农药处理的胡萝卜愈伤组织化学提取以评估农药代谢物的细胞毒性

首先，将每个冻干、经农药处理的胡萝卜胼胝样品的磨粉 0.2 克与 3 毫升乙腈混合在 10 毫升离心管中。涡旋离心管 8 分钟，然后以 150 瓦和 40 kHz 的功率对其进行超声处理 5 分钟。接下来，将试管在 8， 000G 和 4 摄氏度下离心 10 分钟，然后通过移液收集上清液。

使用 40 摄氏度的氮气吹制浓缩器，将混合的提取物浓缩至干燥。将提取物的残留物重新溶解在含有 0.3% DMSO 的一毫升 DMEM 中，以产生农药代谢物暴露溶液。以类似的方式，重新溶解从空白胼胝样品中获得的提取物残留物。

在一毫升 DMEM 中，含有 0.3% DMSO。然后，将含有空白样品残留溶液的不同试管中使用的每种农药各 1 毫克溶解，以产生明显的农药暴露溶液。