يصف هذا الفيديو الإجراءات خطوة بخطوة على استخدام مسبار قوة البيوميمبران، أو BFP لقياس ثابت الربيع الجزيئي. في التحقيق القوة، ظهرت مؤخرا BFP في سطح الخلية الأصلية أو في تحليل الطيف القوة الديناميكية SITU. والهدف الرئيسي من هذه التقنية هو قياس جزيء واحد ربط علم الوراثة.
هذا الإجراء تحليل البيانات هو رسالة بسيطة ولكنها قوية وتوفير المعلومات الميكانيكية، وتحديدا القوة الديناميكية والتهاب غشاء الخلية التعبير عن الجزيئات. خلال دورة تجربة BFP ، يمكن اعتبار رهان ميكروبيوم المسبار مع خلية الدم الحمراء والوصايا والخلية المستهدفة والترابط الجزيئي لمستقبلات الليغند بين المسبار والهدف كنظام دماغي متصل بسلسلة. استنادا إلى قانون هوك، فإن المعاملة بالمثل لمجموع ثابت الربيع لنظام ربيع متصل سلسلة يساوي مجموع ثابت الربيع العكسي لكل مكون واحد، كما تظهر المعادلة.
يتم حساب ثابت الربيع لخلايا الدم الحمراء على أساس حركة الأحداث ، والتي تعتمد على شعاعي من ميكروبايت التحقيق في فتحة. خلية الدم الحمراء، منطقة الاتصال الدائرية بين خلية الدم الحمراء والوصايا ومكابس الماصة الدقيقة. يتم الحصول على بيانات الطريق BFP بواسطة أداة افتراضية محلية الصنع للعرض الأيسر ، والتي تتحكم في حركة المواسير الصغيرة المستهدفة بواسطة مترجم PAs.
وتتكون دورة اللمس الكاملة من PFP من خمس مراحل. Approach.Impinge.Contact. تراجع وانفصاح. في البداية، لا التأكيد على موقف روبوستو APICS يشار إلى X يساوي 0 في deshine الأسود.
ثم يتم دفع الهدف من قبل قطعة أو مترجم للطعن في وضغط robusto للتسبب في حركة الوصايا السلبية. لاحظ أنه X أصغر من الصفر في خط شرطة أحمر. في مرحلة التراجع، تتحرك قمة busto الحمراء من X أصغر من موقف الصفر مرة أخرى إلى X يساوي موقف صفر يشار إليها باسم المرحلة ضاغطة.
إذا تشكلت رابطة بين مجمع جزيء مستقبلات الليغند ، فإن خلية الدم الحمراء ستختلف أكثر عن الاتجاه الإيجابي الآخر. يشار إلى هذه الفترة X أكبر من الصفر كمرحلة الشد من مرحلة التراجع. مرحلة التراجع هو الجزء الأكثر أهمية لتحديد ثابت الربيع من جزيء الترابط.
جمع القوة مقابل بيانات الطريق الزمني باستخدام منصة الحصول على البيانات BSP. تسجل كل تجربة عادة 50 إلى 200 دورة لمس، افتح برنامج تحليل بيانات PFP. انقر على رمز المجلد الأصفر وحدد ملف بيانات الصف المقابل بالنقر المزدوج عليها.
نحن في البرنامج ثم انقر على أزرار السهم صعودا وهبوطا للتبديل بين الأحداث. استخدام معايير الاستبعاد المتطرفة لحجب الأحداث غير الصالحة.
حدد نوع البيانات المصدرة الذي تم فرضه على تنسيق الوقت واختر نطاق الوقت المناسب. انقر على زر بيانات رسم التصدير. يتم حفظ البيانات المصدرة كملف نصي بشكل افتراضي.
يحتوي هذا الملف النصي على عمودين من البيانات. إنه العمود الأول الذي يمثل الوقت الآباء والعمود الثاني الذي يمثل القوة المقابلة في كل نقطة زمنية. رسم القوة مقابل منحنى الوقت باستخدام برامج جداول البيانات للحصول على منحنى القسري مقابل التشريد.
قم بضرب القيمة الزمنية لكل نقطة بيانات بحركة Willow Steel PSO. صفر نقطة البيانات الأولى عن طريق طرح أصغر قيمة إزاحة من كل نقطة بيانات. لا يؤثر هذا التحول الأفقي على حساب ثابت الربيع اللاحقة.
في منحنى القوة مقابل الإزاحة، كانت مجموعتان فاعلتان متميزتان مختلفتين إذا كان من الممكن تحديد منحدر القوة الجديد. كل منها يمثل المرحلة الضاغطة ومرحلة النمط 10. احتواء خط انحدار لكل مجموعة بيانات.
يمثل الخط ذو المنحدر الأكثر انحدارا إجمالي ثابت الربيع في مرحلة الضاغط المشار إليها باسم K1. والخط الذي كان أصغر أعلى يمثل الخط في هذه المرحلة نمط 10 المشار إليها على أنها K2.As ذكرتها، وثابت الربيع الإجمالي هو متبادل من ابن سلسلة ثابت الربيع من كل عنصر. خلال المرحلة الضاغطة من فوز لوضع الخلية، لا تمتد الترابط الجزيئي، وبالتالي لا يؤخذ ثابت الربيع الترابط الجزيئي في الاعتبار. يوصف ثابت الربيع للخلية المستهدفة بأنه المعادلة المعروضة حيث يمثل K1 ثابت الربيع الإجمالي خلال مرحلة الضاغط.
في مرحلة نمط 10 من فوز لبيع الوضع، ومجموع ثابت الربيع هو الشمس من ثابت الربيع uverse من السندات الجزيئية خلايا الدم الحمراء. والخلية المستهدفة، استخدم المعادلة المعروضة لحساب ثابت الربيع الترابط الجزيء، الذي يمثل K2 ثابت الربيع الكلي. تقرأ مرحلة التوقف 10.
في فوز للفوز على الوضع، منذ تشوه B لا يكاد يذكر، وهو المصطلح الذي يصف عكس الخلية المستهدفة الربيع نهج ثابت صفر، وبالتالي فإن مجموع ثابت الربيع في مرحلة ضاغط يعادل ثابت ربيع خلايا الدم الحمراء تظهر على أنها المعادلة التالية. في مرحلة الشد ، يمكن حساب ثابت الربيع للترابط الجزيئي عن طريق طرح تأثير خلية الدم الحمراء التي تظهر على أنها المعادلة التالية. جمع ثوابت الربيع من الجانب الرياح دمج الموقف باء ، بيتا 3 المعقدة ، وخلية K562 وFe febrifugine دمج الموقف باء بيتا ثلاثة معقدة ، وحساب متوسط والانحراف المعياري للثوابت الربيع المستمدة في اختيار نيوتن أو مقياس نانومتر.
الآن يجب أن يكون لديك فهم أفضل لما هي متطلبات قياس والربيع ثابت من البيانات VFD. وينبغي ملاحظة الاختلافات بين فوز لوضع الخلية وفاز على وضع للفوز. خدمة تقديم جزيء مختلفة سيكون لها دفاعات مختلفة لقياس ثابت الربيع.
في الختام، يصف هذا الإجراء خطوة بخطوة كيفية إجراء تحليل مستمر الربيع الجزيئي باستخدام BFP. ونحن نتوقع أن تبذل جهود في المستقبل لأتمتة ودمج الحصول على البيانات BFP وتحليل DFS في برنامج واحد بقية الكمبيوتر. جعل تحليل بيانات عملية BFP بأكمله أكثر سهولة في الاستخدام وعاليا طوال الوقت.
