Protokolümüz, pulmoner hipertansiyonun tersine dönmesine yol açan sol kalp hastalığına bağlı pulmoner hipertansiyonun sıçan modelinde yükselen aort bandını çıkarmak için cerrahi bir prosedürü tanımlamaktadır. Bu teknik, pulmoner dolaşımda ve sağ ventrikülde fizyolojik ters yeniden yapılanma mekanizmalarını incelemek için değerli bir araç sunmaktadır. Pulmoner hipertansiyon tedavisi için stratejiler geliştirmede yardımcı olabilir.
Cerrahi aletler hazırlandıktan sonra, anestezi uygulanmış bir sıçanı sterilize edilmiş bir cerrahi masaya sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Daha sonra, hayvanın karnını ve uzuvlarını yapışkan bir bantla sabitleyin ve hayvan derisini povidon-iyot / iyodofor çözeltisi ile dezenfekte edin. Birincil cerrahi aort bandı veya AoB ameliyatından yara izleri ve dikişlere dikkat edin.
Ayak parmağını kıstırma ile yeterli anestezi derinliğini sağladıktan sonra, dikişleri birincil AoB ameliyatından çıkarın. Daha sonra, ince makasla 7 ila 10 milimetre uzunluğunda servikal orta hat kesisi yaparak trakeotomi yapın. Bir çift künt forseps yardımıyla, infrahyoid kasları açığa çıkarmak için servikal yumuşak dokuyu disseke edin.
Ardından, orta çizgideki kasları bölerek, trakeayı görselleştirin. Tamamlandığında, iki milimetre dış çaptaki trakea kanülünü trakeaya yerleştirmek için açılı Noyes yay makası kullanarak iki kıkırdaklı halka arasında iki milimetrelik bir trakea kesisi yapın. Ardından, kanülü 4-0 ipek dikişle sabitleyin.
Trakeal kanülün diğer ucunu mekanik bir ventilatöre bağlayarak ölü alanı minimumda tutun. Perioperatif akciğer ventilasyonunu, vücut ağırlığının kilogramı başına 8.5 mililitrelik bir gelgit hacminde dakikada 90 nefeslik bir solunum hızında tutun. Aort sökme için, ince makas kullanarak ikinci ve üçüncü kaburgalar arasında 20 milimetre uzunluğunda bir cilt kesisi yapın.
Daha küçük cerrahi makasların yardımıyla, kasları katman katman yaymak ve kesmek, ardından ikinci ve üçüncü kaburga arasındaki interkostal boşluk boyunca 10 milimetrelik bir yanal kesi yapmak. Cerrahi bir pencere oluşturmak için ikinci ve üçüncü kaburga arasındaki interkostal boşluğu genişletmek için bir kaburga yayıcı kullanın. Künt forseps yardımıyla, aortu klipsle görselleştirmek için timüsleri kalpten ayırın ve arterleri kanalize edin.
Forseps yardımıyla klipsi tutun, ardından aortu ortaya çıkarmak için klipsin etrafındaki bağ dokusunu çıkarın. Klipsi bir iğne tutucu ile açın ve klipsi göğüs boşluğundan çıkarın. Göğsü kapatmadan önce, akciğer atelektazisini açın ve mekanik ventilasyon ile aşırı distansiyon olmadan, 10 dakika boyunca kilogram vücut ağırlığı başına 9.5 mililitre gelgit hacmi ile yeterli akciğer alımını sağlayın ve kilogram vücut ağırlığı başına 8.5 mililitrelik bir gelgit hacmine geri dönün.
Daha sonra, derin kasları 4-0 ipek kullanarak basit bir kesilmiş dikişle kapatın ve üst kasları basit bir sürekli dikişle bağlayın. Ardından, cildi basit bir sürekli dikişle kapatın. Spontan solunum için sıçanı gözlemlerken trakea kanülünü havalandırma makinesinden ayırın.
Hayvan bağlantı kesildikten sonra kendiliğinden nefes alamazsa, ventilatörü yeniden bağlayın ve prosedürü tekrarlamadan önce beş dakika daha havalandırmaya devam edin. Spontan solunum yeniden kurulduktan sonra, kanülü trakeadan çıkarın ve trakea çevresindeki sıvıyı sünger noktalarıyla temizleyin. Trakeayı 6-0 Prolene kullanarak basit bir dikişle kapatın ve infrahyoid kasları 4-0 ipek kullanarak basit bir kesilmiş dikişle kapatın.
Cildi basit bir sürekli dikişle bağlayın, ardından povidon-iyot / iyodofor çözeltisi ile kasları ve cildi temizleyin ve dezenfekte edin. Cerrahi prosedürü tamamladıktan sonra, tek bir hayvanı ek oksijen ve kızılötesi lamba içeren bir kurtarma kafesine taşıyın ve oksijen maskesini sıçanın burnuna yakın bir yere yerleştirin. Çalışmada, klibin AoB hayvanlarında yükselen aort üzerindeki konumu ve debanding veya Deb ameliyatından sonra yokluğu görselleştirildi.
Ayrıca, aort kan akımı, debanding öncesi AoB hayvanlarında ve Deb ameliyatından sonra karşılık gelen aort segmentlerinde klip öncesi ve sonrası pulse dalga Doppler görüntüleme ile değerlendirildi. Sonuçlar, fonksiyonel debanding ile paralel olarak kan akışı gradyanının belirgin bir şekilde zayıfladığını gösterdi. Beşinci haftada, Deb sıçanları, sahte hayvanlarla karşılaştırılabilir seviyelerde beyin natriüretik peptidini veya BNP'yi eksprese ettiler ve bu da sol ventrikülün veya LV'nin tersine çevrildiğini, aort debandinginin başarısızlığını gösterdi.
Transtorasik ekokardiyografi ile LV fonksiyonunun değerlendirilmesi, Deb hayvanlarında AoB sıçanlarına kıyasla artmış LV ejeksiyon fraksiyonu ve LV hacmi olduğunu ortaya koydu. AoB'den sonraki üçüncü haftada yapılan debanding cerrahisi, AoB hayvanlarına kıyasla sol ventrikül sistolik basıncında ve LV hipertrofisinde önemli bir azalma ile sonuçlandı. Üçüncü ve beşinci haftadaki AoB sıçanlarıyla karşılaştırıldığında, Deb hayvanları ayrıca sağ ventrikül sistolik basıncında ve sağ ventrikül hipertrofisinde önemli bir azalma gösterdi ve sol kalp hastalığına bağlı pulmoner hipertansiyonun başarılı bir şekilde tersine çevrildiğini gösterdi.
Bu işlemdeki en kritik adımlar klipsin çıkarılması ve aort debandinginden sonra akciğerin alınmasıdır. Bu adımlar, doğru bir şekilde uygulandığında, hayvan hayatta kalmasını arttırır.
