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坏死性小肠结肠炎 (NEC) 是最严重的胃肠道 (GI) 疾病,常发生于早产儿,尤其是出生体重极低的婴儿,死亡率高且发病机制不明。NEC的病因可能与炎症性免疫调节系统异常有关。NEC动物模型是NEC疾病免疫研究不可或缺的工具。NEC动物模型通常使用C57BL / 6J新生小鼠;BALB / c新生小鼠很少使用。相关研究表明,当小鼠被感染时,与C57BL / 6J小鼠相比,BalB / c小鼠的Th2细胞分化占主导地位。研究表明,NEC的发生和发展与T辅助2型(Th2)细胞的增加有关,并且通常伴有感染。因此,本研究使用新生BALB / c小鼠诱导NEC模型,其临床特征和肠道病理变化与NEC患儿相似的NEC模型。需要进一步的研究来确定该动物模型是否可用于研究NEC中的Th2细胞反应。
坏死性小肠结肠炎 (NEC) 是最严重的胃肠道 (GI) 疾病,常发生于早产儿,尤其是出生体重极低的婴儿,死亡率高且发病机制不明。NEC的病因可能与炎症性免疫调节系统异常有关。NEC动物模型是NEC疾病免疫研究不可或缺的工具。NEC动物模型通常使用C57BL / 6J新生小鼠;BALB / c新生小鼠很少使用。相关研究表明,当小鼠被感染时,与C57BL / 6J小鼠相比,BalB / c小鼠的Th2细胞分化占主导地位。研究表明,NEC的发生和发展与T辅助2型(Th2)细胞的增加有关,并且通常伴有感染。因此,本研究使用新生BALB / c小鼠诱导NEC模型,其临床特征和肠道病理变化与NEC患儿相似的NEC模型。需要进一步的研究来确定该动物模型是否可用于研究NEC中的Th2细胞反应。
坏死性小肠结肠炎 (NEC) 是最严重的胃肠道 (GI) 疾病,见于大多数早产儿 (>90%),尤其是出生体重极低 (VLBW) 的早产儿 1。在VLBW婴儿中,该疾病的发病率范围为10%至12%,被诊断患有NEC的儿童的死亡率在20%至30%之间2,3。NEC的病因可能与黏膜损伤、致病菌侵袭和肠道进食有关,可导致易感宿主出现炎症反应和肠道损伤诱导3。NEC的发病机制尚不清楚。相关研究表明,患儿的免疫反应异常,遗传易感性、微血管张力、肠道细菌变化可能在疾病中发挥重要作用3。
NEC动物模型是NEC发病机制研究不可或缺的工具。用于NEC模型的动物种类是猪,大鼠和小鼠。然而,由于妊娠期长、生长周期长、成本高,近年来,猪一直不是NEC模型的首选,已被大鼠或小鼠取代4。由于不同小鼠品系的免疫背景存在差异5,不同的研究需要使用不同的小鼠品系来建立NEC动物模型。BALB / C小鼠具有重要特征;当它们被感染或应对外部损伤时,小鼠感染期间TH2细胞的极化明显强于其他小鼠品系6,7,8。T辅助细胞在NEC的发生和进展中起着至关重要的作用,特别是TH2细胞的发育3,9,10,11。因此,本研究使用BALB/ c小鼠建立了NEC模型,这可能对T细胞的NEC疾病研究有所帮助。
本研究获得广州市妇女儿童医学中心医学伦理委员会(编号:174A01)和广州恒源生物科学实验动物中心动物伦理委员会(IACUC-G160100)的批准。所有动物都在同一房间内在特定的无病原体(SPF)环境中繁殖,并在常规环境中进行实验。用于繁殖的小鼠年龄为7-8周龄;第4天将诱导NEC(n = 72)的小鼠与大坝分离,将大坝(n = 14)保存在原始笼中并护理对照(Cont.)组小鼠(n = 24)。
1. 试剂和设备的制备
2.诱导新生儿BALB / c小鼠坏死性小肠结肠炎
3. 加瓦老鼠
4. 收集新鲜肠道组织标本进行苏木精和曙红(H&E)染色
BALB/c小鼠NEC模型由配方奶粉喂养、LPS喂养、缺氧和冷刺激诱导。在诱导期间,观察小鼠的肠道病理学,粪便特征,体重变化和每日生存率。NEC诱导期间小肠的代表性图像;图片中的数字表示肠道病理学评分从0(正常上皮)到4(最严重)(图3A)。NEC组的肠道病理学评分显著高于Cont.组(图3B)。图片中的数字表示从0(形成良好的颗粒)到3(液体粪便)?...
NEC是新生儿最常见的胃肠道系统急症,发病率和死亡率高,尤其是早产儿1,2,3。然而,其发病机制尚不清楚。目前认为,黏膜损伤、病原体侵袭和肠内喂养是 NEC3 的高危因素。迄今为止,用于NEC模型的动物主要是猪,大鼠和小鼠。大多数研究使用新生儿C57BL / 6小鼠诱导NEC13,
作者没有利益冲突需要披露。
作者感谢广州市妇幼医学中心临床生物资源库提供的临床样本,感谢广州恒源生物科学实验动物中心提供的小鼠。本研究得到了中国国家自然科学基金81770510(R.Z.)的支持。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Absolute ethanol | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 100092683 | |
Goat Milk powder | Petag | 71795558417 | |
HE dye solution | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | G1003 | |
Isoflurane | RWD, Shenzhen Reward Life Technology Co., LTD. | R510 | |
LPS | Sigma-Adrich | L2880 | |
Medical oxygen | various | various | |
Microscope | NIKON | NIKON imaging system (DS-Ri2) | |
Neutral resin | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 10004160 | |
Paraffin | various | various | |
Premature baby milk powder | Abbott | 57430 | |
Xylene | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 10023418 | |
1% Hydrochloric acid | various | various | |
10% Formalin | LEAGENE | DF0110 |
An erratum was issued for: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis. The Representative Results section was updated.
Figure 1 was updated from:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
to:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
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