培养和枚举从土壤样品的细菌

Overview

资料来源: 实验室的博士伊恩胡椒和博士查尔斯称-亚利桑那大学
演示作者: 布拉德利施密茨和路易莎 Ikner

表层土壤是的拼在一起就形成二次聚合的无机和有机颗粒均匀的混合物。内和骨料之间的空隙或视觉上包含两个的毛孔空气和水。这些条件创建一个理想的生态系统为细菌,所以所有土壤都包含了数量庞大的细菌,通常超过 100 万每克土壤。

细菌是最简单的微生物,称为原核生物。在原核该组内有丝状微生物称为放线菌。放线菌是实际上的细菌,但他们经常被认为是一个独特的群体内的细菌分类由于其丝状的结构,组成的多个单元格,向窗体菌丝串在一起。本实验使用甘油案例媒体选择为放线菌的殖民地,在稀释和电镀。通常情况下,放线菌的细菌总人口的大约 10%。细菌和放线菌发现在每个环境中在地球上,但这些微生物在土壤中的多样性和丰富是无与伦比。这些微生物,对人类生活和什么人吃、 喝、 呼吸,或触摸的影响至关重要。此外,还有细菌物种可以感染人并导致疾病,还有细菌能产生能治病的天然产品。放线菌是产生抗生素,如链霉素的尤为重要。细菌是养分循环、 植物生长和有机污染物的降解的关键。

细菌是物种的高度多样化可以找到在土壤中,部分因为他们生理和代谢功能多样数目。细菌可以是异养,意思他们利用有机的化合物,如葡萄糖、 食品和能源,或自养,意思他们利用无机化合物,如元素硫,对食品和能源。它们也可以是有氧,利用氧气呼吸,或厌氧,利用相结合形式的氧气,如硝酸或硫酸,能够自由呼吸。某些细菌可以使用氧气或组合形式的氧和被称为兼性厌氧菌。

Procedure

1.土壤稀释液的制备

  1. 开始执行程序,称出 10 克的土壤样本,并将添加到 95 mL 的去离子水。摇匀,暂停和"A"的标签。
  2. 土壤落定之前,删除 1 mL 悬浮液与不育吸管和移交 9 mL 去离子的水的空白。涡彻底,和作为"B"的标签。
  3. 重复此稀释步骤三次,每次 1 毫升的前悬架和 9 毫升与去离子水空白。标签这些顺序作为管 C、 D 和 e。这将导致 10-1 10-5克每毫升土壤通过系列稀释

2.制作传播细菌培养板

  1. 生长菌落,他们为 C、 D 和 E.涡样本 C、 D 和 E 和吸管 0.1 毫升装每个盘子里拿三个预先准备好的蛋白胨酵母琼脂板,标签。这增加了十倍稀释值进一步,(C = 10-3,D = 10-4,E = 10-5)。
  2. 接下来,将玻璃吊具蘸乙醇。将摊铺机放在火焰的几秒钟,点燃并烧掉乙醇。这将消毒吊具。
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Results

一份 10 g 样品的土壤和水分含量为 20%干体重的基础上分析了通过稀释和电镀技术可行可培养细菌。稀释了如表 1所示。1 毫升的解决方案 E 是倒镀到适当的介质上,结果在 200 细菌菌落。

Equation 1

但是,潮湿的土壤,10g

Equation 2

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Application and Summary

有两个基本应用程序的稀释和电镀的土壤细菌。第一个应用程序是可培养细菌内一种特殊土的枚举。定量测定的土壤细菌数量说明土壤健康。例如,如果有 106至 108可培养细菌目前每克土壤,这将被认为健康的数量。A 数少于 106每克指示土壤健康状况差,可能是由于缺乏营养作为发现低有机质土壤;非生物胁迫征收极端土壤 pH 值 (pH < 5 或 > 8);或征收有机或无机的汇的?...

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