We would like to thank members of the Tessier lab for critical reading of this manuscript and helpful suggestions during the preparation of this protocol.

1. المجاعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد يطير قارورة المجاعة التي تشبع القطن الكرة مع 18.2 MΩ الماء في قاع القارورة الطيران القياسية. بدلا من ذلك، تشبع بالمثل شريط صغير من ورق الترشيح مع 18.2 MΩ المياه ومكان في زاوية داخل القارورة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الذباب في مجموعات من ~ 100 الحيوانات على وسادة CO 2 ثم قم بإضافة الذباب إلى قارورة المعدة. ملاحظة: يتم الحصول على أفضل النتائج مع الحيوانات التي هي أقل من 5 أيام من العمر. ومع ذلك، فإن العمر الدقيق للحيوانات يمكن التحكم كمتغير تجريبي لتحديد التغيرات في تفضيل طعم مر الزمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام القطن الكرة أو رغوة سدادة لتأمين قارورة مغلقة. ضع قارورة الى جانبهم في حاضنة تسيطر بيئة. الحفاظ على درجة الحرارة عند 25 درجة مئوية، والرطوبة فوق 70٪. ترك قارورة يمسها لمدة 24 ساعة. </li></ol> 2. طعم تفضيل الفحص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد جميع tastants للفحص في نفس اليوم لالصورة الاختبار. ملاحظة: tastants الدقيقة لاستخدامها سوف تختلف اعتمادا على مسألة تجريبية يتم طلب. وفيما يلي مثال tastants المستخدمة في هذا البروتوكول. انظر القسم 4 لأمثل. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد مراقبة منبهة للذوق (1 ملم السكروز) من خلال الجمع بين 10 ميكرولتر من 100 ملي حل السكروز، 13 ميكرولتر من تلوين الطعام الأحمر، و977 ميكرولتر من 18.2 MΩ المياه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد منبهة للذوق التجريبية (5 ملي السكروز) من خلال الجمع بين 50 ميكرولتر من 100 ملي حل السكروز، 10 ميكرولتر من تلوين الطعام الأزرق، و 940 ميكرولتر من 18.2 MΩ المياه. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل غرف الفحص باستخدام 100 ملم × 15 ملم طبق بتري البلاستيكية القياسية التي أعدت على النحو التالي: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع ثلاث قطرات 10 ميكرولتر من منبهة للذوق تحكم أقرب حافة لوحة عند 12:00 و 3 قطرات أخرى في 06:00. تأكد من أن تباعد بين قطرات مشابه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع ثلاث قطرات 10 ميكرولتر من منبهة للذوق التجريبية أقرب حافة لوحة في 03:00 وقطرات 3 آخرين في 09:00. تأكد من أن تباعد بين قطرات مشابه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات من 2.2.1 و 2.2.2 لأكبر عدد ممكن من مكررات كما تريد. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فارغة 1 قنينة من ~ 100 الذباب جوعا على وسادة CO 2 فقط لفترة كافية لتخدير جميع الحيوانات (حوالي 10 ثانية). فرشاة الحيوانات في وسط غرفة فحص المعدة، وتغطي مع غطاء الطبق. وينبغي تجنب فترات أطول من التعرض CO 2 إلى تحسين وقت الانتعاش وتدخل حدود مع سلوك التغذية: مذكرة. التعرض للالجليد (~ 5 دقائق) يمكن أن تستخدم لتخدير لتجنب CO 2 الآثار السلوكية التي قد تنشأ من التعرض حتى محدودة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع غرفة فحص في صندوق من الورق المقوى مبهمة. تأكد من تسمية من خارج منطقة الجزاء مع حالة وراثى التي يجري اختبارها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الإعداد كامل (غرفة الفحص الواردة في صندوق من الورق المقوى من الخطوة 2.4) إلى 25 درجة مئوية مع حاضنة لا يقل عن 70٪ من الرطوبة لمدة 2 ساعة. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات من 2.3 خلال 2.5 لجميع مكررات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 2 ساعة، ضع غرف الفحص، لا يزال الواردة في صناديق من الورق المقوى، مباشرة في الثلاجة -20 درجة مئوية لتصبح جاهزة للالكميات. </li></ol> 3. طعم تفضيل الفحص الكمي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح لغرفة الفحص واحدة في عملية الاحماء لدرجة حرارة الغرفة (حوالي 5 دقائق). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحت المجهر تشريح، وذلك باستخدام فرشاة أو زوج من الملقط، حيوانات المجموعة على أساس لون البطن: الأحمر والأزرق والأرجواني أو واضح (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسجيل عدد من الحيوانات في كل مجموعة. النظر في الحيوانات واضحة للم تشارك في الفحص وبالتالي لا تدرجها في أي حسابات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب مؤشر الأفضلية وفقا لواحدة من المعادلات التالية: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا تم إضافة منبهة للذوق التجريبية التي تهم صبغ أحمر، ثم استخدم (N أحمر + 0.5N الأرجواني) / (N أحمر + N أزرق + N purplه). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا تم إضافة منبهة للذوق التجريبية للصبغة زرقاء، ثم ضبط المعادلة (N الأزرق + 0.5N الأرجواني) / (N الأزرق + N أحمر + N الأرجواني). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكرار العمليات الحسابية لجميع الظروف التجريبية ومكررات. </li></ol> 4. تحسين الذوق الأفضلية الفحص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد تجريبيا تركيز المؤشرات تلوين الطعام ليتم استخدامها حتى تلوين الطعام لا يؤثر على نتائج الفحص طعم، على النحو التالي: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد 4 tastants باستخدام نفس المجمع قاعدة (على سبيل المثال 5 مم السكروز) كما هو مبين في الخطوة 2.1، ولكن حذفت تلوين الطعام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 1.3٪ أحمر تلوين الطعام إلى واحدة من tastants. جعل 3 tastants المتبقية مع تلوين الطعام الأزرق من تركيزات مختلفة في كل أنبوب (على سبيل المثال 0.6٪، 1٪، و 1.3٪). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بروتوكول الكامل الخطوات 2.2 خلال 3.4 لكل زوج منبهة للذوق: 1.3٪ مقابل 0.6٪ أحمر أزرق؛ 1.3٪ مقابل 1٪ أحمر أزرق و1.3٪ مقابل 1.3٪ أحمر أزرق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 4.1.1-4.1.3 مع نسب مختلفة من تلوين الطعام الأزرق حتى متوسطات مؤشر تفضيل قيمة 0 (الشكل 2). ملاحظة: وكنقطة انطلاق، 1.3٪ تلوين الطعام الأحمر إلى جانب 1٪ أزرق تلوين الطعام عادة تؤدي إلى نتائج جيدة. إذا لم يكن هناك تركيز مرضية من تلوين الطعام الأزرق يمكن أن يقابل 1.3٪ صبغة، ثم خطوة 4.1.1 خلال 4.1.3 يمكن أن تتكرر مع تركيزات مختلفة من اللون الأحمر وتركيز ثابت من تلوين الطعام الأزرق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحليل جميع الشروط التي سيتم اختبارها بنفس التراكيز تلوين الطعام الأمثل. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Herrero, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fruit+fly+behavior+in+response+to+chemosensory+signals.">Fruit fly behavior in response to chemosensory signals.</a> Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).</li><li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila.">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).</li><li>Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representations+of+Taste+Modality+in+the+Drosophila+Brain.">Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain.</a> Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).</li><li>Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+encoding+of+odors+by+channels+with+diverse+sensitivity+to+inhibition.">Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition.</a> Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).</li><li>Kain, P., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+taste+neurons+that+convey+sweet+taste+and+starvation+in+the+Drosophila+brain.">Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain.</a> Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).</li><li>Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dopamine-modulated+neural+circuit+regulating+aversive+taste+memory+in+Drosophila.">A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila.</a> Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).</li><li>Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acid+sensing+by+sweet+and+bitter+taste+neurons+in+Drosophila+melanogaster.">Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster.</a> Nat Commun. 4, 2042 (2013).</li><li>Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candidate+taste+receptors+in+Drosophila.">Candidate taste receptors in Drosophila.</a> Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).</li><li>Scott, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chemosensory+gene+family+encoding+candidate+gustatory+and+olfactory+receptors+in+Drosophila.">A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila.</a> Cell. 104 (5), 661-673 (2001).</li><li>Kim, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+TRPA1+channel+mediates+chemical+avoidance+in+gustatory+receptor+neurons.">Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).</li><li>Koh, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+IR20a+clade+of+ionotropic+receptors+are+candidate+taste+and+pheromone+receptors.">The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors.</a> Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).</li><li>Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+basis+for+attractive+salt-taste+coding+in+Drosophila.">The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila.</a> Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).</li><li>Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+experience-induced+taste+desensitization+modulated+by+the+Drosophila+TRPL+channel.">Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel.</a> Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).</li><li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+coding+of+taste.">Peripheral coding of taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li><li>Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=malvolio,+the+Drosophila+homologue+of+mouse+NRAMP-1+(Bcg),+is+expressed+in+macrophages+and+in+the+nervous+system+and+is+required+for+normal+taste+behaviour.">malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour.</a> EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).</li><li>Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taste+sensitivity+to+trehalose+and+its+alteration+by+gene+dosage+in+Drosophila+melanogaster.">Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).</li><li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila.">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li><li>French, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+mechanism+for+bitter+avoidance+in+Drosophila.">Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila.</a> J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).</li><li>Deshpande, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+Drosophila+food+intake:+comparative+analysis+of+current+methodology.">Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology.</a> Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

وصفناها بروتوكول بسيطة لكنها فعالة لتحديد طعم الأفضلية في ذبابة الفاكهة. وتستخدم إصدارات هذا الفحص بشكل روتيني في التجارب لتحديد مساهمات من المستقبلات الذوقية (الموارد الوراثية) إلى إدراك نوعيات مختلفة (المر والحلو والحامض والمالح، وأومامي) من المركبات الذوق. ...

الحيوانات تستخدم chemosensation للتمييز الشروط المواتية بصرف النظر عن ظروف الحرمان. هذا التصور يمكن أن تكون حاسمة لأشياء مثل تحديد أفضل المصادر الغذائية، وتجنب المواد السامة أو تحديد أفضل التزاوج شريك 1. وغالبا ما تنقسم Chemosensation إلى عنصرين الحسية: حواس الشم والحواس الذوقية. وهناك سمة مميزة الرئيسية لهذه الحواس هي أن الشم (الرائحة) يستخدم لأخذ عينات من البيئة الكيميائية الغازية المحيطة بينما ذوق حاسة (طعم) يتطلب اتصال جسدي مع الركيزة غير قلق. كلا طرائق الحسية تحفز الاستجابات العصبية التي يتم تجهيزها وفك الشفرة في الدماغ لإنتاج جذابة أو مثير للاشمئزاز السلوك المناسب 2. هذه الحواس هي بالتالي حاسمة لبقاء الحيوان. ذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة هو كائن النموذج الذي لا تزال تنمو في شعبية للاستخدام في فهمجي كيف تنظر الحشرات الشم والذوق. ذبابة الفاكهة توفر مزايا هائلة على النظم نموذج الأخرى نتيجة للثروة من الأدوات الجينية المتاحة للتشريح المسارات الجزيئية الخلوية، والسلوكية. وقد تم العمل على مدى السنوات ال 15 الماضية بشكل خاص دور فعال في تشخيص هويات الخلوية محددة، مستقبلات الخلايا العصبية، ويشير الآليات التي تشارك في كل من الشم والذوق. الآن، يتم استخدام قوة الوراثة ذبابة الفاكهة لزيادة توضيح كيف يتم ترميز هذه العمليات على مستوى الخلايا العصبية واحدة ودائرة واحدة 3-6. وبالتالي، المقايسات التي توفر سجل بسهولة قراءات من التعديلات على مسارات الحسية هي حيوية للتقدم المستمر في هذه المجالات. في حين أن الكثير معروف حول كيفية إشارات الشم يتم ترميز ومعالجتها في الدماغ، ومن المفهوم أقل بكثير عن آليات مماثلة في مسار الذوقية. نحن هنا وصف بروتوكول والتي يمكن استخدامها للتأكد preferen الذوقم في ذبابة الفاكهة. ذبابة الفاكهة، مثل الثدييات، يفضلون عموما المركبات تذوق الحلو بدلا من المركبات تذوق مرارة. ويمكن استخدام أي مزيج من هذه المصادر الغذائية في هذا التصميم التجريبي لتحديد كيفية تأثير تغيرات جينية معروفة الاختيار الذوق. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن بالمثل استراتيجيات التدخل الدوائي يتم تقييم لآثارها على تفضيل طعم الحيوانات. سهولة ومرونة هذا الاختبار يجعلها نموذجا مفيدا لفهم طبيعة الإدراك الذوقي في ذبابة الفاكهة.

<table><tbody><tr><td>Blue Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Blue 1 and Red 40, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cryo/Freezer Boxes w/o Dividers</td><td>Fisher</td><td>03-395-455</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Fisher</td><td>BP2401-500</td><td></td></tr><tr><td>Leica S6 E Stereozoom 0.63X-4.0X microscope</td><td>W. Nuhsbaum, Inc.</td><td>10446294</td><td></td></tr><tr><td>Petri dish (100 mm x 15 mm)</td><td>BD Falcon</td><td>351029</td><td>Reuseable if thoroughly washed and dried</td></tr><tr><td>Quick-Snap Microtubes</td><td>Alkali Scientific Inc.</td><td>C3017</td><td></td></tr><tr><td>Red Food Coloring (Water, Propylene Glycol, FD&amp;amp;C Reds 40 and 3, Propylparaben)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>IBI Scientific</td><td>IB37160</td><td></td></tr></tbody></table>

taste preference assay for adult drosophila

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival. The most obvious application of these chemosenses is to be able to distinguish good food sources from potentially dangerous food sources. Gustation requires physical contact with a chemical compound which is able to signal through taste receptors that are expressed on the surface of neurons. In insects, these gustatory neurons can be located across the animal's body allowing taste to play an important role in many different behaviors. Insects typically prefer compounds containing sugars, while compounds that are considered bitter tasting are avoided. Given the basic biological importance of taste, there is intense interest in understanding the molecular mechanisms underlying this sensory modality. We describe an adult Drosophila taste assay which reflects the preference of the animals for a given tastant compound. This assay may be applied to animals of any genetic background to examine the taste preference for a desired soluble compound.

وأظهرت بعض النتائج نموذجية من المقايسات تفضيل طعم أدناه. في معظم التجارب سوف ينظر بعض الاختلاف في شدة التلوين البطن (الشكل 1). يعتبر أي التلوين في البطن سواء مكثفة أو ضعيفة على ابتلاع إيجابي. ولذلك فمن المستحسن للباحثين ليسجل الحيوانات في حي...

Watch this Scientific Journal Video about Taste Preference Assay for Adult Drosophila at JoVE.com

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

طعم الفحص تفضيل الكبار<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival.  The most obvious application of these chemosenses is to be able to ...

taste-preference-assay-for-adult-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

9.6K Views.  Indiana University School of Medicine-South Bend. Taste is an important sensory process which facilitates attraction to beneficial substances and avoidance of toxic substances. This protocol describes a simple ingestion assay for determining Drosophila gustatory preference for a given chemical compound.

Video: Taste Preference Assay for Adult Drosophila

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

In the following we describe the methodological details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with genetic interference, provides a handle to analyze the neuronal and molecular fundamentals of specifically associative learning in a simple larval brain.
Organisms can use past experience to adjust present behavior. Such acquisition of behavioral potential can be defined as learning, and the physical bases of these potentials as memory traces1-4. Neuroscientists try to understand how these processes are organized in terms of molecular and neuronal changes in the brain by using a variety of methods in model organisms ranging from insects to vertebrates5,6. For such endeavors it is helpful to use model systems that are simple and experimentally accessible. The Drosophila larva has turned out to satisfy these demands based on the availability of robust behavioral assays, the existence of a variety of transgenic techniques and the elementary organization of the nervous system comprising only about 10,000 neurons (albeit with some concessions: cognitive limitations, few behavioral options, and richness of experience questionable)7-10.
Drosophila larvae can form associations between odors and appetitive gustatory reinforcement like sugar11-14. In a standard assay, established in the lab of B. Gerber, animals receive a two-odor reciprocal training: A first group of larvae is exposed to an odor A together with a gustatory reinforcer (sugar reward) and is subsequently exposed to an odor B without reinforcement 9. Meanwhile a second group of larvae receives reciprocal training while experiencing odor A without reinforcement and subsequently being exposed to odor B with reinforcement (sugar reward). In the following both groups are tested for their preference between the two odors. Relatively higher preferences for the rewarded odor reflect associative learning - presented as a performance index (PI). The conclusion regarding the associative nature of the performance index is compelling, because apart from the contingency between odors and tastants, other parameters, such as odor and reward exposure, passage of time and handling do not differ between the two groups9.

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are able to associate odor stimuli with gustatory reward. Here we describe a simple behavioral paradigm that allows the analysis of appetitive associative olfactory learning.

مشهي التعلم النقابي في الشم<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; اليرقات

In the following we describe the methodological  details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

تجريب<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الشم مع الفحص Y-المتاهة

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

عالية الإنتاجية الفحص لفحص تفضيلات بيضة زرع الفردي<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

طريقة بسيطة لقياس التغيرات في السلوك المكافأة التماس طريق<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

الشعيرات الدموية المغذية الفحص يقيس كمية الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate their food environment. The fruit fly, Drosophila melanogaster, is a genetically tractable model organism that is widely used to decipher the molecular, cellular, and neural underpinnings of food preference. To analyze fly food preference, a robust feeding method is needed. Described here is a two-choice feeding assay, which is rigorous, cost-saving, and fast. The assay is Petri-dish-based and involves the addition of two different foods supplemented with blue or red dye to the two halves of the dish. Then, ~70 prestarved, 2-4-day-old flies are placed in the dish and&#160;allowed to choose between blue and red foods in the dark for about 90 min. Examination of the abdomen of each fly is followed by the calculation of the preference index. In contrast to multiwell plates, each Petri dish takes only ~20 s to fill and saves time and effort. This feeding assay can be employed to quickly determine whether flies like or dislike a particular food.

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

We present a protocol for a two-choice feeding assay for flies. This feeding assay is fast and easy to run and is suitable not only for small-scale laboratory research, but also for high-throughput behavioral screens in flies.

A سريع الغذاء تفضيل المقايسة في دروسوفيليا

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...

Feeding Test: Assessment of Feeding Preferences in Drosophila melanogaster

Source: Bovier, T. F., et al. <a href="https://www.jove.com/video/59535/" target="_blank">Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster</a>. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay for fruit flies in which colored food is used to monitor feeding and the effect added compounds may have on feeding activity. The example protocol tests the effects of several endocrine disrupting chemicals (EDC).

اختبار التغذية: تقييم تفضيلات التغذية في ذبابة الفاكهة السوداء

Source: Bovier, T. F., et al. Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).
This video describes a feeding assay ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

Drosophila melanogaster (fruit fly)

Adult

Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae

Source: Liu, J., et al. <a href="https://www.jove.com/video/57963/" target="_blank">A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae</a>. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies can distinguish small changes in temperature and therefore select environments with favorable thermal conditions. This video describes a behavioral assay that tests the temperature preference of Drosophila larvae on a linear thermal gradient.

مقايسة تدرج درجة الحرارة: طريقة لاختبار تفضيل درجة الحرارة في ذبابة الفاكهة يرقات

Source: Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
Drosophila fruit flies ...

Larva

Taste Preference Assay: A Method for Measuring Feeding Behavior in Drosophila

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. <a href="https://www.jove.com/video/54403/" target="_blank">Taste Preference Assay for Adult Drosophila</a>. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference assay, a behavioral method used to measure attraction or avoidance towards colored solutions that taste differently by assessing the fly&#39;s abdominal coloration after ingestion of the preferred substance. The featured protocol demonstrates the procedure used to measure flies&#39; preference towards solutions of varying sucrose concentrations.

فحص تفضيل الذوق: طريقة لقياس سلوك التغذية في ذبابة الفاكهة

Source: Bantel, A. P. and Tessier, C. R. Taste Preference Assay for Adult Drosophila. J. Vis. Exp. (2016).
This video describes the taste preference ...

طعم الفحص تفضيل الكبار

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

مشهي التعلم النقابي في الشم

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في

تجريب

عالية الإنتاجية الفحص لفحص تفضيلات بيضة زرع الفردي

طريقة بسيطة لقياس التغيرات في السلوك المكافأة التماس طريق

الشعيرات الدموية المغذية الفحص يقيس كمية الطعام في

A سريع الغذاء تفضيل المقايسة في دروسوفيليا

اختبار التغذية: تقييم تفضيلات التغذية في ذبابة الفاكهة السوداء

مقايسة تدرج درجة الحرارة: طريقة لاختبار تفضيل درجة الحرارة في ذبابة الفاكهة يرقات

فحص تفضيل الذوق: طريقة لقياس سلوك التغذية في ذبابة الفاكهة