Quantitative Measurement of Epithelial Barrier Integrity and Confluency of 2D Bovine Ileal Enteroid-Derived Monolayer

首先，从培养箱中取出含有2D牛回肠肠单层的Transwell培养板。让板在室温下在生物安全柜中平衡几分钟。确保 STX2 电极已按照制造商的说明进行预处理，并且伏欧姆表已校准至 1000 欧姆。

将探针的较长端插入基底外侧隔室，将较短的一端插入Transwell上皮细胞培养物的顶端隔室。在设置稳定后，对每个 Transwell 插入物进行三次跨上皮电阻测量，包括没有细胞的插入物。计算每个相应刀片的测量值的平均值。

从实验孔中减去空白孔的平均测量值，然后将其乘以插入物的表面积，以确定上皮屏障的阻力。在不到一周的培养中观察到融合的 2D 单层。TEER 测量结果显示，该值在 7 天内稳步增加，然后在第 12 天下降。

染色的 2D 单层的共聚焦显微镜显示 DAPI 核染色、E-钙粘蛋白和 F-肌动蛋白染色的定位。这些细胞似乎与肠内分泌细胞、潘氏细胞和肠细胞谱系分化。单层的顶端刺激导致细胞因子产生增加。