هذه الطريقة تساعد على الإجابة على ما إذا كان الانفجار الصدمة إصابات الدماغ يؤدي إلى إصابات الأوعية الدموية الدماغية وإذا كان نطاق الآثار يمتد إلى ضعف استجابة الأوعية الدموية. يسمح لنا إعداد الشريان المضغوط المعزول بفصل الآثار المباشرة للتعرض للانفجار على الشرايين الدماغية عن الآثار غير المباشرة الناجمة عن التعرض للانفجار إلى الدماغ. يمكن استخدام مستحضرات الشرايين المعزولة والضاغطة لدراسة وظيفة الأوعية الدموية في مجموعة متنوعة من الأمراض أو الحالات ، بما في ذلك السكتة الدماغية وارتفاع ضغط الدم ، ثم مرض السكري.
الهدف من دراستنا هو تحديد العلاجات التي تحافظ على قدرة الدورة الدموية الدماغية لحماية الدماغ من الآثار الضارة لنزف الدم. إظهار الإجراءات اليوم سيكون ماغي البقدونس، مساعد مدير مختبرنا ويابينغ تسنغ، رئيس فني البحوث لدينا. لإعداد محاكاة الانفجار المتقدمة، أو ABS، استخدم قطعة 2.54 سنتيمتر من شريط الإخفاء إلى الشريط على طول الحافة العلوية من أربعة صفائح Mylar مكدسة مسبقًا.
باستخدام قطعة ثانية من الشريط، قم بتأمين الحافة العلوية لغشاء Mylar إلى أعلى غرفة التوسيع فوق مركز الفتحة بين السائق وغرف التوسع. استبدال اثنين من قضبان كل الصفحات في الجزء العلوي من الغرفة واليد تشديد كل من المكسرات غطاء المحيطة الغرفة لتأمين غرفة السائق ضد غشاء Mylar. شد مقبض المضخة اليدوية الهيدروليكية ولاحظ عتبة ضغط ثابتة على المقياس الهيدروليكي للتأكد من أن غرفة السائق لا تزال مضغوطة بدون تسرب.
ثم افتح ملف الاستحواذ على الزناد الذي يسجل آثار ضغط جهاز الانفجار ABS على جهاز انفجار ABS. لإعداد الجرذ المُجَنَّف للإصابة، استخدم ملاقط طويلة لالتقاط البيك آب لوضع اللسان إلى الجانب ومسح على طول الجزء الداخلي من الحلق بطرف مسحة قطنية غارقة في الليدوكائين قبل إدخال نمط يحتوي بلطف على أنبوب إنتوراشي في القصبة الهوائية. مرة واحدة intubated، تضاف نهاية خرطوم التنفس إلى الطرف الخارجي من أنبوب البطانة ومراقبة والتأكد من أن الفئران تتنفس بثبات ودون صعوبة.
بعد ذلك، قم بإزالة صينية العينة ABS من غرفة العينة ودفئ الصينية تحت مصباح حراري. في حين أن الدرج هو الاحترار، حلق الجزء العلوي من فروة الرأس من فوق العينين إلى ما بين الأذنين واستخدام مقص لقطع مقبس الأذن رغوة الحجم القياسية من القاعدة إلى طرف مدورة إلى أنصاف عمودية متطابقة. ثم أدخل قطعة نصفين في كل طرف الأذن، أولا على طول قناة الأذن، حتى يتم الاتصال مع الغشاء اللامبان.
إزالة خرطوم التنفس من أنبوب البطانة، بسرعة ولكن بلطف الشريحة الفئران في نهاية الجزء العلوي من علبة العينة، وتوجيه بعناية الرأس من خلال فتح حامل الرأس وطوق مطاطي. عندما يكون الجرذ في مكانه، أعد إدخال خرطوم التنفس الصناعي مرة أخرى إلى أنبوب البطانة والتحقق من أن طوق المطاط مؤمن بقوة، ولكن ليس بإحكام حول الرقبة، وأن الجرذ يضع في وضعية العرض الجانبي. ثم قفل وتأمين علبة العينة ABS التي تحتوي على الجرذ المهد إلى غرفة العينة ABS وقرصة بلطف أصابع الكف الخلفي مع ملاقط طويلة كل ثلاث ثوان حتى يتم الحصول على استجابة منعكس الانسحاب.
انقر فوق ابدأ على صفحة الاستحواذ المفتوحة على جهاز الكمبيوتر انفجار ABS واضغط باستمرار على الزناد انفجار ABS في نافذة الاستحواذ حتى الانفجار تنفجر، تمزق غشاء Mylar وإدارة إصابة الانفجار ABS. الحق بعد الانفجار يفجر، بدء جهاز توقيت الثاني لتتبع كم الوقت المنقضي في دقائق وثواني حتى حقوق الفئران نفسها، بعد الإصابة، ووضع الفئران في موقف سوبين على لوحة زرقاء والاحترار لتقييم قمع منعكس تصنيف. لاستخراج الشريان الدماغي الأوسط، استخدم شفرة مشرط رقم 10 لصنع شق مركزي بطول العظم بطول بوصة ونصف بوصة من أعلى فروة الرأس الحليقة إلى المُصلي القذالي واستخدم رُخَص العظام الصغيرة لفتح وفصل جلد فروة الرأس عن عظم الجمجمة.
باستخدام الرانكور العظام الكبيرة، وقطع واستخراج القذالي، interparietal، ونصف السفلي من العظام الأمامية اضمى الدماغ واستخدام ملعقة جراحية لحفر بعناية الدماغ من الجمجمة بمجرد أن تم تحريرها من العظام المحيطة بها. إيداع الدماغ المحصود في طبق صغير من الزجاج بيتري يحتوي على محلول ملح فسيولوجي مبرد ، أو PSS ، على كتلة جليدية صلبة تحت مجهر تشريح ، وإزالة بعناية كل من الشرايين الدماغية الوسطى اليسرى والأينية ، أو MCAs ، بدءًا من دائرة ويليس والاستمرار بشكل جانبي و dorsally لما يقرب من أربعة إلى خمسة ملليمترات. استخدام ملقط صغيرة لتنظيف بلطف الأجزاء MCA التي تم جمعها وتركيب الشرايين على الشريان.
Cannulate الطرف القريب من كل قطعة مع الزجاج، 70 ميكروبيبت قطر ميكرومتر وتأمين الماصات مع خياطة النايلون 10-O. نفخ بهدوء لومينا مع PSS لإزالة أي الدم المتبقية و cannulate نهاية مجرد من كل قطعة مع ميكروبليت الثانية دون تمديد الأنسجة الشريانية. تأمين micropipettes مع مجموعة ثانية من خياطة النايلون 10-O ووضع الشريان على خشبة المسرح من مجهر مقلوب مجهزة كاميرا وشاشة.
رفع الزجاجات الاحتياطية المتصلة بالميكروبيبتات إلى ارتفاع مناسب فوق الأجزاء لتكبيل أجزاء MCA بضغط 50 ملليمتراً من الزئبق لمدة 60 دقيقة. في نهاية فترة التوازن، تعيين الزجاجات في ارتفاعات مختلفة لبعضها البعض لفحص الردود المتمدد السفينة، وخفض زجاجات الخزان للحد من الضغط داخل الأوعية الدموية إلى 80 ملليمتر من الزئبق والسماح للشرائح لتكواد لمدة 10 دقائق. ثم، تقليل الضغط داخل الأوعية الدموية إلى 60، 40، و 20 ملليمتر من الزئبق، مما يسمح للشرائح لتكواز بعد كل تغيير الضغط.
في هذا الرسم البياني التمثيلي، يُصوَّر قطر الشرياني على المحور Y على أنه التغير في النسبة المئوية لقطر عند ضغط أساس يبلغ 100 مليمتر من الزئبق. على المحور س، يتم عرض الضغوط المختلفة داخل الأوعية الدموية التي تم اختبارها الردود توسع الشرايين. وبالنسبة لمجموعة الإصابات الصورية، زادت أقطار MCA فوق خط الأساس واستمرت في التمدد عادةً مع انخفاض الضغط داخل الغم من 100 إلى 20 ملليمتراً من الزئبق.
وعلى النقيض من ذلك، فإن استجابات MCA التعوينية للانخفاض المستمر المفروض في الضغط داخل الأوعية الدموية في مجموعات إصابات الدماغ الرضية الناجمة عن الانفجار لمدة 30 دقيقة و 60 دقيقة قد انخفضت بشكل كبير في قدرتها على التوسع بعد التعرض للانفجار، مما يشير إلى ضعف كبير في الاستجابات الوعائية الدماغية للضغط المنخفض. إن تقنيات استخراج السفينة، واستردادها، وتصاعدها، وكثرة الإسراف فيها معقدة للغاية، وينبغي بذل كل جهد من أجل العناية الدقيقة عند تنفيذ هذه الإجراءات.
