이전에는 화학 물질이 동맥 수축력에 미치는 영향을 조사하는 주요 방법은 장기 목욕에서 생체 외 와이어 근 조영술이었습니다. 이 기술의 의의는 생체 내에서 혈관 세그먼트에 대한 화학 물질 및 유전자 조작의 영향을 조사할 수 있다는 것입니다. 이 기술의 주요 장점은 동맥 수축 및 혈류에 대한 약물의 만성 노출 및 장기 평가를 수행 할 수 있다는 것입니다.
이것은 장기 목욕의 고립된 혈관에서는 불가능합니다. 태아의 외부화를 시작하려면 암양에게 적절한 마취 깊이를 확보하십시오. 배꼽에서 유방의 두개골 부분까지 선형 알바 위에 숫자 20 메스 날을 사용하여 10cm 표준 개복술 절개를 수행합니다.
그런 다음 피부 절개 아래 체벽의 정중선을 통해 작은 절개를 하고 Metzenbaum 가위를 사용하여 복강을 엽니다. 복벽을 통해 태아가 있는 자궁을 외부로 내보내고, 산모의 복부와 자궁 사이에는 멸균 수술용 수건을 깔아줍니다. 그런 다음 자궁을 촉진하여 태아의 위치와 꼬리 유도를 결정합니다.
소작기를 사용하여 혈관과 태반이 보이지 않도록 머리 등쪽에 큰 곡률로 자궁벽을 10cm 절개합니다. 다음으로 4개의 Babcock 클램프로 자궁과 태반막을 고정하고 반대쪽 모서리 4개에서 Babcock 클램프를 당겨 태아의 머리가 보이도록 합니다. 이 절개를 통해 태아의 두개골 절반을 바깥쪽으로 만들고 호흡이 시작되지 않도록 섭씨 37도의 따뜻한 멸균 식염수로 채워진 멸균 비라텍스 장갑으로 머리를 덮습니다.
태아의 목이 노출된 상태에서 경동맥 혈관 주위 카테터를 삽입하기 위해 목 중간 부위의 한쪽 흉쇄유돌기 또는 SCM 근육의 전방 경계를 따라 3-3.5cm의 비스듬한 피부를 절개합니다. 그런 다음 모기 집게로 근막을 분리하십시오. platysma를 나누고 SCM 근육의 내측 경계를 따라 힘줄에서 상부하고 하부로 오모설근 수준까지 절개합니다.
Babcock cl로 피부를 집어넣으십시오.amps. 둔한 절제술을 시행하여 주변 조직과 경동맥 시트에서 경동맥을 제거합니다. 그런 다음 멸균 팩에서 3mm 유량 프로브를 꺼내 백킹 플레이트의 나사를 풀고 밀어 열어 L 브래킷을 노출시킵니다.
집게를 사용하여 백킹 플레이트를 닫힌 위치로 부드럽게 밀어 흐름 프로브 브래킷을 닫습니다. 그런 다음 유량 프로브의 백킹 나사를 조여 유량 프로브 브래킷을 고정합니다. 3.0 비흡수성 실크 봉합사를 사용하여 플로우 프로브에 근접한 경동맥 근처에 미리 세척된 혈관 주위 카테터를 놓습니다.
혈관 주위 시스템의 근위 및 원위 길이와 유동 프로브를 근처의 간질 조직에 고정합니다. 연속 봉합을 사용하여 절개 부위와 태아 피부를 3.0 비흡수성 봉합사로 봉합합니다. 카테터 주위에 봉합사를 세 번 감아 카테터를 피부에 고정합니다.
장갑을 벗은 후 태아의 머리를 다시 자궁에 넣습니다. 태아 사지 카테터 삽입을 시행하려면 태아의 뒷다리를 바깥쪽으로 만들고 다리를 잡고 옆으로 돌려 허벅지 안쪽 부위를 시각화합니다. 멸균 거즈로 해당 부위를 청소한 후 2cm 절개를 하고 대퇴 동맥을 노출시킵니다.
경동맥에 대해 이전에 설명한 대로 Flow 프로브를 배치하고 고정하고 절개 부위를 닫습니다. 다음으로 무릎 원위부에서 약 0.5cm 떨어진 경골의 내측을 따라 2cm를 절개합니다. 두꺼운 벽의 후경골 동맥과 얇은 벽의 복재정맥을 노출시킵니다.
폴리비닐 카테터를 삽입하려면 표준 절단 기술을 사용하여 둔한 해부로 관심 혈관을 해제합니다. 그런 다음 3.0 실크 봉합사로 혈관의 말단 부분을 결찰하고 바늘 없이 세 번 던지는 사각형 매듭을 사용합니다. 두 번째 실크 프리 넥타이를 혈관의 근위부에 미리 배치하되 합자는 풀지 않은 상태로 두십시오.
Castroviejo 가위를 사용하여 원위 합자에 근접한 2mm 떨어진 혈관을 가로 방향으로 작게 자릅니다. 근위부의 풀린 봉합사를 부드럽게 잡아당겨 혈관 혈류를 제한합니다. 그런 다음 카테터를 멸균 헤파린 처리 식염수로 채웁니다.
카테터의 비스듬한 끝을 삽입하고 팁을 태아의 혈관 안으로 20cm 전진시킵니다. 보조자가 근위 실크 프리 타이 봉합사를 묶어 혈관을 카테터에 고정하는 동안 겸자로 카테터를 제자리에 고정합니다. 삽입 부위에서 2mm 떨어진 정사각형 매듭을 사용하여 삽입된 카테터 주위에 혈관을 완전히 결찰합니다.
그런 다음 근위 원위 결찰을 근위 넥타이에 묶어 혈관을 카테터에 고정합니다. 연속 패턴을 사용하여 3.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 피부 절개 부위를 봉합합니다. 봉합사가 카테터 주위에 묶여 있는지 확인하여 당겨질 경우 혈류가 제한되지 않도록 합니다.
미리 세척된 카테터를 자궁에 삽입하고 3.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 봉합사로 태아에 고정합니다. 태아를 다시 자궁에 넣는다. 연속 잠금 패턴의 3.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 태아막을 봉합한 다음 3.0 비흡수성 봉합사를 사용하여 자궁 근육층을 봉합합니다.
18인치 스테인리스 스틸 수술용 막대를 복벽을 따라 늑골 주위 부위까지 피하로 삽입합니다. 카테터를 수술용 막대의 말단 끝에 부착하고 보조자가 막대를 늑골 주위 개구부를 통해 막대를 완전히 밀어 넣어 카테터와 흐름 프로브 케이블을 늑골 주위 출구 부위를 통해 공급하도록 합니다. 그런 다음 모든 카테터와 플로우 프로브 케이블을 주위 늑골 절개 부위에 고정합니다.
방수 테이프를 붙인 후 카테터를 암양의 피부에 봉합합니다. 플라스틱 메쉬 파우치를 암양 외부에 봉합하여 카테터와 프로브를 보관합니다. 1.0 모노필라멘트 합성 흡수성 봉합사 재료를 사용하여 linea alba를 연속 패턴으로 고정하고 수술용 스테이플로 피부층을 고정합니다.
혈류를 측정하려면 혈관 주위 유동 모듈과 함께 태아에 삽입된 유동 프로브를 PowerLab과 연결된 컴퓨터에 부착합니다. 동맥 및 양수 카테터를 아날로그-디지털 변환기에 부착된 브리지 증폭기에 부착합니다. 10마이크로몰 페닐에프린 1밀리리터를 태아에게 정맥 주사하고 15분 동안 경동맥 및 대퇴골 흐름을 측정합니다.
그런 다음 30분 동안 또는 혈류가 기준선으로 돌아올 때까지 기다립니다. 다음으로, 10 마이크로몰 페닐에프린 1밀리리터를 혈관 주위 카테터에 주입하고 15분 동안 혈류를 측정합니다. 혈관 주위 카테터를 통해 5ml의 따뜻한 식염수를 투여하여 페닐에프린을 씻어냅니다.
그런 다음 30분 동안 또는 혈류가 기준선으로 돌아올 때까지 기다립니다. 이 연구는 단기 및 조산 태아와 양에서 혈류 조작의 국소적 효과를 조사했습니다. 알파-1 AR 작용제인 10마이크로몰 페닐에프린 1밀리리터를 경동맥의 혈관 주위 공간에 투여한 결과, 전신 혈압에 영향을 미치지 않으면서 만삭 양과 조산 태아 모두에서 경동맥 혈류가 크게 감소하는 것이 관찰되었습니다.
반대로, 페닐에프린을 정맥 주사하면 경동맥 혈류에 영향을 미치지 않으면서 단기 태아 양과 조산 태아 모두에서 전신 혈류가 크게 증가했습니다. 그 결과, 조산아의 경우 페닐에프린 매개 경동맥 혈류 조절에 반응하지 않는 것으로 나타났지만, 단기 태아의 경우 반응이 성숙한 것으로 나타났다. 특히, 페닐에프린의 정맥 투여는 미숙아 태아에서만 경동맥 혈류를 증가시켰으며, 단기 태아에서는 유의미한 효과가 없었다.
그러나 페닐에프린의 정맥 투여는 조산아와 단기 태아 모두의 전신 혈압을 높였다. 결과는 또한 페닐에프린의 혈관 주위 설치가 전신 혈압에 영향을 미치지 않는다는 것을 보여줍니다. 혈관을 식별하기 위해 뭉툭한 절개를 수행하고 카테터의 비스듬한 끝을 삽입하기 위해 흠집을 내는 동안 최대한의 주의를 기울여야 합니다.
흠집은 작아야 하며 전체 용기를 자르지 않아야 합니다. 이 방법은 모든 혈관의 혈관 수축도와 혈류량을 측정할 수 있습니다. 또한 표적이 될 장기 또는 조직의 근처에 화학 물질과 벡터를 전달하는 데 사용할 수 있습니다.
이 기술은 발달 중인 태아의 자궁 내 대뇌 혈류 자가조절의 변화를 결정하고 전사를 상향 조절하거나 침묵시키는 모든 유전자를 표적으로 삼는 데 사용할 수 있습니다.