이 기술은 신진 대사 활동 및 호흡 기능을 측정하여 폐 생리학 및 병리학의 특성화에 유용합니다. 고립 된 폐 관류 시스템은 환기 와 관류를 재현하면서 지속적인 생리 적 기능의 연구를 가능하게하는 완전한 기능 기관과 함께 작동 할 수 있습니다. 이 방법은 폐류 대식세포 및 내피 조직과 같은 다양한 구성 요소의 대사 활동 및 활동과 같은 폐 조직의 비 호흡 능력의 특성화에 대한 통찰력을 제공 할 수 있습니다.
먼저, 작업 장치를 조립하여, 기포 트랩이 있는 열 위와 예열 코일 뒤에 위치한 폐렴및 중량 트랜스듀서와 인공 흉부와 함께 인공 흉부를 들고 있는 베이스 플레이트에 장착된 주 강철 기둥이 포함되어 있는지 확인한다. 모든 트랜스듀서를 중앙 전자 장치에 연결하고 장치 외에 환기 시스템을 준비합니다. 마취 된 토끼의 수술 부위를 면도 한 후 흉골 마누브리움에서 목까지 3 ~ 5 cm의 복부 중앙 분리를 만듭니다.
작동 가위를 사용하여 연골 고리 사이의 기관대의 전방 2/3을 자른다. 기관 섬유 막을 통해 5mm 기관 캐뉼라를 삽입하고 4-0 실크 봉합사로 조심스럽게 캐뉼라를 고정합니다. 통조니가 기관지에 구부러지지 않도록 집게 또는 핀셋을 기관 아래에 놓습니다.
호흡 펌프를 기관 캐뉼라에 연결하고, 조력량을 킬로그램당 10 밀리리터로 설정하고 기관 절제술 후 그리고 흉부가 열리기 전에 신속하게 환기를 시작하여 수술 중 폐 붕괴를 방지하기 위한 폐의 양압을 유지합니다. 흉부 구멍에 액세스하려면 메스 또는 가위를 사용하여 흉부 벽을 열고 흉부의 상위 3 분의 1까지 내측 스분루를 수행하십시오. 두 개의 리트랙터와 함께 흉부 반쪽을 열어 두는 다.
우수하고 열등한 베나 카바를 현지화하고 실로 태그합니다. 동물의 멸종 전에, 오른쪽 심실을 식별하고 헤파린의 킬로그램 당 1, 000 국제 단위를 주입. 주입 직후, 사전 루프 스레드로 우수하고 열등한 베나 카바를 리게이트합니다.
관내 스테미를 잘라 기관 캐뉼라쪽으로 내측 스테르노절제술을 확장하고 양쪽의 기관지를 연결 조직에서 방출합니다. 이제 기관 캐뉼라 위의 기관치를 절제하고 두개골 / caudal 축에서 캐뉼라를 부드럽게 당깁니다. 심폐 블록을 수확하기 위한 전산 후, 직접 디지털 해부 또는 스프링 가위를 사용하여 결합 조직을 분리하고 흉부에서 폐를 제거하십시오.
다음으로, 혈관과 식도를 해부한다. 흉부에서 고립된 폐를 들어 올리고 페트리 접시에 멸균 거즈 위에 폐를 조심스럽게 놓습니다. atelectasis를 방지하기 위하여는, 물 컬럼의 2 센티미터에 설정된 양압 기만 압력으로 폐를 환기시하십시오.
대실 홈의 수준에서 심실을 심실을 잘라냅니다. 두 심실을 연 후, 오른쪽 폐 동맥을 통해 폐 동맥 캐뉼라를 소개하고 왼쪽 아트리움 캐뉼라를 통해 왼쪽 아트리움을 통해 왼쪽 아트리움으로 이동합니다. 폐 동맥의 합자에서 주변 조직을 포함하여 4-0 실크 봉합사로 캐뉼라를 고정하고 구조적 팽창을 피하기 위해 아트리움을 좌측으로 고정합니다.
동맥 캐뉼라를 통해 식염수 동소항용액 250밀리리터를 주입하여 혈관 침대에서 남은 혈액을 플러시하십시오. 관류 설정을 위해 격리된 폐를 폐 챔버에 조심스럽게 배치합니다. 기관체를 챔버 커버의 트랜스덕터에 부착하고 칸누이 혈관을 관류 시스템에 연결한 다음 회전 잠금 장치로 챔버를 닫고 고정시합니다.
다음으로 챔버 뚜껑을 부착하고 스톱콕위로 전환하여 양압 환기로 전환합니다. 킬로그램당 분당 3 밀리리터의 흐름부터 시작하여 200밀리리터의 인공 혈액 이내 난간을 가진 폐를 퍼퓨즈한 다음, 킬로그램당 분당 5밀리리터로 천천히 흐름을 강화합니다. 그리고 다음 5분 동안, 흐름이 킬로그램당 분당 8밀리리터에 도달하고, 5분 동안 킬로그램당 분당 최대 10 밀리리터에 도달할 수 있습니다.
분당 30비트의 주파수, 킬로그램당 10밀리리터의 조수부량, 2센티미터의 수분 기둥의 끝 만료 압력으로 폐를 환기시다. 영역 세 가지 조건을 달성하기 위해, ISO 중력 상태를 특징으로 평형을 얻기 위해 10 ~ 15 분 동안 기다려, 정맥 압력이 레지스트리 전체에서 안정되어 있는지 확인. 폐의 무게가 일정하게 유지되고 동맥 및 좌심방 압력이 최대 수의 폐 혈관을 열고 실험 중에 미세 혈관 침대 함량을 유지하기 위해 영역 3 가지 조건을 달성하기 위해 안정되어 있는지 확인하십시오.
전자 제어 및 신호 처리의 경우, 호흡기 흐름, 체중 변화, 미세 혈관 압력, 조수 부피, 혈관 저항 등이 트랜스듀서에서 나오는 신호를 통합하고 평가 시스템에 표시하는 여러 중앙 전자 장치에 등록되어 있는지 확인합니다. 폐 대사와 혈관 투과성에 관여하는 5-HT 및 모노아민 산화제의 농도가 평가되었다. 5-HT와 모노아민 산화제의 농도는 보존 의 15 분 후에 정점에 그후에 다음 6 시간 도중 감소했습니다.
그 후, 관류 수준은 24 시간까지 비 통계적으로 유의한 증가를 보였다. 5-HT와 모노아민 산화제의 방출 속도는 보존의 첫번째 시간 도중, 5-HT 수준이 단백민 산화제 보다는 높게 상승하고 내피 세포 및 혈소판에 의해 탈환된 후에 6 시간 안에 감소한다는 것을 표시했습니다, 뿐만 아니라 monoamine 산화매개 양극증. 중성 내피티다아제 활성은 9시간에서 증가한 후 12~24시간 동안 안정적으로 유지되었습니다.
안지오텐신 변환 효소 활성은 4시간 후에 감소하고, 그 후 24시간까지 시간을 통해 안정적으로 유지되었습니다. 모세관 투과성에서 폐 보존의 효과는 24시간 동안 평가되었으며, 이는 응융합된 폐가 모세관 여과 계수의 점진적 증가를 겪었다는 것을 나타낸다. 다양한 조건하에서 분리된 폐 관류 시스템의 모세관 투과성에서 상이한 첨가제의 효과를 확인하고 역동성을 통해 투과성의 최대 증가를 관찰했다.
가장 중요한 기동은 폐챔버에 폐를 올바르게 배치하고 관류 시스템에 칸누이 혈관을 연결하는 것입니다. 이 기술의 의미는 순환 물질과 약물 검사 및 다양한 폐 병리학에서와 같이 흡입되거나 perfused 된 물질의 효과 사이의 상호 작용으로 확장됩니다.
