تم جمع اللحاء مباشرة من النباتات لمراقبة انتقال المركبات العضوية عبر مسافات طويلة ، في حين أنه من الصعب الحصول على اللحاء من الشتلات النباتية. تم تقديم طريقة بسيطة وفعالة ، وهي تقنية الجذر المقسم ، لدراسة نقل PFAAs في النباتات ، أثناء التعرض قصير الأجل نسبيا. يمكن أن تكشف هذه الطريقة أيضا عن النقل لمسافات طويلة للمركبات المختلفة في النباتات.
يجب أن يكون التركيز المعطى ل PFAAs المستهدفة أعلى نسبيا من تركيزها في البيئة الحقيقية ، مما يضمن مراقبة PFAAs المستهدفة في القمح في محلول غير مسنن. ابدأ باختيار Triticum aestivum ذات الحجم المماثل ، أو بذور القمح ، وقم بتطهيرها لمدة 15 دقيقة بمحلول بيروكسيد الهيدروجين بنسبة 8٪. شطف جيدا البذور المطهرة بالماء منزوع الأيونات.
ضع البذور على ورق الترشيح الرطب في الظلام في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 أيام للإنبات. اختر ما يقرب من 9 شتلات نبتة ، ذات حجم موحد ، وانقلها إلى أكواب زجاجية بلاستيكية بها 250 ملليلتر من 1/4 قوة محلول Hoagland. قبل العلاج ، قم بزراعة الشتلات في غرف النمو لمدة 7 أيام مع دورة 14 ساعة عند 22 درجة مئوية ، و 10 ساعات عند 27 درجة مئوية.
لزراعة الشتلات ، قم بإعداد 2 أنبوب طرد مركزي ، A و B ، يحتوي كل منهما على 50 ملليلتر من 1/4 قوة محلول Hoagland. إذابة حمض الأوكتين المشبع بالفلور التجاري، أو PFOA، وحمض السلفونيك المشبع بالفلور أوكتين، أو PFOS، في الميثانول، وتخفيفه بمحلول المغذيات المعقم كمحلول مخزون، ثم إضافة محلول المخزون إلى الأنبوب B عند 100 ميكروغرام لكل لتر من PFOA و PFOS. بعد ذلك ، افصل الجذور الكاملة لشتلة القمح إلى 2 أجزاء متساوية باستخدام ملاقط مع الجذور المتصلة بنفس اللقطة ، ثم أدخلها في الأنابيب A و B على التوالي.
أغلق الأنبوبين بورق الألمنيوم قبل زراعتهما في حاضنة لمدة 7 أيام بدورة 14 ساعة عند 22 درجة مئوية ، و 10 ساعات عند 27 درجة مئوية. بعد 7 أيام ، اجمع شتلات القمح وافصلها إلى 3 أجزاء باستخدام المقص ، مثل البراعم والجذور المستزرعة في المحلول المسنن لأحماض البيرفلورواكيل ، أو PFAAs ، في محلول غير مسنن. قم بتجميد عينات النبات الجافة في مجفف بالتجميد عند 55 درجة مئوية تحت الصفر لمدة 48 ساعة.
بعد 2 أيام ، تجانس. وزن الجذر واطلاق النار عينات. اجمع عينات المحلول المسننة وغير المسننة.
في أنبوب بولي بروبيلين سعة 15 ملليلتر ، أضف 2 ملليلتر من محلول كربونات الصوديوم ، و 1 ملليلتر من كبريتات هيدروجين رباعي بوتيلامونيوم ، و 5 ملليلتر من ميثيل ثالثي بوتيل إيثر ، والجذر أو اللقطة المتجانسة. عند الانتهاء ، هز الأنبوب عند 250 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة ، قبل الطرد المركزي عند 2000 جم لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة للحصول على المرحلة العضوية المطهرة. بعد الاستخراج الثاني ، قم بتجميع مستخلصات المعالجة المماثلة وتبخيرها حتى تجف في تيار نيتروجين لطيف ، ثم أعد تكوينها ب 5 ملليلتر من الميثانول ودوامة لها ، مع الحفاظ على نفس السرعة لمدة 30 ثانية تقريبا.
قم بتكييف خرطوشة PestiCarb ب 5 ملليلتر من هيدروكسيد الأمونيوم 0.1٪ في الميثانول و 5 ملليلتر من الماء و 5 ملليلتر من الميثانول. أضف 5 ملليلتر من محلول استخراج الميثانول من خلال خرطوشة PestiCarb لإزالة الصبغة. تمييع خرطوشة مع 5 ملليلتر من الميثانول وجمع في أنابيب العينة.
تتبخر 10 ملليلتر التي تم جمعها من محلول الميثانول لتجف وإعادة تشكيلها مع 200 ميكرولتر من الميثانول قبل الدوامة ، ثم الطرد المركزي العينة في 10،000 غرام لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. قم بتكييف خرطوشة استخراج البوليمر المحسنة قطبيا ب 5 ملليلتر من الميثانول و 5 ملليلتر من الماء لتنشيطها. أضف 1 ملليلتر من المحلول المسنن أو 50 ملليلترا من عينات المحلول غير المسنن من خلال الخرطوشة.
استعصي على PFAAs المستهدفة ب 10 ملليلتر من الميثانول. قم بتبخير المستخلص بتيار نيتروجين لطيف ثم أعد تكوين المستخلص المتبخر ب 200 ميكرولتر من الميثانول للتحليل. بحثت تجربة الجذر المقسم في النقل لمسافات طويلة ل PFAAs في القمح.
وقد لوحظ أن جذر القمح تناول السلفونات المشبعة بالفلور أوكتين والسلفونات المشبعة بالفلور أوكتين بتركيز 11.94 نانوغرام لكل غرام و30.67 نانوغرام لكل غرام بالوزن الجاف في محلول مسنن على التوالي، ونقلتا إلى البراعم بتركيز 5.01 نانوغرام لكل غرام و4.17 نانوغرام لكل غرام بالوزن الجاف. وقد وجد أنه تم الكشف عن PFOA و PFOS في جذور القمح المستزرعة في محلول غير مسنن بتركيز 0.26 نانوجرام لكل جرام و 0.64 نانوجرام لكل جرام بالوزن الجاف على التوالي. واقترح أن سلفونات الأوكتين المشبعة بالفلور والسلفونات المشبعة بالفلور أوكتين يمكن أن تشهد انتقالا لمسافات طويلة عبر اللحاء من الساق إلى الجذر.
ولوحظ أن حمض بيرفلورو الأوكتين والسلفونات المشبعة بالفلور أوكتين موجودان أيضا في محلول المغذيات غير المسنن بتركيز 17.8 نانوغرام لكل لتر و28.5 نانوغرام لكل لتر على التوالي، مما يشير إلى أن حمض بيرفلورو أوكتين والسلفونات المشبعة بالفلور أوكتين يمكن أن يمروا عبر جذر شريط كاسباريان. يجب اتخاذ الاحتياطات اللازمة للتأكد من أن المحلول المسنن في الأنبوب B لا يلوث المحلول غير المسنن في الأنبوب A.يمكن أن يوفر العرض المرئي لهذه الطريقة عملية بسيطة للكشف عن النقل لمسافات طويلة ل PFAAs في القمح.
