قياس طول ذيل بولي أ من دماغ يرقة ذبابة الفاكهة وخط الخلية

Polyadenylation هو تعديل ما بعد النسخ. وهذا يضيف ذيول بولي-أ إلى الطرف ثلاثي الأعداد الأولية لجزيئات mRNA . ارتبط عدم تنظيم polyadenylation بالتعبير الجيني غير الطبيعي والأمراض المختلفة ، بما في ذلك الاضطرابات العصبية.

توفر طريقتنا تحليلا عالي الدقة وفعالا من حيث التكلفة لقياس أطوال poly-A. توفر الطرق عالية الإنتاجية لتحليل ذيل poly-A ، مثل تسلسل الجيل التالي ، والتسلسل عالي الإنتاجية معلومات عالية المحتوى. ومع ذلك ، يمكن أن يكون تحليل النصوص النادرة أمرا صعبا للغاية باستخدام هذه الأساليب.

عادة ما تكون الطرق القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل منخفضة الإنتاجية. ومع ذلك ، يمكن استخدامها بسهولة لتحليل عدد صغير من النصوص. طريقة GI-tailing هي واحدة منهم.

باستخدام هذه الطريقة ، اكتشفنا أن Dscam mRNAs تحتوي على ذيول بولي أ قصيرة. Dscam هو جزيء التصاق الخلايا العصبية. وتشارك في العديد من عمليات النمو العصبي الهامة.

نظرا لأن Dscam mRNA يحتوي على ذيول poly-A قصيرة على عكس معظم mRNAs ، فإن ترجمة Dscam mRNA تخضع لتنظيم جيني فريد ، وهو أحد الأسئلة التي نحاول الإجابة عليها.