1。解决方案和材料的制备这些步骤应该进行提前几天。 <ol><li>盖玻片。盖玻片清洗浸泡10分钟到一个解决方案Linbro 7X清洁剂：水混合1：3的比例和加热，搅拌，直到明确。盖玻片被广泛冲洗去离子水，然后在450℃烘烤6小时。装入陶瓷染色架盖玻片（见试剂）简化了这个过程。 </li><li>蛋白质溶液冲压。重组纤维连接蛋白的1 mg / ml浓度的原液制造商的说明。 </li></ol> 2。从拓扑主演员邮票这些步骤可以进行提前几天。商店邮票图案在有盖菜，如组织培养皿。 <ol><li>使用压缩，过滤空气或惰性气体流，删除主浮尘。 </li><li>广场主图案的一面，在一个塑料盘仅比主底部。 60 - 100毫米组织培养皿非常适合用于这一目的。 </li><li>聚苯乙烯50 mL离心管，在固化剂的比例结合Sylgard组件：1：10的橡胶基地重量。调匀使用塑料的设备，如一次性吸管。准备好至少0.2毫升弹性体每平方厘米的菜面积。 </li><li> 300 G 50毫升管离心5分钟，以去除气泡。 </li><li>倒在主的弹性，然后放置在干燥器中，在真空条件下，30分钟。 </li><li>烘箱中固化在65℃至少2个小时的弹性。固化在更高的温度和更长的时间，结果更严厉的弹性。让冷却到室温。 </li><li>从主分离的邮票纸。 </li></ol> 3。微接触印刷到玻璃纤维连接蛋白<ol><li>切出单枚邮票。邮票测量4毫米x 4毫米至1厘米× 1厘米，面积1 - 2毫米厚的最简单的开始。广场图案的一面，在玻片上或小塑料盘。 </li><li>放置在等离子体清洁和过程的邮票，在真空条件下，30秒。一个科学Harrick等离子清洗器（设备），其最高输出设置渲染的PDMS表面的亲水性。更长的时间，在弹性体开裂。 </li><li>用去离子水稀释到一个冲压浓度为50微克/毫升的纤维连接蛋白的解决方案。 </li><li>将一小滴（10 - 50μL）冲压邮票上的解决方案。将分散在亲水表面。只添加足够的解决方案，下降涵盖了邮票，但不超过边缘运行。让蛋白质吸附邮票5分钟。 </li><li>使用Kimwipe ®或其他清洁纸巾，灯芯从邮票大部分蛋白质溶​​液，而不触及图案的区域。 </li><li>下一个清洁，干燥，惰性气体，如氮，流干从邮票的解决方案。 </li><li>使用镊子，取出载玻片邮票，反转，并在清洗玻璃盖玻片（表面图案）接触的地方。放置在顶部的重量，以促进良好的接触。具体的重量，提供了最好的图案是邮票大小和图案的依赖;开始用5克重，和调整之间的冲压件。离开邮票与表面1分钟接触。 </li><li>仔细拆解堆栈，并从盖玻片单独的邮票。 </li><li>大力漂洗，去离子水，在PBS图案盖玻片删除不被吸附到表面的蛋白质，是。干盖玻片下氮气流。 </li></ol>代表性的成果微接触印刷是表面上的图案分子的强大的过程。这个过程有能力创造，从几十微米到几百纳米的尺寸不等的功能;图。 1A，在左边的标志是每200微米的高度，而绿色的点如图所示。 1B是直径在1微米，间距4微米的间隔，测量中心到中心。图1B也说明了微接触印刷的强大属性，即它是和添加剂的过程。微接触印刷的多轮可用于创建一个表面多组分体系 3 。 <img src="/files/ftp_upload/old/1065_2008_11_24_3/Figure_a.jpg" alt="图A" /><img src="/files/ftp_upload/old/1065_2008_11_24_4/FIGURE_B.jpg" alt="图B" />

<ol>
	<li>Chen, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geometric+control+of+cell+life+and+death.">Geometric control of cell life and death.</a> Science. 276, 1425-1425 (1997).</li><li>Kumar, A., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Features+of+Gold+Having+Micrometer+to+Centimeter+Dimensions+can+be+Formed+Through+a+Combination+of+Stamping+with+an+Elastomeric+Stamp+and+an+Alkanethiol+"Ink"+Followed+by+Chemical+Etching.">Features of Gold Having Micrometer to Centimeter Dimensions can be Formed Through a Combination of Stamping with an Elastomeric Stamp and an Alkanethiol "Ink" Followed by Chemical Etching.</a> Applied Physics Letters. 63, 4-4 (1993).</li><li>St. John, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preferential+Glial+Cell+Attachment+to+Microcontact-printed+Surfaces.">Preferential Glial Cell Attachment to Microcontact-printed Surfaces.</a> Journal of Neuroscience Methods. 75, 171-171 (1997).</li><li>Kam, L., Boxer, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+adhesion+to+protein-micropatterned-supported+lipid+bilayer+membranes.">Cell adhesion to protein-micropatterned-supported lipid bilayer membranes.</a> Journal of Biomedical Materials Research. 55, 487-487 (2001).</li><li>Kung, L. A., Kam, L., Hovis, J. S., Boxer, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterning+Hybrid+Surfaces+of+Proteins+and+Supported+Lipid+Bilayers.">Patterning Hybrid Surfaces of Proteins and Supported Lipid Bilayers.</a> Langmuir. 16, 6773-6773 (2000).</li><li>Shen, K., Thomas, V. K., Dustin, M. L., Kam, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micropatterning+of+costimulatory+ligands+enhances+CD4++T+cell+function.">Micropatterning of costimulatory ligands enhances CD4+ T cell function.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 7791-7791 (2008).</li><li>Shi, P., Shen, K., Kam, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+presentation+of+L1+and+N-cadherin+in+multicomponent,+microscale+patterns+differentially+direct+neuron+function+in+vitro.">Local presentation of L1 and N-cadherin in multicomponent, microscale patterns differentially direct neuron function in vitro.</a> Developmental Neurobiology. 67, 1765-1765 (2007).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

微接触印刷过程的概念很简单，非常强大的，已被应用于各种基材上的广泛的分子图案。然而，这个过程仍然是一门艺术的东西。创建，该模式的具体几何图案的蛋白质，适用于重量，和涂料/冲压条件都影响冲压件的质量。例如，过小，重量轻，适用于大的特点，往往在模式中的正确的标志在图上可以看到差距的结果。 1A。相反，过多的重量会导致下垂和邮票的崩溃，造成意想不到的沉积蛋白质在图案之间的地...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Plasma Cleaner</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harrick Scientific Products, Inc.</td>
<td>PDC-32G</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Desiccator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nalgene</td>
<td>5315-0150</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10010-072</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Protein labeling kit</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A30006</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fibronectin </td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>F2006</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Staining rack</td>
<td>Reagent</td>
<td>Thomas Scientific</td>
<td>8542E40</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Coverslips</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>12-544-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sylgard 184</td>
<td>Reagent</td>
<td>Ellsworth Adhesives</td>
<td>184 Sil Elast Kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Diffraction Grating</td>
<td>Reagent</td>
<td>Edmund Scientific</td>
<td>3040267</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

microcontact printing of proteins for cell biology

模式到基板的蛋白质和其他生物大分子的能力是非常重要的捕捉外环境的空间复杂性。微接触印刷的发展怀特赛德斯组（<a href="http://gmwgroup.harvard.edu/"&gt; http://gmwgroup.harvard.edu/</a&gt;）在20世纪90年代中期revolutionalized这​​一领域，微电子/微细加工技术，生命科学重点​​实验室访问。这种方法的初步实现，用于聚二甲基硅氧烷（PDMS）邮票上创建材料表面的功能化化学品模式<sup&gt; 1</sup&gt;。从那时起，已经开发了一系列创新的方法模式的其他分子，包括蛋白质<sup&gt; 2</sup&gt;。这个视频演示的创造的PDMS邮票的基本过程和使用模式的蛋白质，这些步骤是很难准确地用言语表达。我们专注于盖玻片作为一个具体的例子，图案到细胞外基质蛋白纤维连接蛋白图案。微接触印刷过程中的一个重要组成部分，是拓扑的主，从投邮票;主的升高和降低的地区，都反映到邮票，并确定最终的模式。通常情况下，主涂层与光致抗蚀剂，然后通过光刻图案硅片组成，都是在这里完成。包含一个特定的模式创建的主人，需要专门的设备，最好是在与一个制造中心或设施咨询走近。然而，几乎任何与拓扑结构的基板可以被用来作为一个高手，如塑料光栅（见一个例子试剂），和这样的偶然的主人提供现成的，简单的模式。该协议开始掌握在手的点。

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Microcontact Printing of Proteins for Cell Biology

微接触印刷被广泛使用模式的蛋白质和其他分子在材料表面。我们展示这一过程的基本步骤，冲压到玻璃纤维连接蛋白的模式。

微接触印刷的蛋白细胞生物学

The ability to pattern proteins and other biomolecules onto substrates is important for capturing the spatial complexity of the extracellular environment. ...

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19.9K 次观看.  Columbia University. 微接触印刷被广泛使用模式的蛋白质和其他分子在材料表面。我们展示这一过程的基本步骤，冲压到玻璃纤维连接蛋白的模式。