1.土壤稀释液的制备

1. 开始执行程序，称出 10 克的土壤样本，并将添加到 95 mL 的去离子水。摇匀，暂停和"A"的标签。
2. 土壤落定之前，删除 1 mL 悬浮液与不育吸管和移交 9 mL 去离子的水的空白。涡彻底，和作为"B"的标签。
3. 重复此稀释步骤三次，每次 1 毫升的前悬架和 9 毫升与去离子水空白。标签这些顺序作为管 C、 D 和 e。这将导致 10^-1 10^-5克每毫升土壤通过系列稀释

2.制作传播细菌培养板

1. 生长菌落，他们为 C、 D 和 E.涡样本 C、 D 和 E 和吸管 0.1 毫升装每个盘子里拿三个预先准备好的蛋白胨酵母琼脂板，标签。这增加了十倍稀释值进一步，(C = 10^-3，D = 10^-4，E = 10^-5)。
2. 接下来，将玻璃吊具蘸乙醇。将摊铺机放在火焰的几秒钟，点燃并烧掉乙醇。这将消毒吊具。
3. 按住上面第一板吊具，直到熄灭的火焰。打开板快，持有由合上的盖子。触摸到从接种琼脂吊具 (接种 = 细胞用于开始文化) 冷却，和然后传播滴接种在琼脂表面附近，直到游离液体的痕迹消失。更换板盖。
4. 重新火焰吊具和重复此过程下, 一板，迅速工作，以免弄脏与机载有机体琼脂
5. 细菌板在室温下孵育 1 周。请确保板孵化，防止水分从堕琼脂表面结露滴期间被倒置。

3.使扩散板的放线菌

1. 成长放线菌，把事先准备好的甘油-酪蛋白三个盘子，并贴上标签为 B，C，和 D.采用前面所示的技术扩散板 0.1 毫升从悬浮物 B、 C 和 d。低稀释使用因为放线菌是通常存在作为细菌群体的 1/10^th (B = 10^-2，C = 10^-3，D = 10^-4)。
2. 孵育放线菌板 （倒） 在室温下为 2 周。

4.细菌和放线菌计数

1. 经过孵化，所有细菌板仔细检查，并注意在蚁群的规模和形状的差异。当在琼脂上生长，细菌能产生粘糊糊的殖民地，从无色到明亮的橙色、 黄色或粉红色。相比之下，放线菌菌落垩白、 坚定，革质，并将打破在压力下，在那里其他细菌菌落将涂片。这允许殖民地通过触摸与不育的循环变化加以区别。
2. 点算并记录的细菌菌落，包括任何放线菌数量。只能算 30-200 殖民地每板板。

5.纯文化的隔离

1. 从任何板块选择单个菌落。如果土壤特别感兴趣，可以选择更多的殖民地。使用高稀释板，因为它往往会有很好分离的纯殖民地。选择从邻近的殖民地是分离良好和看形态有别于彼此的殖民地。
2. 通过浸在酒精和燃烧了消毒循环。快速打开培养皿的兴趣，并触摸到光秃的斑点，在琼脂培养基中使它冷却回路。然后，删除少量的殖民地上的循环利息。
3. 以新鲜的蛋白胨酵母板，使条纹几厘米长的一边。消毒和晾凉再一次，然后使仅在第一遍十字架的初始连胜的条纹。重复此过程以同样的方式两次更多。这个裸奔的"稀释"结果回路分开另一个单元格中。将盘子放在黑暗的地方，在室温下孵育两个星期。