We thank Caroline Bouchard from the animal facility for the rat work. A.S. holds a J.A. De S&#232;ve master fellowship, and B.P. a COPSE fellowship from the Universit&#233; de Montr&#233;al This work was funded by grants attributed to J.B. from FRQS-Pfizer and start-up funds from H&#244;pital du Sacr&#233;-Coeur de Montr&#233;al Research Center.

الأخلاق البيان: إن بروتوكول الحيوان لهذا المشروع الحصول على موافقة من لجنة رعاية الحيوان من مستشفى دو القلب الأقدس في مونتريال وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي للرعاية الحيوان. 1. إعداد القسطرة قبل جراحة التجسيمي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع القسطرة PE50 (6 سم في الطول) التي سيتم استخدامها لتوصيل قنية مع مضخات التناضحي (انظر الشكل 1A). ملء القسطرة PE50 مع السائل النخاعي الاصطناعي (ACSF) وختم طرفي القسطرة. إبقاء القسطرة في 4 درجات مئوية حتى استخدامها. </li></ol> 2. قنية زرع عن طريق جراحة التوضيع التجسيمي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء عملية جراحية في ظروف معقمة. تعقيم جميع الأدوات والمواد الجراحية قبل التعقيم. تنظيف جهاز التجسيمي ومنطقة العمل بدقة، وتطهيرها بمحلول الإيثانول 70٪. ارتداء قناع جراحي، بونيه الشعر وقفازات معقمة.</li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق (IP) حل الكيتامين وزيلازين (100 ملغ / كغ و 10 ملغم / كغم، على التوالي). تأكيد التخدير عن طريق فحص الحركة بعد قليل اصبع القدم لطيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن غير الستيرويدية المضادة للالتهابات المخدرات (ميلوكسيكام، 1 ملغ / كلغ) تحت الجلد (SC) إلى حيوان تخدير 30 دقيقة على الأقل قبل الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حلق رأس الحيوان باستخدام كليبرز وتطهير الجلد بمحلول جلوكونات الكلورهيكسيدين 2٪ والإيزوبروبيل 2٪ ثلاث مرات. تطبيق مرهم البيطرية على العينين لمنع جفاف بينما تحت التخدير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان على إطار التجسيمي مع قضبان الأذن. إصلاح قنية واحد على ذراع حامل الإطار التجسيمي. حقن (الشوري) وكيل مخدر موضعي (بوبيفكين (1.5 ملغ / كلغ) والليدوكائين (1.5 ملغ / كلغ) على الجزء العلوي من الرأس. التخدير هو يحافظ خلال الإجراء بأكمله عن طريق وضع مخروط الأنف تسليم 3٪ الأيزوفلورين. باسرها وينبغي أن يكون الجراحي الميدانيرايات قبالة، ولكن لم يحدث ذلك هنا لإظهار أفضل تقنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء شق من 3 سم في الجزء العلوي من الرأس مع مشرط. تثبيت 4 المشابك حول شق لمغادرة الجمجمة واضح. باستخدام مقص مستديرة الحافة، وجعل جيب (2 × 2 سم 2) تحت الجلد بين عظام الكتف للحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتخلص من السمحاق من الجمجمة مع شفرة. تطبيق الشاش على الجمجمة إذا النزيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من أن الجمجمة مسطح والانحياز بشكل جيد على الإطار التجسيمي. للتأكد من أن الجمجمة هي مسطحة، والتحقق من ارتفاع ينسق في bregma وفي امدا. أخذ إحداثيات bregma التي سيتم استخدامها كنقطة مرجعية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدءا من bregma، وحساب إحداثيات دليل قنية اللذين سيتم زرعها ثنائيا في قرن آمون (الأمامي الخلفي: - 0.42 سم؛ الناصف الوحشي: ± 0.30 سم؛ ظهري بطني: - 0.28 سم وفقا لأطلس دماغ الفئران باكينوس واتسون) 29 . بيانموقف قنية مع علامة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حفر حفرة (0.5 ملم) في الجمجمة عند نقطة غرس كل قنية. حفر اثنين من الثقوب الأخرى حوالي 5 ملم فوق وتحت هذه النقاط لادخال المسامير التي سوف يصلب قنية عند تطبيق الاسمنت الأسنان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع واحدة من نهاية القسطرة شغل سابقا مع ACSF مع مشرط، وأدخله في الذراع زاوية قنية. إصلاح قنية الأولى مع الاسمنت الأسنان. تجنب وضع الاسمنت الأسنان حول الموقف من قنية الثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسمحوا الجافة الاسمنت الأسنان ل2-3 دقائق، ثم إزالة ذراع حامل من قنية الأولى، وإصلاح قنية الثانية في ذلك. كرر الخطوات من 2.11 و 2.12. وضع قنية همية على كل قنية دليل. تأكد من أن دمية ودليل قنية هي من نفس الطول لمنع تسلل الأنسجة ومنع قنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج نهاية خالية من كل من القسطرة في الجيب بها سابقا بين الكتف من الحيوان. إزالة المشابك وغرزة الجلد معخيوط الجروح 4-0. ملاحظة: بالنسبة للشركات قنية دليل يجب أن تكون في متناول للدفعات Aβo القادمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الحيوان من الإطار التجسيمي ووضعها مرة أخرى في قفصه. خلال فترة الانتعاش بعد العمليات الجراحية، ووضع القفص على بطانية تسخين المياه حتى يستيقظ الحيوان تصل. يجب أن يكون القفص جزئيا على لوحة حتى الفئران يمكن أن تتحرك بعيدا عن الحرارة إذا لزم الأمر. مراقبة الحيوانات باستمرار حتى يستعيد وعيه كافية للحفاظ على الاستلقاء القصية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عودة الفئران إلى منشأة الحيوان للتعافي من الجراحة لمدة 10 يوما تحت المراقبة الدقيقة. ملاحظة: لا عودة الحيوان الذي خضع لعملية جراحية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما. وتعطى ميلوكسيكام (1 ملغ / كلغ) مرة واحدة يوميا خلال اليومين التاليين لعملية جراحية لعلاج الألم. </li></ol> تركيب 3. الأسموزي مضخة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل يوم واحد التثبيت، ملء مضخات التناضحي مع 6E10 الأجسام المضادة (1 ملغ / مل، 100 ميكرولتر) والسيطرة IgG1الأجسام المضادة (1 ملغ / مل، 100 ميكرولتر) وفقا لتعليمات الشركة الصانعة تحت ظروف معقمة. الحفاظ على مضخات في الماء المقطر المعقم عند 37 درجة مئوية خلال الليل لتفعيل المضخات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران مع isoflurane 3٪ لتثبيت مضخات التناضحي (0.5 ميكرولتر / ساعة لمدة 7 أيام). يحلق بين الكتف وتطهير الجلد بمحلول جلوكونات الكلورهيكسيدين 2٪ والإيزوبروبيل 2٪. إجراء شق من 2 سم مع مشرط بين الكتف لتحديد موقع القسطرة PE50 متصلا قنية دليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع نهاية القسطرة PE50 تحتوي على الاسمنت الأسنان مع مشرط. ربط مضخات التناضحي لالقسطرة PE50، وإضافة بعض الاسمنت الأسنان في مضخة والقسطرة تقاطع لتأمين الاتصال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غرزة الجلد بإحكام بخيط خياطة 4-0. وضع الظهر الحيوان في قفصه على وسادة تسخين المياه. مراقبة أعقاب الحيوان تصل بسرعة من التخدير الأيزوفلورين (حوالي 5 دقائق). ملاحظة: عملية جراحية تستغرق APPROximately 5-10 دقيقة. </li></ol> 4. الحقن Aβo في استيقظ والفئران تتحرك بحرية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الحل Aβo (0.2 ميكروغرام / ميكرولتر) كما ذكرت سابقا. 28،30 السماح Aβo لتجميع حيوي وتلقائي لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة قبل الحقن في الوريد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تثبيت اثنين من 10 المحاقن ميكرولتر على مضخة التسريب. ملء المحاقن مع 5 ميكرولتر من الماء المقطر المعقم. قطع اثنين القسطرة PE50 إلى حوالي 60 سم في الطول مع مشرط. ملء كل من القسطرة بالماء المقطر المعقم باستخدام 1 مل المحاقن والإبر 21G. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حافظ على 1 مل الحقن في واحدة من نهاية القسطرة وتوصيل الطرف الآخر إلى الحقن هاميلتون. إزالة 1 مل الحقن وتحقق من عدم وجود فقاعات الهواء داخل القسطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج قنية الداخلية في نهاية القسطرة PE50. استخدام الماء المقطر المعقم، وملء قنية الداخلية متصلة القسطرة PE50 يصل to1 ميكرولتر في الحقن هاميلتون. جعل فقاعة الهواء التي كتبها pulling العودة المكابس لتصل إلى 2 ميكرولتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيج الحل Aβo pipetting صعودا وهبوطا باستخدام غيض من الحد الأدنى من الالتزام. تجنب تشكيل فقاعات أثناء الخلط. ملء كل من قنية الداخلية مع 1.5 ميكرولتر من محلول Aβo من الانسحاب المكابس يصل إلى 3.5 ميكرولتر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل خطوط مع علامة قبل وبعد فقاعة الهواء القيام به في كل من القسطرة. وهذا بمثابة نقطة تفتيش التسريب المستمر. للتسريب، وجلب قفص بالقرب من مضخة التسريب وإزالة غلافها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الفئران في تكبب وكشط بإحكام ذراع تكبب حول عنقه لشل حركة الرأس من الفئران. إزالة قنية همية من قنية اثنين من الدليل. إدراج قنية الداخلية أعدت مسبقا في قنية دليل. تحقق من أن يتم إدراجها بشكل كامل وثابت تماما لقاعدة قنية دليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الافراج عن الفئران من تكبب ووضعها مرة أخرى في قفصه للحد من التوتر خلاف. مراقبة عن كثب للتأكد من أن القسطرة لا يلوون togetويتم لها والتسريب صحيح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدوره على مضخة التسريب. حقن 1 ميكرولتر من حل Aβo بمعدل 0.1 ميكرولتر / دقيقة (10 دقيقة). خلال التسريب، تأكد من أن التحركات حقنة المكبس من 3.5 ميكرولتر 2.5 ميكرولتر، وأن فقاعة الهواء في كل من القسطرة PE50 تتحرك باستمرار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ترك قنية الداخلية في المكان لمدة 5 دقائق أخرى بعد ضخ للسماح للنشر الفعال للحل Aβo. جعل الفئران مرة أخرى في تكبب لإزالة قنية الداخلية وتوج قنية دليل لمنع ارتداد من الحل حقن. استخدام قنية همية أن تتوقف فقط قبل الذراع زاوية قنية. عودة الحيوان في قفصه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر Aβo ضخ مرة واحدة يوميا على مدى 6 أيام متتالية. الموت ببطء الحيوان بقطع الرأس. </li></ol>

<ol>
	<li>Hardy, J. A., Higgins, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's+disease:+the+amyloid+cascade+hypothesis.">Alzheimer's disease: the amyloid cascade hypothesis.</a> Science. 256, 184-185 (1992).</li><li>Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+comprehensive+theory+for+Alzheimer's+disease.+Hypothesis:+Alzheimer's+disease+is+caused+by+the+cerebral+accumulation+and+cytotoxicity+of+amyloid+beta-protein.">Toward a comprehensive theory for Alzheimer's disease. Hypothesis: Alzheimer's disease is caused by the cerebral accumulation and cytotoxicity of amyloid beta-protein.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 924, 17-25 (2000).</li><li>Terry, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+basis+of+cognitive+alterations+in+Alzheimer's+disease:+synapse+loss+is+the+major+correlate+of+cognitive+impairment.">Physical basis of cognitive alterations in Alzheimer's disease: synapse loss is the major correlate of cognitive impairment.</a> Ann. Neurol. 30, 572-580 (1991).</li><li>Giannakopoulos, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangle+and+neuron+numbers,+but+not+amyloid+load,+predict+cognitive+status+in+Alzheimer's+disease.">Tangle and neuron numbers, but not amyloid load, predict cognitive status in Alzheimer's disease.</a> Neurology. 60, 1495-1500 (2003).</li><li>Price, J. L., Morris, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangles+and+plaques+in+nondemented+aging+and+"preclinical"+Alzheimer's+disease.">Tangles and plaques in nondemented aging and "preclinical" Alzheimer's disease.</a> Ann. Neurol. 45, 358-368 (1999).</li><li>Reiman, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrillar+amyloid-beta+burden+in+cognitively+normal+people+at+3+levels+of+genetic+risk+for+Alzheimer's+disease.">Fibrillar amyloid-beta burden in cognitively normal people at 3 levels of genetic risk for Alzheimer's disease.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 6820-6825 (2009).</li><li>Aizenstein, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequent+amyloid+deposition+without+significant+cognitive+impairment+among+the+elderly.">Frequent amyloid deposition without significant cognitive impairment among the elderly.</a> Arch. Neurol. 65, 1509-1517 (2008).</li><li>Mc Donald, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+presence+of+sodium+dodecyl+sulphate-stable+Abeta+dimers+is+strongly+associated+with+Alzheimer-type+dementia.">The presence of sodium dodecyl sulphate-stable Abeta dimers is strongly associated with Alzheimer-type dementia.</a> Brain. 133, 1328-1341 (2010).</li><li>Tomic, J. L., Pensalfini, A., Head, E., Glabe, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+fibrillar+oligomer+levels+are+elevated+in+Alzheimer's+disease+brain+and+correlate+with+cognitive+dysfunction.">Soluble fibrillar oligomer levels are elevated in Alzheimer's disease brain and correlate with cognitive dysfunction.</a> Neurobiol. Dis. 35, 352-358 (2009).</li><li>Naslund, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+elevated+levels+of+amyloid+beta-peptide+in+the+brain+and+cognitive+decline.">Correlation between elevated levels of amyloid beta-peptide in the brain and cognitive decline.</a> JAMA. 283, 1571-1577 (2000).</li><li>Hardy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+double+trouble.">Amyloid double trouble.</a> Nat. Genet. 38, 11-12 (2006).</li><li>Hardy, J., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+amyloid+hypothesis+of+Alzheimer's+disease:+progress+and+problems+on+the+road+to+therapeutics.">The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease: progress and problems on the road to therapeutics.</a> Science. 297, 353-356 (2002).</li><li>Haass, C., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+protein+oligomers+in+neurodegeneration:+lessons+from+the+Alzheimer's+amyloid+beta-peptide.">Soluble protein oligomers in neurodegeneration: lessons from the Alzheimer's amyloid beta-peptide.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 101-112 (2007).</li><li>McLean, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+pool+of+Abeta+amyloid+as+a+determinant+of+severity+of+neurodegeneration+in+Alzheimer's+disease.">Soluble pool of Abeta amyloid as a determinant of severity of neurodegeneration in Alzheimer's disease.</a> Ann. Neurol. 46, 860-866 (1999).</li><li>Hepler, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+state+characterization+of+amyloid+beta-derived+diffusible+ligands.">Solution state characterization of amyloid beta-derived diffusible ligands.</a> Biochemistry. 45, 15157-15167 (2006).</li><li>Martins, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipids+revert+inert+Abeta+amyloid+fibrils+to+neurotoxic+protofibrils+that+affect+learning+in+mice.">Lipids revert inert Abeta amyloid fibrils to neurotoxic protofibrils that affect learning in mice.</a> EMBO J. 27, 224-233 (2008).</li><li>Lesne, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+specific+amyloid-beta+protein+assembly+in+the+brain+impairs+memory.">A specific amyloid-beta protein assembly in the brain impairs memory.</a> Nature. 440, 352-357 (2006).</li><li>Hung, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-beta+peptide+(Abeta)+neurotoxicity+is+modulated+by+the+rate+of+peptide+aggregation:+Abeta+dimers+and+trimers+correlate+with+neurotoxicity.">Amyloid-beta peptide (Abeta) neurotoxicity is modulated by the rate of peptide aggregation: Abeta dimers and trimers correlate with neurotoxicity.</a> J. Neurosci. 28, 11950-11958 (2008).</li><li>Ono, K., Condron, M. M., Teplow, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure-neurotoxicity+relationships+of+amyloid+beta-protein+oligomers.">Structure-neurotoxicity relationships of amyloid beta-protein oligomers.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 14745-14750 (2009).</li><li>Lambert, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusible,+nonfibrillar+ligands+derived+from+Abeta1-42+are+potent+central+nervous+system+neurotoxins.">Diffusible, nonfibrillar ligands derived from Abeta1-42 are potent central nervous system neurotoxins.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95, 6448-6453 (1998).</li><li>Shankar, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-beta+protein+dimers+isolated+directly+from+Alzheimer's+brains+impair+synaptic+plasticity+and+memory.">Amyloid-beta protein dimers isolated directly from Alzheimer's brains impair synaptic plasticity and memory.</a> Nat. Med. 14, 837-842 (2008).</li><li>Shankar, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+oligomers+of+the+Alzheimer+amyloid-beta+protein+induce+reversible+synapse+loss+by+modulating+an+NMDA-type+glutamate+receptor-dependent+signaling+pathway.">Natural oligomers of the Alzheimer amyloid-beta protein induce reversible synapse loss by modulating an NMDA-type glutamate receptor-dependent signaling pathway.</a> J. Neurosci. 27, 2866-2875 (2007).</li><li>Cleary, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+oligomers+of+the+amyloid-beta+protein+specifically+disrupt+cognitive+function.">Natural oligomers of the amyloid-beta protein specifically disrupt cognitive function.</a> Nat. Neurosci. 8, 79-84 (2005).</li><li>Townsend, M., Shankar, G. M., Mehta, T., Walsh, D. M., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+secreted+oligomers+of+amyloid+beta-protein+on+hippocampal+synaptic+plasticity:+a+potent+role+for+trimers.">Effects of secreted oligomers of amyloid beta-protein on hippocampal synaptic plasticity: a potent role for trimers.</a> J. Physiol. 572, 477-492 (2006).</li><li>Gomez-Isla, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Profound+loss+of+layer+II+entorhinal+cortex+neurons+occurs+in+very+mild+Alzheimer's+disease.">Profound loss of layer II entorhinal cortex neurons occurs in very mild Alzheimer's disease.</a> J. Neurosci. 16, 4491-4500 (1996).</li><li>DeKosky, S. T., Scheff, S. W., Styren, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+correlates+of+cognition+in+dementia:+quantification+and+assessment+of+synapse+change.">Structural correlates of cognition in dementia: quantification and assessment of synapse change.</a> Neurodegeneration. 5, 417-421 (1996).</li><li>Brouillette, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effects+of+Soluble+Abeta+Oligomers+on+Neurodegeneration+in+Alzheimer's+Disease.">The Effects of Soluble Abeta Oligomers on Neurodegeneration in Alzheimer's Disease.</a> Curr. Pharm. Des. 20, 2506-2519 (2014).</li><li>Brouillette, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotoxicity+and+memory+deficits+induced+by+soluble+low-molecular-weight+amyloid-beta1-42+oligomers+are+revealed+in+vivo+by+using+a+novel+animal+model.">Neurotoxicity and memory deficits induced by soluble low-molecular-weight amyloid-beta1-42 oligomers are revealed in vivo by using a novel animal model.</a> J. Neurosci. 32, 7852-7861 (2012).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat brain in stereotaxic coordinates. , (1998).</li><li>Broersen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+and+biocompatible+preparation+of+aggregate-free+amyloid+beta+peptide+for+biophysical+and+biological+studies+of+Alzheimer's+disease.">A standardized and biocompatible preparation of aggregate-free amyloid beta peptide for biophysical and biological studies of Alzheimer's disease.</a> PEDS. 24, 743-750 (2011).</li><li>Thakker, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebroventricular+amyloid-beta+antibodies+reduce+cerebral+amyloid+angiopathy+and+associated+micro-hemorrhages+in+aged+Tg2576+mice.">Intracerebroventricular amyloid-beta antibodies reduce cerebral amyloid angiopathy and associated micro-hemorrhages in aged Tg2576 mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 4501-4506 (2009).</li><li>Papon, M. A., Whittington, R. A., El-Khoury, N. B., Planel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's+disease+and+anesthesia.">Alzheimer's disease and anesthesia.</a> Front. Neurosci. 4, 272 (2011).</li><li>Le Freche, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tau+phosphorylation+and+sevoflurane+anesthesia:+an+association+to+postoperative+cognitive+impairment.">Tau phosphorylation and sevoflurane anesthesia: an association to postoperative cognitive impairment.</a> Anesthesiology. 116, 779-787 (2012).</li></ol>

Publication of this video-article is sponsored by ALZET Osmotic Pumps.

هناك خطوات حاسمة في هذا البروتوكول التي تتطلب اهتماما خاصا. عندما غرس قنية، وتجنب وضع الاسمنت الأسنان عندما يكون السائل أيضا لمنع عرقلة ثقب في قنية الثانية. من المهم أن تضع الاسمنت الأسنان في نهاية خالية من القسطرة P50 تعلق على مضخة لمنع تهيج والاستجابة الالتهابية الممكنة. في يوم من الجراحة التجسيمي، واستخدام قنية همية التي هي نفس طول دليل قنية لتجنب عرقلة قنية. ومع ذلك، بعد تثبيت تستخدم مضخات أقصر قنية همية أن تتوقف قبل الذراع زاوية قنية للسماح ضخ السليم من الحل من المضخة إلى الحصين. تراقب عن كثب ضخ Aβo والتحقق من أن فقاعة الهواء عمله في القسطرة يتحرك بشكل مستمر خلال ضخ. تأكد من أن قنية الحقن يتم إدخال تماما في قنية دليل خلال ضخ دائما. إذا كانت المشكلة هي لقاء خلال Aβ ضختحقق من أن قنية الداخلية لا يتم حظر. إذا كان هذا هو الحال، تدفق الماء المقطر المعقم خلال قنية الداخلية. وإذا تم حجب قنية دليل، وتحويل قنية الداخلية في قنية دليل. خلاف ذلك نقل قنية الداخلية صعودا وهبوطا. خلاف في تكبب يمكن أن تكون مرهقة بالنسبة للفئران، وخاصة في اليوم الأول. لتقليل الإجهاد من الحيوان، ونحن نوصي للتلاعب وروض الفئران إلى تكبب قبل الجراحة التجسيمي. ويمكن أن يعزى العديد من المزايا لهذه الرواية ومرونة في نهج الجسم الحي. والواقع أن طبيعة Aβo ضخت يمكن التحكم بدقة قبل التسريب، ونوع مختلف من الاستعدادات Aβ (على سبيل المثال الاصطناعية مقابل حلول Aβ المستمدة من الدماغ) يمكن حقن لتقييم السمية العصبية في الجسم الحي. ويمكن أيضا أن هذا النموذج أن تستخدم للتحقيق في الآليات التي الأنواع المختلفة Aβ (على سبيل المثال، أحادية، المنخفضة وارتفاع الوزن الجزيئي رأigomers، protofibrils) يمكن أن تحدث التأثيرات السمية العصبية في الجسم الحي، وكيف العلاجات مثل العلاج المناعي قد يقاوم تأثير ضار في الدماغ. منذ ضخ وأداء في مستيقظا، والحيوانات التي تتحرك بحرية، وعدم وجود آثار الخلط بين وكلاء مخدر والحل Aβo على مسارات إشارات، كما هو مبين في الدراسات السابقة. صبغ 32،33 في نقل الحيوانات بحرية وأيضا متوافقة مع الاختبارات السلوكية أي الوقت قبل وبعد الحقن. دفعات من Aβo وتركيب مضخة يمكن القيام به في الحيوانات من مختلف الأعمار لتحديد آثار Aβo والعلاجات أثناء الشيخوخة. منذ يحدث التنكس العصبي في محيط موقع التسريب، المشبك وفقدان الخلايا العصبية يمكن أن يتسبب في مختلف المناطق والمحلية الدماغ. ضخ جانبية من Aβo والتحكم (سيارة أو التدافع Aβ) يسمح السيطرة على أي تغيير في نفس الحيوان. على العكس من ذلك، Aβo أو السيطرة سولutions يمكن حقن ثنائيا في اليمين واليسار الحصين، على سبيل المثال عند اختبار الحيوانات في المهام السلوكية. ضخ Aβo والعلاج يمكن أن يتم في وقت واحد أو بدلا من ذلك مضخات يمكن تركيبها بعد Aβo ضخ لتقييم ما إذا كان العلاج فعال بعد Aβ الترسيب. ويمكن أيضا أن البروتوكول نفسه هو موضح هنا أن تستخدم عند القيام ضخ intracerebroventricular من Aβo. تأثير Aβo على مسارات الإشارات بين الخلايا يمكن تقييم قبل وبعد فقدان الخلايا العصبية في غضون فترة زمنية قصيرة معقولة. الجرعة وعدد من ضخ Aβ كما يمكن تعديلها للحصول على أكثر أو أقل حدة Aβ المرضية. على الرغم من شديد التنوع، وهذا الأسلوب له بعض القيود. قنية زرع ينتج اضطراب الميكانيكية للأنسجة وneuroinflammation في الأيام القليلة الأولى بعد الجراحة. وبالتالي، لا بد من الانتظار أسبوع واحد على الأقل بعد عملية جراحية قبل البدء Aβo infuسيون، وإضافة ضوابط سليمة (حقن سيارة أو التدافع غير نشط Aβ) أن تأخذ في الاعتبار هذه الأحداث. أيضا، فقط كمية صغيرة من Aβo يمكن غرست للحد من انتشار الحل. تمثل مضخات التناضحي وسيلة لتوصيل مريحة وفريدة من نوعها من أجل التحقق من قبل السريرية وكلاء تهدف إلى منع التنكس العصبي الناجم عن Aβ. منذ وقد تبين العلاج المناعي مع الأجسام المضادة 6E10 سابقا لتقليل تراكم Aβ في الدماغ، 31 استخدمنا الأجسام المضادة 6E10 كمفهوم إثبات صحة للتحقق من صحة لدينا في الجسم الحي نهج جديد. وتستخدم مضخات التناضحي في هذا النموذج قد الآن أن تستخدم لتطوير المرض تعديل العلاجات الجديدة التي يمكن أن تمنع ترسب والعصبية من Aβo في المرضى الذين يعانون م ما قبل السريرية.

واقترح في البداية كان أن تراكم الأنواع Aβ غير قابلة للذوبان في الدماغ المركزي لم المرضية. 1،2 ومع ذلك، تم الكشف عن اللويحات النشوانية أيضا في بعض وضعها الطبيعي معرفيا كبار السن. 3-7 للتغلب على ضعف العلاقة القائمة بين ترسبات البلاك والعجز المعرفي في ميلادي، وقد أظهرت أحدث التقارير وجود Aβo قابل للذوبان سامة في بداية المرض، الذي ربط أفضل بكثير مع الدولة السريرية للمرضى. 8-14 منذ عملية Aβ oligomerization وديناميكية للغاية، واقترح أن العصبية يسببها مختلف Aβo بدلا من نوع واحد محدد فقط من قليل وحدات 14-16 منذ أظهرت العديد من الدراسات أن Aβo يمكن بدء الاختلالات المشبك قبل المشبك وفقدان الخلايا العصبية، 17-24 النظريات الحالية تشير إلى أن المعاملة المتعلقة Aβ-قد تكون فعالة في م في وقت مبكر بدلا من في مراحل لاحقة كما تم اختبارها حتى الآن في التجارب السريرية. واحدة سمة مميزة لم المرضية هي القتل الجماعي وعلى نطاق واسع الخلية لوحظ في مراحل متأخرة من المرض، والمشبك كبير وفقدان الخلايا العصبية التي لوحظت في مناطق الدماغ المترجمة عندما تصبح العجز في الذاكرة للكشف على المستوى السريري. وأقلقت مسار الثاقب أن المشاريع من القشرة المخية الأنفية الداخلية (EC) إلى التلفيف المسنن (DG) بشكل ملحوظ في وقت مبكر من بداية م. 25،26 خلال الدولة البادري ميلادي عندما الضعف الادراكي المعتدل (MCI) يصبح واضحا موت الخلايا كبيرا تم الكشف في المفوضية الأوروبية، فضلا عن فقدان متشابك في المديرية العامة. 25،26 على الرغم من أن مجموعة كبيرة من الأدلة قد حددوا للعمل السامة من Aβo قابل للذوبان في أوائل م، 8-14 التنكس العصبي الناجم عن Aβo-لوحظ في ثقافة العصبية أو عضوي النمط ثقافة شريحة الدماغ كان أكثر تحديا لإعادة إنتاج في النماذج الحيوانية. 27 معظم المعدلة وراثيا م نماذج overexpressing وβ يكون لويحات الأميلويد، hyperphosphorylation تاو، ونقص متشابك والعجز في الذاكرة. 27 ومع ذلك، فإن هذه النماذج أقل نجاحا كبيرا في موت الخلايا النمذجة التي لوحظت في الحصين من المرضى ميلادي. للتغلب على هذه المسائل التقنية وضعنا نموذج يقوم على ضخ داخل المخ من Aβo قابل للذوبان. نحن ذكرت في وقت سابق أن تكرار الحقن الحصين من Aβo قابل للذوبان تحفز فقدان الخلايا العصبية تدريجية وhyperphosphorylation تاو، وهما بصمات المرضية المرتبطة تراجع الذاكرة في ميلادي 28 هنا، فإننا نبين طريقة رواية لاختبار علاجات م باستخدام قنية تصميم خصيصا للدفعات في وقت واحد من Aβo واستمرار تدفق Aβo الضد (6E10) مع مضخات التناضحي. توفر مضخات التناضحي طريقة فريدة لاختبار في الجسم الحي كفاءة أي الأجسام المضادة (أو غيرها من المركبات) ضد التنكس العصبي الناجم عن Aβo مباشرة في الموقع ضخ Aβo. وهكذا، وهذه المضخات reprESENT أداة ملائمة لإنشاء إثبات صحة مفهوم صلبة فيما يتعلق بآليات عمل وكلاء العلاجية المحتملة في م. منذ التقارير الأخيرة تشير إلى الأهمية الحاسمة التي Aβo قابل للذوبان في المراحل المبكرة من الميلاد، هي في الواقع يجري اختبار العديد من العلاجات الموجهة نحو Aβo من قبل مختبرات الأكاديمية والمستحضرات الصيدلانية. هذا نموذج حيواني رواية يسمح محاكاة فقدان متشابك والعصبية التي لوحظت في وقت مبكر م، وتستخدم مضخات التناضحي للبث بشكل مستمر وكلاء العلاج تحديدا في موقع الحقن Aβo. إخفاقات المتكررة من العلاجات م اختبارها على مدى السنوات القليلة الماضية في خفيفة الى معتدلة المرضى كما دفعت الباحثين إلى بدء المحاكمات في المرضى قبل الخرف قبل Aβo تبدأ تتراكم بكثرة وتوليد تلف في الدماغ لا رجعة فيه. في هذا السياق، واختبار المركبات الجديدة التي تمنع ترسب وبالتالي العصبية من Aβo قد تكون ذات فائدة للمرضى ما قبل السريرية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="792">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF)</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">59-7316</td>
			<td style="width:201px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PE50 Catheter thin wall</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">C232CT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">Ketamine Hydrochloride (100 mg/mL)</td>
			<td style="width:167px;">Bioniche</td>
			<td style="width:147px;">1989529</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Xylaxine Hydrochloride (100 mg/mL)</td>
			<td style="width:167px;">Bimeda</td>
			<td style="width:147px;">8XYL004C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Meloxicam (5 mg/mL)</td>
			<td style="width:167px;">Norbrook</td>
			<td style="width:147px;">215670I01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Solution of chlorhexidine gluconate 2% and isopropyl alcohol 2%</td>
			<td style="width:167px;">Carefusion</td>
			<td style="width:147px;">260100C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lidocaine Hydrochloride</td>
			<td style="width:167px;">Alveda Pharma</td>
			<td style="width:147px;">0122AG01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bupivacaine Hydrochloride</td>
			<td style="width:167px;">Hospira</td>
			<td style="width:147px;">1559</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ophthalmic ointment</td>
			<td style="width:167px;">Baussh and Lomb inc.</td>
			<td style="width:147px;">2125706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">stereotaxic frame</td>
			<td style="width:167px;">Stoelting</td>
			<td style="width:147px;">51600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">stereotaxic cannula holder arm</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">72-4837</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Drill</td>
			<td style="width:167px;">Dremel</td>
			<td style="width:147px;">8050-N/18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Guide Cannula</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">326OPG/spc</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Injection Cannula</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">C315I/spc</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dummy Cannula</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">C315DC/spc</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Suture thread coated vicryl rapide 4-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:147px;">VR2297</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dental Acrylic Cement</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">72-6906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Screws</td>
			<td style="width:167px;">JI Morris Company</td>
			<td style="width:147px;">P0090CE125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">6E10 antibody (mouse IgG1 isotype)&#160;</td>
			<td style="width:167px;">BioLegend</td>
			<td style="width:147px;">803003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Mouse IgG1 isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:147px;">AB18447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Alzet osmotic pumps model 1007D</td>
			<td style="width:167px;">Durect corporation</td>
			<td style="width:147px;">290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:167px;">Baxter</td>
			<td style="width:147px;">CA2L9100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Amyloid-beta 1-42&#160;</td>
			<td style="width:167px;">rPeptide</td>
			<td style="width:147px;">A-1163-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Hamilton syringe (10 &#181;L)</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientique</td>
			<td style="width:147px;">14815279</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Infusion Syringe Pump CMA 402</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">CMA8003110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Syringe 1 mL</td>
			<td style="width:167px;">BD</td>
			<td style="width:147px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Needle 21G</td>
			<td style="width:167px;">Terumo</td>
			<td style="width:147px;">NN-2125R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Snuggle</td>
			<td style="width:167px;">Lomir Biomedical</td>
			<td style="width:147px;">RTS04</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

neurodegeneration in an animal model of chronic amyloid-beta oligomer infusion is counteracted by antibody treatment infused with osmotic pumps

تراجع في الذاكرة واضحة تعتمد على الحصين (ذاكرة للوقائع والأحداث) هو واحد من أقرب أعراض سريرية لمرض الزهايمر (AD). ومن الثابت أن فقدان المشبك وما تلاها من التنكس العصبي هي أفضل تنبئ عن ضعف الذاكرة في ميلادي. وقد أكدت أحدث الدراسات دور أعصاب من الأوليغومرات اميلويد بيتا القابلة للذوبان (Aβo) التي تبدأ تتراكم في الدماغ البشري ما يقرب من 10 إلى 15 سنة قبل أن تصبح الأعراض السريرية واضحة. وتشير العديد من التقارير أن ذوبان Aβo ترتبط مع العجز في الذاكرة في نماذج م والبشر. كان التنكس العصبي الناجم عن Aβo الملحوظ في الثقافات شريحة العصبية والدماغ أكثر تحديا لإعادة إنتاج في العديد من النماذج الحيوانية. نموذج ضخ Aβo المتكررة هو موضح هنا التغلب على هذه المسألة، والسماح معالجة اثنين من المجالات الرئيسية لتطوير علاجات جديدة المرض تعديل: تحديد العلامات البيولوجية لتشخيص مبكر م، وتحديد ميكا الجزيئيnisms التي تقوم عليها العجز في الذاكرة الناجم عن Aβo-في بداية م. منذ مجموع Aβo ذوبان سريع نسبيا في الألياف غير القابلة للذوبان Aβ التي ترتبط بشكل سيئ مع الدولة السريرية للمرضى، تعد قابلة للذوبان Aβo الطازجة وحقن مرة واحدة يوميا لمدة ستة أيام لإنتاج موت الخلايا ملحوظ في قرن آمون. كنا قنية تصميم خصيصا للدفعات في وقت واحد من Aβo واستمرار تدفق Aβo الضد (6E10) في قرن آمون باستخدام مضخات التناضحي. هذا مبتكرة في طريقة الجسم الحي يمكن أن تستخدم الآن في الدراسات قبل السريرية للتحقق من كفاءة العلاجات م جديدة قد منع ترسب والعصبية من Aβo مرضى قبل الخرف.

تم دراسة تأثير أعصاب من Aβo في الفئران طويل ايفانز من خلال زرع قنية في المدير العام للقرن آمون. تم حقن للذوبان Aβo كل يوم على مدى ستة أيام متتالية. كنا قنية تصميم خصيصا للدفعات في وقت واحد من Aβo واستمرار تدفق 6E10 أو السيطرة IgG1 الضد في قرن آمون باستخدام مضخات التناضحي (الشكل 1A). لتم تخدير الفئران المناعية، perfused transcardially مع 0.9٪ كلوريد الصوديوم، والعقول مغمورة في 4٪ حل لامتصاص العرق لمدة 48 ساعة و 15٪ محلول السكروز لمدة 24 ساعة. وعولج العائمة خالية أقسام الاكليلية (40 ميكرون) مع 0.3٪ H 2 O 2 لمدة 30 دقيقة، ومنعت في 1٪ مصل الماعز لمدة 1 ساعة، وحضنت بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية مع الأجسام المضادة المعادية للعموم Aβ. وعولج المقاطع مع حمض الفورميك 70٪ لمدة 3 دقائق قبل تطبيق الأجسام المضادة. تم إجراء الكشف باستخدام مجمع ABC و 0.05٪ من محلول 3،3-diaminobenzidine. وقد شنت أقسام على الشرائح المغلفة الجيلاتين الزجاج، والمجفف في الهواء 2 ساعة، المجففة (30، 70، 95، و 100٪ كحول)، المحتضنة في التولوين 5 دقائق، وcoverslipped. لالكريزيل البنفسجي تلطيخ، وحضنت أقسام 10 دقيقة في 0.5٪ محلول الكريزيل البنفسجي، حضنت 1 دقيقة في محلول حامض الخليك 0.5٪، decolored (70، 95، و 100 الكحول٪)، منغمسين في التولوين 5 دقائق، ومغطاة ساترة الزجاج. أظهرت النتائج المعروضة هنا ترسب Aβo في المديرية العامة في محيط موقع التسريب، وموت الخلايا المرتبطة بهذا التراكم. لقد وجدنا أن مستوى Aβo وقد انخفضت بشكل كبير عن طريق 6E10 العلاج بالاجسام المضادة (الشكل 1B). وقد لوحظ التنكس العصبي تتميز بالقرب من موقع الحقن من Aβo، والموهن من قبل 6E10 العلاج بالاجسام المضادة (الشكل 1B). هذه النتائج متسقة مع Aβo تراكم أننا لاحظنا في DGبعد تكرار الحقن Aβo في الفئران. 28 إزالة ترسبات الأميلويد من العلاج المناعي مع 6E10 الضد يظهر هنا يتماشى مع تقرير آخر القيام به في نموذج م الماوس المعدلة وراثيا. 31 <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/54215/54215fig1.jpg" /> تم حقن الفئران في مستيقظا ويتحرك بحرية (مرة واحدة في اليوم لمدة 6 أيام) باستخدام القسطرة PE50 متصلة قنية الداخلية؛ الشكل 1. صورة من الحيوان مع قنية الثنائية خلال Aβo تسريب محلول من Aβo. (1 ميكرولتر 0.2 ميكروغرام / ميكرولتر) إدراجها في دليل قنية. وقد غرست العلاج مع التحكم (CTL) IgG1 أو 6E10 الأجسام المضادة مباشرة في موقع الحقن Aβo باستخدام مضخات التناضحي الموجود تحت الجلد بين لوحي الكتف للحيوان. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54215/54215fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من ال</a>هو الرقم. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/54215/54215fig2.jpg" /> هو تخفيف الشكل 2. تخفيف العصبية المستحث بواسطة Aβo ترسب بواسطة 6E10 الجسم المضاد علاج A، Aβo (0.2 ميكروغرام / ميكرولتر، 1 ميكرولتر). تم حقن مرة واحدة يوميا خلال 6 أيام متتالية، وتعامل مع CTL (IgG1) أو 6E10 الأجسام المضادة في موقع التسريب باستخدام مضخات التناضحي باء، تراكم الممثل من Aβo في المديرية العامة على القسم على الفور بجانب إدخال قنية، وتلطيخ التمثيلي مع البنفسجي الكريزيل تبين فقدان الخلية. أشرطة النطاق: 50 ميكرومتر (ن = 4) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54215/54215fig2large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps at JoVE.com

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

To study the effects of A&#946;o in vivo, we developed a model based on repeated hippocampal infusions of soluble A&#946;o coupled with continuous infusion of A&#946;o antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps to counteract the neurotoxic effect of A&#946;o.

التنكس العصبي في نموذج حيواني من المزمن اميلويد بيتا قليل وحدات ضخ وتصدى بواسطة الأجسام المضادة العلاج يملؤه المضخات الأسموزية

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

neurodegeneration-an-animal-model-chronic-amyloid-beta-oligomer

Research

JoVE Journal

Medicine

9.2K Views.  Université de Montréal. To study the effects of Aβo in vivo, we developed a model based on repeated hippocampal infusions of soluble Aβo coupled with continuous infusion of Aβo antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps to counteract the neurotoxic effect of Aβo.

Video: Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

نموذج من تسريب المغذيات المزمنة في الفئران

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals. This article introduces a standard protocol used to induce aortic aneurysms via subcutaneous infusion of angiotensin II (AngII) from implanted osmotic pumps. This protocol includes calculation of AngII amount and dissolution, osmotic pump filling, implantation of osmotic pumps subcutaneously, observation after pump implantation, and harvest of aortas to visualize aortic aneurysms in mice. Subcutaneous infusion of AngII through osmotic pumps following this protocol is a reliable and reproducible technique to induce both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice. Infusion durations range from a few days to several months based on the purpose of the study. AngII 1,000 ng/kg/min is sufficient to provide maximal effects on abdominal aortic aneurysmal formation in male hypercholesterolemic mouse models such as apolipoprotein E deficient or low-density lipoprotein receptor deficient mice. Incidence of abdominal aortic aneurysms induced by AngII infusion via osmotic pumps is 5 - 10 times lower in female hypercholesterolemic mice and also lower in both genders of normocholesterolemic mice. In contrast, AngII-induced thoracic aortic aneurysms in mice are not hypercholesterolemia or gender-dependent. Importantly, multiple features of this mouse model recapitulate those of human aortic aneurysms.

Subcutaneous implantation of osmotic pumps provides a convenient approach for prolonged and consistent delivery of compounds. This approach has been used extensively to study both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice.

تحت الجلد أنجيوتنسين II تسريب باستخدام الأسموزي مضخات يقنع الأورطي تمدد الأوعية الدموية في الفئران

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Bioluminescence Imaging of an Immunocompetent Animal Model for Glioblastoma

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and histopathologic features of the human disease. When GL261 cells are implanted intracranially in syngeneic C57BL/6 mice, the model has the added advantage of maintaining an intact immune microenvironment. Stable expression of luciferase in GL261 cells allows non-invasive cost effective bioluminescence monitoring of intracranial tumor growth. We have recently demonstrated that luciferase expression in GL261 cells does not affect the tumor growth properties, tumor cell immunomodulatory cytokine expression, infiltration of immune cells into the tumor, or overall survival of animals bearing the intracranial tumor. Therefore, it appears that the GL261 luciferase glioma model can be useful in the study of novel chemotherapeutic and immunotherapeutic modalities. Here we report the technique for generating stable luciferase expression in GL261 cells and how to study the in vitro and in vivo growth of the tumor cells by bioluminescence imaging.

GL261 glioma cells provide a useful immunocompetent animal model of glioblastoma. The goals of this protocol are to demonstrate proper techniques for monitoring intracranial tumor growth using in vivo bioluminescence imaging, and to verify the utility of luciferase-modified GL261 cells for studying tumor immunology and immunotherapeutic approaches for treating glioblastoma.

التصوير تلألؤ بيولوجي لنموذج مناعيا الحيوان ورم أرومي دبقي

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and ...

Quantitative 3D In Silico Modeling (q3DISM) of Cerebral Amyloid-beta Phagocytosis in Rodent Models of Alzheimer's Disease

Neuroinflammation is now recognized as a major etiological factor in neurodegenerative disease. Mononuclear phagocytes are innate immune cells responsible for phagocytosis and clearance of debris and detritus. These cells include CNS-resident macrophages known as microglia, and mononuclear phagocytes infiltrating from the periphery. Light microscopy has generally been used to visualize phagocytosis in rodent or human brain specimens. However, qualitative methods have not provided definitive evidence of in vivo phagocytosis. Here, we describe quantitative 3D in silico modeling (q3DISM), a robust method allowing for true 3D quantitation of amyloid-&#946; (A&#946;) phagocytosis by mononuclear phagocytes in rodent Alzheimer&#39;s Disease (AD) models. The method involves fluorescently visualizing A&#946; encapsulated within phagolysosomes in rodent brain sections. Large z-dimensional confocal datasets are then 3D reconstructed for quantitation of A&#946; spatially colocalized within the phagolysosome. We demonstrate the successful application of q3DISM to mouse and rat brains, but this methodology can be extended to virtually any phagocytic event in any tissue.

Quantitative 3D In Silico Modeling q3DISM of Cerebral Amyloid-beta Phagocytosis in Rodent Models of Alzheimer's Disease

We developed a methodology for quantitative 3D in silico modeling (q3DISM) of cerebral amyloid-&#946; (A&#946;) phagocytosis by mononuclear phagocytes in rodent models of Alzheimer&#39;s disease. This method can be generalized for the quantitation of virtually any phagocytic event in vivo.

3D الكمي<em&gt; في السيليكو</em&gt; النمذجة (q3DISM) من الدماغيه اميلويد بيتا البلعمة في نماذج القوارض من مرض الزهايمر

Neuroinflammation is now recognized as a major etiological factor in neurodegenerative disease. Mononuclear phagocytes are innate immune cells responsible ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but regardless of the approach, an in vivo model is needed to test each treatment. The pig is one of the most used large animal models for cardiovascular disease. Its heart is very similar in anatomy and function to that of a human. The ameroid placement technique creates an ischemic area of the heart, which has many useful applications in studying myocardial infarction. This model has been used for surgical research, pharmaceutical studies, imaging techniques, and cell therapies.
There are several ways of inducing an ischemic area in the heart. Each has its advantages and disadvantages, but the placement of an ameroid constrictor remains the most widely used technique. The main advantages to using the ameroid are its prevalence in existing research, its availability in various sizes to accommodate the anatomy and size of the vessel to be constricted, the surgery is a relatively simple procedure, and the post-operative monitoring is minimal, since there are no external devices to maintain. This paper provides a detailed overview of the proper technique for the placement of the ameroid constrictor.

The purpose of this protocol is to demonstrate the placement of a delayed constricting device (an ameroid constrictor) around a coronary artery in a swine model. This device creates an ischemic area of the heart that is useful for studying new diagnostic imaging techniques and new methods of treatment.

نموذج الاسكيمية القلب مزمنة في الخنازير باستخدام العاصرة أميرويد

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Mouse Model for Chronic Pancreatitis via Bile Duct TNBS Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. Several rodent models have been developed to study CP, of which the bile duct 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) infusion model replicates the features of neuropathic pain seen in CP. However, bile duct drug infusion in mice is technically challenging. This protocol demonstrates the procedure of bile duct TNBS infusion for generation of a CP mouse model. TNBS was infused into the pancreas through the ampulla of Vater in the duodenum. This protocol optimized drug volume, surgical techniques, and drug handling during the procedure. TNBS-treated mice showed features of CP as reflected by bodyweight and pancreas weight reductions, changes in pain-associated behaviors, and abnormal pancreatic morphology. With these improvements, mortality associated with TNBS injection was minimal. This procedure is not only critical in generating pancreatic disease models but is also useful in local pancreatic drug delivery.

Chronic pancreatitis (CP) is a disease characterized by inflammation and fibrosis of the pancreas, often associated with intractable abdominal pain. This article focuses on refining the technique to generate a mouse model of CP via bile duct infusion with 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS).

نموذج الماوس لالتهاب البنكرياس المزمن عن طريق ضخ القناة الصفراوية TNBS

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. ...

The Miniature Pig: A Large Animal Model for Cochlear Implant Research

Cochlear implants (CI) are the most effective method to treat people with severe-to-profound sensorineural hearing loss. Although CIs are used worldwide, no standard model exists for investigating the electrophysiology and histopathology in patients or animal models with a CI or for evaluating new models of electrode arrays. A large animal model with cochlea characteristics similar to those of humans may provide a research and evaluation platform for advanced and modified arrays before their use in humans. 
To this end, we established standard CI methods with Bama mini-pigs, whose inner ear anatomy is highly similar to that of humans. Arrays designed for human use were implanted into the mini pig cochlea through a round window membrane, and a surgical approach followed that was similar to that used for human CI recipients. Array insertion was followed by evoked compound action potential (ECAP) measurements to evaluate the function of the auditory nerve. This study describes the preparation of the animal, surgical steps, array insertion, and intraoperative electrophysiological measurements. 
The results indicated that the same CI used for humans could be easily implanted in mini-pigs via a standardized surgical approach and yielded similar electrophysiological outcomes as measured in human CI recipients. Mini-pigs could be a valuable animal model to provide initial evidence of the safety and potential performance of novel electrode arrays and surgical approaches before applying them to human beings.

Miniature pigs (mini-pigs) are an ideal large animal model for research into cochlear implants. Cochlear implantation surgery in mini-pigs can be utilized to provide initial evidence of the safety and potential performance of novel electrode arrays and surgical approaches in a living system similar to human beings.

الخنزير المصغر: نموذج حيواني كبير لأبحاث زراعة قوقعة الأذن

Cochlear implants (CI) are the most effective method to treat people with severe-to-profound sensorineural hearing loss. Although CIs are used worldwide, ...

Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving patients' eye health. Historically, corneal healing has been studied in rodents such as mice and rats, but these models might not completely mimic human disorders. However, information on other rodents such as Mongolian gerbils (Meriones unguiculatus) is scant in corneal research.
Here, we describe a technique to develop a novel animal model for studying corneal healing after photorefractive keratectomy. Due to the limited literature available on the cornea of M. unguiculatus, we also describe a histological analysis of the normal cornea. These research techniques can also be employed in the study of eye diseases because of the similarity between the corneas of Mongolian gerbils and humans in terms of genetics, anatomy, and physiology.

This article describes a new animal model developed to study the anatomy and histology of the cornea and its healing processes. This new animal model uses the Mongolian gerbil, which has a cornea with many similarities to the human cornea.

الجربوع المنغولية كنموذج حيواني لالتئام الجروح

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving ...

3D إعادة الإعمار لتشخيص وعلاج العقيدات الرئوية

A 3D Digital Model for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Nodules

The three-dimensional (3D) reconstruction of pulmonary nodules using medical images has introduced new technical approaches for diagnosing and treating pulmonary nodules, and these approaches are progressively being acknowledged and adopted by physicians and patients. Nonetheless, constructing a relatively universal 3D digital model of pulmonary nodules for diagnosis and treatment is challenging due to device differences, shooting times, and nodule types. The objective of this study is to propose a new 3D digital model of pulmonary nodules that serves as a bridge between physicians and patients and is also a cutting-edge tool for pre-diagnosis and prognostic evaluation. Many AI-driven pulmonary nodule detection and recognition methods employ deep learning techniques to capture the radiological features of pulmonary nodules, and these methods can achieve a good area under-the-curve (AUC) performance. However, false positives and false negatives remain a challenge for radiologists and clinicians. The interpretation and expression of features from the perspective of pulmonary nodule classification and examination are still unsatisfactory. In this study, a method of continuous 3D reconstruction of the whole lung in horizontal and coronal positions is proposed by combining existing medical image processing technologies. Compared with other applicable methods, this method allows users to rapidly locate pulmonary nodules and identify their fundamental properties while also observing pulmonary nodules from multiple perspectives, thereby providing a more effective clinical tool for diagnosing and treating pulmonary nodules.

تسليط الضوء على المؤلف: نموذج رقمي 3D لتشخيص وعلاج العقيدات الرئوية  

The objective of this study is to develop a novel 3D digital model of pulmonary nodules that serves as a communication bridge between physicians and patients and is also a cutting-edge tool for pre-diagnosis and prognostic evaluation.

نموذج رقمي 3D لتشخيص وعلاج العقيدات الرئوية

The three-dimensional (3D) reconstruction of pulmonary nodules using medical images has introduced new technical approaches for diagnosing and treating ...