1.土壤样品制备

1. 首先，确定土壤初始含水量由隔夜的已知量的潮湿的土壤中，干燥和硬仗土壤干。方程来确定土壤初始含水量是:
   
   （方程 1）
   地点:
   MC = 水分含量
   W = 净重量
   D = 干重
2. 计算的金额必须添加到 25 克的土壤，增加土壤含水量对干体重的基础上 10%的水。
3. 接下来，添加大量水 25 克的土壤。
4. 用塑料包装容器上盖上和穿刺影片用探针允许曝气孵化期间几次。安全膜用橡胶带。
5. 衡量土壤和包装，然后样品在室温下孵育一周。

2.真菌接种与培养

1. 完成孵化后，衡量土壤样品的包装与橡皮筋。计算的重量损失水分流失。
2. 计算新的土壤水分含量。
3. 接下来，准备 1/10-稀释系列的土壤如图 2所示。这将导致稀释 10^-1 （瓶 A）、 10^-2 （管 B）、 10^-3 （管 C），10^-4 （D 管），10^-5 （管 E） g 土壤每毫升悬浮液。
4. 准备不育玫瑰孟加拉-链霉素琼脂平板。孟加拉和链霉素抑制细菌的生长。对于非常肥沃的土壤，土壤微生物数量很高，空房的稀释应更高，即10^-310^-4，，10^-5，g 土壤每板。
5. 每个 10^-3在琼脂表面使用乙醇火焰蔓延灭菌玻璃吊具、 板，从稀释管 10^-2，添加 0.1 毫升。因为 0.1 毫升数量镀金，这使得有效稀释 10^-3。对于所有稀释重复这些步骤。
6. 板在室温下孵育一周。

3.菌落计数及显微镜检查

1. 每个土壤稀释，且仅有一个采用使菌落计数。计数板应该有谨慎的可数名词殖民地。杂草丛生的板不应计算在内。同样，不应算板与小于 10 的殖民地。注意到并描述三种不同的殖民地的文化特征。
2. 在幻灯片上的压胶带 （透明胶带） 坐骑准备详细的显微镜研究使用下面的过程:
   1. 存一滴 lactophenol 安装流体在干净的玻璃幻灯片的中心
   2. 切一条透明的玻璃纸胶带约 3 厘米长从股票卷。为了避免污染表面胶时处理磁带, 使用产钳。夹层的针，将有助于释放钳从磁带。
   3. 胶带粘面应用于表面的培养真菌菌落。要避免过度的压力，在磁带或太黑压压的菌丝和孢子将收集。
   4. 从接触真菌菌落中取出磁带，并应用它粘贴一侧下来，滴在玻片上安装流体。用快递气泡光滑、 平坦文书轻轻摩擦的磁带。
   5. 用油检查镜下油浸物镜的磁带装载。
   6. 确定两个不同的真菌属使用提供的真菌鉴定键 (图 4)。

图 4。真菌鉴定的关键。