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03:26 min
March 8th, 2024
DOI :
10.3791/202019-v
副本
首先,佩戴适当的个人防护装备。手术前,给大鼠称重以确定基于体重的药物和呼吸机设置的正确剂量。麻醉大鼠后,将大鼠置于俯卧位。
要确认麻醉深度,请使用镊子轻轻按压后肢脚垫并检查是否有戒断反应。现在将兽医认可的石油基软膏涂抹在大鼠的眼睛上,以防止干燥。观察呼吸频率并评估戒断反应,如前所述。
然后用剪刀剃掉老鼠的后肢。使用胶带定位肢体,踝关节背屈 90 度,膝关节伸展,髋关节外展。然后,插入一对绝缘的 28 号单极针,用于刺激坐骨神经,阴极位于后肢近端区域,阳极位于皮下组织内更近端,覆盖骶骨。
然后将一次性接地电极放在对侧后肢或尾部。小心地将专为单纤维肌电图设计的 27 号、25 毫米高压灭菌器针状电极插入右侧腓肠肌。将单纤维肌电图针状电极与腓肠肌纤维平行插入,以捕获单纤维动作电位。
以 10 赫兹的频率对右侧坐骨神经施加恒流刺激,强度范围为 0.3 至 10 毫安,脉冲持续时间为 0.1 毫秒。将增益从每格 200 微伏调整到 1000 微伏,以增强电位的可视化。将扫描速度配置为每格 500 微秒。
要将响应归类为 SFAP,它必须表现出短于 500 微秒的上升时间、200 微伏的最小振幅,并表现出全或无行为。使用给定的方程计算至少 50 次刺激后连续放电之间 SFAP 潜伏期的抖动或变化。评估和量化阻塞。
在评估了每只动物的 10 个突触后,计算抖动并确定每只动物的平均值。当记录显示间歇性阻滞的电位时,增加刺激强度以确认 SFAP 失败不是由于次最大刺激引起的。在罗库溴铵给药期间,与健康个体相比,单纤维 EMG 显示传输和神经肌肉接头阻滞的变异性增加。
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啮齿动物的 SFEMG:评估 NMJ 在健康和疾病中的功能
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