تم تصميم بروتوكولنا لإجراء فحص دقيق لذبابة الفاكهة ، وهو كائن حي نموذجي قوي يمكنه تصميم جميع الجينات والمستقبلات والخلايا العصبية والرؤوس العصبية النفسية التي تشارك في الإحساس بالاختبار واستهلاك الطعام. مثل البشر يطير مثل الطعام الذي الأذواق: الحلو، مالح قليلا، قليلا الحامض أو رفض الطعام الذي الأذواق المريرة، مالحة جدا أو حامضة جدا. قوة هذه التقنية تأتي من السرعة والراحة.
يمكنك اختبار العديد من الذباب المختلفة في وقت قصير PRH دون الإعداد معقدة. طريقتنا هي ممتازة، ويقايس ممتازة لفهم ما إذا كان الذباب مثل، تماما مثل طعام معين، فضلا عن كيفية تأثير بعض المنتجات الجينية تفضيل الذوق. تحديد ما إذا كانت الحيوانات تقبل أو ترفض بعض الأطعمة يمكن أن يكون تحديا.
لذلك من المهم وضع بروتوكول قياسي لاختبار تفضيل الذوق الحيواني. لإعداد قوارير المجاعة للمقايسة ، ضغط فضفاض قطعة من الأنسجة في الجزء السفلي من كل قارورة ذبابة بلاستيكية فارغة لكل نوع جين ذبابة ليتم اختبارها. بحيث تملأ الورقة هذه المساحة دون تشكيل كتلة كثيفة ، في حوالي ثلاثة ملليلترات من الماء النقي لكل قارورة لتشبع الأنسجة تماما دون ماء دائم.
الحرص على عدم وجود قطرات كبيرة من المياه الزائدة على جدران القنينات. بدلا من ذلك يمكن استبدال خمسة ملليلترات من 1٪ Agros بدون السكروز بالورق المنقوع، قبل 24 ساعة من تجربة تخدير ثاني أكسيد الكربون الذباب القديم لمدة يومين إلى أربعة أيام وفرز الذباب إلى مجموعات من حوالي 70. ثم إضافة كل مجموعة من الذباب إلى المجاعة الخسيس وتسمية كل قارورة مع النمط الجيني ووقت بدء المجاعة.
قبل إجراء تجربة، قم بإعداد مجموعة من التخفيفات لكل صبغة باستخدام نفس الطعام مع كل لون صبغة مختلفة. مجتمعة 0.5 غرام من Agros مع 50 ملليلتر من المياه النقية في وعاء آمن الميكروويف وتسخين الحل الزراعي حتى يذوب اثارة حسب الضرورة. حل كل مكون غذائي، بما في ذلك السكروز وأي مركبات تجريبية في الماء في تركيز 100 أضعاف أو أعلى من التركيز النهائي اختبارها.
وخلط الصبغة الزراعية والمجمع التجريبي المطلوب في أنابيب الطرد المركزي المخروطية والبولي بروبلين. بعد خلط مكان الأنابيب في حمام الماء 60 درجة مئوية حتى التوزيع وإضافة ملليلتر واحد من لون واحد من الغذاء التجريبي وحلول صبغ إلى جانب واحد من طبق المقايسة الأولى. السماح لل Agros لتبرد حتى شركة قبل إضافة ملليلتر واحد من الحل الغذاء السيطرة، وصفت مع لون صبغ الثاني إلى الجانب الآخر من الطبق.
ثم كرر إعداد طبق المقايسة، مع التحكم المعاكس والزوج حل صبغ التجريبية. استخدام النتائج لتحديد اثنين من تركيزات الصبغة التي تسفر عن مؤشر تفضيل صفر. عندما لا يتم إضافة مركب تجريبي.
لإجراء فحص التغذية في اتجاهين. أول مشلول مؤقتا ذبابة تجريبية واحدة حقيرة لمدة ثلاث إلى خمس دقائق على الجليد حتى لا يلاحظ أي أنشطةحركية واضحة مثل الطيران والتسلق. مرة واحدة وقد تم شل حركة الذباب، عكس بلطف القارورة والاستفادة من نقل الذباب إلى غرفة المقايسة ثم وضعت بسرعة الغطاء على الغرفة.
عندما يتم نقل جميع المجموعات نقل جميع غرف الفحص إلى مساحة مظلمة ومغلقة لمدة 90 دقيقة. في نهاية المقايسة عكس الغرف في الفريزر ناقص 20 درجة مئوية، لمدة ساعة تقريبا. قبل وضع كل غرفة تحت مجهر ستيريو لفحص لون البطن من الذباب في كل مجموعة تجريبية.
عد ذبابة، إذا كان البطن أكثر من 50٪ الملونة مما يدل على تغذية قوية، وتجاهل أي الذباب الذي يحتوي على البطن سوى بقعة طعام صغيرة، وهو ما يدل على سوء الأكل. عندما يتم حساب جميع الذباب استخدم المعادلة لتحديد مؤشر تفضيل الطعام لكل مجموعة. في هذا المقايسة، تم تقسيم طبق 35 ملليمتر إلى أسبوعين سوف نتغذى في مقصورات تحتوي على طعام أغرو، إلى جانب صبغة حمراء أو زرقاء.
لاستبعاد التحيز صبغ، تم صقل تركيزات الصبغة الزرقاء والحمراء بعناية لتسفر عن تفضيل الصفر التقريبي عندما أضيفت فقط هذه الأصباغ اثنين، 90 دقيقة بعد الرطب يتضورون جوعا يطير الكبار تحميل ألوان البطن برلي ظهرت باللون الأزرق أو الأحمر. إذا كان الحيوان يستهلك في الغالب الطعام الأزرق أو الأحمر ، على التوالي ، إذا استهلكت ذبابة الأزرق والأحمر على حد سواء ، فإن البطن يبدو أرجوانيا. ولم يسجل سوى الذباب الذي تناول كمية كبيرة من الطعام، في حين لم يتم احتساب الذباب الذي لا يتناول كمية كافية من الطعام.
مقارنة هذا الطبق بيتري القائم على المقايسة لوحة متعددة الآبار على أساس كشفت أن طريقتي التغذية أعطى أساسا نفس نتائج التغذية المقايسة ردا على الطعام الحلو والمر والمالح في نوع الذباب البري. وتجدر الإشارة إلى أنه من الأسرع بكثير إعداد وتوزيع الطعام في طبق بيتري مما كان عليه في طبق 60 بئرا متعدد الآبار. تأكد من تحديد ما تركيز صبغ لاستخدام خاصة بعد اتخاذ دفعة حمية جديدة.
يمكن أن يكون هذا التركيز مختلفا بين خطوط الطيران. ويستند لدينا زوج اليوم اثنين من خيار المقايسة قوية جدا جدا. بالنسبة لك يسأل كيف الذباب، والشعور على حد سواء الإطار الداخلي والخارجي تضررت إلى حالة حقيقية التغذية المناسبة والسلوك.
