في السابق ، كانت الطريقة الرئيسية لفحص تأثير المواد الكيميائية على انقباض الشرايين هي التصوير العضلي للسلك خارج الجسم الحي في حمامات الأعضاء. تكمن أهمية هذه التقنية في أنه يمكن فحص آثار المواد الكيميائية والتلاعب الجيني على جزء السفينة في الجسم الحي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن إجراء التعرض المزمن والتقييم طويل الأجل لتأثير الأدوية على انقباض الشرايين وتدفق الدم.
هذا غير ممكن في الأوعية المعزولة في حمامات الأعضاء. لبدء إضفاء الطابع الخارجي على الجنين ، تأكد من عمق التخدير الكافي في النعجة. قم بإجراء شق البطن القياسي 10 سم باستخدام شفرة مشرط رقم 20 فوق ألبا الخطي من السرة إلى الجزء الجمجمة من الضرع.
ثم قم بعمل شق صغير من خلال خط الوسط لجدار الجسم أسفل شق الجلد ، وافتح تجويف البطن باستخدام مقص Metzenbaum. قم بإخراج الرحم الذي يحتوي على الجنين من خلال جدار البطن ، مع وضع مناشف جراحية معقمة تحته بين بطن الأم والرحم. ثم جس الرحم لتحديد موضع الجنين والخيوط الذيلية.
باستخدام الكي ، قم بعمل شق 10 سم عبر جدار الرحم مع انحناء كبير فوق ظهر الرأس ، وتجنب أي أوعية دموية ومشيمة مرئية. بعد ذلك ، باستخدام أربعة مشابك بابكوك ، قم بتأمين الرحم وأغشية المشيمة ، واسحب مشابك بابكوك في الزوايا الأربع المتعارضة لجعل رأس الجنين مرئيا. قم بإخراج النصف الجحفي من الجنين من خلال هذا الشق ، وقم بتغطية الرأس بقفاز معقم غير مطاطي مملوء بمحلول ملحي معقم دافئ عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمنع بدء التنفس.
لإجراء أجهزة قسطرة الشريان السباتي حول الأوعية الدموية ، مع كشف عنق الجنين ، قم بعمل شق جلدي مائل من ثلاثة إلى 3.5 سم على طول الحدود الأمامية للعضلة القصية الترقوية الخشائية أو SCM على جانب واحد من الرقبة في المنطقة الوسطى. ثم افصل اللفافة بملقط البعوض. قسم platysma ، وتشريح على طول الحدود الإنسية لعضلة SCM من وترها بشكل متفوق ، وإلى مستوى العضلة اللامية السفلية.
تراجع الجلد مع المشابك بابكوك. إجراء تشريح حاد لتحرير الشريان السباتي من الأنسجة المحيطة وورقة السباتي. بعد ذلك ، خذ مسبار تدفق ثلاثة ملليمترات من العبوة المعقمة ، وقم بفك لوحة الدعم ، وحركها لفتحها لفضح قوس L.
باستخدام الملقط ، أغلق قوس مسبار التدفق عن طريق تحريك لوحة الدعم برفق إلى وضع مغلق. ثم قم بتأمين قوس مسبار التدفق عن طريق شد المسمار الخلفي لمسبار التدفق. ضع قسطرة محيطية بالأوعية الدموية مسبقا بالقرب من الشريان السباتي القريب من مسبار التدفق بخيط حريري 3.0 غير قابل للامتصاص.
قم بتأمين الأطوال القريبة والبعيدة للجهاز حول الأوعية الدموية ومسبار التدفق إلى النسيج الخلالي القريب. باستخدام غرزة مستمرة ، أغلق موقع الشق وجلد الجنين بخياطة 3.0 غير قابلة للامتصاص. ثبت القسطرة على الجلد عن طريق لف الخيط حول القسطرة ثلاث مرات.
بعد إزالة القفاز ، ضع رأس الجنين مرة أخرى في الرحم. لإجراء قسطرة أطراف الجنين ، قم بإخراج الساق الخلفية للجنين ، وأمسك الساق ، وقم بتدويرها جانبيا لتصور منطقة الفخذ الداخلية. بعد تنظيف المنطقة بشاش معقم ، قم بإجراء شق بطول سنتيمترين وفضح الشريان الفخذي.
ضع مسبار التدفق وقم بتأمينه كما هو موضح سابقا للسباتي ، وأغلق الشق. بعد ذلك ، قم بعمل شق بطول سنتيمترين على طول الجانب الإنسي من الساق ، حوالي 0.5 سم بعيدا عن الركبة. كشف الشريان الظنبوبي الخلفي السميك الجدران والوريد الصافن رقيق الجدران.
لإدخال قسطرة البولي فينيل ، باستخدام تقنية القطع القياسية ، قم بتحرير الوعاء المثير للاهتمام بتشريح حاد. ثم اربط الجزء البعيد من الوعاء بخياطة حريرية 3.0 ، وبدون إبرة ، باستخدام عقدة مربعة بثلاث رميات. ضع ربطة عنق ثانية خالية من الحرير في الجانب القريب من الوعاء ، لكن اترك الرباط غير مقيد.
باستخدام مقص Castroviejo ، قم بعمل قطع عرضي صغير في الوعاء ملليمترين بالقرب من الرباط البعيد. قم بتقييد تدفق الدم في الوعاء الدموي عن طريق سحب الخيط القريب غير المربوط برفق. ثم املأ القسطرة بمحلول ملحي معقم بالهيبارين.
أدخل الطرف المشطوف للقسطرة ، وادفع الطرف 20 سم في وعاء الجنين. ثبت القسطرة في مكانها بالملقط بينما يقوم المساعد بربط خيط ربطة العنق الحريرية القريبة لتثبيت الوعاء بالقسطرة. اربط الوعاء بالكامل حول القسطرة المدخلة باستخدام عقدة مربعة على بعد مليمترين من موقع الإدخال بثلاث رميات.
ثم اربط الرباط البعيد القريب بربطة العنق القريبة ، وقم بتأمين الوعاء بالقسطرة. أغلق شق الجلد باستخدام خياطة 3.0 غير قابلة للامتصاص ، باستخدام نمط مستمر. تأكد من ربط الغرز حول القسطرة لتجنب تقييد تدفق الدم إذا تم سحبها.
ضع قسطرة متدفقة مسبقا في الرحم ، وقم بتثبيتها على الجنين عن طريق خياطة باستخدام خياطة 3.0 غير قابلة للامتصاص. ضع الجنين مرة أخرى في الرحم. خيط أغشية الجنين باستخدام 3.0 خيوط غير قابلة للامتصاص بنمط قفل مستمر ، ثم أغلق الطبقة العضلية الرحمية باستخدام خياطة 3.0 غير قابلة للامتصاص.
أدخل قضيبا جراحيا من الفولاذ المقاوم للصدأ مقاس 18 بوصة تحت الجلد على طول جدار البطن حتى المنطقة الطفيلية. قم بتوصيل القسطرة بالطرف البعيد للقضيب الجراحي ، مع وجود مساعد لتغذية القسطرة وكابل مسبار التدفق عبر موقع الخروج الطفيلي عن طريق دفع القضيب بالكامل من خلال الفتحة الطفيلية. بعد ذلك ، قم بتأمين جميع القسطرة وكابلات مسبار التدفق في موقع الشق الطفيلي.
بعد وضع الشريط المقاوم للماء ، قم بخياطة القسطرة على جلد النعجة. قم بخياطة كيس شبكي بلاستيكي إلى الجزء الخارجي من النعجة فوق القسطرة والتحقيق لتخزين القسطرة. باستخدام مادة خياطة اصطناعية قابلة للامتصاص 1.0 أحادية الشعيرات ، قم بتأمين خط ألبا بنمط مستمر ، وقم بتأمين طبقة الجلد بدبابيس جراحية.
لقياس تدفق الدم ، قم بتوصيل مجسات التدفق التي تم إدخالها في الجنين باستخدام وحدة التدفق حول الأوعية الدموية ب PowerLab وجهاز كمبيوتر مرفق. قم بتوصيل القسطرة الشريانية والأمنيوسية بمضخم الجسر المتصل بمحول تناظري إلى رقمي. تطبيق بلعة ملليلتر واحدة من 10 ميكرومولار فينيليفرين للجنين عن طريق الوريد، وقياس التدفق السباتي والفخذي لمدة 15 دقيقة.
ثم انتظر لمدة 30 دقيقة ، أو حتى يعود تدفق الدم إلى خط الأساس. بعد ذلك ، قم ببث ملليلتر واحد من 10 ميكرومولار فينيليفرين في القسطرة المحيطة بالأوعية الدموية ، وقياس تدفق الدم لمدة 15 دقيقة. اغسل فينيليفرين عن طريق إعطاء خمسة ملليلتر من المحلول الملحي الدافئ من خلال القسطرة المحيطة بالأوعية.
ثم انتظر لمدة 30 دقيقة ، أو حتى يعود تدفق الدم إلى خط الأساس. فحصت هذه الدراسة الآثار الموضعية للتلاعب بتدفق الدم في الأجنة والأغنام على المدى القريب والخدج. عند إعطاء ملليلتر واحد من 10 ميكرومولار فينيليفرين ، ناهض ألفا -1 AR ، في الفضاء حول الأوعية الدموية للشريان السباتي ، لوحظ انخفاض كبير في تدفق الدم السباتي في كل من الأغنام الجنينية على المدى القريب والجنين الخدج دون أي تأثير على ضغط الدم النظامي.
على العكس من ذلك ، تسبب إعطاء فينيليفرين عن طريق الوريد في زيادة كبيرة في تدفق الدم النظامي في كل من الأغنام الجنينية على المدى القريب والجنين الخديج دون التأثير على تدفق الدم السباتي. كشفت النتائج أن الأجنة الخدج لا تستجيب لتنظيم تدفق الدم السباتي بوساطة فينيليفرين ، ومع ذلك ، فإن الاستجابة ناضجة في الأجنة على المدى القريب. والجدير بالذكر أن إعطاء فينيليفرين عن طريق الوريد زاد من تدفق الدم السباتي فقط في الأجنة الخدج ، مع عدم وجود تأثير كبير في الأجنة على المدى القريب.
ومع ذلك ، فإن إعطاء فينيليفرين عن طريق الوريد رفع ضغط الدم النظامي في كل من الأجنة الخدج وعلى المدى القريب. تظهر النتائج أيضا أن التركيب حول الأوعية الدموية للفينيليفرين لم يؤثر على ضغط الدم النظامي. يجب توخي أقصى درجات الحذر أثناء إجراء تشريح حاد لتحديد الأوعية وضربها لإدخال الطرف المشطوف للقسطرة.
يجب أن يكون الشق صغيرا وتجنب قطع الوعاء بأكمله. يمكن لهذه الطريقة قياس انقباض الأوعية الدموية وتدفق الدم لأي وعاء. كما يمكن استخدامه لتوصيل المواد الكيميائية والنواقل بالقرب من محيط العضو أو الأنسجة المراد استهدافها.
يمكن استخدام هذه التقنية لتحديد التغيرات في التنظيم الذاتي لتدفق الدم الدماغي في الرحم في الجنين النامي ، واستهداف أي جين لتنظيم أو إسكات النسخ.
