2 الاستقطاب الخلية، هي خلايا إعادة حفز مع س. المنسونية مستضد البيض لمدة 72 ساعة. يمكن فحص Intracellar تلطيخ خلوى بواسطة التدفق الخلوي، ويمكن استرداد supernatants وتخزينها في درجة مئوية -20 لإليسا من السيتوكينات TH2 (IL-4، IL-5، IL-13) 6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> BAL: خلايا من مكعبات (400 x ج / 5 دقيقة / 4 درجات مئوية). يتم استرداد السائل BAL وتخزينها في -20 درجة مئوية لتحليل السيتوكينات TH2 بواسطة ELISA. وتستخدم الخلايا BAL التهم باعتبارها قراءات لالتهاب الشعب الهوائية. الاستعدادات Cytocentrifuge من 10،000-100،000 الخلايا (500 دورة في الدقيقة / 5 دقيقة / 4 درجات مئوية)، وسوف تليها تلطيخ Diffquik تسمح تعداد التهابات تسلل 4 و 6. بدلا من ذلك، يمكن فحص الخلايا BAL بواسطة التدفق الخلوي 6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أنسجة الرئة: أنسجة الرئة هو ستورإد بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية. الأنسجة الثابتة هو جزءا لا يتجزأ من البارافين، مقطوع، والتي شنت على الشرائح للتحليل النسيجي والمناعي. </li></ol> 6. ممثل النتائج هذه تفاصيل بروتوكول جميع الخطوات اللازمة ل(ط) إعداد تنقية بيض البلهارسيا المنسونية للاستخدام في الجسم الحي (الشكل 1)، (ب) توعية وتحدي مع هذه الفئران البيض و(ثالثا) استرداد أجهزة للفحص من الاستجابة للالتهابات الرئة. هذا نموذج في فيفو يدفع بتكاثر امكانات استجابة الرئة TH2 التهابات. هذا ما أظهرته التهاب الشعب الهوائية، وكثرة اليوزينيات تصور حسب تعداد خلايا BAL والاستعدادات cytocentrifuge (الشكل 2). يمكن فحص H &amp; E-أقسام الرئة الملون للبيضة التي يسببها حبيبية (الشكل 3A)، وتلطيخ مناعي من أقسام الرئة تسمح برؤية الضامة تفعيلها بدلا من ذلك، وTH2 خلوى الناجمة عن الجينات مثل Resisالقصدير مثل α (RELM) جزيء (الشكل 3B). يتم فحص المستضد محددة CD4 استجابة خلوى TH2 بواسطة ELISAs لIL-5، IL-4 و. IL-13 من مستضد حفز parathymic خلايا العقدة الليمفاوية (الشكل 4) <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3905/3905fig1.jpg" /> الشكل 1 وتظهر البلهارسيا حقن البويضة المنسونية نموذج صورة الممثل من كبد الحبيبي، سمة من أعباء S.mansoni البيض عالية، والبيض S.mansoni - حجم متوسط ​​(L) 120 ميكرون من ميكرون 50 (W). <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/3905/3905fig2.jpg" /> الشكل 2. س. المنسونية بيضة حقن يقود التهاب الشعب الهوائية. أ. أرقام الخلية BAL (X10 5) من السذاجة (N) أو S.mansoni الفئران المحقونة البيض (ن خ). * P &lt;0.05. ب إعداد Cytocentrifuge من الخلايا BAL. لجنة الهدنة العسكرية، بلعم؛ ايوق، يوزينية؛ الليمفاوية، الخلايا اللمفاوية. بار، و 10 ميكرون. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/3905/3905fig3.jpg" /> الشكل 3. التصور من حبيبية الرئوي وبدلا من ذلك تفعيل الضامة المحيطة بيضة S.mansoni ألف. وكان حبيبي رئوي المحيطة بيضة SM (السهم الأسود) في تصور H &amp; E-أقسام الرئة الملون. B. المناعي تلطيخ لRELMα (الأخضر)، مستقبلات المانوز (أحمر) ودابي (الأزرق) يكشف الضامة وبدلا من تفعيل (أبيض السهم) في الحبيبي المحيطة autofluorescent ن خ البيض (السهم الأسود). بار، و 50 ميكرون. <img alt="الشكل 4" src="/files/ftp_upload/3905/3905fig4.jpg" /> الشكل 4. S.mansoni بيضة مستضد معين وحفز استجابة خلوى TH2. تصريف parathymic خلايا العقدة الليمفاوية من الفئران ساذجة (N) أو ن خ البويضة المحقونة مع SM &lt;/ م&gt; مستضد البيض لمدة 72 ساعة، تلتها إليسا من supernatants لIL-4، IL-5 و IL-13. النطاق، نانوغرام / مل. * P &lt;0.05.

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+control+of+schistosomiasis+and+soil-transmitted+helminthiasis:+report+of+a+WHO+expert+committee.">Prevention and control of schistosomiasis and soil-transmitted helminthiasis: report of a WHO expert committee.</a> WHO Technical Report Series 912. , (2002).</li><li>Pearce, E. J., MacDonald, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunobiology+of+schistosomiasis.">The immunobiology of schistosomiasis.</a> Nat. Rev. Immunol. 2, 499-511 (2002).</li><li>Sandler, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+gene+expression+profiles+during+acute+pathogen-induced+pulmonary+inflammation+reveal+divergent+roles+for+Th1+and+th2+responses+in+tissue+repair.">Global gene expression profiles during acute pathogen-induced pulmonary inflammation reveal divergent roles for Th1 and th2 responses in tissue repair.</a> J. Immunol. 171, 3655-3667 (2003).</li><li>Perrigoue, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-31-IL-31R+interactions+negatively+regulate+type+2+inflammation+in+the+lung.">IL-31-IL-31R interactions negatively regulate type 2 inflammation in the lung.</a> J. Exp. Med. 204, 481-487 (2007).</li><li>Sandor, M., Weinstock, J. V., Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granulomas+in+schistosome+and+mycobacterial+infections:+a+model+of+local+immune+responses.">Granulomas in schistosome and mycobacterial infections: a model of local immune responses.</a> Trends Immunol. 24, 44-52 (2003).</li><li>Nair, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternatively+activated+macrophage-derived+RELM-{alpha}+is+a+negative+regulator+of+type+2+inflammation+in+the+lung.">Alternatively activated macrophage-derived RELM-{alpha} is a negative regulator of type 2 inflammation in the lung.</a> J. Exp. Med. 206, 937-952 (2009).</li><li>Dalton, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+isolation+of+schistosome+eggs+and+miracidia+free+of+contaminating+host+tissues.">A method for the isolation of schistosome eggs and miracidia free of contaminating host tissues.</a> Parasitology. 115, 29-32 (1997).</li><li>Lewis, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+laboratory+maintenance+of+Schistosoma+mansoni,+with+observations+on+three+schistosome/snail+host+combinations.">Large-scale laboratory maintenance of Schistosoma mansoni, with observations on three schistosome/snail host combinations.</a> J. Parasitol. 72, 813-829 (1986).</li><li>Tilney, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+lymphatic+drainage+in+the+adult+laboratory+rat.">Patterns of lymphatic drainage in the adult laboratory rat.</a> J. Anat. 109 (Pt. 3), 369-383 (1971).</li><li>Lewis, F., Coligan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schistosomiasis.">Schistosomiasis.</a> Current protocols in immunology. Chapter 19, Unit 19 (2001).</li><li>Kaplan, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Th2+cells+are+required+for+the+Schistosoma+mansoni+egg-induced+granulomatous+response.">Th2 cells are required for the Schistosoma mansoni egg-induced granulomatous response.</a> J. Immunol. 160, 1850-1856 (1998).</li><li>Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrotic+disease+and+the+T(H)1/T(H)2+paradigm.">Fibrotic disease and the T(H)1/T(H)2 paradigm.</a> Nat. Rev. Immunol. 4, 583-594 (2004).</li><li>Cheever, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+of+hepatic+fibrosis+and+granuloma+size+among+mouse+strains+infected+with+Schistosoma+mansoni.">Variation of hepatic fibrosis and granuloma size among mouse strains infected with Schistosoma mansoni.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 37, 85-97 (1987).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

هنا، يوصف نموذج توظيف بيض البلهارسيا المنسونية للحث على نوع التهاب الرئة 2. السمات المميزة لهذا النموذج وتشمل استجابة مناعية قوية TH2، التهاب الشعب الهوائية والرئة تشكيل الحبيبي. وبما أن هذه المعايير تعتمد على ردود CD4 الخلية TH2 11، هذا هو نموذج مفيدة للتحقيق ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الكاشف </td><td> حجم / الوصف </td><td> شركة </td><td> كتالوج # </td></tr><tr><td> كولاجيناز / Dispase </td><td> 500 ملغ </td><td> روش العلوم التطبيقية </td><td> 11 097 113 001 </td></tr><tr><td> فرق كويك هيما 3 اللطخة </td><td> حزمة </td><td> فيشر العلمية ذ. </td><td> 122-911 </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> سائل </td><td> Gibco </td><td> 11965 </td></tr><tr><td> صقر 50mL </td><td> حزمة </td><td> صقر </td><td> 352070 </td></tr><tr><td> Intramedic PE الأنابيب </td><td> 0،58 ملم </td><td> بيكتون ديكنسون وشركاه </td><td> 427410 </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> 250 مل </td><td> رئيس الدير صحة الحيوان </td><td> 52600405 </td></tr><tr><td> الكيتامين </td><td> 100 ملغ / مل </td><td> فورت دودج، صحة الحيوان </TD&gt; <td> N / A </td></tr><tr><td> المانوز مستقبلات الجسم المضاد </td><td> البيوتين </td><td> عبد Serotec </td><td> MCA2235B </td></tr><tr><td> مصفاة معدنية </td><td> معيار مطبخ مصفاة </td><td> الهدف </td><td> Laurentiis </td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد </td><td> 16٪ </td><td> الإلكترون Microsc. علوم </td><td> 15710 </td></tr><tr><td> البنسلين / الستربتومايسين عقار </td><td> 100X </td><td> Gibco </td><td> 15070 </td></tr><tr><td> Percoll </td><td> 1 ليتر </td><td> جنرال إلكتريك للرعاية الصحية العلوم البيولوجية </td><td> 17 01 0891 </td></tr><tr><td> RELMα الأضداد </td><td> 50 ميكروغرام </td><td> Peprotech </td><td> 500-P214 </td></tr><tr><td> جراحية الموضوع </td><td> 2.0 USP 100 ياردة </td><td> تخصصات جراحية كورب </td><td> SP118 </td></tr><tr><td> حقنة الإبرة </td><td> 23g، 3/4 بوصة </td><td> دينار بحريني Vacutainer مختبر. ميد. </td><td>305143 </td></tr><tr><td> الولايات المتحدة الأمريكية معيار الاختبار المنخل </td><td> 150 ميكرون، 0.0059 &quot; </td><td> WS تايلر، المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> ASTME-11، المواصفات. رقم 100 </td></tr><tr><td> زيلازين </td><td> 20 ملغ / مل </td><td> كبير الخدم </td><td> N / A </td></tr></tbody></table>

using eggs from schistosoma mansoni as an in vivo model of helminth-induced lung inflammation

طفيليات البلهارسيا والديدان المثقوبة الدم الذي يصيب ما يقدر بنحو 200 مليون شخص في جميع أنحاء العالم 1. في عدوى مزمنة مع البلهارسيا، وأمراض خطيرة، بما في ذلك تليف الكبد وتضخم الطحال، والناجمة عن رد الفعل المناعي للبيض الطفيلي بدلا من الطفيليات نفسها 2. بيض طفيلي حث استجابة Th2 يتميز إنتاج IL-4، IL-5، وايل 13، وتفعيل البديل الضامة وتجنيد الحمضات. هنا، نحن تصف حقن بيض البلهارسية المنسونية كنموذج لدراسة الطفيليات محددة استجابات TH2 خلوى في الرئة والغدد الليمفاوية استنزاف، وتشكيل حبيبية رئوي المحيطة البيض، والتهاب الشعب الهوائية. بعد توعية داخل الصفاق والتحدي في الوريد، S. ويتم نقل البيض المنسونية إلى الرئة عن طريق الشريان الرئوي حيث هم محاصرون داخل حمة الرئةبواسطة حبيبية تتألف من الخلايا الليمفاوية، الحمضات والضامة تفعيلها بدلا من 3-6. المرتبطة التهاب الحبيبي، وتشكيل في المساحات الشعبة الهوائية السنخية، ويمكن التوسع في الغدد الليمفاوية واستنزاف CD4 يمكن ملاحظة تي تنشيط الخلايا. نحن هنا بالتفصيل بروتوكول لعزل بيض البلهارسيا المنسونية من الأكباد المصابة (تعديل من 7)، وتوعية وتحدي الفئران، واستعادة أجهزة (الشعبة الهوائية غسل السنخية (بال) والرئة والغدد الليمفاوية تصريف) للتحليل. نحن تشمل أيضا نسيجية ممثل والبيانات المناعية واقتراحات لتحليل مناعية إضافية. عموما، هذه الطريقة توفر في نموذج الجسم الحي للتحقيق استجابات مناعية الديدان الطفيلية التي يسببها في الرئة، والتي تنطبق على نطاق واسع لدراسة الأمراض الالتهابية TH2 بما في ذلك عدوى الديدان الطفيلية، والأمراض متليفة، التهاب الحساسية والربو. مزايا هذا النموذج لدراسة الطباعE 2 التهاب في الرئة وتشمل استنساخ استجابة قوية للالتهابات TH2 في الرئة والغدد الليمفاوية استنزاف، وسهولة تقييم التهاب عن طريق الفحص نسيجية من حبيبية المحيطة البيض، وإمكانات التخزين الطويل الأجل للطفيلي بيض.

Watch this Scientific Journal Video about Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation at JoVE.com

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

بيض البلهارسيا المنسونية والتحفيز والتشجيع قوي من نوع المساعد تي 2 (TH2) استجابة جهاز المناعة، سمة من العدوى الطفيلية، والربو والالتهاب التحسسي. ويستخدم هذا البروتوكول س. المنسونية بيضة حقن لتوليد CD4 TH2 خلوى بفعل الاستجابة الالتهابية في الرئة، وتتميز تشكيل الحبيبي الرئة في جميع أنحاء البيض، كثرة اليوزينيات وتنشيط البلاعم بديل.

باستخدام بويضات من<em&gt; البلهارسيا المنسونية</em&gt; ك<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; نموذج من التهاب الرئة الناجم عن الديدان الطفيلية

Schistosoma parasites are blood flukes that infect an estimated 200 million people worldwide 1. In chronic infection with Schistosoma, the severe ...

using-eggs-from-schistosoma-mansoni-as-an-vivo-model-helminth-induced

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

13.7K Views.  University of Pennsylvania. بيض البلهارسيا المنسونية والتحفيز والتشجيع قوي من نوع المساعد تي 2 (TH2) استجابة جهاز المناعة، سمة من العدوى الطفيلية، والربو والالتهاب التحسسي. ويستخدم هذا البروتوكول س. المنسونية بيضة حقن لتوليد CD4 TH2 خلوى بفعل الاستجابة الالتهابية في الرئة، وتتميز تش?...

Video: Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Cercarial Transformation and in vitro Cultivation of Schistosoma mansoni Schistosomules

Schistosome parasites are the causative agents of schistosomiasis, a chronically debilitating disease that affects over 200 million people globally and ranks second to malaria among parasitic diseases in terms of public health and socio-economic impact (1-4). Schistosome parasites are trematode worms with a complex life cycle interchanging between a parasitic life in molluscan and mammalian hosts with intervening free-swimming stages. Briefly, free-swimming cercariae infect a mammalian host by penetrating the skin with the aid of secreted proteases, during which time the cercariae lose their tails, transforming into schistosomules. The schistosomules must now evade the host immune system, develop a gut for digestion of red blood cells, and migrate though the lungs and portal circulation en route to their final destination in the hepatic portal system and eventually the mesenteric veins (for S. mansoni) where male and female worms pair and mate, producing hundreds of eggs daily. Some of the eggs are excreted from the body into fresh water, where the eggs hatch into free-swimming miracidia (5-10). The miracidia infect specific snail species and transform into mother and daughter sporocysts, which in turn, produce infective cercariae, completing the life cycle. Unfortunately, the entire schistosome life cycle cannot be cultured in vitro, but infective cercariae can be transformed into schistosomules, and the schistosomules can be cultured for weeks for the analysis of schistosome development in vitro or microarray analysis. In this protocol, we provide a visual description of cercarial transformation and in vitro culturing of schistosomules. We shed infectious cercariae from the snail host Biomphalaria glabrata and manually transform them into schistosomules by detaching their tails using an emulsifying double-ended needle. The in vitro cercarial transformation and schistosomules culture techniques described avoid the use of a mammalian host, which simplifies visualization of schistosomes and facilitates the collection of the parasite for experimental analysis. in vitro transformation and culturing techniques of schistosomes have been done for years (11, 12), but no visual protocols have been developed that are available to the entire community.

Cercarial Transformation and in vitro Cultivation of Schistosoma mansoni Schistosomules

We describe an in vitro method for culturing schistosomula of the flatworm parasite Schistosoma mansoni, via the harvesting and transformation of infective cercariae from the fresh water snail intermediate host Biomphalaria glabrata.

بالمذنبات والتحول في المختبر زراعة البلهارسيا المنسونية Schistosomules

Schistosome parasites are the causative agents of schistosomiasis, a chronically debilitating disease that affects over 200 million people globally and ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the initial and determining step of the pathogenesis. Although experimentally adhesion is mostly studied in static conditions adhesion actually takes place in the presence of flowing liquid. First encounters between bacteria and their host often occur at the mucosal level, mouth, lung, gut, eye, etc. where mucus flows along the surface of epithelial cells. Later in infection, pathogens occasionally access the blood circulation causing life-threatening illnesses such as septicemia, sepsis and meningitis. A defining feature of these infections is the ability of these pathogens to interact with endothelial cells in presence of circulating blood. The presence of flowing liquid, mucus or blood for instance, determines adhesion because it generates a mechanical force on the pathogen. To characterize the effect of flowing liquid one usually refers to the notion of shear stress, which is the tangential force exerted per unit area by a fluid moving near a stationary wall, expressed in dynes/cm2. Intensities of shear stress vary widely according to the different vessels type, size, organ, location etc. (0-100 dynes/cm2). Circulation in capillaries can reach very low shear stress values and even temporarily stop during periods ranging between a few seconds to several minutes 1. On the other end of the spectrum shear stress in arterioles can reach 100 dynes/cm2 2. The impact of shear stress on different biological processes has been clearly demonstrated as for instance during the interaction of leukocytes with the endothelium 3. To take into account this mechanical parameter in the process of bacterial adhesion we took advantage of an experimental procedure based on the use of a disposable flow chamber 4. Host cells are grown in the flow chamber and fluorescent bacteria are introduced in the flow controlled by a syringe pump. We initially focused our investigations on the bacterial pathogen Neisseria meningitidis, a Gram-negative bacterium responsible for septicemia and meningitis. The procedure described here allowed us to study the impact of shear stress on the ability of the bacteria to: adhere to cells 1, to proliferate on the cell surface 5and to detach to colonize new sites 6 (Figure 1). Complementary technical information can be found in reference 7. Shear stress values presented here were chosen based on our previous experience1 and to represent values found in the literature. The protocol should be applicable to a wide range of pathogens with specific adjustments depending on the objectives of the study.

During the infection process, a key step is the adhesion of pathogens with host cells. In most instances this adhesion step occurs in the presence of mechanical stress generated by flowing liquid. We describe a technique that introduces shear stress as an important parameter in the study of bacterial adhesion.

إدخال إجهاد القص في دراسة الالتصاق الجرثومي

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological deficiencies. GVHD is caused by mature alloreactive T cells present in the bone marrow graft that are infused into the recipient and cause damage to host organs. However, in mice, T cells must be added to the bone marrow inoculum to cause GVHD. Although extensive work has been done to characterize T cell responses post transplant, bioluminescent imaging technology is a non-invasive method to monitor T cell trafficking patterns in vivo. 
Following lethal irradiation, recipient mice are transplanted with bone marrow cells and splenocytes from donor mice. T cell subsets from L2G85.B6 (transgenic mice that constitutively express luciferase) are included in the transplant. By only transplanting certain T cell subsets, one is able to track specific T cell subsets in vivo, and based on their location, develop hypotheses regarding the role of specific T cell subsets in promoting GVHD at various time points. At predetermined intervals post transplant, recipient mice are imaged using a Xenogen IVIS CCD camera. Light intensity can be quantified using Living Image software to generate a pseudo-color image based on photon intensity (red = high intensity, violet = low intensity). 
Between 4-7 days post transplant, recipient mice begin to show clinical signs of GVHD. Cooke et al.1 developed a scoring system to quantitate disease progression based on the recipient mice fur texture, skin integrity, activity, weight loss, and posture. Mice are scored daily, and euthanized when they become moribund. Recipient mice generally become moribund 20-30 days post transplant. 
Murine models are valuable tools for studying the immunology of GVHD. Selectively transplanting particular T cell subsets allows for careful identification of the roles each subset plays. Non-invasively tracking T cell responses in vivo adds another layer of value to murine GVHD models.

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Murine bone marrow transplantation is a widely used technique to study immunological mechanisms governing graft-versus-host disease in humans. The ability to monitor T cell trafficking patterns in vivo allows for detailed analysis of the development and perpetuation of T cell responses during graft-versus-host disease.

تحريض الطعم ضد المضيف المرض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; مراقبة الخلايا T باستخدام نموذج MHC المطابقة الفئران

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that distinguish acute and chronic inflammation in mouse models. With tissue damage or pathogen invasion, neutrophils are the first line of defense, playing a major role in mediating the acute inflammatory response. As the inflammatory reaction progresses, circulating monocytes gradually migrate into the site of injury and differentiate into mature macrophages, which mediate chronic inflammation and promote tissue repair by removing tissue debris and producing anti-inflammatory cytokines. Intraperitoneal injection of luminol (5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione, sodium salt) enables detection of acute inflammation largely mediated by tissue-infiltrating neutrophils. Luminol specifically reacts with the superoxide generated within the phagosomes of neutrophils since bioluminescence results from a myeloperoxidase (MPO) mediated reaction. Lucigenin (bis-N-methylacridinium nitrate) also reacts with superoxide in order to generate bioluminescence. However, lucigenin bioluminescence is independent of MPO and it solely relies on phagocyte NADPH oxidase (Phox) in macrophages during chronic inflammation. Together, luminol and lucigenin allow non-invasive visualization and longitudinal assessment of different phagocyte populations across both acute and chronic inflammatory phases. Given the important role of inflammation in a variety of human diseases, we believe this non-invasive imaging method can help investigate the differential roles of neutrophils and macrophages in a variety of pathological conditions.

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

We describe a non-invasive imaging method for distinguishing inflammatory stages. Systemic delivery of luminol reveals areas of acute inflammation dependent upon MPO activity in neutrophils. In contrast, injection of lucigenin allows for visualization of chronic inflammation dependent upon Phox activity in macrophages.

في الجسم الحي أسلوب التصوير لتميز الالتهاب الحاد والمزمن

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter lesions in inflammatory demyelinating disorders like multiple sclerosis (MS). In these disorders, mainly CD8+ T-cells of putative specificity for myelin- and oligodendrocyte-related antigens are found, so that neuronal apoptosis in grey matter lesions may be a collateral effect of these cells. Different types of animal models are established to study the underlying mechanisms of the mentioned pathophysiological processes. However, although they mimic some aspects of MS, it is impossible to dissect the exact mechanism and time course of &#8216;&#8216;collateral&#8217;&#8217; neuronal cell death. To address this course, here we show a protocol to study the mechanisms and time response of neuronal damage following an oligodendrocyte-directed CD8+ T cell attack. To target only the myelin sheath and the oligodendrocytes, in vitro activated oligodendrocyte-specific CD8+ T-cells are transferred into acutely isolated brain slices. After a defined incubation period, myelin and neuronal damage can be analysed in different regions of interest. Potential applications and limitations of this model will be discussed.

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

To address mechanisms of demyelination and neuronal apoptosis in cortical lesions of inflammatory demyelinating disorders, different animal models are used. We here describe an ex vivo approach by using oligodendrocyte-specific CD8+ T-cells on brain slices, resulting in oligodendroglial and neuronal death. Potential applications and limitations of the model are discussed.

ل<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; نموذج لهجوم T-خلية الموجه دبقية قليلة التغصن في الدماغ الحادة شرائح

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

Influenza Virus Propagation in Embryonated Chicken Eggs

Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous emergence of new influenza virus strains due to mutation and re-assortment complicates the control of the virus and necessitates the permanent development of novel drugs and vaccines. The laboratory-based study of influenza requires a reliable and cost-effective method for the propagation of the virus. Here, a comprehensive protocol is provided for influenza A virus propagation in fertile chicken eggs, which consistently yields high titer viral stocks. In brief, serum pathogen-free (SPF) fertilized chicken eggs are incubated at 37 &#176;C and 55-60% humidity for 10 &#8211; 11 days. Over this period, embryo development can be easily monitored using an egg candler. Virus inoculation is carried out by injection of virus stock into the allantoic cavity using a needle. After 2 days of incubation at 37 &#176;C, the eggs are chilled for at least 4 hr at 4 &#176;C. The eggshell above the air sac and the chorioallantoic membrane are then carefully opened, and the allantoic fluid containing the virus is harvested. The fluid is cleared from debris by centrifugation, aliquoted and transferred to -80 &#176;C for long-term storage. The large amount (5-10 ml of virus-containing fluid per egg) and high virus titer which is usually achieved with this protocol has made the usage of eggs for virus preparation our favorable method, in particular for in vitro studies which require large quantities of virus in which high dosages of the same virus stock are needed.

Fertile chicken eggs are widely used to produce large amounts of human influenza A virus as they provide a convenient and cost-effective system to prove high yields of virus.

نشر فيروس الانفلونزا في أجنة بيض الدجاج

Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous ...

An Optimized Method for Isolating and Expanding Invariant Natural Killer T Cells from Mouse Spleen

The ability to rapidly secrete cytokines upon stimulation is a functional characteristic of the invariant natural killer T (iNKT) cell lineage. iNKT cells are therefore characterized as an innate T cell population capable of activating and steering adaptive immune responses. The development of improved techniques for the culture and expansion of murine iNKT cells facilitates the study of iNKT cell biology in in vitro and in vivo model systems. Here we describe an optimized procedure for the isolation and expansion of murine splenic iNKT cells.
Spleens from C57Bl/6 mice are removed, dissected and strained and the resulting cellular suspension is layered over density gradient media. Following centrifugation, splenic mononuclear cells (MNCs) are collected and CD5-positive (CD5+) lymphocytes are enriched for using magnetic beads. iNKT cells within the CD5+ fraction are subsequently stained with &#945;GalCer-loaded CD1d tetramer and purified by fluorescence activated cell sorting (FACS). FACS sorted iNKT cells are then initially cultured in vitro using a combination of recombinant murine cytokines and plate-bound T cell receptor (TCR) stimuli before being expanded in the presence of murine recombinant IL-7. Using this technique, approximately 108 iNKT cells can be generated within 18-20 days of culture, after which they can be used for functional assays in vitro, or for in vivo transfer experiments in mice.

Here we present an adapted protocol that can be used to generate a large number of murine invariant natural killer T cells from mouse spleen. The protocol outlines an approach by which splenic iNKT cells can be enriched for, isolated and expanded in vitro using a limited number of animals and reagents.

والطريقة الأمثل لعزل وتوسيع قسما ثابتا الطبيعية الخلايا التائية القاتلة من الماوس الطحال

The ability to rapidly secrete cytokines upon stimulation is a functional characteristic of the invariant natural killer T (iNKT) cell lineage. iNKT cells ...

Optical Screening of Novel Bacteria-specific Probes on Ex Vivo Human Lung Tissue by Confocal Laser Endomicroscopy

Improving the speed and accuracy of bacterial detection is important for patient stratification and to ensure the appropriate use of antimicrobials. To achieve this goal, the development of diagnostic techniques to recognize bacterial presence in real-time at the point-of-care is required. Optical imaging for direct identification of bacteria within the host is an attractive approach. Several attempts at chemical probe design and validation have been investigated, however none have yet been successfully translated into the clinic. Here we describe a method for ex vivo validation of bacteria-specific probes for identification of bacteria within the distal lung, imaged by fibered confocal fluorescence microscopy (FCFM). Our model used ex vivo human lung tissue and a clinically approved confocal laser endomicroscopy (CLE) platform to screen novel bacteria-specific imaging compounds, closely mimicking imaging conditions expected to be encountered with patients. Therefore, screening compounds by this technique provides confidence of potential clinical tractability.

Optical Screening of Novel Bacteria-specific Probes on Ex Vivo Human Lung Tissue by Confocal Laser Endomicroscopy

This technique describes an efficient screening process for evaluating bacteria-specific optical imaging agents within ex vivo human lung tissue, by fibered confocal fluorescence microscopy for the rapid identification of small molecule chemical probe-candidates with translatable potential.

تحقيقات الفحص البصري للرواية الخاصة بالبكتيريا في أنسجة الرئة البشرية السابقين فيفو بالليزر [كنفوكل] اندوميكروسكوبي

Improving the speed and accuracy of bacterial detection is important for patient stratification and to ensure the appropriate use of antimicrobials. To ...

Assessment of the Cytotoxic and Immunomodulatory Effects of Substances in Human Precision-cut Lung Slices

Respiratory diseases in their broad diversity need appropriate model systems to understand the underlying mechanisms and enable development of new therapeutics. Additionally, registration of new substances requires appropriate risk assessment with adequate testing systems to avoid the risk of individuals being harmed, for example, in the working environment. Such risk assessments are usually conducted in animal studies. In view of the 3Rs principle and public skepticism against animal experiments, human alternative methods, such as precision-cut lung slices (PCLS), have been evolving. The present paper describes the ex vivo technique of human PCLS to study the immunomodulatory potential of low-molecular-weight substances, such as ammonium hexachloroplatinate (HClPt). Measured endpoints include viability and local respiratory inflammation, marked by altered secretion of cytokines and chemokines. Pro-inflammatory cytokines, tumor necrosis factor alpha (TNF-&#945;), and interleukin 1 alpha (IL-1&#945;) were significantly increased in human PCLS after exposure to a sub-toxic concentration of HClPt. Even though the technique of PCLS has been substantially optimized over the past decades, its applicability for the testing of immunomodulation is still in development. Therefore, the results presented here are preliminary, even though they show the potential of human PCLS as a valuable tool in respiratory research.

In view of the 3Rs principle, respiratory models as alternatives to animal studies are evolving. Especially for risk assessment of respiratory substances, there is a lack of appropriate assays. Here, we describe the use of human precision-cut lung slices for the assessment of airborne substances.

تقييم للسآمة للخلايا وإيمونومودولاتوري آثار المواد في شرائح البشرية دقة قطع الرئة

Respiratory diseases in their broad diversity need appropriate model systems to understand the underlying mechanisms and enable development of new ...

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosoma japonicum

Extracellular vesicles (EVs) are membranous vesicles released by a variety of cells into the extracellular microenvironment. EVs represent a population of heterogeneous vesicles, whose size range between 40 and 1,000 nm. Accumulated evidence indicated that EVs play important regulatory roles in pathogen-host interactions. A deep understanding of schistosome EVs should provide insights into the mechanisms underlying schistosome-host interactions, enabling development of novel strategies against schistosomiasis. Here, we aim to further study EVs functions in schistosomes by presenting a protocol for the isolation and characterization of EVs from adult Schistosoma japonicum (S. japonicum). EVs were isolated from in vitro culture medium using centrifugation combined with a commercial exosome isolation kit. The isolated S. japonicum EVs (SjEVs) typically possess a diameter of 100 - 400 nm, and are characterized by transmission electronic microscopy and western blotting. The usage of PKH67 dye-labeled SjEVs has demonstrated that SjEVs are internalized by the recipient cells. Overall, our protocol provides an alternative method for isolating EVs from adult schistosomes; the isolated SjEVs may be suitable for functional analysis.

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosoma japonicum

Here, we present a protocol to describe extracellular vesicles (EVs) isolation in in vitro cultured medium from adult Schistosoma japonicum.

عزل وتوصيف حويصلات خارج الخلية من الكبار بالبلەارسيات بلهارسيه

Extracellular vesicles (EVs) are membranous vesicles released by a variety of cells into the extracellular microenvironment. EVs represent a population of ...