يسمح هذا البروتوكول بتقطيع البذور إلى شرائح سليمة حتى لا تنهار ، مما يسمح بتصور حبيبات النشا في أي بذور يمكن أن تندرج في طرف ماصة. يدعم المخروط البلاستيكي القابل للمرونة الهيكل الأصلي للأنسجة الجافة والأعضاء ، لذلك يسمح هذا متعدد العينات الرخيص والسهل بمعالجة العديد من العينات في وقت قصير. للذهاب من ميزة المجهر الطب الشرعي هنا، النشا المقاوم، وهو ما نبحث عنه جميعا، وسهولة الوصول إلى الإنزيمات إلى أن النشا الخام، انحلال الأميلوليسيس، مؤشر نسبة السكر في الدم، وارتفاع الجلوكوز، وهذه هي المعلمات الأساسية لتربية أصناف الأرز أفضل لمكافحة مرض السكري من النوع 2 في جميع أنحاء العالم اليوم.
والآن من دواعي سروري أن أقدم لك الدكتورة كيا بارتون الدكتورة بارتون من مختبرنا وسوف تستخدم مرفق التصوير الأساسي لأعضاء هيئة التدريس لتظهر لك كيف يتم نشر هذه التقنية. تبدأ بإزالة قشر حبات الجافة.
ضع نواة واحدة على سدادة مطاطية مسطحة على مقعد العمل ، وتأكد من أن هذه السدادة لا تزال ثابتة. استخدام سدادة المطاط المسطح الثاني لتآكل النواة عن طريق التواء ضد سدادة المطاط الأول، ثم إزالة قشور من النواة، مع الحرص على عدم تحطيم الاندوسبيرم ولا طحن البذور بقوة جدا بين اثنين من الأرانب المطاطية. إزالة أي قشور المتبقية باستخدام ملقط غرامة وإدراج نواة قشر الفردية في البلاستيك 250 ميكرولتر ماصة تلميح.
تأكد من أن نهاية الجنين من النواة تواجه نحو نهاية مخروطية من طرف ماصة. إدراج الثانية 250 ميكرولتر ماصة تلميح لإجبار النواة في تلميح ماصة الأولى والحفاظ على نواة غير متحركة أثناء المقطع، مع الحرص على عدم تلف النواة أو ثني طرف ماصة الثانية. وضع ماصة طرف تجميع شقة على منضدة العمل والاحتفاظ بها في مكان باليد.
من ناحية أخرى، استخدم شفرة مشرط حادة لشريحة من خلال وسط النواة، وقطع نهاية طرف ماصة. شريحة إلى أسفل من خلال التجميع ومن ثم توجيه شفرة مشرط عموديا حتى اثنين من وجوه قسم اليد الجديدة المكشوفة موازية. ثم استخدم المشرط لقطع أجزاء سميكة ملليمتر واحد من نواة الأرز.
لإجراء المجهر الضوء المنعكس، ضع أقسام الأرز العرضي على قطعة من الورق الأسود قياس الثقيلة. الحصول على صور ضوئية للأقسام العرضية باستخدام مجهر ستيريو مع goosenecks محمولة للإضاءة المائلة، وذلك باستخدام ما لا يقل عن 10 مرات التكبير. تم فحص أقسام نيبونباري وssg1 البرية تحت 260 مرة، 920 مرة، و 4200 مرة التكبير.
عندما أعدت بشكل صحيح، كانت أقسام الأرز ما يقرب من 0.9 ملليمتر سميكة مع الحد الأدنى من تحطيم الاندوسبيرم وطبقات بيريكارب سليمة والسورون. تسمح هذه التقنية بإعداد أقسام ذات جودة كافية لمراقبة الخلية الاندوسبيرم بأكملها وحبيبات النشا المركبة والحبيبات الفرعية الفردية. منتجي النواة شفافة، مثل الخط الهجين النشا مقاومة من النوع البري، Zhehui 7954 والكوبالت ولدت RS111 متحولة، أنتجت حبيبات النشا متعددة الهدرات معبأة بإحكام، وهو النمط الظاهري الاندوسبيرم الأرز العادي.
صور SEM من منتجي النواة الطباشيرية، متنوعة التجارية يي تانغ و RS4، وعرض حبيبات النشا التي كانت مستديرة ومعبأة فضفاضة. كان لدى Xiushiu 11 البرية وKMD1 المتحولة ، والتي عبرت عن جين Cry1Ab لمنع افتراس الحشرات أقسام وأنماط مورفوتية endosperm مشابهة لخطوط النشا المقاومة الشفافة. ويمكن تطبيق هذه التقنية على بذور الأنواع الأخرى.
نموذج monocot، براتاشيون براتاثيون براتشيبوديوم، وتنتج بذور صلبة جدا، ولكن كان لا يزال من الممكن الحصول على قسم عرضي سليمة. كما تم إنتاج أقسام عرضية سليمة من القمح الشتوي الأبيض الناعم. يمكن تطبيق طريقة الفحص السريعة ورخيصة للنظر داخل الهياكل البيولوجية على أرجل الحشرات ، أو مسامير شجرة الفول ، أو الزعرور ، أو العمود الفقري للأسماك ، أو أي مجال من المجهر الشرعي الذي يمكن أن يستفيد من إعداد دعم العينة هذا.
بعد تنفيذ هذا البروتوكول، طلاء البلوتر للفحص الكهربائي، تلطيخ مع الأصباغ الفلورية محددة، وتطبيق calcafluor لوصمة عار لسمك جدار الخلية جلوكان بيتا في خطوط الشوفان والشعير متحولة هي بعض الطرق السريعة للاقتراب من تربية النبات مع فحص النمط الظاهري السريع.
