非侵入性 ACL 伤害

1. 穿戴适当的个人防护设备。您可以使用呼吸面罩，但此协议不是强制性的。
2. 使用具有 5% 无氧和 1 L/min 氧气的感应室对大鼠进行麻醉。使用鼻锥维持麻醉的流量，鼻锥体为 1 - 3% 的异常胶和 500 mL/min 的氧气。如果未在背拔或下拔表上设置设备，请确保使用桌面系统和木炭过滤器清除废气。
3. 进行脚趾捏，以确保已经达到足够的麻醉深度。请注意，无需使用眼润滑剂，协议执行迅速（< 3 分钟），角膜干燥的风险最小。
4. 将右后肢置于30°的多西弯曲和100°的膝关节弯曲处，同时为骨质骨相对于股骨的前次压度提供空间。
5. 将顶部膝部级牢固地安装到线性执行器上。
6. 将弯曲的膝盖放在底部，该膝盖直接安装在称重传感器的正上方。
7. 以 8 mm/s 的速度使用单负载的 tibial 压缩来诱导 ACL 损伤。
8. ACL 损伤通过释放压缩力来表示。这通过自定义程序进行监视。
9. 受伤后，当动物仍在麻醉平面下时，执行拉赫曼的测试，以临床上确认ACL破裂已经发生。Lachman 的测试是一种临床测试，用于通过评估下垂计划稳定性来评估 ACL 的完整性。稳定股骨时，向前拉股骨（在前部方向）以评估运动量。完整的ACL将产生一个"牢固的最终感觉"，研究人员将无法向前翻译tibia。受伤的 ACL 会产生"软或模糊末端感觉"，指示 ACL 撕裂。
10. 拍打股骨和头骨，以检测任何严重的骨损伤。如果没有发现禁忌症，将动物转移到笼子里，让它恢复。在此期间，监测动物，以确保它不显示任何疼痛的迹象，如不愿移动，发声，或异常姿态。

关节退化的CT成像

二维图像是使用70kV的扫描仪设置，电流85.5μA（图2B）获得的。每 0.6° 旋转步骤以 11.5 μm 的分辨率通过完整的 180° 收集数据。横截面图像使用平滑的反向投影算法和重建图像堆栈（图2C）进行重建。然后在软件中通过分割分析镜面结构，其中 1.53 mm 球体位于中侧表层和侧叶和股骨的表层中，以确定镜面厚度 （μm）、眼膜分离 （μm） 和镜面数 （1/mm）。^5，6

1. 在ACL受伤后4周，在诱导室中长时间接触_CO2对大鼠实施安乐死。
2. 在自定义 3D 打印设备中扩展和保护 ACL 受伤的后肢 （图 2A）。
3. 使用 _CT 获取图像。
4. 获取正面平面放射成像仪以确定关节空间。缩小（在股骨结节和骨质高原之间[以毫米测量]）相比，非受伤的肢体。
5. 使用以下扫描仪设置获取二维图像：70 kV 和电流 85.5 μA。
6. 以 11.5 μm 的像素大小每 0.6° 旋转步骤收集数据，通过完整的 180°。
7. 使用平滑的背投影算法在重建图像堆栈上重建横截面图像。
8. 为确保测量一致的兴趣区域，在中叶和侧叶高原和股骨的表层板中放置一个1.53 mm球体，以确定眼皮厚度（μm）、眼膜分离（μm）和眼数（1/mm）。

图 2：A） 定制打印设备，用于在 +CT、B） 二维图像和 C） 三维 _CT 期间保存后肢。