هناك حاجة إلى طرق وراثية في الجسم الحي لدراسة الوظيفة البيولوجية للجينات في الأنواع الاستوائية المعمرة ومحاصيل الأشجار البستانية. ومع ذلك ، فإن العديد من هذه الأنواع متمردة على التحول في كل جيل. نطاق هذا البحث هو تطوير طريقة تحول وراثي بسيطة وفعالة تنطبق على النباتات كبيرة الحجم.
سأوضح الأشياء. أصبح التحول الجيني بوساطة Agrobacterium للنباتات التي يصعب تسللها إلى الأنسجة ممكنا عن طريق التسلل القسري باستخدام مضخة تفريغ. ومع ذلك ، فإن البروتوكولات المستخدمة حاليا تقتصر على النباتات الصغيرة الحجم بسبب القيود المادية والاقتصادية لتقديم النباتات كبيرة الحجم إلى غرفة مفرغة.
يمنع حجم غرف التفريغ ، التي عادة ما تكون مجففات مختبرية ، تسلل الفراغ للنباتات الكبيرة جدا بحيث لا تتناسب مع المجففات ، كما هو الحال في النباتات الخشبية الاستوائية. لقد طورنا بروتوكولا للتسلل الفراغي الموضعي الفعال للنباتات الخشبية الاستوائية ، مما يجعل دراسات التحول الوراثي في الجسم الحي لأنواع النباتات الكبيرة ممكنة. سمح لنا هذا البروتوكول بالتغلب على قيود حجم النبات للتسلل الفراغي بوساطة Agrobacterium في محاصيل الأشجار البستانية مثل الكاكاو والأفوكادو.
يمكن إجراء التحويل بوساطة Agrobacterium للأوراق المرفقة عن طريق التسلل الفراغي الموضعي بطريقة سريعة ومباشرة وفعالة من حيث التكلفة من قبل المختبرات التي تستخدم بالفعل تسلل الفراغ ، حيث يمكن استخدام نفس المضخة ووعاء التفريغ دون الحاجة إلى إضافة معدات مكلفة.