우리의 프로토콜은 모든 유전자, 수용체, 뉴런 및 시험 감각 및 음식 소비에 관여하는 신경 심령 머리를 설계할 수 있는 강력한 모델 유기체인 과일 파리에 대한 훌륭한 분석기를 수행하도록 설계되었습니다. 인간처럼 맛있는 음식처럼 날아다니거나: 달콤하고, 약간 짠맛이 나고, 약간 신맛이 나거나, 쓴 맛이 나는 음식을 거부하거나, 너무 짠맛이 나거나, 너무 신맛이 나는 음식을 거부합니다. 이 기술의 힘은 속도와 편리함에서 비롯됩니다.
복잡한 설정 없이 짧은 시간 PRH에서 많은 다른 파리를 테스트할 수 있습니다. 우리의 방법은 특정 식품처럼 파리가 취향에 미치는 영향뿐만 아니라 이해하기위한 우수하고 우수한 분석입니다. 동물이 특정 식품을 받아들이거나 거부하는지 여부를 확립하는 것은 어려울 수 있습니다.
따라서 동물의 취향 선호도를 테스트하기 위한 표준 프로토콜을 수립하는 것이 중요합니다. 분석용 기아 바이알을 준비하려면, 시험할 플라이 유전자 유형당 각 빈 플라스틱 플라이 바이알의 바닥에 있는 조직의 조각을 느슨하게 압축한다. 종이가 조밀한 질량을 형성하지 않고이 공간을 채우도록, 각 유리병에 순수한 물의 약 3 밀리리터에서 완전히 서있는 물없이 조직을 포화.
바이알 의 벽에 여분의 물의 큰 방울이 없다는 것을주의. 또는 자당없이 1 %의 아그로스의 5 밀리리터는 24 시간 전에 이산화탄소가 2 ~ 4 일 된 파리를 마취하고 약 70 의 그룹으로 파리를 분류하기 전에 젖은 종이로 대체 할 수 있습니다. 그런 다음 각 파리 그룹을 기아 사악한 사람에게 추가하고 각 유리병에 유전자형과 기아 개시 시간으로 라벨을 붙입니다.
실험을 수행하기 전에 각 염료 색을 가진 동일한 음식을 사용하여 각 염료에 대한 다양한 희석을 준비하십시오. 0.5 그램의 아그로스와 50 밀리리터의 순수한 물을 전자레인지 안전 용기에 넣고 필요에 따라 교반이 용해될 때까지 Agro 용액을 가열합니다. 자당과 물에 있는 모든 실험 화합물을 포함한 각 식품 성분을 최종 시험 농도의 100배 또는 더 높은 농도로 용해하십시오.
그리고 원내, 폴리 프로필렌 원심분리기 튜브에 Agro 염료와 원하는 실험 화합물을 혼합. 튜브를 혼합 한 후 튜브를 60도 수조에 넣고 분포될 때까지 1 밀리리터를 실험식품과 염료 용액 1밀리리터를 첫 번째 분석 접시의 한쪽에 넣습니다. 아그로스가 대조식품용액1밀리리터를 첨가하기 전에 단단할 때까지 식히도록 하고, 두 번째 염료색으로 라벨을 부착합니다.
그런 다음 반대 제어 및 실험염 용액 쌍으로 분석 접시 준비를 반복합니다. 결과를 사용하여 기본 설정 지수를 0으로 산출하는 두 개의 염료 농도를 식별합니다. 실험 화합물이 첨가되지 않은 경우.
양방향 먹이 분석기를 수행합니다. 먼저 비행과 등반과 같은 명백한 모터 활동이 관찰되지 때까지 얼음에 3 ~ 5 분 동안 하나의 실험 비행 사악한 마비. 파리가 움직이지 않으면 유리병을 부드럽게 뒤집고 파리를 분석실로 옮김한 다음 뚜껑을 챔버에 빠르게 놓습니다.
모든 그룹이 옮겨졌을 때 모든 분석 챔버를 90분 동안 어둡고 닫힌 공간으로 이동합니다. 분석의 끝에서 약 한 시간 동안 영하 20도 냉동고에서 챔버를 반전. 각 챔버를 스테레오 현미경으로 배치하기 전에 각 실험 군에서 파리의 복부 색상을 검사합니다.
복부가 50% 이상 색으로 변한 경우, 복부에 작은 음식 반점만 함유되어 있는 파리를 버리면 가난한 음식을 섭취할 수 있습니다. 모든 파리가 계산되면 방정식을 사용하여 각 그룹에 대한 식품 기본 설정 지수를 정량화합니다. 이 분석에서 35밀리미터 의 요리는 2주 간 갈라져 아그로의 음식이 들어 있는 구획과 붉은 색 또는 파란색 염료가 어우게 됩니다.
염료 바이어스를 배제하기 위해, 파란색과 적색 염료 농도는 이 두 개의 염료만 첨가되었을 때 대략 적인 제로 선호를 산출하기 위해 신중하게 정제되었으며, 젖은 굶주린 성인 플라이로 하딩 후 90 분 은 파란색 또는 빨간색으로 나타났다. 동물이 주로 파란색 또는 빨간색 음식을 소비하는 경우, 파리가 파란색과 빨간색을 모두 소비하는 경우, 복부는 보라색으로 나타났다. 상당한 양의 음식을 섭취한 파리만 득점했고, 음식 섭취량이 부족한 파리는 계산되지 않았습니다.
이 페트리 접시를 다중 웰 플레이트 기반 분석과 비교한 결과, 두 가지 수유 방법은 야생 파리의 달콤하고 쓰라리고 짠 음식에 대한 응답으로 본질적으로 동일한 먹이 주기 결과를 제공한 것으로 나타났습니다. 특히, 60 잘 멀티 웰 접시보다 페트리 접시에 음식을 준비하고 배포하는 것이 훨씬 빠릅니다. 새로운 다이어트 배치를 한 후 특히 사용하는 염료 농도를 확인해야합니다.
이 농도는 플라이 라인 간에 다를 수 있습니다. 오늘 우리의 쌍은 두 선택 분석도 매우 강력합니다 기반입니다. 파리가 어떻게 손상되었는지 물어보시면 내부 외부 프레임이 실제 상태적절한 먹이주기와 동작으로 손상된 것을 감지하십시오.
