Вакуум-принудительная агроинфильтрация для трансформации in planta непокорных растений: какао как тематическое исследование

Генетические методы in vivo необходимы для изучения биологической функции генов тропических многолетних видов и садовых древесных культур. Тем не менее, многие из этих видов не поддаются трансформации в каждом поколении. Целью данного исследования является разработка простого и эффективного метода генетической трансформации, применимого к крупным растениям.

Я проиллюстрирую эти вещи. Опосредованная агробактериями генетическая трансформация растений с трудноинфильтрируемыми тканями стала возможной благодаря принудительной инфильтрации с помощью вакуумного насоса. Однако используемые в настоящее время протоколы ограничены малогабаритными установками из-за физических и экономических ограничений, связанных с помещением крупногабаритных установок в вакуумную камеру.

Размер вакуумных камер, которые обычно представляют собой лабораторные экссикаторы, предотвращает проникновение в вакуум растений, которые слишком велики, чтобы поместиться в эксикаторы, как в случае с тропическими древесными растениями. Мы разработали протокол эффективной локализованной вакуумной инфильтрации тропических древесных растений, что делает возможными исследования генетической трансформации in vivo крупных видов растений. Этот протокол позволил нам преодолеть ограничения по размеру растений для опосредованной агробактериями вакуумной инфильтрации в садовых древесных культурах, таких как какао и авокадо.

Трансформация прикрепленных листьев путем локализованной вакуумной инфильтрации без использования тканевых культур может быть выполнена быстро, просто и экономически эффективным способом в лабораториях, которые уже используют вакуумную инфильтрацию, поскольку один и тот же насос и вакуумный сосуд могут быть использованы без необходимости добавления дорогостоящего оборудования.