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总脂提取物与柱层析纯化

Overview

资料来源: 实验室的杰夫卡普-马萨诸塞大学阿默斯特

有机溶剂萃取,总脂提取物 (TLE) 产品经常是几百,如果不是,数千种不同化合物的复杂混合物。研究员是往往只对感兴趣的化合物少数。感兴趣的化合物可能属于一个几个类的化合物,如烷烃、 酮、 醇或酸 (图 1),并且它可能有用来移除它并不属于为了获得清晰的视野,你感兴趣的化合物的复合类。例如,TLE 可能包含 1000 种化合物,但 Uk'37海表面温度代理基于只有两个化合物 (条件) 和 TEX86海表面温度代理基于只有四个 (甘油二烷基甘油 tetraethers)。它会理应研究员删除尽可能多的化合物也不感兴趣。这使得感兴趣 (条件或 GDGTs) 不太可能用其他外来化合物复杂的化合物的仪器分析方法。

在其他情况下,上游净化技术可能产生您希望现在删除从羧酸产皂化在我们以前的视频,样品的化合物。在两种以上情况称为柱层析净化技术是非常有用的。

Figure 1
图 1。地球化学重要的官能团。从 Killops 和 Killops1

Procedure

1.安装程序和材料的制备

  1. 获得总脂提取物 (TLE) 用溶剂萃取法 (超声、 索氏提取或加速溶剂萃取 (ASE))。
  2. 收集以下: 燃烧高硼硅玻璃吸液管和灯泡、 硅胶、 正己烷、 二氯甲烷 (DCM) 和甲醇。
    1. 这些材料可以从任何化学的零售商购买。试剂应该是纯洁的没有从碳氢化合物。
  3. 此外获得燃烧玻璃棉和 4 毫升高硼硅玻璃小瓶。
  4. 一定要支持的列和收集瓶过程中的一种手段。例如,站立好,夹和卑鄙的机架。许多实验室设计了定制架包含几个列和收集瓶 (图 2)。这使得许多列在同一时间运行。

2.方法

  1. 开始与干样品 4 毫升瓶中。如果样品重量超过 ~ 10 毫克,干燥时,它可能需要在执行下一步,因为硅胶可以只反应与有限大量有机物质之前剥离。
  2. 用少量的正己烷暂停样品。这是第一次,至少极地的三种溶剂用于这个实验。
  3. 如果样品粘在小瓶内,超声波几样品为 5 分钟。

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Results

这种净化技术产生三个不同的小瓶,每个都包含不同的复合类或一组复合类。任何样本分析仪器的复杂性已大大下降。此过程还将删除的化合物,如酸产生皂化,这实际上可以坚持到零件的各项文书,因为其低的波动,将会减少其准确性,精度和寿命。

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Application and Summary

脂肪酮和 isoprenoidal GDGTs 都是很常见的海洋沉积物成分和可以遍布世界的海洋。脂肪酮被越来越多地发现湖泊沉积物中的虽然负责他们生产的生物比不同于海洋中,因此美国和中国之间的关系k'37比和水温度 (校准) 是不同的从海洋和甚至之间单独的湖泊。Isoprenoidal GDGTs 发现在一些大的湖泊和就像条件,往往需要一个本地的校准。

脂肪酮和我们感兴趣的 GDGTs ...

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References

Killops, S. and Killops, V. Introduction to Organic Geochemistry. Blackwell Publishing, Malden, MA (2005).

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Overview

1:05

Principles of Column Chromatography

3:06

Silica Gel Column and Sample Preparation

4:30

Silica Gel Column Chromatography

6:22

Applications

8:52

Summary

此集合中的视频:

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