We thank Rachelle Kanippayoor for her help in identifying the new wild-type strain as being of the melanogaster species. R.W.F, O.F. and A.F.S were responsible for research design; R.W.F, M.N. and O.F. performed the experiments. R.W.F, M.N., O.F. and A.F.S. analyzed the data; R.W.F., I.S.M. and A.F.S. wrote the manuscript. 
This work was supported by PSC-CUNY research awards, jointly funded by The Professional Staff Congress and The City University of New York to A.F.S.; by internal funding from Western University to A.F.S. and I.S.M.; by a training support from the National Alliance for Hispanic Health&#8217;s Alliance/Merck Ciencia (Science) Hispanic Scholars Program and a University Fellowship from the Yale Graduate School of Arts and Sciences to R.W.F.

المعدات والكواشف مكون في منزل 1. (راجع قائمة المواد لأخرى) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد ذبابة الفاكهة جهاز التخدير البارد لأداء العمل الطاير. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع ورقة البولي ايثيلين التي يسهل اختراقها لتغطية مربع صغير من البلاستيك (12.7 سم طويلة، 10.2 سم)، وعادة الغطاء العلوي من مربع نصائح ماصة (12.7 سم طويلة، 10.2 سم، 3.8 سم عمق). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملء مربع مع الثلج المجروش، مع تغطية ورقة البولي ايثيلين التي يسهل اختراقها. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد جهاز T-متاهة. التكيف مع الجهاز سبق وصفها في التفاصيل 28-31. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الشافطة ذبابة كما هو موضح 32. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد جهاز استجابة انجذاب ضوئي لتهجير الذباب ويخرجون من قارورة الاختبار دون إجهاد: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام جهاز المعاكس، كما وصفها 29،33. </li></ol></li></ol> ملاحظة: يمكن أيضا أن T-متاهة أن تستخدم لأغراض أخرى، كما وصفها 28. <ol start="5" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضمان هومظروف الإضاءة ogeneous: أداء التجربة على مقعد مغطاة مقعد غطاء أبيض، وأمام لوحة بيضاء. ملاحظة: للحصول على هذه التجارب، وكانت سلالات ذبابة المستخدمة الدروسوفيلاميلانوجاستر أنواع البرية: كانتون-S، ولاية أوريغون وسمرقند الذباب من مخزونات المختبر لدينا 34؛ تم جمع الذباب إلوود في خريف عام 2011 في حي إلوود من هنتنغتون، في لونغ آيلاند، نيويورك، الولايات المتحدة الأمريكية. </li></ol> 2. إعداد الذباب قبل التجربة 1-2 أيام قبل تنفيذ التجربة: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الذباب على معيار متوسطة دقيق الذرة-أجار الدبس-الخميرة عند 25 درجة مئوية على 12 ساعة ضوء / دورة الظلام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الذباب الرد تحت التخدير الباردة 1-2 أيام قبل تنفيذ التجربة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب من الزجاجات التي أثيرت في 50 مل أنابيب الصقر، وذلك باستخدام قمع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع أنبوب الصقر مع الذباب تحت مستوى الجليد، إلىدلو الثلج معزول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع جهاز التخدير البارد مع الثلج المجروش في -4 ° C إلى البرد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الانتظار 5 دقائق لالذباب لدخول غيبوبة البرد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب على ورقة البولي ايثيلين التي يسهل اختراقها من جهاز التخدير البارد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الذباب الرد على الجهاز التخدير البارد. في RT، تحت stereomicroscope، فصل الذكور 3-7 أيام القديم من الذباب الإناث والحفاظ على هذه الذباب في مجموعات من 40. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الذباب باعث 1-2 أيام قبل إجراء التجربة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع بلطف كانتون-S مختلط الجنس الذباب من الزجاجات، وذلك باستخدام الشافطة الفم، والسيطرة على لعددهم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على هذه الذباب في مجموعة من 60-100، لأنها سوف تكون بواعث. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد العديد من العينات من بواعث كنقاط البيانات اللازمة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسمح على الأقل ليلة من الانتعاش بعد جمع من المستجيبين وبواعث، للحد من أي تأثير الخلط من التخدير الباردوجمع الفم الشافطة على السلوك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح الحقيبة من قارورة اختبار، للسماح للهواء رائحة البلاستيك التي لا معنى لها في الحقيبة لتحل محلها الهواء النقي، 1 في اليوم على الاقل قبل التجربة. </li></ol> 2 ساعة قبل تنفيذ التجربة: <ol start="6" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من أن درجة الحرارة في الغرفة التي يتم تنفيذ التجربة حوالي 23-25 ​​درجة مئوية، حتى مع الضوء، والرطوبة فوق 30٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل المستجيبين والذباب بواعث الفاكهة في قوارير جديدة الغذائية للتأكد من أن هذه الذباب لا جوعا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للذباب الفاكهة على التكيف مع البيئة لمدة 2 ساعة، على مقاعد البدلاء التي سيتم تنفيذ التجربة. </li></ol> 3. إجراء التجربة تجنب الاجتماعي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء كل تجربة في نفس الوقت من اليوم، في مجموعة من 3-4 ساعة في فترة ما بعد الظهر بين الساعة Zeitgeber ZT5 وZT9. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع T-متاهة على لوحة القصف، وتشديد كليب المسمار بحيث رفهو المصاعد مستقر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب الرد في اختبار قارورة جديدة. التقط هذه القارورة التي تحتوي على الذباب الرد على الجزء العلوي من T-المتاهة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مائل جهاز T-متاهة واضغط عليها على حصيرة بقصف حتى تسقط ذبابة الفاكهة في المصعد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الجزء العلوي من المصعد إلى أسفل حتى الذباب ما بين القسم العلوي والجزء السفلي من T-المتاهة، ولكن الالتفات للحفاظ على المصعد فوق نقطة الاختيار - لمنع الذباب من الهرب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على قارورة مع احة دبي للسيليكون (انظر القسم 5 لتوليد خالية احة دبي للسيليكون قارورة التي احتلت من قبل الذباب). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في حين أن الذباب الرد على التكيف مع هذه البيئة الجديدة، ووضع الذباب باعث في قارورة الاختبار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع قطعة من القطن لإغلاق القارورة حتى ذبابة الفاكهة لا يهرب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ميكانيكيا تستنهض الهمم هذه قنينة على-دوامة صغيرة على النحو التالي: دوامة لمدة 15 ثانية، وإزالة القارورة من دوامة لمدة 5 ثانية. كرر 3 مرات ليصبح المجموع 55 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ريماوفه الذباب باعث من القارورة جديدة - من خلال نقل في قارورة الغذاء - وسرعان ما وضع هذا احة دبي للسيليكون ملأت قارورة في واحدة من الجانبين لجهاز T-المتاهة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بالتناوب جانب التنسيب للقارورة احة دبي للسيليكون شغلها في كل شوط جديد. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع اختبار قارورة جديدة على الجانب الآخر من T-المتاهة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جلب المصعد أسفل تماما، وبالتالي فإن ذباب الفاكهة يمكن أن اختار بين قنينة اختبار الطازجة وقنينة اختبار مع احة دبي للسيليكون، وبدء الموقت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للذباب تختار بين القارورة الطازجة والقارورة احة دبي للسيليكون، لمدة 1 دقيقة، ما لم يذكر خلاف ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبعد 1 دقيقة، نقل المصعد تصل للفصل بين الذباب في القارورة جديدة، DSO القارورة، وتلك عالقة في المصعد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب عدد الذباب في كل قارورة، وفي المصعد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم كرر ذلك لكل الوراثي / الشرط. </li></ol> 4. تحليل البيانات تجنب الاجتماعي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب عدد من ذباب الفاكهة في كل قارورة لكل جينو[يب]، ونقل البيانات إلى جدول بيانات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام برنامج جداول البيانات، وحساب مؤشر الأداء (PI) لكل التركيب الوراثي من خلال طرح عدد من الذباب في القارورة احة دبي للسيليكون من عدد الذباب في القارورة المجانية احة دبي للسيليكون، ثم قسمة العدد الكلي للذباب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المقارنة الوسائل حزب القانون والعدالة &quot;باستخدام برامج التحليل الإحصائي للتحليل لنتائج. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ومن الناحية المثالية، وإعداد 2-3 يكرر الداخلية لكل تجربة، و 3 يكرر مستقلة، أجريت على أيام مختلفة، مع زجاجات مختلفة أو الصلبان 30. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام اختبارات توزيع جاوس الإحصائية، وتتبع البيانات التوزيع الطبيعي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند اختبار تأثير واحد (أي كثافة - الشكل 2)، واستخدام ANOVA في اتجاه واحد، مع ما بعد اختبار للمقارنة متعددة (عمود بواسطة عمود)، أو بسيطة اختبار t لمقارنة كل نتيجة لعنصر تحكم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما يتم تنفيذ تجارب المجموعة، اختبار كل الظروف والأجناس (قارورة فارغة، وشدد علىالذباب من الامم المتحدة وأكد د. وتأثير بين الجنسين - الشكل 1)، وذلك باستخدام اتجاهين ANOVA. </li></ol></li></ol> 5. توليد قوارير التي كانت تحتلها الذباب بهيج - تنفيذ وبدلا من 3،5-3،6 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام انجذاب ضوئي لإعداد قارورة المحتلة عن طريق الذباب التي لم يتم شدد، كمجموعة تحكم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب في قارورة الاختبار، وثبتها في الجهاز المعاكس، مع قارورة فارغة جديدة في الموقع المعاكس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الجهاز أفقيا مع القارورة البعيدة مباشرة أمام 15 W الفلورسنت ضوء بارد أبيض، وتغطي مع قطعة قماش سوداء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للذباب تحرك بلطف في قارورة جديدة. قد يستغرق هذا عدة دقائق. مرة واحدة أكثر من الذباب يسيرون نحو الضوء في قارورة البعيدة، وبدء الموقت لمدة 1 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلطف إزالة قطعة قماش سوداء، تبديل مكان وجود الضوء، واستعادة مع القماش الأسود، والسماح للذباب لمغادرة اختبار القارورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في ذلك الوقت، طnitiate التجربة الاختيار كما في 3،2-3،5. تخطي 3.6 و 3.7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حرك المنزلق للجهاز، للفصل بين الذباب الذي شغر قنينة اختبار من الجانب الآخر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام قارورة الاختبار إخلاؤها في T-متاهة على الفور للتجربة الاختيار، كما هو الحال في 3.7. </li></ol>

<ol>
	<li>Fry, S. N., Rohrseitz, N., Straw, A. D., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TrackFly:+virtual+reality+for+a+behavioral+system+analysis+in+free-flying+fruit+flies.">TrackFly: virtual reality for a behavioral system analysis in free-flying fruit flies.</a> J Neurosci Methods. 171, 110-117 (2008).</li><li>Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+video+tracking+of+locomotion+in+adult+Drosophila+melanogaster.">High-resolution video tracking of locomotion in adult Drosophila melanogaster.</a> J Vis Exp. 24, 1096 (2009).</li><li>Dankert, H., Wang, L., Hoopfer, E. D., Anderson, D. J., Perona, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+monitoring+and+analysis+of+social+behavior+in+Drosophila.">Automated monitoring and analysis of social behavior in Drosophila.</a> Nat Methods. 6, 297-303 (2009).</li><li>Branson, K., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+ethomics+in+large+groups+of+Drosophila.">High-throughput ethomics in large groups of Drosophila.</a> Nat Methods. 6, 451-457 (2009).</li><li>Simon, J. C., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+chamber+for+studying+the+behavior+of+Drosophila.">A new chamber for studying the behavior of Drosophila.</a> PLoS One. 5, 8793 (2010).</li><li>Wang, L., Dankert, H., Perona, P., Anderson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inaugural+Article:+A+common+genetic+target+for+environmental+and+heritable+influences+on+aggressiveness.">Inaugural Article: A common genetic target for environmental and heritable influences on aggressiveness.</a> in Drosophila. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 5657-5663 (2008).</li><li>Schneider, J., Dickinson, M. H., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+structures+depend+on+innate+determinants+and+chemosensory+processing+in+Drosophila.">Social structures depend on innate determinants and chemosensory processing in Drosophila.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 2, 17174-17179 (2012).</li><li>Miyamoto, T., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+male+courtship+by+a+Drosophila+pheromone+receptor.">Suppression of male courtship by a Drosophila pheromone receptor.</a> Nat Neurosci. 11, 874-876 (2008).</li><li>Villella, A., Hall, J. C., Jeffrey, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+3+Neurogenetics+of+Courtship+and+Mating+in+Drosophila.+.">Chapter 3 Neurogenetics of Courtship and Mating in Drosophila. .</a> Advances in Genetics. 62, 67-184 (2008).</li><li>Ejima, A., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Courtship+Initiation+Is+Stimulated+by+Acoustic+Signals+in+Drosophila+melanogaster.">Courtship Initiation Is Stimulated by Acoustic Signals in Drosophila melanogaster.</a> PLoS ONE. 3, 3246 (2008).</li><li>Mery, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Public+Versus+Personal+Information+for+Mate+Copying+in+an+Invertebrate.">Public Versus Personal Information for Mate Copying in an Invertebrate.</a> Current Biology. 19, 730-734 (2009).</li><li>Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+taste+of+the+Drosophila+gustatory+receptors.">A taste of the Drosophila gustatory receptors.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 19, 345-353 (2009).</li><li>Billeter, J. -. C., Atallah, J., Krupp, J. J., Millar, J. G., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specialized+cells+tag+sexual+and+species+identity+in+Drosophila+melanogaster.">Specialized cells tag sexual and species identity in Drosophila melanogaster.</a> Nature. 461, 987-991 (2009).</li><li>Krupp, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+experience+modifies+pheromone+expression+and+mating+behavior+in+male+Drosophila+melanogaster.">Social experience modifies pheromone expression and mating behavior in male Drosophila melanogaster.</a> Curr Biol. 18, 1373-1383 (2008).</li><li>Kent, C., Azanchi, R., Smith, B., Formosa, A., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+context+influences+chemical+communication+in+D.+melanogaster+males.">Social context influences chemical communication in D. melanogaster males.</a> Curr Biol. 18, 1384-1389 (2008).</li><li>Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B., Hall, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resetting+the+Circadian+Clock+by+Social+Experience+in+Drosophila+melanogaster.">Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster.</a> Science. 298, 2010-2012 (2002).</li><li>Ganguly-Fitzgerald, I., Donlea, J., Shaw, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Waking+Experience+Affects+Sleep+Need+in+Drosophila.">Waking Experience Affects Sleep Need in Drosophila.</a> Science. 313, 1775-1781 (2006).</li><li>Billeter, J. -. C., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+is+he+and+what+is+he+to+you?+Recognition+in+Drosophila+melanogaster.">Who is he and what is he to you? Recognition in Drosophila melanogaster.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 23, 17-23 (2013).</li><li>Suh, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+population+of+olfactory+sensory+neurons+mediates+an+innate+avoidance+behaviour+in+Drosophila.">A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila.</a> Nature. 431, 854-859 (2004).</li><li>Bonini, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Tribute+to+Seymour+Benzer+1921-2007.">A Tribute to Seymour Benzer 1921-2007.</a> 180, 1265-1273 (2008).</li><li>Castermans, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurobeachin+gene+is+disrupted+by+a+translocation+in+a+patient+with+idiopathic+autism.">The neurobeachin gene is disrupted by a translocation in a patient with idiopathic autism.</a> Journal of Medical Genetics. 40, 352-356 (2003).</li><li>Medrihan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobeachin,+a+protein+implicated+in+membrane+protein+traffic+and+autism,+is+required+for+the+formation+and+functioning+of+central+synapses.">Neurobeachin, a protein implicated in membrane protein traffic and autism, is required for the formation and functioning of central synapses.</a> J Physiol. 587, 5095-5106 (2009).</li><li>Simon, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+assay+to+study+social+behavior+in+Drosophila:+measurement+of+social+space+within+a+group.">A simple assay to study social behavior in Drosophila: measurement of social space within a group.</a> Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).</li><li>Venkatesh, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cold Spring Harbor Meeting: From Molecules to Circuit Behavior. , (2013).</li><li>Hamilton, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=De+novo+mutation+in+the+dopamine+transporter+gene+associates+dopamine+dysfunction+with+autism+spectrum+disorder.">De novo mutation in the dopamine transporter gene associates dopamine dysfunction with autism spectrum disorder.</a> Mol Psychiatry. 18, 1315-1323 (2013).</li><li>Gadow, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+dopamine+gene+variants,+emotion+dysregulation+and+ADHD+in+autism+spectrum+disorder.">Association of dopamine gene variants, emotion dysregulation and ADHD in autism spectrum disorder.</a> Research in Developmental Disabilities. 35, 1658-1665 (2014).</li><li>Fernandez, R. W., Akinleye, A. A., Nurilov, M., Rouzyi, Z., Simon, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (2014).</li><li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assaying+Locomotor,+Learning,+and+Memory+Deficits+in+Drosophila+Models+of+Neurodegeneration.">Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration.</a> J Vis Exp. , 2504 (2011).</li><li>Connolly, J. B., Tully, T., Roberts, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drosophila: A Practical Approach. 1, 265-317 (1998).</li><li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical-conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophila+melanogaster.">Classical-conditioning and retention in normal and mutant Drosophila melanogaster.</a> J Comp Physiol [A]. 157, 263-277 (1985).</li><li>Krashes, M. J., Waddell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Aversive+Olfactory+Conditioning.">Drosophila Aversive Olfactory Conditioning.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2011, (2011).</li><li>Ejima, A., Griffith, L. C., Zhang, B., Freeman, M. R., Waddell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+30.">Ch. 30.</a> Drosophila Neurobiology, A Laboratory Manual. , 475-481 (2010).</li><li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+mutants+of+Drosophila+melanogaster+isolated+by+countercurrent+distribution.">Behavioral mutants of Drosophila melanogaster isolated by countercurrent distribution.</a> PNAS. 58, 1112-1119 (1967).</li><li>Simon, A. F., Shih, C., Mack, A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroid+control+of+longevity+in+Drosophila+melanogaster.">Steroid control of longevity in Drosophila melanogaster.</a> Science. 299, 1407-1410 (2003).</li><li>Vaux, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+methods:+Know+when+your+numbers+are+significant.">Research methods: Know when your numbers are significant.</a> Nature. 492, 180-181 (2012).</li><li>Stowers, L., Logan, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+dimorphism+in+olfactory+signaling.">Sexual dimorphism in olfactory signaling.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 20, 770-775 (2010).</li><li>Simon, A. F., Liang, D. T., Krantz, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+decline+in+behavioral+performance+of+Drosophila+melanogaster+with+age.">Differential decline in behavioral performance of Drosophila melanogaster with age.</a> Mechanisms of Ageing and Development. , 127-647 (2006).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

يصف هذا البروتوكول إجراء مفصل لتجنب الفحص الاجتماعي. سوف كانتون-S تجنب فقط قارورة فيها الذباب قد سبق وأكد ميكانيكيا، وأن الجنس وعدد من المستجيبين لا يؤثر ذلك الأداء تجنب الاجتماعي. ومع ذلك، والخلفية الوراثية للالمستجيبين لديها تأثير كبير. <p class="jove_content" style=";text-align:rig...

والهدف من هذه الطريقة هو لقياس بسهولة جانبا جديدا من السلوك الاجتماعي بسيط في البطن ذبابة الفاكهة، مستقلة عن الخطوبة والعدوان. التفاعلات الاجتماعية هي الحاسمة في تنمية سليمة وصحة الأفراد داخل المجتمع، فضلا عن وظيفة لفئة اجتماعية ككل. تعقيد عالية من هذه التفاعلات يتطلب أحجام عينة كبيرة والنظام الذي يسمح لتبسيط السلوك كما أسس الوراثية والعصبية للسلوك الاجتماعي لا تزال غير مفهومة. ذبابة الفاكهة البطن هو نموذج الجيني القوية التي يمكن أن تستخدم لتحديد الجيني و قواعد العصبية من التفاعلات الاجتماعية. في الواقع، D. البطن لديه ذخيرة من السلوكيات الاجتماعية المعقدة وبعض القياسات المباشرة للتنشئة الاجتماعية وبالفعل تم القيام به 1-7. ومع ذلك، فإن معظم هذه الجهود قد ركزت على السلوكيات الاجتماعية المعقدة نسبيا، مثل aggresالتفاعلات SIVE 3،6، مختلف جوانب الخطوبة 3،8-12، وكيف تجربة اجتماعية تؤثر السلوكيات الأخرى مثل التعلم، أو إيقاع الساعة البيولوجية 13-17. وبالإضافة إلى ذلك، فإن العديد من هذه المقايسات تعتمد على تحليل أنماط التفاعل معقدة من مجموعات من الذباب، وذلك باستخدام التتبع وبرامج الكمبيوتر لتحليل وفرة الناتج من البيانات. مثل هذه التحليلات لا تقدر بثمن، وتؤدي إلى رؤى جديدة مهمة مثل ديناميكية التفاعلات ذبابة ذبابة في مجموعات 7. القيد واحد، ومع ذلك، هو عدم إمكانية الوصول إلى هذه المقايسات للمجتمع ككل، ومعرفة محدودة من الآليات الكامنة الاعتراف بالآخر. وبعبارة أخرى، فإن أساس انبعاث إشارة من قبل فرد واحد والاعتراف بها من جانب آخر لا تزال غير مفهومة 18. في المقابل، الذباب أيضا يحمل سلوك بسيط، وتجنب الاجتماعي، حيث يتحرك الأفراد بعيدا عن إشارة المنبعثة من الذباب وشدد: على D. melanogaster الإجهاد الرائحة أو احة دبي للسيليكون 19. في مقايسة الإنتاجية العالية، يمكن قياسها كميا هذا السلوك كما تجنب إشارة التوتر المنبعث من الذباب أخرى، أو تجنب الاجتماعي 19. توضع الذباب في جهاز T-المتاهة، وإعطاء خيار لتجنب قارورة تحتوي على احة دبي للسيليكون. باستخدام هذا الاختبار، تبين CO 2 لتكون عنصرا من عناصر احة دبي للسيليكون، وجزء من الدوائر العصبية اللازمة للاستجابة إلى CO 2 تم تشريح 19. الفحص تجنب الاجتماعي المقدمة هنا هو المفهوم مماثل لالمقايسات سلوكية بسيطة وضعت في مختبر سيمور بنزر أن تمكين أجيال من الباحثين لتشريح السلوكيات المعقدة 20. تحليل تجنب الاجتماعي يمكن أن تنفذ فعالية من حيث التكلفة باستخدام مقايسة T-متاهة، والسماح لدراسة أكثر انتشارا من السلوك الاجتماعي. على سبيل المثال، وذلك باستخدام هذا الاختبار أثبتنا مؤخرا أن مخاطر وراثية مختلفة لمرض التوحد لها آثار متباينة في ب الاجتماعيةالمقايسات ehavior. المسوخ لجين مرشح لمرض التوحد - neurobeachin 21،22 - أوجه القصور الحالية على حد سواء في الفضاء الاجتماعي (وصف مكان آخر 23) وتجنب الاجتماعي 24. ومن المقترح غير طبيعية إشارات الدوبامين أيضا للعب دور في مسببات مرض التوحد في البشر 25،26. وعلى النقيض من النتائج التي تم الحصول عليها مع neurobeachin، وجدنا أن الأداء تجنب الاجتماعي لم يتأثر زيادة أو انخفاض مستويات من ذبابة الفاكهة الحويصلي أحادي الأمين الناقل (VMAT) في خلايا الدوبامين، على الرغم من الفضاء الاجتماعي ترتبط مباشرة إلى هذه المستويات من VMAT 27. النتائج المتناقضة التي تم الحصول عليها مع neurobeachin وVMAT تؤكد إمكانية تحديد أشكال مختلفة من السلوك ااجتماعي، وبالتالي مختلفة circuitries العصبية الكامنة تحوير الاستجابة للآخرين.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Stereo Zoom Microscope&#160;</td>
			<td>Nikon&#160;&#160;</td>
			<td>SMZ-645</td>
			<td>Any other standard scope for fly handling would work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small paint brushes&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>for pushing flies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porous Polyethylene, 12&#34; x 12&#34; Sheet</td>
			<td>Flystuff - Genesee</td>
			<td>46-100</td>
			<td>http://www.flystuff.com/ProductInfo.php?productID=46-100 
			Porous Plastic sheet for the cold anesthesia box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-Alarm Timer/Stopwatch</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Sharpie pens</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive Tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini vortex</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-955-151&#160;</td>
			<td>http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail 
			For mechanical agitation of the flies - any vortex would work.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Life Sciences DL No.:352017, Falcon test tube; round bottom; disposable; no closure, 14mL;&#160; 17 x 100mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-959-8 &#160;&#160;</td>
			<td>http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail?storeId=10652&#38;langId=-1&#38;catalogId=29104&#38;productId=2771811&#38;distype=0&#38;highlightProductsItemsFlag=Y&#38;fromSearch=1&#38;searchType=PROD&#38;hasPromo=0 
			These snap in place in the in-house made T-maze and counter-current apparatus (see text)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton balls</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to close the vials after the experiment.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>trifold board and white bench cover</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to provide a white background, and a homogeneous light.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>white bench cover</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pounding pad</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any mouse pad works.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>large black cloth</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to cover the counter-current apparatus in phototaxis response.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cool-white light&#160;</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>1000516563</td>
			<td>http://www.homedepot.ca/product/illume-26-fluorescent-plug-in-linear/911423 
			any similar linear light with fluorescent light bulb cool-white at 13-15W would work</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

straightforward assay for quantification of social avoidance in drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

تجنب فحص الاجتماعي هو اختبار قوي قياس قدرة ذبابة الفاكهة على التعرف على إشارة الإجهاد (DSO) المنبعثة من الذباب أخرى، وبالتالي تقييم جانبا واحدا من التفاعلات الاجتماعية. يتم تنفيذ الفحص باستخدام جهاز يستخدم عادة في مختلف مقايسات السلوك المعروف باسم T-المتاهة، الت?...

Watch this Scientific Journal Video about Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster at JoVE.com

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

الفحص مباشرة للالكمي لتجنب الاجتماعي في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

straightforward-assay-for-quantification-social-avoidance-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

11.1K Views.  Yale University. Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

Video: Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We developed a novel nanoinjection/electrophysiology assay that allows the detection of bioactive modulatory effects of compounds on the function of a neuronal circuit that mediates the escape response in Drosophila melanogaster3,4. Our in vivo assay, which uses the Drosophila Giant Fiber System (GFS, Figure 1) allows screening of different types of compounds, such as small molecules or peptides, and requires only minimal quantities to elicit an effect. In addition, the Drosophila GFS offers a large variety of potential molecular targets on neurons or muscles. The Giant Fibers (GFs) synapse electrically (Gap Junctions) as well as chemically (cholinergic) onto a Peripheral Synapsing Interneuron (PSI) and the Tergo Trochanteral Muscle neuron (TTMn)5. The PSI to DLMn (Dorsal Longitudinal Muscle neuron) connection is dependent on D&alpha;7 nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs)6. Finally, the neuromuscular junctions (NMJ) of the TTMn and the DLMn with the jump (TTM) and flight muscles (DLM) are glutamatergic7-12. Here, we demonstrate how to inject nanoliter quantities of a compound, while obtaining electrophysiological intracellular recordings from the Giant Fiber System13 and how to monitor the effects of the compound on the function of this circuit. We show specificity of the assay with methyllycaconitine citrate (MLA), a nAChR antagonist, which disrupts the PSI to DLMn connection but not the GF to TTMn connection or the function of the NMJ at the jump or flight muscles.
Before beginning this video it is critical that you carefully watch and become familiar with the JoVE video titled "Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster " from Augustin et al7, as the video presented here is intended as an expansion to this existing technique. Here we use the electrophysiological recordings method and focus in detail only on the addition of the paired nanoinjections and monitoring technique.

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

A rapid in vivo assay to test for neuromodulatory compounds using the Giant Fiber System (GFS) of Drosophila melanogaster is described. Nanoinjections in the head of the animal along with electrophysiological recordings of the GFS can reveal bioactivity of compounds on neurons or muscles.

تقرن Nanoinjection والفحص الكهربية للكشف عن النشاط الحيوي للمركبات باستخدام ذبابة الفاكهة السوداء البطن نظام الألياف العملاق

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We ...

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

A growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive manipulation of the neural activity of specific neurons in Drosophila melanogaster1. Chief among these are optogenetic tools, which enable the activation or silencing of specific neurons in the intact and freely moving animal using bright light. Channelrhodopsin (ChR2) is a light-activated cation channel that, when activated by blue light, causes depolarization of neurons that express it. ChR2 has been effective for identifying neurons critical for specific behaviors, such as CO2 avoidance, proboscis extension and giant-fiber mediated startle response2-4. However, as the intense light sources used to stimulate ChR2 also stimulate photoreceptors, these optogenetic techniques have not previously been used in the visual system. Here, we combine an optogenetic approach with a mutation that impairs phototransduction to demonstrate that activation of a cluster of loom-sensitive neurons in the fly's optic lobe, Foma-1 neurons, can drive an escape behavior used to avoid collision. We used a null allele of a critical component of the phototransduction cascade, phospholipase C-&beta;, encoded by the norpA gene, to render the flies blind and also use the Gal4-UAS transcriptional activator system to drive expression of ChR2 in the Foma-1 neurons. Individual flies are placed on a small platform surrounded by blue LEDs. When the LEDs are illuminated, the flies quickly take-off into flight, in a manner similar to visually driven loom-escape behavior. We believe that this technique can be easily adapted to examine other behaviors in freely moving flies.

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Genetically encoded optogenetic tools enable noninvasive manipulation of specific neurons in the Drosophila brain. Such tools can identify neurons whose activation is sufficient to elicit or suppress particular behaviors. Here we present a method for activating Channelrhodopsin2 that is expressed in targeted neurons in freely walking flies.

Optogenetic تحفيز السلوك في الهروب<em&gt; ذبابة الفاكهة الدروسوفيلا</em

A  growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive  manipulation of the neural activity of specific neurons in ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

تحديد العفوي الحركي آخر في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a straightforward manner. As we previously demonstrated 1, in a two-dimensional chamber, we first force the flies to form a tight group, subsequently allowing them to take their preferred distance from each other. After the flies have settled, we measure the distance to the closest neighbor (or social space), processing a static picture with free online software (ImageJ). The analysis of the distance to the closest neighbor allows researchers to determine the effects of genetic and environmental factors on social interaction, while controlling for potential confounding factors. Diverse factors such as climbing ability, time of day, sex, and number of flies, can modify social spacing of flies. We thus propose a series of experimental controls to mitigate these confounding effects. This assay can be used for at least two purposes. First, researchers can determine how their favorite environmental shift (such as isolation, temperature, stress or toxins) will impact social spacing 1,2. Second, researchers can dissect the genetic and neural underpinnings of this basic form of social behavior 1,3. Specifically, we used it as a diagnostic tool to study the role of orthologous genes thought to be involved in social behavior in other organisms, such as candidate genes for autism in humans 4.

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The effect of genes and environment on social space of Drosophila melanogaster can be quantified through a powerful but straightforward analytical paradigm. We show here different factors that can affect this social space, and thus need to be taken into consideration when designing experiments in this paradigm.

الظروف التي تؤثر في الفضاء الاجتماعي<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To complicate matters even further, the odors detected by the insect nervous system usually are not single compounds but mixtures whose composition and concentration ratios vary. This leads to an almost infinite amount of different olfactory stimuli which have to be evaluated by the nervous system.
To understand which aspects of an odor stimulus determine its evaluation by the fly, it is therefore desirable to efficiently examine odor-guided behavior towards many odorants and odor mixtures. To directly correlate behavior to neuronal activity, behavior should be quantified in a comparable time frame and under identical stimulus conditions as in neurophysiological experiments. However, many currently used olfactory bioassays in Drosophila neuroethology are rather specialized either towards efficiency or towards resolution.
Flywalk, an automated odor delivery and tracking system, bridges the gap between efficiency and resolution. It allows the determination of exactly when an odor packet stimulated a freely walking fly, and to determine the animal&#180;s dynamic behavioral reaction.

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

The automated tracking system Flywalk is used for high-resolution quantification of odor-guided behavior in Drosophila melanogaster.

عالية الدقة الكمي للسلوك رائحة الموجهة في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em&gt; استخدام<em&gt; Flywalk</em&gt; بارادايم

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

A Behavioral Assay for Mechanosensation of MARCM-based Clones in Drosophila melanogaster

Because of the structural and functional homology to the hair cells of the mammalian inner ear, the neurons that innervate the Drosophila external sense organs provide an excellent model system for the study of mechanosensation. This protocol describes a simple touch behavior in fruit flies which can be used to identify mutations that interfere with mechanosensation. The tactile stimulation of a macrochaete bristle on the thorax of flies elicits a grooming reflex from either the first or third leg. Mutations that interfere with mechanotransduction (such as NOMPC), or with other aspects of the reflex arc, can inhibit the grooming response. A traditional screen of adult behaviors would have missed mutants that have essential roles during development. Instead, this protocol combines the touch screen with mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) to allow for only limited regions of homozygous mutant cells to be generated and marked by the expression of green fluorescent protein (GFP). By testing MARCM clones for abnormal behavioral responses, it is possible to screen a collection of lethal p-element mutations to search for new genes involved in mechanosensation that would have been missed by more traditional methods.

A Behavioral Assay for Mechanosensation of MARCM-based Clones in Drosophila melanogaster

In order to identify novel mutations affecting mechanosensation, we designed an assay that measures the behavioral response to tactile stimulation of fly bristles in mutant clones generated by the MARCM method. The combination of techniques allows for the identification of mechanosensitive mutations that would otherwise be lethal.

النسخ في والسلوكية الفحص لMechanosensation من MARCM المستندة<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Because of the structural and functional homology to the hair cells of the mammalian inner ear, the neurons that innervate the Drosophila external sense ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

عالية الإنتاجية الفحص لفحص تفضيلات بيضة زرع الفردي<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral variation. The larval path-length assay was developed to measure individual differences in foraging behavior that were later linked to the foraging gene. Larval path-length is an easily scored trait that facilitates the collection of large sample sizes, at minimal cost, for genetic screens. Here we provide a detailed description of the current protocol for the larval path-length assay first used by Sokolowski. The protocol details how to reproducibly handle test animals, perform the behavioral assay and analyze the data. An example of how the assay can be used to measure behavioral plasticity in response to environmental change, by manipulating feeding environment prior to performing the assay, is also provided. Finally, appropriate test design as well as environmental factors that can modify larval path-length such as food quality, developmental age and day effects are discussed.

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

We provide a detailed protocol for a Drosophila melanogaster foraging path-length assay. We discuss the preparation and handling of test animals, how to perform the assay and analyze the data.

تستخدم علفا بروتوكول مسار طول ل<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; يرقات

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

الشعيرات الدموية المغذية الفحص يقيس كمية الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease that can be caused by inherited mutations in the gene encoding copper-zinc superoxide dismutase 1 (SOD1). The structural instability of SOD1 and the detection of SOD1-positive inclusions in familial-ALS patients supports a potential causal role for misfolded and/or aggregated SOD1 in ALS pathology. In this study, we describe the development of a cell-based assay designed to quantify the dynamics of SOD1 aggregation in living cells by high content screening approaches. Using lentiviral vectors, we generated stable cell lines expressing wild-type and mutant A4V SOD1 tagged with yellow fluorescent protein and found that both proteins were expressed in the cytosol without any sign of aggregation. Interestingly, only SOD1 A4V stably expressed in HEK-293, but not in U2OS or SH-SY5Y cell lines, formed aggregates upon proteasome inhibitor treatment. We show that it is possible to quantify aggregation based on dose-response analysis of various proteasome inhibitors, and to track aggregate-formation kinetics by time-lapse microscopy. Our approach introduces the possibility of quantifying the effect of ALS mutations on the role of SOD1 in aggregate formation as well as screening for small molecules that prevent SOD1 A4V aggregation.

We describe a method to quantify the aggregation of misfolded proteins. Our protocol details lentiviral induced stable cell line generation, automated confocal imaging, and image analysis of protein aggregates. As an illustrative application, we studied the effect of small molecules in promoting SOD1 aggregation in a time- and dose-dependent manner.

التنمية المقايسة للقياس الكمي المحتوى عالية Sod1 البروتين متحولة تشكيل التجميعية في الخلايا الحية

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease that can be caused by inherited mutations in the gene encoding copper-zinc ...