نموذج لإعادة تشكيل الأوعية الدموية العكسية في ارتفاع ضغط الدم الرئوي بسبب أمراض القلب اليسرى عن طريق حل الأبهر في الفئران

يصف بروتوكولنا إجراء جراحيا لإزالة النطاقات الأبهرية الصاعدة في نموذج الفئران من ارتفاع ضغط الدم الرئوي بسبب أمراض القلب اليسرى ، مما يؤدي إلى عكس ارتفاع ضغط الدم الرئوي. تقدم هذه التقنية أداة قيمة لدراسة آليات إعادة التشكيل العكسي الفسيولوجي في الدورة الدموية الرئوية والبطين الأيمن. يمكن أن يساعد في تطوير استراتيجيات لعلاج ارتفاع ضغط الدم الرئوي.

بعد إعداد الأدوات الجراحية ، ضع فأرا مخدرا في وضع ضعيف على طاولة جراحية معقمة. ثم ، قم بإصلاح بطن الحيوان وأطرافه بشريط لاصق ، وقم بتطهير جلد الحيوان بمحلول البوفيدون اليود / اليودوفور. لاحظ الندوب والخيوط من جراحة ربط الأبهر الجراحية الأولية ، أو AoB ، الجراحة.

بعد ضمان عمق كاف للتخدير مع قرص إصبع القدم ، قم بإزالة الغرز من جراحة AoB الأولية. ثم قم بإجراء بضع القصبة الهوائية عن طريق إجراء شق خط منتصف عنق الرحم بطول 7 إلى 10 ملليمترات باستخدام مقص دقيق. بمساعدة زوج من الملقط الحاد ، قم بتشريح الأنسجة الرخوة لعنق الرحم لفضح العضلات تحت الحمراء.

ثم ، عن طريق تقسيم العضلات في خط الوسط ، تصور القصبة الهوائية. عند الانتهاء، قم بعمل شق في القصبة الهوائية بمليمترين بين حلقتين غضروفيتين باستخدام مقص نابض Noyes بزاوية لإدخال قنية القصبة الهوائية ذات القطر الخارجي بمقدار مليمترين في القصبة الهوائية. ثم ، قم بتأمين القنية باستخدام خياطة حريرية 4-0.

قم بتوصيل الطرف الآخر من قنية القصبة الهوائية بجهاز تنفس صناعي ميكانيكي مع الحفاظ على الحد الأدنى من المساحة الميتة. حافظ على تهوية الرئة المحيطة بالجراحة بمعدل تنفسي يبلغ 90 نفسا في الدقيقة بحجم المد والجزر البالغ 8.5 ملليلتر لكل كيلوغرام من وزن الجسم. لفك ارتباط الأبهر ، قم بعمل شق جلدي بطول 20 ملم بين الضلعين الثاني والثالث باستخدام مقص دقيق.

بمساعدة مقص جراحي أصغر ، قم بنشر العضلات وقطعها طبقة تلو الأخرى ، تليها إجراء شق جانبي 10 ملم على طول المساحة الوربية بين الضلع الثاني والثالث. استخدم موزع الأضلاع لتوسيع المسافة الوربية بين الضلع الثاني والثالث ، لإنشاء نافذة جراحية. بمساعدة ملقط حاد ، افصل الغدة الصعترية عن القلب وقناة الشرايين لتصور الشريان الأورطي باستخدام المقطع.

أمسك المشبك بمساعدة الملقط ، متبوعا بإزالة النسيج الضام حول المشبك لفضح الشريان الأورطي. افتح المشبك باستخدام حامل إبرة ، وقم بإزالة المشبك من التجويف الصدري. قبل إغلاق الصدر ، افتح انخماص الرئة وتأكد من توظيف الرئة الكافي دون الإفراط في الانتفاخ مع التهوية الميكانيكية ، مع حجم المد والجزر من 9.5 ملليلتر لكل كيلوغرام من وزن الجسم لمدة 10 دقائق ، والعودة إلى حجم المد والجزر من 8.5 ملليلتر لكل كيلوغرام من وزن الجسم.

في وقت لاحق ، أغلق العضلات العميقة عن طريق خياطة متقطعة بسيطة باستخدام 4-0 حرير ، وقم بتوصيل العضلات العلوية بخياطة مستمرة بسيطة. ثم أغلق الجلد بخياطة مستمرة بسيطة. افصل قنية القصبة الهوائية عن آلة التهوية أثناء مراقبة الفئران للتنفس التلقائي.

إذا فشل الحيوان في التنفس تلقائيا عند قطع الاتصال ، فأعد توصيل جهاز التنفس الصناعي واستمر في التهوية لمدة خمس دقائق إضافية قبل تكرار الإجراء. بعد إعادة التنفس التلقائي ، قم بإزالة القنية من القصبة الهوائية وتنظيف السائل حول القصبة الهوائية بنقاط إسفنجة. أغلق القصبة الهوائية بخياطة بسيطة باستخدام 6-0 Prolene ، وأغلق العضلات تحت الحمراء في خياطة متقطعة بسيطة باستخدام 4-0 من الحرير.

قم بتوصيل الجلد في خياطة مستمرة بسيطة ، تليها تنظيف وتطهير العضلات والجلد في هذه العملية بمحلول البوفيدون اليود / اليودوفور. بعد الانتهاء من العملية الجراحية ، انقل حيوانا واحدا إلى قفص الاسترداد مع الأكسجين التكميلي ومصباح الأشعة تحت الحمراء ، وضع قناع الأكسجين بالقرب من خطم الفئران. في الدراسة ، تم تصور موضع المقطع على الشريان الأورطي الصاعد في AoB وغيابه بعد جراحة فك العنق ، أو Deb.

أيضا ، تم تقييم تدفق الدم الأبهري عن طريق تصوير دوبلر بالموجة النبضية قبل وبعد المقطع في AoB قبل التفكك وفي الأجزاء الأبهرية المقابلة بعد جراحة Deb. أظهرت النتائج تخفيفا ملحوظا لتدرج تدفق الدم بما يتماشى مع الانحراف الوظيفي. في الأسبوع الخامس، عبرت فئران ديب عن الببتيد الناتريوتريك في الدماغ، أو BNP، بمستويات مماثلة للحيوانات الوهمية، مما يشير إلى انعكاس البطين الأيسر، أو LV، فشل عن طريق فك الوتر الأبهري.

كشف تقييم وظيفة LV بواسطة تخطيط صدى القلب عبر الصدر عن زيادة الكسر القذفي LV وحجم LV في Deb مقارنة بفئران AoB. أدت جراحة فك الانحراف التي أجريت في الأسبوع الثالث بعد AoB إلى انخفاض كبير في الضغط الانقباضي للبطين الأيسر وتضخم LV مقارنة بحيوانات AoB. بالمقارنة مع فئران AoB في الأسبوع الثالث والأسبوع الخامس ، أظهرت ديب أيضا انخفاضا كبيرا في الضغط الانقباضي البطيني الأيمن وتضخم البطين الأيمن ، مما يدل على انعكاس ناجح لارتفاع ضغط الدم الرئوي بسبب أمراض القلب اليسرى.

الخطوات الأكثر أهمية في هذا الإجراء هي إزالة المقطع وتجنيد الرئة بعد فك الأبهر. هذه الخطوات ، عند تنفيذها بشكل صحيح ، تزيد من بقاء الحيوان.