يستخدم هذا البروتوكول الجراحي نموذج عيب مجزأ ثابت خارجيًا ثابتًا وثابتًا بشكل ثابت خارجيًا لتقييم آليات الشفاء من العظام واستخدام العلاجات التجديدية المحتملة. لقد قمنا بتبسيط عملية جراحية صعبة لإنشاء وتثبيت نموذج عيب العظام المجزأ الذي يمكن الوصول إليه وفعال من حيث التكلفة مع الحفاظ على ملاءمته لدراسات الشفاء الطولية. هذه التقنية هي ترجمة خاصة لعلاج عيوب العظام الهاتية الحرجة الحجم التي قد تستفيد من التثبيت مع التثبيت الخارجي، على الرغم من أن النموذج يتطلب المزيد من الدراسة.
لمنع وجود كسر أثناء حفر الدبابيس ، استخدم دورات عالية في الدقيقة وضغطًا منخفضًا لثقب القشرة الجانبي ، ثم تقليل الدوران في الدقيقة للتقدم. بعد إعداد السقالة من العظام morphogenetic البروتين أنبوب العظام الكسب غير المشروع عدة، وفقا لتعليمات الشركة المصنعة، واستخدام مقص معقمة وحاكم معقمة لتقليم الكولاجين الاسفنج لتناسب خمسة بثلاثة من ثلاثة عيب ملليمتر. ثم استخدام حقنة لتوزيع العظام morphogenetic البروتين 2 حل بالتساوي على سطح الاسفنج، حتى يتم امتصاص حجم كامل من الحل.
بعد ذلك ، حلق المنطقة المحيطة بالساق الخلفية فأر مُجعر باستخدام الضلع الثالث عشر ، والمخلب الخلفي ، وخطوط الوسط الظهرية والبينيترالية كهوامش ، تليها أربعة فرك متتابعة بالتناوب من الجلد المكشوف مع شاش معقمة غارقة في 10 ٪ بوفيدون اليود والإيثانول 70 ٪. للحث على عيب الفخذ، تمديد الساق حلق من خلال الستائر لزجة واضحة fenestrated، وتغطية مقاعد البدلاء الجراحية في المناشف العقيمة لإنشاء حقل معقمة. Palpate عظم الفخذ واستخدام عدد 15 شفرة لخلق شق anterolateralral من خلال الجلد تمتد من الرضفة إلى أكبر trochanter في عظم الفخذ القريب.
بعناية قطع اللفافة الساق الجانبي على طول الحاجز العضلي لفصل العضلات الفاترة من رباعيات في وقت لاحق من أوتار الركبة في وقت لاحق حتى يتعرض عظم الفخذ الجانبي. الحفاظ على شفرة مشرط رقم 15 بالتوازي مع كفاف سطح العظام ، وقطع بلطف العضلات بعيدا عن العظام الكامنة لأداء حذرا ، تشريح الأنسجة اللينة التحسسية الأذينية ، والبدء على السطح الجانبي ، وفضح عظم الفخذ في منتصف diaphysis. استخدام مصعد periosteal لرفع العضلات بعيدا عن العظام المكشوفة كما يتم تشريحها، والمضي قدما حول رمح الفخذ حتى تم تطهيرها من سبعة إلى 10 ملليلتر من داء الداين المركزي من الأنسجة الرخوة من جميع الجوانب.
المقبل، وضع دبوس واحد فقط على مستوى epicondyl الجانبي، تليها وضع تدفق رقصة إلى عظم الفخذ البعيدة الجانبي، وإدراج واحد ملليمتر واحد مترابطة طرف سلك Kirschner. المقبل، والحفاظ على موقف من رقصة على العظام، وتحديد حيث سيدخل معظم دبوس أقرب إلى العظام على أساس الثقوب. بعناية موازي لألياف وتر الألوية حسب الحاجة لخلق فجوة صغيرة في الأنسجة للدبوس القريب لتمرير من خلال، والتقليل من الضرر iatrogenic إلى وتر.
حفر واحد ملليمتر غير مترابطة ك سلك في الفجوة، ومقارنة ارتفاع دبوس حفر مع دبوس فضفاضة للتأكد من أن دبوس يشارك كل من الكورنيش. الحفاظ على موقف من الرقصة في اتصال مع العظام وحفر اثنين من ملليمتر واحد الخيوط ك الأسلاك، واحد على جانبي موقع عيب في المستقبل، وضمان أن دبابيس إشراك كل من الكورتيص، ووضع مستوى شريط المثبت الخارجي واحد سم فوق الجلد. المسمار بإحكام، وتأمين شريط في مكان، وقصاصة أطوال دبوس الزائدة.
ضع ناظرًا منحنيًا صغيرًا حول عظم الفخذ الأمامي والخلفي لحماية الأنسجة الرخوة المحيطة والعضلات وحزمة الأعصاب ، واستخدم شفرة منشار الأقواس المتذبذبة خمسة ملليمترات تقريبًا ، والضوء ، وحتى الضغط ، لإنشاء عيب قطاعي من خمسة ملليمترات بعناية فائقة من خلال الغشاء النصفي المتوسط. دافق الجرح مع 10 ملليلتر من 0.9٪ ملحي طبيعي بعد خلق الخلل، وإدارة 0.1 ملليلتر من 0.25٪ bupivacaine مع الادرينالين إلى الجرح باعتباره مسكن والأوعية الدموية. أدخل سقالة إسفنجية منقوشة للبروتين-2 في العيب، واستخدم خياطة قابلة للامتصاص 4-0 في نمط بسيط متقطع لإغلاق الطائرة العضلية.
ثم أغلق طبقة الجلد باستخدام خياطة قابلة للامتصاص 4-0 في نمط تحت الجلد ، ثم الغراء الجلد لإغلاق أي ثغرات حول دبابيس جاحظ ، والحصول على صورة الأشعة الأمامية الخلفية لعظم الفخذ على الفور ، وأربعة أسابيع و 12 بعد الجراحة. عيوب التحكم السلبية التي تحتوي على إسفنج الكولاجين فقط لا تظهر أي دليل على سد هشاشة العظام بين حواف العظام القريبة والعرية. ويمكن رؤية كمية صغيرة من إعادة عرض العظام الجديدة مباشرة المجاورة لحافة عظم الفخذ قطع، في حين أن العيب نفسه يظهر عدم وجود المواد العظمية، ووجود الغضاريف، وبعض الوما الدموية المتبقية.
العيوب التي تحتوي على العظام مورفوجينيك البروتين-2 الإسفنج غارقة تظهر شفاء العظام كبيرة في وقت مبكر من أربعة أسابيع بعد الجراحة، كما يتضح من سد قاسية غير شفافة لاسلكيا عبر العيب. بحلول 12 أسبوعا، وقد شكلت ترسبات معدنية جديدة كبيرة في جميع أنحاء عيب. يمكن ملاحظة عظم سفلي جديد كبير في التمدد القاسي من حافة عظم الفخذ المقطوعة وقد تطورت التوابل من العظام المنسوجة والميريالة في جميع أنحاء العيب.
وعلاوة على ذلك، لا ينظر إلى ترسب الغضروف. التصوير عن طريق نظام التصوير في في فيفو بعد إزالة المثبت الخارجي يسمح التصور من الخلايا العابرة للإنارة الحيوية داخل العيب. على سبيل المثال، الخلايا في تجويف النخاع الإنارة بعد transfection مع الترميز مرنا معقدة لغاوسيا لوسيفيراس، ويمكن استخدامها لقياس التغيرات البيولوجية في التعبير عن الجينات أو البروتين من الفائدة أثناء عملية الشفاء.
وضع دبوس مهم لضمان تثبيت خارجي مستقر ودائم. يجب أن تكون الدبابيس عمودية مباشرة على عظم الفخذ ، وموازاة بعضها البعض ، لتقليل الكسر والعدوى. باستخدام هذا النموذج، يمكن رصد الآليات البيولوجية، مثل تعبيرات بروتينية محددة، لفهم الشفاء بشكل أفضل، كما يمكن اختبار المواد الحيوية أو العلاجات المختلفة للسقالة للفعالية العلاجية.
نأمل أن تسمح هذه التقنية للباحثين في المستقبل لدراسة أكثر كفاءة وفعالية شفاء العظام مع التثبيت الخارجي بحيث يمكن ترجمة النتائج إلى النجاحات السريرية المحسنة. تجنب استنشاق الغازات المخدرة، وارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة عند التعامل مع formalin وEDTA، والعناية عند التعامل مع الأدوات الجراحية، وخاصة منشار العظام المثقبة والمتذبذبة.
