وأيد هذا البحث من المنح المقدمة من المعهد الوطني للعلوم الطبية العامة (GM099883 وGM074675) لEAK كان الممولين أي دور في تصميم الدراسة وجمع البيانات وتحليلها، قرار نشر أو إعداد المخطوطة. نشكر الشعب من متجر لدينا آلة في كلية الطب بجامعة هارفارد لتصميم الجهاز السلوكي (يرجى الاتصال ب: <a href="http://mikesmachine.com">http://mikesmachine.com).</a> الكاتب المساهمات: ST، تصميم BC جهاز السلوكي. ST تصميم والأمثل بروتوكول تجريبي. ST وBC المنجز وتحليل التجارب. كتب ST، EAK وBC ورقة.

ملاحظة: وفيما يلي وصفا خطوة بخطوة للبروتوكول تجريبي نستخدمها للسماح اثار موثوق بها العدوان بين أزواج من ذباب الفاكهة الذكور (D. البطن). هذا الإجراء الحث على تشكيل &quot;الخاسر&quot; تأثير. باستخدام هذا البروتوكول، على المدى القصير تأثير &quot;الفائز&quot; كما أفادت التقارير مؤخرا 5،6 الشكل 1 يبين الجدول الزمني للتجارب سلوكية. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig1.jpg" /> الشكل 1. الجدول الزمني للتجربة العدوان. في يوم 1، المرحلة الأخيرة من الذكور الشرانق (عندما تصبح أجنحة سوداء) معزولة في قارورة العزلة الطازجة. في يوم 5 بعد الناشئة مثل البالغين، يتم تخدير الذباب الذكور القديمة يوم 4 مع CO 2 ورسمت بألوان مختلفة لأغراض تحديد الهوية. في يوم 7 أكواب الطعام وغرف القتال هياستعدادا لإعداد التجارب السلوكية. يتم تحميل اثنين من 6-7 الذكور البالغين بعمر يوم واحد في غرف وقادرين على التفاعل. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> 1. يوم 1: العزلة الاجتماعية من شرانق <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع والاحتفاظ بمخزونات الطيران في بيئة تسيطر عليها 12 ساعة ضوء / 12 ساعة دورة الظلام حاضنة عند 25 درجة مئوية والرطوبة النسبية 50٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد قارورة العزلة: تسخين الطعام ذبابة جديدة حتى ذاب. باستخدام ماصة باستور، ونقل ما يقرب من 1.5 مل من ذبابة الغذائية الذائبة في واحدة فارغة أنابيب الاختبار الزجاجية (1.6 × 10 سم). السماح الطعام ليصلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الشرانق: مع الفرشاة الجميلة، وإزالة بلطف ذكر خادرة في مرحلة متأخرة (عندما تصبح أجنحة سوداء) من القارورة الأسهم ووضعه على جانب من الطازجة الأغذية التي تحتوي على أنبوب اختبار. وثيقة قارورة العزلة مع القطن (الشكل 2). </li><lط&gt; قارورة مكان العزلة التي تحتوي على الشرانق في 12 ساعة ضوء / 12 ساعة حاضنة مظلمة عند 25 درجة مئوية، والرطوبة النسبية 50٪. </li></ol><img alt="الرقم 2" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig2.jpg" /> يتم وضع الشكل 2. العزلة الاجتماعية، وأحد المراحل المتأخرة من الذكور خادرة على الجانب على قارورة العزلة الطازجة. يتم وضع قارورة العزلة التي تحتوي على خادرة في 12 ساعة ضوء / 12 ساعة حاضنة مظلمة عند 25 درجة مئوية، والرطوبة النسبية 50٪. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig2large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> 2. يوم 5: لوحة الذباب لأغراض تحديد الهوية الفردية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنفيذ هذه الخطوة في يوم 5 مع 4 الذباب الذكور بعمر يوم ويومين قبل التجارب السلوكية للحد من الأثر السلبي لCO 2 التخدير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الطاير مع CO 2. </lI&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع المسواك على ما يرام، ضع نقطة صغيرة من طلاء الاكريليك على الصدر. تجنب وضع الطلاء على رأسه، والأجنحة والبطن أو الساقين (الشكل 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا الطلاء الجاف لنحو 10 ثانية، ونقل بلطف الذباب إلى قارورة العزلة الأصلية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العودة قارورة العزلة إلى 12 ساعة ضوء / 12 ساعة حاضنة مظلمة عند 25 درجة مئوية، والرطوبة النسبية 50٪. </li></ol><img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig3.jpg" /> الشكل 3. تحديد الفردي، وبعد التخدير ذبابة مع CO 2، قطرة صغيرة من طلاء الاكريليك يطبق على الصدر. لغرض تحديد الهوية الفردية، يتم استخدام ألوان مختلفة (أبيض وأزرق هنا). انظر المناقشة أدناه حول استخدام CO 2 في هذه الخطوة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا فيقو</a>إعادة. 3. يوم 7: إعداد جهاز <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الكؤوس الغذاء: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسخين الطعام ذبابة الطازج حتى يذوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام ماصة باستور، ونقل ما يقرب من 0.8 مل الغذائية لغطاء قارورة سقف المسمار (1.5 سم القطر، وارتفاع 1 سم) والسماح لتبرد. تجنب فقاعات الهواء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل عجينة الخميرة الطازجة عن طريق خلط الخميرة الجافة مع بضع قطرات من الماء. عندما سميكة، وتطبيق قطرة صغيرة من عجينة الخميرة في وسط سطح كوب الطعام مع المسواك (الشكل 4). </li></ol></li></ol><img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig4.jpg" /> الرقم 4. إعداد كوب الغذاء. ويتم إعداد كوب الطعام مع الطعام ذبابة الطازجة. بعد يتصلب الطعام، يتم وضع نقطة من معجون الخميرة في وسط سطح كوب الغذاء. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig4large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لضد</a>iew نسخة أكبر من هذا الرقم. <ol start="2" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد غرف القتال الفردية: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تماما غسل أجهزة والقتال الفردي غرف بالماء قبل استخدامها في كل مرة. الجافة مع منشفة ورقية قبل الاستخدام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع كوب الطعام في وسط كل دائرة القتال وإصلاح في مكان مع قطرة من المعجون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الدوائر القتال مع غطاء الجهاز (الشكل 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الجهاز في بيئة عالية الرطوبة (60٪) عند 25 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع مصدر الضوء فوق جهاز لإلقاء الضوء على غرف القتال ووضع كاميرا فيديو لتسجيل من فوق. </li></ol></li></ol><img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig5.jpg" /> الرقم 5. إعداد غرفة القتال الفردية. تم إصلاح كوب الغذائية الطازجة مع نقطة من معجون الخميرة على السطح إلى غسلها فاي الفرديةghting غرف. يتم إغلاق غرف مع غطاء اثنين من قطعة السماح بإدخال مقسم البلاستيك مبهمة إلى غرف القتال الفردية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> 4. يوم 7: تجربة السلوكية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء التجارب السلوكية مع الذباب الذكور القديمة يوم 07/06. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج فواصل البلاستيك في كل دائرة القتال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة المكونات القطن من أنبوب العزل ووضع أنبوب أسفل حفرة مفتوحة على جانب الجهاز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دعونا الطاير يدخل إلى غرفة القتال انجذاب بالجاذبية السلبية، عادة في غضون بضع ثوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق جدار انزلاق بعد أن غادر الطاير الأنبوب ودخلت الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الإجراء لإدخال الطاير الثاني في المعركة الدائرة على الجانب الآخر من الجهاز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الجهاز مرة أخرى في videotapi مضيئةنانوغرام الموقف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء تسجيل الفيديو وإزالة المفرق البلاستيك للسماح الذباب للتفاعل. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتجارب العدوان: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في هذه التجارب، سجل يحارب لمدة 20 دقيقة على الأقل لضمان تكوين علاقات هيمنة قوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الوقت المطلوب، ووقف تسجيل الفيديو. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الذباب من غرف القتال عن طريق عكس الإجراء الموضح أعلاه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تماما غسل الجهاز السلوكي مع منظف معتدل والماء بعد كل استعمال وشطف. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ل &quot;الخاسر&quot; تجارب تأثير: ملاحظة: في هذه التجارب، تعتبر المعارك الأولى كمرحلة تكييف وتحارب الثانية كمرحلة اختبار. فترة الراحة بين المعارك يمكن أن تختلف ولكن 10 دقيقة يسمح بتشكيل &quot;الخاسر&quot; تأثير قوي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتبع الإجراء المذكورة أعلاه إلى تنفيذ المعركة الأولى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خطوة حاسمة: للحث على تشكيل &quot;الخاسر&quot; عقلية، هتكفل للمعارك الأولى هي 20 دقيقة على الأقل طويل من أجل إقامة علاقات هيمنة قوية. بعد 20 دقيقة، وإعادة إدراج المفرق البلاستيك إلى غرف القتال لفصل الذباب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد فترة 10 دقيقة من الراحة، وإزالة بلطف المفرق البلاستيك للسماح الذباب للتفاعل لمعارك الثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في نهاية الحرب الثانية 20 دقيقة، ووقف تسجيل الفيديو. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الذباب من غرف السلوكية على النحو الوارد أعلاه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة أخرى، وتنظيف شامل للجهاز السلوكي. </li></ol></li></ol></li></ol> 5. تحليل السلوكي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل أفلام <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط الكاميرات إلى الكمبيوتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحويل الذباب .MTS إلى وسائل التحقق الذباب والانضمام الأفلام مقاطع معا، وذلك باستخدام الفيديو تحويل البرمجيات وخيار &quot;الانضمام مقاطع مختارة&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة وتحليل كل فيلم مع برنامج قارئ الفيديو. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سجل السلوك ملاحظة: يمكن القيام بذلك يدويا أو لناالسلوكي البرنامج برنامج تحليل جي إن وجدت. يصف الرسم التوضيحي أدناه الممكن تحليل مختصر ل&quot;الخاسر&quot; تأثير. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسجيل الوقت من أول لقاء بين الذباب على الكأس الغذائية (لقاءات والتفاعلات بين أزواج من الذباب التي تستمر على الأقل 2 ثانية) ووقت ظهور اندفع الأول (أ النمط السلوكي الذي ذبابة واحدة يرتفع عاليا على ل رجليه الخلفيتين ويستقر أسفل على ومحاولات للاستيلاء على الخصم). ثم، والنتيجة الكمون إلى اندفع (الفترة الفاصلة بين أول لقاء واندفع الأول). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد عدد من اللقاءات والطعنات خلال مشاجرة. ملاحظة: إذا رغبت في ذلك، واحدة أيضا يمكن أن يسجل الأنماط السلوكية الأخرى، مثل تهديد الجناح، الملاكمة، المبارزة، تراجع أو أرقام لقاءات قبل اندفع الأول، على سبيل المثال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يسجل وقت إنشاء هيمنة (الوقت بين أول لقاء ووقت واحد يطير يتراجع لثلاث مرات متتالية قبالة الخلف كوب الطعامإيه تلقي الطعنات). ملاحظة التي تطير هو الفائز والذي الخاسر من المعركة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتساب &quot;الخاسر&quot; تأثير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم عدد من المعارك التي الخاسرين السابقة تفقد 2 معارك الثاني (الخاسرون التي تفقد: LL) من قبل عدد من المعارك، وتتكاثر 100. النسبة المئوية التي تم الحصول عليها تمثل &quot;الخاسر&quot; تأثير: [(# الذباب LL) / (# الإجمالية القتال)] × 100 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام اختبار مربع كاي للمقارنة بين ما إذا كان &quot;الخاسر&quot; تأثير مختلف إحصائية عن القيمة المتوقعة من 50٪. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Chen, S., Lee, A. Y., Bowens, N. M., Huber, R., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fighting+fruit+flies:+a+model+system+for+the+study+of+aggression.">Fighting fruit flies: a model system for the study of aggression.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 5664-5668 (2002).</li><li>Hsu, Y., Earley, R. L., Wolf, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+aggressive+behaviour+by+fighting+experience:+mechanisms+and+contest+outcomes.">Modulation of aggressive behaviour by fighting experience: mechanisms and contest outcomes.</a> Biol Rev Camb Philos Soc. 81, 33-74 (2006).</li><li>Yurkovic, A., Wang, O., Basu, A. C., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+memory+associated+with+aggression+in+Drosophila+melanogaster.">Learning and memory associated with aggression in Drosophila melanogaster.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103, 17519-17524 (2006).</li><li>Penn, J. K., Zito, M. F., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+social+defeat+reduces+aggression+in+a+highly+aggressive+strain+of+Drosophila.">A single social defeat reduces aggression in a highly aggressive strain of Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107, 12682-12686 (2010).</li><li>Trannoy, S., Chowdhury, B., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Handling+alters+aggression+and+'loser'+effect+formation+in+Drosophila+melanogaster.">Handling alters aggression and 'loser' effect formation in Drosophila melanogaster.</a> Learn Mem. 22, 64-68 (2015).</li><li>Trannoy, S., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+and+memory+during+aggression+in+Drosophila:+handling+affects+aggression+and+the+formation+of+a+''loser''+effect.">Learning and memory during aggression in Drosophila: handling affects aggression and the formation of a ''loser'' effect.</a> Journal of Nature and Science. 1 (3), e56 (2015).</li><li>Alekseyenko, O. V., Chan, Y. B., Li, R., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+dopaminergic+neurons+that+modulate+aggression+in+Drosophila.">Single dopaminergic neurons that modulate aggression in Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 6151-6156 (2013).</li><li>Dierick, H. A., Greenspan, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serotonin+and+neuropeptide+F+have+opposite+modulatory+effects+on+fly+aggression.">Serotonin and neuropeptide F have opposite modulatory effects on fly aggression.</a> Nat Genet. 39, 678-682 (2007).</li><li>Williams, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+aggression+by+obesity-linked+genes+TfAP-2+and+Twz+through+octopamine+signaling+in+Drosophila.">Regulation of aggression by obesity-linked genes TfAP-2 and Twz through octopamine signaling in Drosophila.</a> Genetics. 196, 349-362 (2014).</li><li>Chase, I. D., Bartolomeo, C., Dugatkin, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggressive+interactions+and+inter-contest+interval:+how+long+do+winners+keep+winning?.">Aggressive interactions and inter-contest interval: how long do winners keep winning?.</a> Anim. Behav. 48, 393-400 (1994).</li><li>Goessmann, C., Hemelrijk, C., Huber, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+formation+and+maintenance+of+crayfish+hierarchies:+behavioral+and+self-structuring+properties.">The formation and maintenance of crayfish hierarchies: behavioral and self-structuring properties.</a> Behav Ecol Sociobiol. 48, 418-428 (2000).</li><li>Sturtevant, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experiments+on+sex+recognition+and+the+problem+of+sexual+selection+in+Drosophila.">Experiments on sex recognition and the problem of sexual selection in Drosophila.</a> J Animal Behav. 5, 351-366 (1915).</li><li>Jacobs, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+light+on+mating+of+Drosophila+melanogaster.">Influence of light on mating of Drosophila melanogaster.</a> Ecology. 41, 182-188 (1960).</li><li>Dow, M. A., von Schilcher, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggression+and+mating+success+in+Drosophila+melanogaster.">Aggression and mating success in Drosophila melanogaster.</a> Nature. 254, 511-512 (1975).</li><li>Hoffmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+laboratory+study+of+male+territoriality+in+the+sibling+species+Drosophila+melanogaster+and+D.+simulans.">A laboratory study of male territoriality in the sibling species Drosophila melanogaster and D. simulans.</a> Anim. Behav. 35, 807-818 (1987).</li><li>Vrontou, E., Nilsen, S. P., Demir, E., Kravitz, E. A., Dickson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=fruitless+regulates+aggression+and+dominance+in+Drosophila.">fruitless regulates aggression and dominance in Drosophila.</a> Nat Neurosci. 9, 1469-1471 (2006).</li><li>Nilsen, S. P., Chan, Y. B., Huber, R., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender-selective+patterns+of+aggressive+behavior+in+Drosophila+melanogaster.">Gender-selective patterns of aggressive behavior in Drosophila melanogaster.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101, 12342-12347 (2004).</li><li>Fernandez, M. P., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggression+and+courtship+in+Drosophila:+pheromonal+communication+and+sex+recognition.">Aggression and courtship in Drosophila: pheromonal communication and sex recognition.</a> J Comp Physiol A Neuroethol Sens Neural Behav Physiol. 199, 1065-1076 (2013).</li><li>Alekseyenko, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+serotonergic+neurons+that+modulate+aggression+in+Drosophila.">Single serotonergic neurons that modulate aggression in Drosophila.</a> Current biology : CB. 24, 2700-2707 (2014).</li><li>Asahina, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tachykinin-expressing+neurons+control+male-specific+aggressive+arousal+in+Drosophila.">Tachykinin-expressing neurons control male-specific aggressive arousal in Drosophila.</a> Cell. 156, 221-235 (2014).</li><li>Andrews, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Octopamine+neuromodulation+regulates+Gr32a-linked+aggression+and+courtship+pathways+in+Drosophila+males.">Octopamine neuromodulation regulates Gr32a-linked aggression and courtship pathways in Drosophila males.</a> PLoS genetics. 10, e1004356 (2014).</li><li>Zwarts, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+genetic+architecture+of+Drosophila+aggressive+behavior.">Complex genetic architecture of Drosophila aggressive behavior.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 108, 17070-17075 (2011).</li><li>Dierick, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+quantifying+aggression+in+male+Drosophila+melanogaster.">A method for quantifying aggression in male Drosophila melanogaster.</a> Nat Protoc. 2, 2712-2718 (2007).</li><li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hierarchical+chemosensory+regulation+of+male-male+social+interactions+in+Drosophila.">Hierarchical chemosensory regulation of male-male social interactions in Drosophila.</a> Nat Neurosci. 14, 757-762 (2011).</li><li>Davis, S. M., Thomas, A. L., Nomie, K. J., Huang, L., Dierick, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tailless+and+Atrophin+control+Drosophila+aggression+by+regulating+neuropeptide+signalling+in+the+pars+intercerebralis.">Tailless and Atrophin control Drosophila aggression by regulating neuropeptide signalling in the pars intercerebralis.</a> Nat Commun. 5, 3177 (2014).</li><li>Yuan, Q., Song, Y., Yang, C. H., Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+contact+modulates+male+aggression+via+a+sexually+dimorphic+GABAergic+circuit+in+Drosophila.">Female contact modulates male aggression via a sexually dimorphic GABAergic circuit in Drosophila.</a> Nat Neurosci. 17, 81-88 (2014).</li><li>Perron, J. M., Huot, L., Corrivault, G. W., Chawla, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+carbon+dioxide+anaesthesia+on+Drosophila+melanogaster.">Effects of carbon dioxide anaesthesia on Drosophila melanogaster.</a> J Insect Physiol. 18, 1869-1874 (1972).</li><li>Joachim, D., Curtsinger, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotype+and+anesthetic+determine+mate+choice+in+Drosophila+melanogaster.">Genotype and anesthetic determine mate choice in Drosophila melanogaster.</a> Behav Genet. 20, 73-79 (1990).</li><li>Barron, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthetising+Drosophila+for+behavioural+studies.">Anaesthetising Drosophila for behavioural studies.</a> J Insect Physiol. 46, 439-442 (2000).</li><li>Greenspan, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fly Pushing: The theory and Practice of Drosophila Genetics. , (1997).</li><li>Cabral, L. G., Foley, B. R., Nuzhdin, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+sex+trade+with+violence+among+genotypes+in+Drosophila+melanogaster?.">Does sex trade with violence among genotypes in Drosophila melanogaster?.</a> PLoS One. 3 (4), e1986 (2008).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

بدأ العصر الحديث استخدام ذبابة الفاكهة لأساليب وراثية قوية كما كائن نموذج لدراسة العدوان قبل نحو عشر سنوات مع إدخال الساحات التجريبية الجديدة التي يمكن الحصول عليها السلوك القتال موثوق بها مع أزواج واحدة من الذباب 1،7، 8،17،19. وشملت هذه الساحات الموارد الم?...

ويرتبط العدوان في أنظمة الحيوان بقوة مع اقتناء وتنظيم الموارد مثل الغذاء والأراضي والاصحاب. نظرا للدور المهم هذا يلعب في اللياقة البدنية للأفراد، فإنه ليس من المستغرب أن العدوان قد تطورت في جميع أنحاء المملكة الحيوانية. كما سمة التكيف التي يستفيد منها الأفراد مباشرة، ويرتبط عنصر التعلم والذاكرة القوية مع العدوان. وفي التنافس على المرتبة الاجتماعية، والخبرة السابقة القتال يؤثر على نتائج مسابقات لاحقة. بشكل عام، قبل الزيادات تجربة خاسرة، وانخفاض تجربة الفوز، واحتمال فقدان مسابقات لاحقة (وتسمى &quot;خاسر&quot; و &quot;رابح&quot; الآثار). وقد لوحظت &quot;الخاسر&quot; الآثار في مجموعة واسعة من الأنواع، وتشير بعض التقارير إلى أن هذه يمكن أن تستمر لعدة أيام في حين أن &quot;الفائز&quot; الآثار وعادة ما تكون أقصر مدة 2،10،11. التقرير الأول من السلوك العدوانيفي ذباب الفاكهة (D. ampelophila) كان من قبل Sturtevant في عام 1915 في ورقة المعنية مع الاعتراف الجنس واختيار جنس المولود 12. وقدمت بعد نصف قرن، والامتحانات أكثر اكتمالا من الفاكهة الذكور تطير العدوان، التي وصفت معظم الأنماط السلوكية التي لوحظت خلال معارك ذبابة الفاكهة. أجريت هذه التجارب في الغالب في مجموعات صغيرة من الذباب الذكور والإناث لوحظ خلال ساعات 13-15. في الآونة الأخيرة، مع إضافة أدوات قوية الجينية، الديناميكية واحدة المعركة الجنس الاجهزة وأوقات أقصر من المراقبة، D. وقد برز البطن كنظام نموذجا هاما لدراسة البيولوجية للسلوك العدواني 1،16. أظهر تحليل معارك بين أزواج من نفس الجنس من الذباب الذكور والإناث أن العدوان ينطوي على الأنماط السلوكية النمطية التي الانتقال من واحدة إلى أخرى بطريقة موثوقة إحصائيا 1،17. بعض الأنماط السلوكية لوحظ على جنس معين بينما لاحظ آخرون في القتالالصورة في كلا الجنسين. معارك الذكور تذهب إلى مستويات أعلى كثافة من المعارك الإناث والنتيجة في تكوين علاقات مع هيمنة واضحة &quot;الفائزين&quot; و &quot;الخاسرون&quot;. في الوقت الحاضر، وقد بدأت العديد من المختبرات التحقيق في الكيمياء الحيوية 18، العصبية 7،19-21، والجينية 22 الأسس العدوان. لسوء الحظ، فإن التحليل التلوي من الدراسات لاكتساب نظرة ثاقبة المعركة دينامية وتشكيل والحفاظ على علاقات الهيمنة إشكالية نظرا لاستخدام تعدد الإجراءات التجريبية في مختبرات مختلفة. أساسا كل من الأساليب المذكورة في الأدب تنطوي على التعامل والتلاعب من الذباب لتعريفهم إلى الساحات 19،23،24 وخلال التجربة السلوكية 3،4 لنقل الذباب من الساحات. طموح لطيف هي الطريقة الأكثر شيوعا لمعالجة الذباب 3،4،23-25، ولكنها تستخدم الباردة أو CO 2 التخدير أيضا 9،26، على الرغم من عوأفادت الدراسات revious بالفعل أن هذه الإجراءات لها آثار ضارة على سلوك الذبابة 27،28. ينصح مدة لا تقل عن 24 ساعة بعد استخدام أي مواد التخدير للتقليل من آثارها على سلوك 29،30. الذباب تتعلم من تجربة القتال السابقة وتعديل استخدام النمط السلوكي في مواقف جديدة، مما يشير إلى أن التعلم والذاكرة مرافقة وعواقب لقاءات ناهض. في هذا المعنى، ويطير معارك تشبه إلى تكييف هواء فعال حالات التعلم الذي يطير تعلم أن استراتيجية عملت ومن ثم استخدامها أكثر وأكثر في كثير من الأحيان خلال لقاءات لاحقة. الذباب تتغير الاستراتيجيات قتالهم بعد أن تم تأسيس علاقات الهيمنة خلال معارك مع الفائزين الإندفاع أكثر وأكثر والخاسرين أقل وأقل. بعد فترة من الانفصال، وتبين الخاسرين السابقة السلوك أكثر منقاد بكثير ومن المحتمل للغاية أن تفقد 2 الثانية تحارب عندما يقترن السذاجة فلوريداالمنشأ أو الفائزين السابقين 3،4. ومع ذلك، فقد بذلت غياب إجراء التجارب يستبعد التعامل مع الذباب دراسات تفصيلية عن &quot;الخاسر&quot; الآثار الصعبة. في دراسة حديثة، قارنا اثنين الإجراءات التجريبية تستخدم بشكل روتيني في مختبرات (طموح والتخدير البارد) لإدخال الذباب إلى غرف السلوكية للإجراء الجديد الذي يلغي التعامل معها. وأظهرت النتائج أن التخدير البارد زيارتها أكبر بكثير آثار سلبية على العدوان من الطموح، ولكن خفضت حتى تطلع مستوى العدوانية عن طريق الذباب. الطموح، مع ذلك، أن تتسبب في آثار هامة للغاية على التعلم والذاكرة التي تصاحب العدوان. بعد بروتوكول متطابقة مع اثنين من الإجراءات التجريبية (الطموح ولا مناولة)، لوحظ وجود قوي &quot;الخاسر&quot; تأثير إلا إذا تم القضاء على التعامل مع الذباب من الإجراء 5،6 التجريبية. من الناحية المثالية، دراسات ذبابة الفاكهة العدوان في لبووينبغي أن تتضمن ratories الأوضاع البيئية التي تواجه عادة الذباب في البرية (التنافس على الموارد، أراضي للدفاع والفضاء من الفرار). بالإضافة إلى ذلك، ينبغي أن يكون الأمثل الظروف التجريبية للحث موثوق، ومراقبة وتفسير السلوك قيد البحث والدراسة (محاولة للحد من التعامل مع الحيوانات، والحد من استخدام CO 2 كما مخدر، وتوحيد الإجراءات التجريبية). في محاولة للتصدي لمعظم أو كل هذه القضايا، قمنا بتصميم جهاز السلوكي الجديد الذي يلغي التعامل مع الذباب قبل وأثناء وبعد تعريفهم الساحات السلوكية. مع هذه الأجهزة، واستخدام الذباب انجذاب بالجاذبية السلبية الفطرية ليتم نقل وتحويل من وإلى المعركة غرف. من خلال القضاء على التعامل مع الذباب، ويهدف البروتوكول إلى: (أ) الحد من التباين في السلوك بين الأفراد؛ (ب) تقليل الوقت اللازم للذباب للتفاعل وتوليد علاقات هيمنة واضحة (ذكور)؛ و (ج) حث موثوق behavio قوي بما فيه الكفايةتغييرات راؤول للسماح بتشكيل الآثار &quot;الخاسر&quot;. يصف هذا البروتوكول جهاز تجريبي جديد وخطوة الإجراء خطوة لتحليل العدوان والسماح بتشكيل &quot;الخاسر&quot; تأثير قوي في D. البطن. ونحن نتوقع أن هذا الجهاز السلوكي يمكن أن تتكيف بسهولة لدراسة السلوكيات الاجتماعية الأخرى التي أظهرتها ذباب الفاكهة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="665">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Drosophila melanogaster pupa</td>
			<td style="width:163px;">Bloomington Stock Center</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard fly food</td>
			<td style="width:163px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Fabricated in-house.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Behavioral chambers</td>
			<td style="width:163px;">Mike machine</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Fabricated in-house. Directly&#160; contact the compagny for more informations.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Borosilicate glass vials</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">47729-576</td>
			<td style="width:167px;">16 x 10 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton</td>
			<td style="width:163px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">22-456-881</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pasteur pipettes</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">53300-567</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paintbrush&#160;</td>
			<td style="width:163px;">Blick Art Material</td>
			<td style="width:119px;">06157-7030</td>
			<td style="width:167px;">Round , Size 3/0</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Toothpick</td>
			<td style="width:163px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Acrylic paint (blue/white)</td>
			<td style="width:163px;">Blick Art Material</td>
			<td style="width:119px;">01637-5172/01637-1022</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dry active yeast</td>
			<td style="width:163px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">YSC2-500G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Srew cap tube</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">10011-394&#160;</td>
			<td style="width:167px;">15 mm diameter, 10 mm height</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">22363212</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tape</td>
			<td style="width:163px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Plastic slices</td>
			<td style="width:163px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:119px;">70329-40</td>
			<td style="width:167px;">22 x 40 x 0.25 mm Thickness</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Light source (bulb)</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">500003-418</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Timer</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62344-641</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Incubator</td>
			<td style="width:163px;">Percival</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Directly contact the constructor for more informations.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Carbon Dioxide Dry (CO2)</td>
			<td style="width:163px;">Medical-Technical Gases, Inc</td>
			<td style="width:119px;">14H31</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Binocular</td>
			<td style="width:163px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ-745</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Camera (SONY Handycam&#160; HDR-CX330)</td>
			<td style="width:163px;">B&#38;H</td>
			<td style="width:119px;">SOHDRCX330B</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Computer</td>
			<td style="width:163px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">With a minimum of 1.4 Ghz Processor, running Microsoft Windows or Machintosh HD</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">ClipWrap</td>
			<td style="width:163px;">Download online</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Any importing software can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">QuickTime Player</td>
			<td style="width:163px;">Download online</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Any reading software can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">GraphPad Software</td>
			<td style="width:163px;">Online</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Any statistical software can be used</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a new approach that eliminates handling for studying aggression and the "loser" effect in drosophila melanogaster

يتكون السلوك العدواني في ذبابة الفاكهة السوداء البطن للتعبير متتابعة من الأنماط السلوكية النمطية (لتحليل رؤية 1). ويتأثر هذا السلوك المعقد إلى عوامل وراثية، هرمونية والبيئية. كما هو الحال في العديد من الكائنات الحية، والخبرة السابقة القتال يؤثر على استراتيجية القتال من الذباب ونتائج مسابقات لاحقة: فقدان معركة يزيد من احتمال فقدان مسابقات لاحقة، وكشف عن الآثار &quot;الخاسر&quot; من المرجح تنطوي على التعلم والذاكرة 2-4. التعلم والذاكرة التي تصاحب التعبير عن السلوكيات الاجتماعية المعقدة مثل العدوان، حساس إلى ما قبل الاختبار التعامل مع الحيوانات 5،6. وتستخدم العديد من الإجراءات التجريبية في مختبرات مختلفة لدراسة العدوان 7-9، ومع ذلك، لا بشكل روتيني البروتوكول المستخدم يستبعد التعامل مع الذباب هو متاح حاليا. هنا، نحن تقرير جهاز السلوكي الجديد الذي يلغي التعامل مع الذباب، وذلك باستخدام insteaد الفطرية الردود geotactic السلبية لنقل الحيوانات داخل أو خارج غرف القتال. في هذا البروتوكول، وتنقسم صغيرة دائرية المعركة الساحات التي تحتوي على كوب الغذائية إلى نصفين متساويين من قبل التمرير البلاستيكية القابلة للإزالة قبل إدخال الذباب. الذباب دخول غرف من قوارير العزلة وطنهم عبر أبواب منزلقة وانجذاب بالجاذبية الغرفة. على إزالة المتزلجون البلاستيك، الذباب خالية للتفاعل. بعد فترات زمنية محددة، يتم فصل الذباب مرة أخرى عن طريق المتزلجون للتجريب لاحق. ويتم كل ذلك بسهولة من دون التعامل مع الذباب الفردية. يوفر هذا الجهاز نهجا جديدا لدراسة العدوان والتعلم المرتبطة بها، والذاكرة، بما في ذلك تشكيل الآثار &quot;الخاسر&quot; في معارك الطاير. بالإضافة إلى ذلك، هذا الجهاز الجديد السلوكي للأغراض العامة يمكن استخدامها لدراسة السلوكيات الاجتماعية الأخرى من الذباب، وينبغي، بصفة عامة، تكون ذات فائدة للتحقيق التغيرات المرتبطة خبرة في العمليات السلوكية الأساسية.

يعرض هذا القسم تصميم غرفة السلوكية وتحليل مجموعة نموذجية من التجارب السلوكية التالية بروتوكول المذكورة أعلاه قياس العدوان وتشكيل &quot;الخاسر&quot; تأثير. كما هو موضح هم عينات من السلوكيات الأخرى التي يمكن قياسها باستخدام هذا الجهاز. <p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl...

Watch this Scientific Journal Video about A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster at JoVE.com

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the &quot;Loser&quot; Effect in Drosophila melanogaster

خلال الفاكهة معارك الطيران، والأنماط السلوكية لاحظت، ومحاربة ديناميكية، وتتأثر التعلم والذاكرة يرتبط بها من ظروف تجريبية. بروتوكول المعروضة هنا يصف الإجراء الرواية التي يلغي تماما التعامل مع الذباب خلال التجارب. هذا يحسن المعركة دينامية ويسمح تشكيل &quot;الخاسر&quot; آثار قوية.

نهج جديد يقضي على مناولة لدراسة العدوان و &quot;الخاسر&quot; تأثير في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

a-new-approach-that-eliminates-handling-for-studying-aggression-loser

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

9.5K Views.  Harvard Medical School.  خلال الفاكهة معارك الطيران، والأنماط السلوكية لاحظت، ومحاربة ديناميكية، وتتأثر التعلم والذاكرة يرتبط بها من ظروف تجريبية. بروتوكول المعروضة هنا يصف الإجراء الرواية التي يلغي تماما التعامل مع الذباب خلال التجارب. هذا يحسن المعركة دينامي?...

Video: A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed in sensory hairs called sensilla, which cover the surface of olfactory organs. The surface of each sensillum is covered with tiny pores, through which odorants pass and dissolve in a fluid called sensillum lymph, which bathes the sensory dendrites of the OSNs housed in a given sensillum. The OSN dendrites express odorant receptor (OR) proteins, which in insects function as odor-gated ion channels4, 5. The interaction of odorants with ORs either increases or decreases the basal firing rate of the OSN. This neuronal activity in the form of action potentials embodies the first representation of the quality, intensity, and temporal characteristics of the odorant6, 7.
Given the easy access to these sensory hairs, it is possible to perform extracellular recordings from single OSNs by introducing a recording electrode into the sensillum lymph, while the reference electrode is placed in the lymph of the eye or body of the insect. In Drosophila, sensilla house between one and four OSNs, but each OSN typically displays a characteristic spike amplitude. Spike sorting techniques make it possible to assign spiking responses to individual OSNs. This single sensillum recording (SSR) technique monitors the difference in potential between the sensillum lymph and the reference electrode as electrical spikes that are generated by the receptor activity on OSNs1, 2, 8. Changes in the number of spikes in response to the odorant represent the cellular basis of odor coding in insects. Here, we describe the preparation method currently used in our lab to perform SSR on Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae, and show representative traces induced by the odorants in a sensillum-specific manner.

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

Electrophysiological responses of olfactory sensory neurons to odorants can be measured in insects using single sensillum recordings. In this video article we will demonstrate how to perform single sensillum recordings in the antennae of the vinegar fly (Drosophila melanogaster) and the maxillary palps of the malaria mosquito (Anopheles gambiae).

تسجيلات Sensillum واحدة في الحشرات ذبابة الفاكهة السوداء البطن و الأنوفيلة الغامبية</em

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed ...

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We developed a novel nanoinjection/electrophysiology assay that allows the detection of bioactive modulatory effects of compounds on the function of a neuronal circuit that mediates the escape response in Drosophila melanogaster3,4. Our in vivo assay, which uses the Drosophila Giant Fiber System (GFS, Figure 1) allows screening of different types of compounds, such as small molecules or peptides, and requires only minimal quantities to elicit an effect. In addition, the Drosophila GFS offers a large variety of potential molecular targets on neurons or muscles. The Giant Fibers (GFs) synapse electrically (Gap Junctions) as well as chemically (cholinergic) onto a Peripheral Synapsing Interneuron (PSI) and the Tergo Trochanteral Muscle neuron (TTMn)5. The PSI to DLMn (Dorsal Longitudinal Muscle neuron) connection is dependent on D&alpha;7 nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs)6. Finally, the neuromuscular junctions (NMJ) of the TTMn and the DLMn with the jump (TTM) and flight muscles (DLM) are glutamatergic7-12. Here, we demonstrate how to inject nanoliter quantities of a compound, while obtaining electrophysiological intracellular recordings from the Giant Fiber System13 and how to monitor the effects of the compound on the function of this circuit. We show specificity of the assay with methyllycaconitine citrate (MLA), a nAChR antagonist, which disrupts the PSI to DLMn connection but not the GF to TTMn connection or the function of the NMJ at the jump or flight muscles.
Before beginning this video it is critical that you carefully watch and become familiar with the JoVE video titled "Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster " from Augustin et al7, as the video presented here is intended as an expansion to this existing technique. Here we use the electrophysiological recordings method and focus in detail only on the addition of the paired nanoinjections and monitoring technique.

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

A rapid in vivo assay to test for neuromodulatory compounds using the Giant Fiber System (GFS) of Drosophila melanogaster is described. Nanoinjections in the head of the animal along with electrophysiological recordings of the GFS can reveal bioactivity of compounds on neurons or muscles.

تقرن Nanoinjection والفحص الكهربية للكشف عن النشاط الحيوي للمركبات باستخدام ذبابة الفاكهة السوداء البطن نظام الألياف العملاق

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other insects proprioception is provided by specialized sensory organs termed chordotonal organs (ChOs) 2. Like many other organs in Drosophila, ChOs develop twice during the life cycle of the fly. First, the larval ChOs develop during embryogenesis. Then, the adult ChOs start to develop in the larval imaginal discs and continue to differentiate during metamorphosis.
The development of larval ChOs during embryogenesis has been studied extensively 10,11,13,15,16. The centerpiece of each ChO is a sensory unit composed of a neuron and a scolopale cell. The sensory unit is stretched between two types of accessory cells that attach to the cuticle via specialized epidermal attachment cells 1,9,14. When a fly larva moves, the relative displacement of the epidermal attachment cells leads to stretching of the sensory unit and consequent opening of specific transient receptor potential vanilloid (TRPV) channels at the outer segment of the dendrite 8,12. The elicited signal is then transferred to the locomotor central pattern generator circuit in the central nervous system.
Multiple ChOs have been described in the adult fly 7. These are located near the joints of the adult fly appendages (legs, wings and halters) and in the thorax and abdomen. In addition, several hundreds of ChOs collectively form the Johnston's organ in the adult antenna that transduce acoustic to mechanical energy 3,5,17,4.
In contrast to the extensive knowledge about the development of ChOs in embryonic stages, very little is known about the morphology of these organs during larval stages. Moreover, with the exception of femoral ChOs 18 and Johnston's organ, our knowledge about the development and structure of ChOs in the adult fly is very fragmentary.
Here we describe a method for staining and visualizing ChOs in third instar larvae and pupae. This method can be applied together with genetic tools to better characterize the morphology and understand the development of the various ChOs in the fly.

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

A method to immunostain and visualize chordotonal organs in larvae and pupae of Drosophila melanogaster is described.

تصور في Proprioceptors<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; يرقات وشرانق

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

تحديد العفوي الحركي آخر في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

الفحص مباشرة للالكمي لتجنب الاجتماعي في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a straightforward manner. As we previously demonstrated 1, in a two-dimensional chamber, we first force the flies to form a tight group, subsequently allowing them to take their preferred distance from each other. After the flies have settled, we measure the distance to the closest neighbor (or social space), processing a static picture with free online software (ImageJ). The analysis of the distance to the closest neighbor allows researchers to determine the effects of genetic and environmental factors on social interaction, while controlling for potential confounding factors. Diverse factors such as climbing ability, time of day, sex, and number of flies, can modify social spacing of flies. We thus propose a series of experimental controls to mitigate these confounding effects. This assay can be used for at least two purposes. First, researchers can determine how their favorite environmental shift (such as isolation, temperature, stress or toxins) will impact social spacing 1,2. Second, researchers can dissect the genetic and neural underpinnings of this basic form of social behavior 1,3. Specifically, we used it as a diagnostic tool to study the role of orthologous genes thought to be involved in social behavior in other organisms, such as candidate genes for autism in humans 4.

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The effect of genes and environment on social space of Drosophila melanogaster can be quantified through a powerful but straightforward analytical paradigm. We show here different factors that can affect this social space, and thus need to be taken into consideration when designing experiments in this paradigm.

الظروف التي تؤثر في الفضاء الاجتماعي<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To complicate matters even further, the odors detected by the insect nervous system usually are not single compounds but mixtures whose composition and concentration ratios vary. This leads to an almost infinite amount of different olfactory stimuli which have to be evaluated by the nervous system.
To understand which aspects of an odor stimulus determine its evaluation by the fly, it is therefore desirable to efficiently examine odor-guided behavior towards many odorants and odor mixtures. To directly correlate behavior to neuronal activity, behavior should be quantified in a comparable time frame and under identical stimulus conditions as in neurophysiological experiments. However, many currently used olfactory bioassays in Drosophila neuroethology are rather specialized either towards efficiency or towards resolution.
Flywalk, an automated odor delivery and tracking system, bridges the gap between efficiency and resolution. It allows the determination of exactly when an odor packet stimulated a freely walking fly, and to determine the animal&#180;s dynamic behavioral reaction.

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

The automated tracking system Flywalk is used for high-resolution quantification of odor-guided behavior in Drosophila melanogaster.

عالية الدقة الكمي للسلوك رائحة الموجهة في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em&gt; استخدام<em&gt; Flywalk</em&gt; بارادايم

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

A Behavioral Assay for Mechanosensation of MARCM-based Clones in Drosophila melanogaster

Because of the structural and functional homology to the hair cells of the mammalian inner ear, the neurons that innervate the Drosophila external sense organs provide an excellent model system for the study of mechanosensation. This protocol describes a simple touch behavior in fruit flies which can be used to identify mutations that interfere with mechanosensation. The tactile stimulation of a macrochaete bristle on the thorax of flies elicits a grooming reflex from either the first or third leg. Mutations that interfere with mechanotransduction (such as NOMPC), or with other aspects of the reflex arc, can inhibit the grooming response. A traditional screen of adult behaviors would have missed mutants that have essential roles during development. Instead, this protocol combines the touch screen with mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) to allow for only limited regions of homozygous mutant cells to be generated and marked by the expression of green fluorescent protein (GFP). By testing MARCM clones for abnormal behavioral responses, it is possible to screen a collection of lethal p-element mutations to search for new genes involved in mechanosensation that would have been missed by more traditional methods.

A Behavioral Assay for Mechanosensation of MARCM-based Clones in Drosophila melanogaster

In order to identify novel mutations affecting mechanosensation, we designed an assay that measures the behavioral response to tactile stimulation of fly bristles in mutant clones generated by the MARCM method. The combination of techniques allows for the identification of mechanosensitive mutations that would otherwise be lethal.

النسخ في والسلوكية الفحص لMechanosensation من MARCM المستندة<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Because of the structural and functional homology to the hair cells of the mammalian inner ear, the neurons that innervate the Drosophila external sense ...

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral variation. The larval path-length assay was developed to measure individual differences in foraging behavior that were later linked to the foraging gene. Larval path-length is an easily scored trait that facilitates the collection of large sample sizes, at minimal cost, for genetic screens. Here we provide a detailed description of the current protocol for the larval path-length assay first used by Sokolowski. The protocol details how to reproducibly handle test animals, perform the behavioral assay and analyze the data. An example of how the assay can be used to measure behavioral plasticity in response to environmental change, by manipulating feeding environment prior to performing the assay, is also provided. Finally, appropriate test design as well as environmental factors that can modify larval path-length such as food quality, developmental age and day effects are discussed.

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

We provide a detailed protocol for a Drosophila melanogaster foraging path-length assay. We discuss the preparation and handling of test animals, how to perform the assay and analyze the data.

تستخدم علفا بروتوكول مسار طول ل<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; يرقات

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

طريقة بسيطة لقياس التغيرات في السلوك المكافأة التماس طريق<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...