需要体内遗传方法来研究热带多年生物种和园艺树木作物中基因的生物学功能。然而,这些物种中的许多物种在每一代中都顽固地进行改造。本研究的范围是开发一种适用于大型植物的简单有效的遗传转化方法。
我会说明这些事情。农杆菌介导的难以浸润组织的植物的遗传转化是通过使用真空泵强制浸润实现的。然而,由于将大型工厂提交真空室的物理和经济限制,目前使用的协议仅限于小型工厂。
真空室的尺寸通常是实验室干燥器,可以防止太大而无法放入干燥器的植物的真空渗透,就像热带木本植物一样。我们开发了一种对热带木本植物进行高效局部真空浸润的方案,使大型植物物种的体内遗传转化研究成为可能。该协议使我们能够克服可可和鳄梨等园艺树木作物中农杆菌介导的真空浸润的植物大小限制。
已经使用真空浸润的实验室可以快速、直接且具有成本效益的方式通过局部真空浸润对附着的叶片进行无组织培养农杆菌介导的转化,因为可以使用相同的泵和真空容器,而无需添加昂贵的设备。