الهدف العام من هذا البروتوكول هو المزج الإشعاعي لمقتفي التربتوفان المسمى إشعاعيا F18 من خلال نهج من وعاء واحد وخطوتين. قد يجد المقتفي الإشعاعي تطبيقا واسع النطاق لتصوير استقلاب التربتوفان. وتستخدم هذه التقنية النظائر المشعة ذات عمر النصف الأطول، وسلائف تفاعل أقل، وحجم تفاعل أقل، ومرحلة حميدة بيئيا للتنقية.
يمكن استخدام المقتفي الإشعاعي لتشخيص الاضطرابات المختلفة التي تؤثر على الدماغ ، بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الصرع والاضطرابات العصبية والنفسية والأورام العصبية. ويمكن تطبيق هذه الطريقة على وحدات الوسم الإشعاعي الأخرى المتاحة تجاريا. بمجرد استلام محلول فلوريد F18 ، ابدأ بمسح صندوق الرصاص على السطح ، ومن مسافة متر واحد ، سجل الحد الأقصى لمعدلات التعرض للإشعاع.
بعد إجراء اختبار المسح للتأكد من أن صندوق الشحن غير ملوث ، سجل جرعة فلوريد F18 والوقت. نقل محلول فلوريد F18 إلى نظام تخليق الكيمياء الإشعاعية. قم بتوصيل خط الأرجون بإبرة قصيرة وخط نقل الفلورايد F18 بإبرة طويلة بقارورة فلوريد F18.
ثم ، أغلق الباب الزجاجي للخلية الساخنة وباب الرصاص. قم بتشغيل خط إمداد الأرجون بالنقر فوق توريد الأرجون. قم بزيادة ضغط الأرجون وقم بتشغيل خط دفع فلوريد F18 لدفع فلوريد F18 المائي عبر خرطوشة ضوء QMA.
بمجرد أن يتم حبس كل النشاط الإشعاعي في خرطوشة ضوء QMA ، وتكون قراءة كاشف النشاط الإشعاعي ثابتة ، قم بزيادة ضغط الأرجون ونفخ الأرجون من خلال الخرطوشة لمدة خمس دقائق أخرى لإزالة الماء الزائد. بعد إيقاف تشغيل خط دفع الفلورايد F18 ، قم بتقليل ضغط الأرجون إلى الصفر وقم بتبديل الصمام ثنائي المنافذ المكون من ستة منافذ من موضع محاصرة الفلورايد F18 إلى موضع الاستلقاء. افتح قارورة التفاعل ، وقم بتشغيل موضع MVP للإدخال خط أرجون واحد ، وادفع محلول كربونات البوتاسيوم K222 والبوتاسيوم إلى موضع MVP للإدخال قارورة واحدة من خلال خرطوشة ضوء QMA لإخراج النشاط الإشعاعي إلى قارورة التفاعل.
قم بتبديل موضع إزالة الفلورايد F18 إلى موضع الاصطياد. انقر فوق الزر "حرارة" لتسخين المفاعل عند 110 درجة مئوية، وقم بتشغيل خط الأرجون MVP MVP الذي يتصل بالمفاعل، وتبخر المذيب في موضع MVP الناتج أربعة قارورة. انقر فوق الزر تبريد لتبريد المفاعل إلى درجة حرارة الغرفة باستخدام ثاني أكسيد الكربون المضغوط.
قم بإيقاف تشغيل خط الكنس ، وقم بتبديل موضع MVP للإدخال واحد إلى موضع اثنين ، وأضف الأسيتونيتريل اللامائي في القارورة الثانية. يقوم اثنان بتشغيل الخط الكاسح والسخان لتجفيف فلوريد F18 بشكل أزيوتروبي عند 110 درجة مئوية. بمجرد أن يصل المفاعل إلى درجة حرارة الغرفة ، قم بإيقاف تشغيل خط الكنس ، وقم بتبديل موضع MVP للإدخال اثنين إلى موضع ثلاثة ، وأضف سلائف وضع العلامات الراديوية tosylate في القارورة الثلاثة.
أغلق المفاعل وقم بتسخين مخاليط التفاعل عند 100 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. لتبخير مذيب التفاعل ، بمجرد أن يبرد المفاعل ، قم بتشغيل خط الاجتياح وتبخر مذيب التفاعل عند 100 درجة مئوية. بمجرد أن يبرد المفاعل ، قم بإيقاف تشغيل خط الكنس وقم بتبديل موضع MVP للإدخال ثلاثة إلى موضع أربعة.
عند إضافة خليط حمض الهيدروكلوريك الأسيتونيتريل ، سخن التفاعل عند 100 درجة مئوية لمدة 10 دقائق لإزالة الحماية من مجموعات حماية tert-butyl و tert-butyloxycarbonyl في سلائف وضع العلامات الإشعاعية. لتحييد التفاعل ، عندما يصل المفاعل إلى درجة حرارة الغرفة ، قم بتبديل موضع MVP للإدخال من أربعة إلى موضع خمسة وأضف اثنين من هيدروكسيد الصوديوم المولي إلى خليط التفاعل وأوقف تشغيل خط الأرجون MVP للإدخال. بعد ذلك ، ابدأ في نقل خليط التفاعل إلى الملف الوسيط بالنقر فوق الزر F في MVP الناتج لتبديل MVP الناتج من موضع التهوية أربعة إلى موضع خمسة ، ثم بالنقر فوق الزر F في MVP الإدخال لتبديل MVP الإدخال من الموضع الخامس إلى الموضع السادس.
بعد تشغيل خط الأرجون MVP الناتج ، ادفع خليط التفاعل عبر أكسيد الألومنيوم المحايد المكدس وخراطيش C8 إلى القارورة الوسيطة المثبتة قبل حلقة عينة HPLC. لشطف المفاعل ، قم بتبديل موضع MVP الناتج خمسة إلى موضع ستة ، وادفع محلول الشطف في قارورة الإخراج MVP موضع السادس من خلال قارورة التفاعل والخراطيش والقارورة الوسيطة ، على التوالي. بعد ذلك ، ابدأ في تنقية الخليط عن طريق تبديل حلقة HPLC من موضع الحقن إلى موضع التحميل وتشغيل خط الأرجون MVP للإدخال.
عند تحميل الخليط إلى حلقة HPLC التي تبلغ خمسة ملليلترات، قم بتبديل الزر تحميل إلى حقن، وانقر فوق حقن HPLC لبدء كروماتوجرام HPLC بمعدل تدفق قدره ثلاثة ملليلترات في الدقيقة، ثم انقر فوق الزر شاشة HPLC للوصول إلى كروماتوجرام HPLC في الوقت الفعلي. انقر فوق الزر تحويل MVP لتحويل جزء HPLC المستهدف إلى العمود C18 القصير في حوالي 12 دقيقة. بعد جمع النشاط الإشعاعي المستهدف في عمود C18 ، قم بتبديل صمام التحويل ثنائي المنافذ المكون من أربعة منافذ إلى موضع جمع النفايات ، واغسل العمود الدائري بمعدل أربعة ملليلترات في الدقيقة لمدة ست دقائق لإزالة إنانتيومر D F18 FETrp البسيط والشوائب فوق البنفسجية الأخرى.
انقر فوق الزر MVP التحويل لتحويل مرحلة HPLC المحمولة مرة أخرى إلى موضع MVP للتركيبة بمعدل ثلاثة ملليلتر في الدقيقة. لاحظ أن المرحلة المتنقلة تمر عبر العمود الدائري والعمود C18 لتنقية L-F18 FETrp المحتفظ به في العمود C18. في حوالي 32 إلى 34 دقيقة ، اجمع الجزء المستهدف في موضع MVP للصياغة قارورتين.
ثم ادفع التركيبة MVP موضع اثنين من محلول القارورة من خلال خط التسليم والمرشح المعقم في قارورة الجرعة النهائية. فحص نشاط الجرعة النهائية وحجمها بعد إزالة المرشح المعقم. اغسل النظام بالماء فائق النقاء متبوعا بالإيثانول بمعدل تدفق قدره أربعة ملليلتر في الدقيقة لمدة 15 دقيقة على الأقل لكل غسلة.
قم بإيقاف تشغيل مضخة HPLC وصندوق PLC ، وأغلق البرنامج ، وأغلق شركة الطيران المضغوطة ، وخط الأرجون ، وخط ثاني أكسيد الكربون ، والطاقة الرئيسية للوحدة. اسحب ما يقرب من 0.1 ملليلتر من الجرعة النهائية إلى إدراج 0.2 ملليلتر من قارورة مراقبة الجودة. قم بتشغيل العينة الساخنة كما هو موضح في برنامج التسلسل الجزئي في مخطوطة النص.
تحليل بيانات مراقبة الجودة عن طريق حساب النقاء الكيميائي والكيميائي الإشعاعي في القيمة الزائدة للأنانتيومريك والنشاط المولي. بعد تحديد قيمة الرقم الهيدروجيني ، حرر الجرعة إذا اجتازت جميع نتائج الاختبار النطاق المقبول. يتم عرض كروماتوغرام HPLC الممثل لمراقبة الجودة.
تم الكشف عن القمم الضئيلة بين حجم الفراغ في 10 دقائق من البرنامج في كروماتوجرام فارغ. وأظهر المرجع القياسي غير الموسوم إشعاعيا L-fluoroethyl-trytophan وجود أيزومر واحد منفصل جيدا عن المرجع القياسي لنظيره D. أظهرت الجرعة النهائية من التربتوفان L-F18 نقاء كيميائيا عاليا ونقاء كيميائيا إشعاعيا.
أظهر اختبار استقرار المنتج النهائي عند أعلى تركيز للجرعة لمدة تصل إلى ثماني ساعات أن التربتوفان L-F18 كان مستقرا من حيث النقاء الكيميائي والنقاء الكيميائي الإشعاعي وفائض enantiomeric وقيمة الرقم الهيدروجيني. تم تحقيق النقاء الكيميائي والكيميائي الإشعاعي أكبر من 95٪ باستخدام هذا البروتوكول. يتم استخدام عمودين لتنقية التتبع.
تذكر التبديل إلى عمود C18 لإزالة الشوائب الكيميائية. يمكننا تكييف هذه الطريقة بسرعة مع الإنتاج السريري للمقتفي الإشعاعي التربتوفان المسمى بالفلور 18.
