Bu cerrahi protokol, kemiğin iyileşme mekanizmalarını ve potansiyel rejeneratif tedavilerin kullanımını değerlendirmek için tutarlı ve tekrarlanabilir dıştan sabit segmental defekt modeli kullanır. Uzunlamasına iyileşme çalışmaları için uygun kalırken erişilebilir ve uygun maliyetli bir segmental kemik defekti modelinin oluşturulması ve stabilizasyonu için zorlu bir ameliyatı kolaylaştırdık. Bu teknik özellikle eksternal fiksasyon ile stabilizasyondan fayda sağlanabilir travmatik kritik boyutlu diaphysial kemik defektlerinin tedavisinde niçin translabl, model daha fazla çalışma gerektirir rağmen.
Pimleri delerken bir kırığı önlemek için, lateral korteksi delmek için dakikada yüksek dönüşler ve düşük basınç kullanın, sonra ilerlemek için dakikada dönüşleri azaltın. Bir kemik morfogenetik protein tüp kemik greft kiti gelen iskele hazırlandıktan sonra, üreticinin talimatlarına göre, steril makas ve steril bir cetvel kollajen sünger beş üç üç milimetrelik defekt uygun kırpmak için kullanın. Daha sonra kemik morfogenetik protein-2 çözeltisini süngeryüzeyine eşit olarak dağıtmak için bir şırınga kullanın, ta ki çözeltinin tüm hacmi emilene kadar.
Daha sonra, 13 kaburga, arka pençe ve dorsal ve ventral orta kenar boşlukları olarak kullanarak bir anestezi kalım sıçan ın arka bacak çevresindeki alanı tıraş, steril gazlı bez ile maruz kalan cildin dört ardışık alternatif scrubs takip 10%povidone-iyot ve% 70 etanol batırılmış. Femoral kusur neden olmak için, bir fenestrated net yapışkan perde ile tıraş bacak uzatmak, ve steril bir alan oluşturmak için steril havlu cerrahi tezgah kapağı. Femur palpate ve proksimal femur büyük trochanter patella uzanan deri yoluyla anterolateral bir kesi oluşturmak için bir sayı 15 bıçak kullanın.
Dikkatle lateral femur maruz kalana kadar arka arkaya hamstrings anteriora quadriceps vastus lateralis kas ayırmak için intermüsküler septum boyunca lateral bacak fasya eğim. Kemik yüzeyinin kontur karşı bir sayı 15 neşter bıçak paralel tutmak, hafifçe dikkatli bir yapmak için altta yatan kemik uzak kas kesti, atravmatik çevresel yumuşak doku diseksiyonu, ve lateral yüzeyde başlamak, orta diafirinde uyluk ortaya çıkarmak. Kesitli olarak maruz kemik uzak kas kaldırmak için bir periosteal asansör kullanın, ve merkezi diaphyz yedi ila 10 mililitre her tarafta yumuşak doku temizlendi kadar femoral şaft etrafında devam edin.
Sonra, lateral epikondil düzeyinde sadece bir pin yerleştirin, lateral distal femur bir jig floş yerleştirilmesi takip, ve bir milimetrelik dişli ucu Kirschner tel takın. Daha sonra, kemik üzerinde jig konumunu koruyarak, jig delikleri dayalı en proksimal pin kemik girecek nerede belirlemek. Proksimal pimin geçmesi için dokuda küçük bir boşluk oluşturmak için gerekli olduğu gibi gluteal tendon liflerine dikkatlice paralel olarak, tendondaki iyatrojenik hasarı en aza indirir.
Bir milimetrelik ipliksiz k-teli boşluğa delin ve pimin her iki kortikası da devreye sokturmasını doğrulamak için delinmiş pimin yüksekliğini gevşek pimle karşılaştırın. Kemikle temas halinde jig konumunu koruyun ve pimleri her iki korteks meşgul sağlanması, gelecekteki kusur sitenin her iki tarafında iki bir milimetre dişli k-teller matkap ve dış fiksatör çubuğu seviyesi cilt üzerinde bir santimetre yerleştirin. Çubuğu yerinde kilitleyerek sıkıca vidalayarak fazla pim uzunluklarını kırpın.
Çevreleyen yumuşak doku, kas ve nörovasküler demet korumak için ön ve posterior uyluk etrafında küçük bir kavisli retraktör yerleştirin ve yaklaşık beş milimetre sagittal salınımlı testere bıçak kullanın, ve ışık, hatta basınç, çok dikkatli orta diafirile beş milimetre segmental defekt oluşturmak için. Defekti oluşturduktan sonra yarayı %0.9 normal salinin 10 mililitresi ile temizle ve 0.1 mililitre bupivacaine epinefrin ile epinefrin ile bir analjezik ve vazokonstriktör olarak yaraya uygulayın. Kemik morfogenetik protein-2 defekt içine ıslatılmış sünger iskele sokulve kas düzlemi kapatmak için basit kesilen desen 4-0 emilebilir dikiş kullanın.
Sonra çalışan subcuticular desen bir 4-0 emilebilir dikiş kullanarak cilt tabakası kapatın, sonra deri tutkal çıkıntılı pimleri etrafında herhangi bir boşlukları kapatmak için, ve hemen femur bir ön-posterior radyografik görüntü elde, ve ameliyattan sonra dört ve 12 hafta. Sadece kollajen sünger içeren negatif kontrol defektleri proksimal ve distal kemik kenarları arasında köprü osteogenezisi hiçbir kanıt göstermektedir. Yeni kemik remodeling küçük bir miktar doğrudan kesim femur kenarına bitişik görülebilir, defekt kendisi kemik malzeme eksikliği gösterirken, kıkırdak varlığı, ve bazı artık hematom.
Kemik morfogenetik protein-2 ıslatılmış sünger içeren kusurlar, defekt arasında radyoopak duygusuz köprüleme ile kanıtlanan ameliyattan dört hafta sonra önemli kemik iyileşmesini göstermektedir. 12 hafta içinde, önemli yeni mineral birikimi defekt boyunca oluşmuştur. Kesme femur kenarından gelen duyarsız uzaması nda önemli yeni periosteal kemik gözlenebilir ve defekt boyunca dokuma ve lamellar kemiğinspileri gelişmiştir.
Ayrıca kıkırdak birikimi görülmez. Dış fiksatör çıkarıldıktan sonra In Vivo Görüntüleme Sistemi ile görüntüleme defekt içinde biyolüminesans transfected hücrelerin görselleştirilmesisağlar. Örneğin, Gaussia luciferase için karmaşık mRNA kodlama ile transfeksiyon sonra medüller kavite luminesce hücreler, ve iyileşme sürecinde ilgi bir gen veya protein ifadesinde biyolojik değişiklikleri ölçmek için kullanılabilir.
Pin yerleşimi, istikrarlı ve kalıcı bir dış fiksasyon sağlamak için önemlidir. Pimleri doğrudan femur dik olmalıdır, ve birbirine paralel, kırılma ve enfeksiyon en aza indirmek için. Bu model kullanılarak, belirli protein ifadeleri gibi biyolojik mekanizmalar, iyileşmeyi daha iyi anlamak için izlenebilir ve farklı iskele biyomateryalleri veya tedavileri de terapötik etkinlik için test edilebilir.
Bu tekniğin gelecekteki araştırmacıların ortopedik iyileşmeyi dış fiksasyonla daha verimli ve etkili bir şekilde incelemelerine olanak sağlayacağını umuyoruz, böylece bulguları gelişmiş klinik başarılara çevrilebilir. Anestezik gazları teneffüs etmekten kaçının, formalin ve EDTA'yı kullanırken uygun kişisel koruyucu ekipman giyin ve cerrahi aletleri, özellikle matkap ve salınımlı kemik testeresini kullanırken dikkatli olun.
