这项工作是由美国国立卫生研究院资助的支持K08 NS061039-01A2，神经学研究发现，和A.阿尔弗雷德·陶布曼医学研究所在密歇根大学的计划。这项工作用了密歇根州的糖尿病研究和培训中心，由国家卫生部授予5P90 DK-20572研究院从国家糖尿病，消化道和肾脏疾病研究所资助的形态和图像分析核心。笔者想感谢罗宾逊的Singleton和戈登史密斯（犹他州大学）的慷慨捐款支持初始伤害性的生物标志物免疫组化技术的发展，人类皮肤样本。

A部分：免疫组化 96 - 孔板的下游和预防的背景染色打孔皮肤活检从人类受试者收集孵育12-24小时，在固定液（用0.75M的L-赖氨酸溶液（pH7.4）中的2％的多聚甲醛和0.05 mM的高碘酸钠）在4℃下，如前面所述。样本，然后cryoprotected的在磷酸盐缓冲盐水（PBS），在4℃的20％甘油1周，嵌入安装媒体最佳的切削温度（OCT），然后划分成50微米厚的部分在低温恒温器中。下面描述的协议，是专为8内的皮肤，皮肤切片的最大数量未能经过自由浮动的免疫组化实验在一个96 - 孔板。 第1天： 1。防止非特异性免疫反应的角质层<ol><li>出版商96 -孔板，如在图1中示出。 </lI&gt; <li>图像IT FX信号（图像），有效阻断背景染色11,12，第1行中的96孔板，每孔加入150μl。 </li><li>行2和3的96 - 孔板中，在每孔中加入150μl的PBS洗涤。 </li><li>收购两项每名患者的50微米的部分：一节从DL活检，活检采取PT的一个部分。接种环（LeLoop）是用来传输从一个部分到下一个冲洗，以避免形态破坏。轻轻将每50微米的部分，用接种环，进入个人的第1行，包含图像。孵育30分钟，在RT上平坦的摇臂部分在图像。 </li><li>冲洗部分用1X PBS（行2和3）的两倍，在RT下10分钟。将漂洗之间的一台摇臂孔板。 </li></ol> 2。 5％BSA封闭液和1％的清​​洗液的制备<ol><li>虽然活检切片图像IT孵化，准备5％封闭的解决方案重刑（5％BSA，0.3％TX-100，0.1 M的PBS涡BSA解决方案，直到完全溶解）。 </li><li>进入第4行每口井的5％BSA封闭液加入150μl。 </li><li>用接种环，部分转移到个别井的5％BSA封闭液。为1-2小时，在RT下孵育5％牛血清白蛋白封闭溶液中的部分，在平坦的摇臂。 </li></ol> 3。 1％BSA冲洗液和稀释初级抗体的制备<ol><li>虽然部分5％BSA封闭溶液中孵育，制备1％冲洗液（1％BSA，0.3％TX-100，0.1M PBS涡的BSA溶液，直至完全溶解）。 </li><li>虽然部分5％BSA封闭溶液中孵育，稀释第一抗体在1％漂洗液。 <ol><li>对于八个部分（8×150微升= 1200微升）共1,200微升是必要的。第一抗体是由在1500微升（约20％的额外体积）。 </li><li>稀释的主要抗体：PGP，1:500; TRKÅ，1:500在含1％BSA的冲洗液。 </li></ol></li></ol> 4。孵化的切片活检小学抗体<ol><li>到指定的96 - 孔板的孔中（第5行），加入150μl稀释的第一抗体。 </li><li>传输部分从封锁5％的溶液（第4行）到指定的初级抗体井（第5行）。 </li><li>用封口膜和铝箔密封的96 - 孔板，以避免干燥和曝光灯。 </li><li>一台摇臂上，孵育96孔板O / N在4℃。 </li></ol>第2天： 5。在1％BSA的冲洗液冲洗穿刺活检<ol><li>到第6行中的各孔，7，和8中，加入150μl含1％BSA的冲洗液。 </li><li>冲洗部分三次，用1％BSA（行6，7，和8），在RT 1小时，每次冲洗液。盖孔板铝箔和冲洗平面之间的摇杆。 </li></ol> 6。稀释二级抗体 &lt;醇&gt; <li>当章节被培养在含1％BSA的冲洗液在最后一次漂洗（第8行），1％BSA的冲洗液中稀释的二抗： <ol><li>对于八个部分（8×150微升= 1200微升）共1,200微升是必要的。该次级抗体是由在1500微升（约20％的额外体积）。 </li><li>的二级抗体稀释：PGP（的Alexa Fluor 488驴抗兔1:250），蒂尔克的Alexa Fluor 647驴抗山羊，1:250），A（1％BSA冲洗液中。 </li></ol></li></ol> 7。孵化的切片活检中学抗体<ol><li>到他们的指定的96 - 孔板的孔中（行9）加入150μl稀释的二级抗体。 </li><li>从1％BSA封闭溶液（第8行），在进入第二抗体以及（9行）传输部分。 </li><li>用封口膜和铝箔密封的96 - 孔板，以避免干燥和曝光灯。 </li><li>孵育部分在指定的二级抗体Ø/ N在4°C一台摇臂上。 </li></ol> 8。在1％BSA的冲洗液冲洗穿刺活检<ol><li>加入150μl含1％BSA的冲洗液到每口井的行10，11，和12。 </li><li>冲洗部分三次，用1％BSA漂洗溶液（行10，11，和12），在RT每次1小时。盖以及用铝箔板和一台摇臂之间冲洗。 </li></ol> 9。显微镜玻片制备和安装切片活检<ol><li>虽然活检切片孵育1％BSA冲洗液（第12行）在最后一次漂洗时，准备显微镜幻灯片。 </li><li>将50μl的1％BSA漂洗溶液一次一张幻灯片上。 </li><li>删除部分从1％BSA的冲洗液（第12行），并将其放置在1％BSA漂洗指定的显微镜载片上的解决办法，将50μl滴。优化部分的位置后，用鼓起的玻璃吸管，去除多余的1％BSA冲洗液，采取预防措施以避免触及标本。 </li></ol> 注意：请确保部分不折叠;，试样应反对表面的显微镜幻灯片持平。 <ol start="4"><li>将1滴延长Gold抗淬灭试剂用DAPI附近的活检安装在显微镜幻灯片。一个22x22毫米显微镜的盖玻片，轻轻把它放在活检和一滴延长Gold抗淬灭试剂DAPI下降。重复的每个部分。 </li><li>让显微镜玻片干燥RT在黑暗O / N。 </li></ol> 注：删除任何气泡，用枪头。擦去多余的延长黄金抗淬灭剂。 B部分：共聚焦成像 10。共聚焦成像<ol><li>荧光图像信号采用奥林巴斯FluoView的500激光扫描共聚焦显微镜40X的油浸目标和变焦两次与FluoView 5.0版软件（1.3 NA）。 </LI&gt; <li>使用的Alexa Fluor 488和647的Alexa Fluor 543-nm的绿色氦氖激光和633 nm的氦氖红色激光，分别以激发。的Alexa Fluor 488的信号表示由绿色的查找表（LUT）的Alexa Fluor 647由红色LUT。 </li><li>每个检测器的共焦的孔设置在400微米，以提高信号。应采取循序扫描，分辨率为1024×1024，以最大限度地提高信号分离。 </li><li>使用1.2μm的z轴步进间隔（基于计算由FluoView软件的最佳扫描单元）与卡尔曼的平均（两帧）捕获三维的z系列。 </li></ol> C部分：三维可视化与动画 11。三维（3D）的可视化和动画<ol><li> Imaris里X64软件（版本7.3，位平面AG）打开Fluoview文件，以可视化的三维图像集。 </li><li>调整显示根据需要，以提高特定的神经信号的对比度。 </li><li>创建一个SUrface可视化真皮表皮边界。使用轮廓工具绘制模式绘制边界。 </li><li>分配一个半透明的表面的边界，以便查看相关的荧光信号。 </li><li>捕获静止图像的3D荧光信号来创建快照映像的3D电影。 </li><li>使用动画功能来创建一个3D的电影。图像可以360度旋转几次，以显示每个信号分开和合并后的（ 图2，图3，和4）。设置动画创建由每秒15帧200帧动画电影。作为一个原始的AVI文件保存每部电影。 </li><li>压缩最终的AVI电影的VirtualDub软件（版本1.9.4）。 </li></ol>

<ol>
	<li>Lauria, G., Holland, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+innervation:+changes+with+aging,+topographic+location,+and+in+sensory+neuropathy.">Epidermal innervation: changes with aging, topographic location, and in sensory neuropathy.</a> J. Neurol. Sci. 164 (2), 172-178 (1999).</li><li>Sullivan, K. A., Hayes, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+diabetic+neuropathy.">Mouse models of diabetic neuropathy.</a> Neurobiol. Dis. 28 (3), 276-285 (2007).</li><li>McArthur, J. C., Stocks, E. A., Hauer, P., Cornblath, D. R., Griffin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+nerve+fiber+density:+normative+reference+range+and+diagnostic+efficiency.">Epidermal nerve fiber density: normative reference range and diagnostic efficiency.</a> Arch. Neurol. 55 (12), 1513-1520 (1998).</li><li>Griffin, J. W., McArthur, J. C., Polydefkis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cutaneous+innervation+by+skin+biopsies.">Assessment of cutaneous innervation by skin biopsies.</a> Curr. Opin. Neurol. 14 (5), 655-659 (2001).</li><li>Cheng, H. T., Dauch, J. R., Hayes, J. M., Yanik, B. M., Feldman, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+growth+factor/p38+signaling+increases+intraepidermal+nerve+fiber+densities+in+painful+neuropathy+of+type+2+diabetes.">Nerve growth factor/p38 signaling increases intraepidermal nerve fiber densities in painful neuropathy of type 2 diabetes.</a> Neurobiol. Dis. 45 (1), 280-287 (2012).</li><li>Lauria, G., Lombardi, R., Camozzi, F., Devigili, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+biopsy+for+the+diagnosis+of+peripheral+neuropathy.">Skin biopsy for the diagnosis of peripheral neuropathy.</a> Histopathology. 54 (3), 273-285 (2009).</li><li>Vlckova-Moravcova, E., Bednarik, J., Dusek, L., Toyka, K. V., Sommer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+validity+of+epidermal+nerve+fiber+densities+in+painful+sensory+neuropathies.">Diagnostic validity of epidermal nerve fiber densities in painful sensory neuropathies.</a> Muscle Nerve. 37 (1), 50-60 (2008).</li><li>Casanova-Molla, J., Morales, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+fluorescence+quantitation+provides+a+new+approach+to+assess+cutaneous+innervation.">Axonal fluorescence quantitation provides a new approach to assess cutaneous innervation.</a> J. Neurosci. Methods. 200 (2), 190-198 (2011).</li><li>Wang, L., Hilliges, M., Jernberg, T., Wiegleb-Edstrom, D., Johansson, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+gene+product+9.5-immunoreactive+nerve+fibres+and+cells+in+human+skin.">Protein gene product 9.5-immunoreactive nerve fibres and cells in human skin.</a> Cell Tissue Res. 261 (1), 25-33 (1990).</li><li>Lauria, G., Morbin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+capsaicin+receptor+immunoreactivity+in+human+peripheral+nervous+system+and+in+painful+neuropathies.">Expression of capsaicin receptor immunoreactivity in human peripheral nervous system and in painful neuropathies.</a> J. Peripher. Nerv. Syst. 11 (3), 262-271 (2006).</li><li>Penna, G., Fibbi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+benign+prostatic+hyperplasia+stromal+cells+as+inducers+and+targets+of+chronic+immuno-mediated+inflammation.">Human benign prostatic hyperplasia stromal cells as inducers and targets of chronic immuno-mediated inflammation.</a> J. Immunol. 182 (7), 4056-4064 (2009).</li><li>Lentz, S. I., Edwards, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+DNA+(mtDNA)+Biogenesis:+Visualization+and+Duel+Incorporation+of+BrdU+and+EdU+Into+Newly+Synthesized+mtDNA+In+Vitro.">Mitochondrial DNA (mtDNA) Biogenesis: Visualization and Duel Incorporation of BrdU and EdU Into Newly Synthesized mtDNA In Vitro.</a> J. Histochem. Cytochem. 58 (2), 207-218 (2010).</li><li>Polydefkis, M., Hauer, P., Griffin, J. W., McArthur, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+biopsy+as+a+tool+to+assess+distal+small+fiber+innervation+in+diabetic+neuropathy.">Skin biopsy as a tool to assess distal small fiber innervation in diabetic neuropathy.</a> Diabetes Technol. Ther. 3 (1), 23-28 (2001).</li><li>Lauria, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+fibre+neuropathies.">Small fibre neuropathies.</a> Curr. Opin. Neurol. 18 (5), 591-597 (2005).</li><li>Sorensen, L., Molyneaux, L., Yue, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+among+pain,+sensory+loss,+and+small+nerve+fibers+in+diabetes.">The relationship among pain, sensory loss, and small nerve fibers in diabetes.</a> Diabetes Care. 29 (4), 883-887 (2006).</li><li>Lauria, G., Morbin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+swellings+predict+the+degeneration+of+epidermal+nerve+fibers+in+painful+neuropathies.">Axonal swellings predict the degeneration of epidermal nerve fibers in painful neuropathies.</a> Neurology. 61 (5), 631-636 (2003).</li><li>Herrmann, D. N., McDermott, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+nerve+fiber+density,+axonal+swellings+and+QST+as+predictors+of+HIV+distal+sensory+neuropathy.">Epidermal nerve fiber density, axonal swellings and QST as predictors of HIV distal sensory neuropathy.</a> Muscle Nerve. 29 (3), 420-427 (2004).</li><li>Navarro, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+27:+Neural+plasticity+after+nerve+injury+and+regeneration.">Chapter 27: Neural plasticity after nerve injury and regeneration.</a> Int. Rev. Neurobiol. 87, 483-505 (2009).</li></ol>

没有利益冲突的声明。

测量IENFD已被广泛用于周围神经病变13,14的程度来决定。目前，最常用的协议仅用于测量神经纤维的密度，穿透基底膜的表皮，它并没有考虑到轴突分枝和/或神经的形态变化。此外，还没有被证明电流IENFD分析与疼痛的存在PN 15相关联IENFD的。 我们以前报道，都与在db / db小鼠的疼痛行为，2型糖尿病的小鼠模型增加的痛觉IENFD的数字。在该报告中，我们首先采用?...

目前，通常的做法是从皮肤打孔活检，可用于诊断小纤维神经病6-8医师量化表皮内神经纤维密度，（IENFD）。活检取自小腿远端（DL），10厘米以上外踝，和大腿近端（PT），20厘米以下的髂前上棘9。 ，所有IENF标记蛋白基因产物9.5（PGP），泛神经标记10-12。目前，标准做法是小纤维神经病诊断确定由PGP染色与明视场显微镜6 IENFD。此外，一些研究小组已经使用PGP免疫组化免疫协议7-9。小纤维神经病变通常伴有神经性疼痛。为了进一步了解必不可少的疼痛处理IENF的作用，我们制定了技术合作标签总IENF的纤维，产生疼痛。 Nocicep略去IENF，特别是Aδ和C纤维，可以研究通过使用PGP IENF标签和痛觉标记，原肌球蛋白受体激酶A（TRK）5。蒂尔克是伤害性的发展是必不可少的神经生长因子的高亲和力受体。 A-阳性的TRK痛觉神经纤维肽纤维快递P物质（SP）和降钙素基因相关肽（CGRP）。此前，劳里亚和他的同事们采用双标记技术，研究PN，共同标签PGP阳性IENF与疼痛标记10。在我们以前的研究中，我们证实蒂尔克A-阳性IENF，但不是蒂尔克A-负面IENF的，上调糖尿病痛性神经病变的动物模型。这个共同标签技术提供了比较量化痛觉IENFD的，总IENFD和学习能力与PN相关的形态学变化的能力。可视的痛觉IENF和COMPA能力，重新量化总IENFD到痛觉IENFD的疼痛的存在可以提供客观的证据，并有可能洞察疼痛的严重程度与PN。这种技术也适用于皮肤的动物模型。在以往的研究相比，目前的协议描述为3D图像分析的方法，创造了机会，以避免错误可能发生在2D图像分析。

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X PBS</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP399-4</td>
			<td>To make up 1X PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image-IT FX Signal</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>I36933</td>
			<td>Image-IT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Gene Product 9.5 (Polyclonal rabbit)</td>
			<td>AbD Serotec</td>
			<td>7863-0504</td>
			<td>PGP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropomyosin Related-Kinase A (Polyclonal goat)</td>
			<td>R&amp;D Systems</td>
			<td>AF1056</td>
			<td>Trk A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 donkey &alpha;-rabbit</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A21206</td>
			<td>AF488 donkey &alpha;-goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 donkey &alpha;-goat</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A21447</td>
			<td>AF647 donkey &alpha;-goat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Albumin, from Bovine Serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7906-100</td>
			<td>BSA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X- 100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9284</td>
			<td>TX-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-calibrated Loop</td>
			<td>LeLoop</td>
			<td>MP 199025</td>
			<td>inoculating Loop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well assay plate</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>3603</td>
			<td>Well plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolong Gold antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36931</td>
			<td>DAPI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Cover Glass 22x22 mm</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-541-B</td>
			<td>Coverslips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus Microscope Slides</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td>Microscope Slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus Fluoview Laser Scanning Confocal Microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV500</td>
			<td>Confocal Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optimum Cutting Temperature</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td>OCT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM1850</td>
			<td>Cryostat</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional imaging of nociceptive intraepidermal nerve fibers in human skin biopsies

一拳的皮肤活检是常用的量化表皮内神经纤维密度（IENFD）的周边多发性神经病变的诊断1,2。目前，通常的作法是，以收集从小腿远端（DL）和近端大腿长度依赖多神经病的评价3（PT）中的3毫米的皮肤活组织切片检查。然而，由于多向性质IENFs，它是具有挑战性的研究通过分析重叠的神经结构的二维（2D）成像。另外，三维（3D）成像，可以提供一个更好的解决方案，这种困境。 在目前的报告中，我们提出了应用三维成像的方法研究痛性神经病变（PN）。为了拣选IENFs的，皮肤样本进行处理的蛋白基因产物9.5（PGP），锅的神经元的标记物的免疫荧光分析。目前，标准做法是诊断小纤维神经病使用IENFD阻止使用PGP免疫组化开采的明视场显微镜4。在目前的研究中，我们采用双重免疫分析识别总IENFD，使用PGP，痛觉IENF，通过使用抗体，承认原肌球蛋白受体激酶A（TRK），高亲和力受体的神经生长因子5。 PGP和TRK A抗体共同染色IENF与优势，有利于PN明确PGP阳性，痛觉纤维染色的研究。这些荧光信号可以被量化，以确定的伤害IENFD及形态学的影响IENF与PN。荧光共聚焦显微镜图像采集和3D分析处理。 3D成像提供了旋转的能力，以进一步分析与PN相关的形态学变化。两者合计，荧光染色，共聚焦成像和3D分析明显受益PN的研究。

我们套用了目前的协议与PN患者在PT和DL皮肤活检研究的形态IENF。犹他州立大学的皮肤，从三个科目，收集展示的病理形态学与PN。主要内容包括：案例1：一名51岁的男性与2型糖尿病（持续时间：14个月;疼痛得分：51）的PN历史案例2：一个56岁的男性与PN的历史2型糖尿病（工期：108个月;疼痛得分：47）;案例3：一个66岁的男性与PN 2型糖尿病（持续时间：42个月;疼痛得分：46）的历史。神经系统病史和?...

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Three-dimensional Imaging of Nociceptive Intraepidermal Nerve Fibers in Human Skin Biopsies

为了研究伤害表皮内神经纤维（IENFs）在痛苦神经病（PN）的变化，我们开发的协议，可以直接检查观察伤害IENFs的三维形态变化。三维分析IENFs的有潜力评估的形态变化IENF PN。

三维成像伤害表皮内神经纤维在人体皮肤活检

A punch biopsy of the skin is commonly used to quantify intraepidermal nerve fiber densities (IENFD) for the diagnosis of peripheral polyneuropathy 1,2. ...

three-dimensional-imaging-nociceptive-intraepidermal-nerve-fibers

Research

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Medicine

13.0K 次观看.  University of Michigan. 为了研究伤害表皮内神经纤维（IENFs）在痛苦神经病（PN）的变化，我们开发的协议，可以直接检查观察伤害IENFs的三维形态变化。三维分析IENFs的有潜力评估的形态变化IENF PN。